对原发性肝细胞癌和门静脉癌栓进行治疗的复方中药制剂的制作方法
[0003]本发明的目的，是经过在对毒理学、与原发性肝癌治疗相关的药理药效学、临床试验等一系列研究的基础上，提供一种对原发性肝细胞癌和门静脉癌栓进行治疗的复方中药制剂，该制剂通过抑制肝癌扩散、转移和发展、同时积极预防门静脉癌栓的产生和形成，并在门静脉癌栓形成后又对其进行消融，从而达到对肝癌进行积极治疗。其制备工艺目的:一是尽量保留一些中药生粉全成分自然特质，二是以期最大限度去除重金属和农药残留物。[0004]在复方中药制剂领域，尚未见涉及到本发明的文献报道或产品。本发明通过以下技术方案达到: 一种对原发性肝细胞癌和门静脉癌栓进行治疗的复方中药制剂，其特征在于，按重量计由如下药材组分制成: 黄芩120g~250g、蒲黄120g~250g、黄芪120g~250g、姜黄120g~250g、女贞子120g~250g、水蛭90g~150g、薏该仁120g~250g、半枝莲120g~250g、白花蛇舌草120g~250g、竹叶柴胡120g~250g、茵陈120g~250g、枳壳120g~250g、甘草30g~90g ;制备步骤为: 0.按组分配比量分别取黄芩、黄芪、姜黄、蒲黄、女贞子、水蛭、薏苡仁、半枝莲、白花蛇舌草、竹叶柴胡、茵陈、枳壳和甘草共13味药材进行拣选并通过电筛震动吹风除尘的干洗方式，去除药材中的杂质和非药用部分并补齐配比量； 2).用于水煎煮提取的黄芪、姜黄、黄芩、甘草、水蛭、白花蛇舌草共6味中药材，按组分配比量进行投料，经水洗并浸泡后加水煎煮提取二次，第一次，按原药材的10倍量加水煎煮2小时，滤过；第二次，按原药材的8倍量加水煎煮2小时，滤过，合并滤液，经真空喷雾干燥后的出膏率为13.26%，经破碎，过6号筛后备用； 3).用于打生粉的蒲黄、半枝莲、女贞子、柴胡、苡仁、茵陈、枳壳共7味中药材，在自然干燥保持其含水率3~8%的前提下，进行粗粉碎至60目和细粉碎至100目，并对粗粉碎和细粉碎第一次过筛后的粗粉进行第二次破碎，第二次破碎后的粗粉进行第三次破碎，经三次破碎，过6号筛，按《中国药典》2010年版对粉体分等的规定，得到全部通过6号筛的细粉；
4).将上述步骤(2)和(3)制得的水提物粉体和生粉粉体，以7:3重量的比例，采用槽混机进行混合50分钟后，进行干燥，干燥后经粉碎至100目后过6号筛，用钴60进行灭菌5~8分钟，进入洁净区整粒备用，在洁净区分别采用常规中成药制剂工艺，制成胶囊剂、软胶囊剂、片剂、糖浆剂、口服液或颗粒散剂中的任一种。
[0005]作为进一步优选的技术方案:
制备胶囊剂时，充填工序使用0#植物空胶囊，每粒装量为0.4g，按《中国药典》2010版规定，装量差异控制在±10% ;磨光工序采用胶囊磨光机，除去胶囊表面的附着物，使胶囊清洁光亮，即成。
[0006]所述的依据该配比原料制成的胶囊剂、软胶囊剂、片剂、糖浆剂、口服液或颗粒散剂剂型，以及从上述配比原料中提取的活性化合物成分、生物活性成分及各类分子簇及衍生物、半合成和全合成物。
[0007]本发明技术的特点是:对原发性肝细胞癌和门静脉癌栓进行治疗，通过抑制肝癌细胞和肝癌肿的扩散和发展、同时积极预防门静脉癌栓的初期产生和形成，并在门静脉癌栓形成后又对其进行消融化解，从而达到对肝癌进行治疗目的的复方中药口服制剂，该制剂对肝癌疼痛还有缓解作用。
[0008]本发明中所采用的各组分原料药均可参见《中华人民共和国药典》2010年版制定的中药材质量鉴定标准记载。[0009]本发明是结合中医药理论和现代医学、试验方法理论，在借鉴研发抗艾滋病和治疗癌症新药“复方三黄胶囊”有关经验的基础上，进一步深入开发、研制出来的。该复方制剂的功能主治，从中医理论角度，拟定为具有扶正祛邪、消结散痞、消除腹部癥瘕。
[0010]其制作工艺和质量:在GMP规范生产条件下，完成了小试和中试；进行了重金属、农残物和微生物的测定；制定了药物质量标准；进行了药物稳定性试验。
[0011]其药用安全性:在GLP毒理学规范条件下，用拟定人口服量的300倍剂量，对大鼠进行灌胃给药急性毒性试验，未得出LD50 ；
