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基于p-硝基苯丙氨酸插入法构建的骨质疏松疫苗制作方法
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专利摘要: 本发明公开了一种基于P-硝基苯丙氨酸插入法构建的骨质疏松疫苗,其特征在于通过如下步骤制备1)RANKL重组表达载体的构建;2)非天然氨基酸p-硝基化苯丙氨酸编码序列的定点插入/置换;3)p-硝基化苯丙氨酸-RANKL蛋白的重组表达与纯化;4)动物免疫与筛选;5)基于血清中和检测及破骨细胞形成分析后的筛选;6)动物实验,确定所需疫苗。该方法有效突破机体对自体蛋白的免疫耐受,通过主动免疫手段,诱导机体产生针对RANKL的特异性中和抗体,实现对骨质疏松良好的防治;同时克服或绕过工业化生产抗体的高额成本问题。 -
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