专利名称：一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂及制备方法目前链球菌已成为主要的鱼类致病菌之一，危害鲑鳟鱼类、真鲷、比目鱼、香鱼、银大麻哈鱼等多种淡水鱼、海水鱼，死亡率高。牛蛙无乳链球菌病感染率与死亡率都较高，给牛蛙养殖业造成了严重的损失。常规治疗牛蛙无乳链球菌病的方法为化药加抗生素法，长期使用抗生素容易使病原微生物产生耐药性而失去治疗效果，而中草药具有无残留、无耐药性的效果，因此，删选对该病有治疗效果的中西药，结合中药配伍及疗效，配制出显效快速，药效持久的复方制剂具有很大意义。
针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种涉及几种中药成分的配伍及对该病有治疗效果的防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂及其制备方法的技术方案，该复方制剂具有对环境毒性低、不易产生耐药性的特点。所述的一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂，其特征在于由重量百分比的以下物质组成五倍子15 25%、穿心莲5 15%、大黄10 20%、金银花10 20%、硫酸新霉素5 15%、淀粉25 35%。所述的一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂，其特征在于所述五倍子的重量百分含量为18 22%，优选15 20%。所述的一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂，其特征在于所述穿心莲的重量百分含量为8 12%，优选9 10%。所述的一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂，其特征在于所述大黄的重量百分含量为12 18%，优选14 16%。所述的一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂，其特征在于所述金银花的重量百分含量为12 18%，优选14 16%。所述的一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂，其特征在于所述硫酸新霉素的重量百分含量为8 12%，优选9 10%。所述的一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂，其特征在于所述淀粉的重量百分含量为27 32%，优选28 30%。所述的一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤1)按照重量百分比分别称取五倍子15 25%、穿心莲5 15%、大黄10 20%、金银花 10 20%、硫酸新霉素5 15%、淀粉25 ；35%，细度要求为80-120目，干燥失重< 10. 0%，2)先将上述中药成分混合淀粉搅拌至完全混合；3)再将硫酸新霉素加入步骤2)所得的混合溶液中搅拌均勻，即得杀灭防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂。所述的一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂的制备方法，其特征在于步骤1)中原料细度要求为90-110目，干燥失重彡8. 0%。所述的五倍子为同翅目蚜虫科的角倍蚜或倍蛋蚜雌虫寄生于漆树科植物“盐肤木”及其同属其他植物的嫩叶或叶柄，刺伤而生成一种囊状聚生物虫瘿，经烘倍干燥后所得。体外试验对金黄色葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌以及伤寒、副伤寒、痢疾、炭疽、白喉、绿脓杆菌等均有明显的抑菌或杀菌作用。所述的穿心莲为爵床科植物穿心莲的干燥地上部分，味苦、性寒。又名一见喜、榄核莲、斩蛇剑、印度草、苦草等，具有清热解毒、消肿止痛、抗菌及抗癌作用。所述的大黄是蓼科多年生高大草本植物，大黄有清热解毒、抗菌消炎、泻火凉血、 利胆退黄、行瘀破积、降压止血之功效。所述的金银花为忍冬科忍冬属植物忍冬及同属植物干燥花蕾或带初开的花。具有抗病原微生物、抗炎和解热、加强防御机能、抗内毒素等作用。所述的硫酸新霉素硫酸新霉素是一种氨基糖苷类抗生素，为广谱抗生素。对葡萄球菌属、棒状杆菌属、大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属等肠杆菌科细菌有良好抗菌作用。上述一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂及制备方法，其复方制剂采用对该病菌有治疗效果的西药硫酸新霉素，结合中药五倍子、穿心莲、大黄、金银花配伍制成， 辅料为淀粉，制得的复方制剂协同增强作用较为明显，疗效得到增加，显效快速，药效持久， 对环境毒性低、不易产生耐药性。