在荷兰莱顿大学相关实验室:a、进行了体外人肝癌细胞株Hepg2的抑制试验；b、以小脊椎动物斑马鱼(zebrafish,拉丁名为Daniorerio)植入人肝癌细胞株Hepg2为模型,进行了体内种植癌的抑制试验；c、对影响斑马鱼胚胎血管系统发育的试验，以观察该制剂抑制血管生长因子(vegfl)的效用。上述预试验，均得出了较好的阳性结果。试验还将在国内外继续并行深入下去。
[0012]


图1是本发明中实施例的制备工艺流程图。

[0013]下面结合附图1详细说明制备片剂的详细生产工艺步骤。
[0014]I).按组分配比量分别取黄芩、黄芪、姜黄、蒲黄、女贞子、水蛭、薏苡仁、半枝莲、白花蛇舌草、竹叶柴胡、茵陈、枳壳、甘草共13味药材进行拣选并进行电筛震动除尘的干洗，去除药材中的杂质和非药用部分并补齐配比量；
2).用于水煎煮提取的黄芪、姜黄、黄芩、甘草、水蛭、白花蛇舌草共6味中药材饮片，即饮片A组，按组分配比量进行投料，经水洗并浸泡后直接加水煎煮提取二次，第一次，按原药材的10倍量加水煎煮2小时，滤过，第二次，按原药材的8倍量加水煎煮2小时，滤过，合并滤液，经真空喷雾干燥，水提物经过滤、真空喷雾干燥后的出膏率为13.26%，过6号筛后备用。
[0015]3).用于打生粉的蒲黄、半枝莲、女贞子、柴胡、苡仁、茵陈、枳壳共7味中药材饮片，即饮片B组，在自然干燥保持其含水率3~8%的前提下，进行粗粉碎至60目和细粉碎至100目，并对粗粉碎和细粉碎第一次过筛后的粗粉进行第二次破碎，第二次破碎后的粗粉进行第三次破碎，经对粗粉三次破碎，过六号筛。按《中国药典》2010年版对粉体分等的规定，该组饮片粉体为能全部通过6号筛的最细粉。小试、中试饮片生粉平均收率为97.8%。
[0016]4).在洁净区，将上述步骤(2)和(3)制得的生粉粉体和水提物粉体，以7:3的重量比例，采用槽混机进行混合50分钟后，进行干燥，干燥后经粉碎至100目后过6号筛，用钴60进行灭菌5~8分钟，进入洁净区整粒备用，分别采用常规中成药制剂工艺，可制成胶囊、软胶囊、片剂、糖浆剂、口服液或颗粒散剂中的任一种。
[0017]5).胶囊剂型的充填工序:使用0#植物空胶囊，每粒装量为0.4g，按《中国药典》规定，装量差异控制在±10% ;磨光工序采用胶囊磨光机，除去胶囊表面的附着物，使胶囊清洁光亮，即成。
以上共计十三种物料，根据药材活性特点和最大限度去除重金属和农残物的愿望，经过制粉、水提和混合等制药工艺处理，水提物平均为13.26%的出膏率；小试、中试饮片生粉平均收率为97.8%。在洁净区充填0#植物空胶囊后，每粒胶囊内容物净重0.4克，并保持含水率4~8%。
[0018]依据本发明制成的传统复方中药胶囊制剂，其送试产品名称暂定为“复方四黄胶囊”
ο
[0019]本发明在GMP认证的生产条件下，完成了本制剂的小试、中试生产工艺。
A、本制剂的重金属、农残物及微生物含量，均控制在2010年版《中国药典》对中成药规定的限度范围内。
[0020]B、北京中医药大学药学院为本制剂制定了《质量标准草案》建立了本制剂的色谱和主要成分含量定量分析指标；正进行产品的稳定性试验。
[0021 ] C、云南省药物研究所在GLP规范下，用拟定人口服量的300倍剂量，对大鼠进行灌胃给药急性毒性试验，未得出LD50 ;正在进行长期毒性试验。
[0022] D、荷兰莱顿大学细胞和分子实验室(Molecular Cell Biology Institute ofBiology Leiden Leiden University )对本制剂进行了初步药效学筛选预试验。预试验结论是:a、复方四黄胶囊提取物的IC50大约为0.64mg ;b、复方四黄胶囊提取物体外明显抑制hepg2肝癌细胞活性；c、l.6mg/ml浓度复方四黄胶囊提取物为斑马鱼胚胎安全浓度；d、l.6mg/ml浓度复方四黄胶囊提取物能被斑马鱼胚胎吸收并引起体内转移肿瘤细胞凋亡；
e、l.6mg/ml浓度复方四黄胶囊提取物可完全抑制斑马鱼血管系统的发育。