且制备工艺简单，容易实现，使用安全、方便，便于推广应用。本申请文件中涉及的百分含量除另有说明外，均指重量百分含量。 称取五倍子18%、穿心莲8%、大黄17%、金银花15%、淀粉32%，硫酸新霉素10%，细度要求为100目，干燥失重< 10. 0% ；将中药成分混合淀粉搅拌至完全混合；将硫酸新霉素加入搅拌均勻，即得防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂。实施例2称取五倍子22%、穿心莲12%、大黄13%、金银花17%、淀粉28%，硫酸新霉素8%，细度要求为120目，干燥失重< 8. 0% ；将中药成分混合淀粉搅拌至完全混合；将硫酸新霉素加入搅拌均勻，即得复方制剂。实施例3
称取五倍子20%、穿心莲5%、大黄15、金银花10%、硫酸新霉素15%、淀粉35%，细度要求为80目，干燥失重< 10. 0% ；将中药成分混合淀粉搅拌至完全混合；将硫酸新霉素加入搅拌均勻，即得复方制剂。实施例4
称取五倍子15%、穿心莲15%、大黄20%、金银花15%、硫酸新霉素10%、淀粉25%，细度要求为90目，干燥失重< 10. 0% ；将中药成分混合淀粉搅拌至完全混合；将硫酸新霉素加入搅拌均勻，即得复方制剂。实施例5
称取五倍子20%、穿心莲10%、大黄10%、金银花20%、硫酸新霉素13%、淀粉27%，细度要求为110目，干燥失重< 8. 0% ；将中药成分混合淀粉搅拌至完全混合；将硫酸新霉素加入搅拌均勻，即得复方制剂。上述中西药复方制剂的其使用方法与用量为将制剂用水1:8-12混合，泼洒在饲料上混勻，1-2小时阴干后投饲，剂量为每公斤饲料添加本品4-6克，优选5克。上述实施例可以列举很多，再此不一一列举，从申请人所做的大实验得到的数据证明，只要是按照本发明的技术方案的参数范围选择，即可制备出达到本发明目的防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂。以下结合中西药复方制剂防治牛蛙无乳链球菌病的药效试验对本发明作进一步说明。1材料与方法
1.1试验牛蛙
浙江省嘉兴平湖某养殖户患典型无乳链球菌病症状的养殖牛蛙，患病牛蛙症状体表背部无明显异常，有些个体腹部及下肢布满血点，上下肢趾处也有充血；肝呈紫红色带血点，肾充血呈紫红色，胃鼓胀充血，有些在胃与肠交接处出现套叠现象。1. 2体外抑菌试验
试验方法取分离得到的细菌作纯培养，用高压灭菌后的改良马丁培养基(含有酚红)作稀释液稀释，调整菌液浓度约为1*105CFU /ml。用试管二倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)，分别测单味中西药及复方制剂。试验重复两次，结果取其平均值。1.3体内抑菌试验
挑选有症状的牛蛙，随机分组每组10只，于体积为SOcmX60cmX40cm的玻璃缸内盛入充分曝气的自然水，PH 7. 0 7. 5，水温25 士 1°C。饲喂浓度为0. 05g/kg，0. 5g/kg，5g/kg， 50g/kgo1.4实际应用治疗效果
挑选发病牛蛙池，采用实施例1制得的复方制剂按照5g/kg拌饲投喂，疗程为3天，观察其死亡数。2 结果
2.1体外抑菌效果
中药成分中单味穿心莲抑菌效果最好，MIC值为33. 25 mg/ml其次是大黄、五倍子、金银花，MIC 值分另Ij为 66. 5mg/ml、66. 5mg/ml、133mg/ml，硫酸新霉素 MIC 值为 15. 625ug/ml， 中西药物联用后，制剂的MIC值都有不同程度下降，MIC值为7.8125 ug/ml。协同增强作用较为明显，疗效得到增加。
2. 2抑菌试验效果
饲喂浓度为0. 05g/kg，0. 5g/kg，5g/kg，50g/kg，其牛蛙存活率分别为10%,80%,90%, 90%。证明浓度为0. 5g/kg浓度的剂量对该病即有良好的治疗效果，本发明使用推荐浓度 0. 5g/kg是有效果的。2. 3实际应用
实施例1复方制剂浓度按照5g/kg拌饲投喂，疗程为3天的方法治疗，投喂后第二天死亡数明显减少，第四天开始不死亡，在实际应用中有良好的治疗效果。采用实施例2-5制得的中西药复方制剂进行相同的试验，也能达到本发明所述的治疗效果，达到治疗牛蛙无乳链球菌病目的。


一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂及制备方法，属于鱼药技术领域。其特征在于由重量百分比的以下物质组成五倍子15～25%、穿心莲5～15%、大黄10～20%、金银花10～20%、硫酸新霉素5～15%、淀粉25～35%。上述一种防治牛蛙无乳链球菌病的中西药复方制剂及制备方法，其复方制剂采用对该病菌有治疗效果的西药硫酸新霉素，结合中药五倍子、穿心莲、大黄、金银花配伍制成，辅料为淀粉，制得的复方制剂协同增强作用较为明显，疗效得到增加，显效快速，药效持久，对环境毒性低、不易产生耐药性。且制备工艺简单，容易实现，使用安全、方便，便于推广应用。