专利名称：Pufa增补剂的制作方法在饮食中提供C18n-6脂肪酸亚油酸在技术上是相对容易的，因为这种脂肪酸富 含在一般的植物油中，例如玉米油和大豆油。含有C18n-3脂肪酸α-亚麻酸的植物油也是 可以利用的，例如菜子油，但是由于稳定性较低，使用起来不太容易。这通常导致在现代饮 食中n-6族相对n-3族过剩。因此，关于在很多怀疑有相对缺乏的情况下应当补充n-3脂肪酸存在分歧。一般， 这一点不能通过提供C-18前体来实现，因为它转化为C20与C22衍生物的效率是很低的。 因此，一致的意见是，应当提供C20与C22n-3脂肪酸(EPA和DHA)本身。在很多情况下，这种补充作用背后的原理是削弱长链n-6脂肪酸ARA的作用。已 经显示，加入从鱼油或微生物(藻类)油衍生的n-3PUFA的确降低ARA水平。在鱼油的情 况下，即使鱼油含有少量ARA也是如此。这种ARA含量的降低不总是可取的。本发明因此寻求提供这样的制剂，它们可以 提高动物的DHA和/或EPA状态，并且不会对ARA水平产生不利影响，或者相反，增加ARA 且不影响DHA和/或EPA状态。以前已经描述过含有ARA与n-3PUFA的制剂在供应婴儿配方PUFA中的用途。其 背后的原理是人母乳含有适量ARA和DHA，据认为它们对婴儿发育是有用的。相形之下，关于成人营养品，还没有这样的天然PUFA来源，尽管ARA和DHA都可以 作为人饮食中的成分找到。不过，由于多种原因，这些PUFA水平似乎是次优的。此外，不同 人群具有不同的PUFA水平，这一点可能影响适合的剂量。由于自然界没有模型，需要确定 所用PUFA的相对量，本发明寻求解决这一问题，提供PUFA的各种制剂和比例，适合于某些 应用。M. Makrides等《欧洲化学营养杂志》50 :352-357(1996)涉及评价改变DHA的内 部摄取(从0至1.3g DHA/天)对母乳脂肪酸的作用的研究。哺乳期母亲饮食中的DHA对母乳DHA具有强特异性和剂量依赖性作用，但是不影响ARA水平。该研究采用藻类油，可从 MartekCorporation, USA 得到，商标名为 NEUROMINS 。W0-A-92/12711 (Martek)涉及含有ARA与DHA的油掺合物，例如ARA DHA之比 为3 1至2 1，特别涉及在婴儿配方中提供这些PUFA，其水平相当于人母乳(ARA水平 为 0.5 至 0.6% )。目前，大量含有PUFA的组合物市场有售。EFANATAL 是胶囊剂，每天服用两粒，每 日摄取DHA 125mg、ARA 8. 6mg和GLA 40mg。胶囊含有一种油，其主要基于鱼油。申请人已 经发现，它降低体内ARA水平，因为在胶囊中DHA含量相对ARA含量而言太高了。因此这种 产品事实上是一种降低ARA、而不是增加ARA的组合物，尽管它含有ARA。下文提供这种产 品与本发明产品之间的比较。EFAMARINE 也是胶囊剂，主要含有鱼油和月见草油，每天服用两粒，每日摄取EPA 34mg、DHA 22mg 禾口 GLA 68mg。EFALEX 是油掺合物，每天两次服用一茶匙(5ml)，每茶匙提供DHAlOOmg、GLA 21mg、ARA 8mg 禾口百里香油 6mg。
本发明在第一方面涉及包含ARA的食用制剂，其量适合于每天释放150mg至Ig的 (ARA)剂量。优选地，该制剂适合于每天释放200至900mg的ARA，例如200至700mg/天，最佳 为 250 至 400 或 500mg/天。食用制剂包括饮食增补剂和(药物)制剂和制品，例如片剂、丸剂和胶囊剂。它们 另外包括(固体或液体)食品，例如乳制品(人造奶油、奶油、乳、酸奶)、面包、蛋糕；饮品， 例如饮料(茶、咖啡、可可、巧克力饮料)、果汁、软饮料(例如泡沫饮料)；甜食；油性食品 (小吃、色拉调味品、蛋黄酱)、汤、调味汁、富含碳水化合物的食品(米饭、面条、意大利面 食)、鱼类食品、婴儿食品(例如婴儿配方，呈液体或粉末)、宠物食品和速食品或微波食品。ARA可以来自任何适当的来源。它可以来自天然(例如植物或海产)来源，或者可 以来自微生物来源，例如真菌、细菌或酵母。适合的真菌是毛霉目，例如被孢霉属、腐霉属或虫霉属。优选的ARA来源是高山被 孢霉或Pythium insidiosum。适合的商业上可得到的ARA油包括来自DSM/Gist-brocades， ffateringseweg, P. 0. Box 1，2600MA，Delft，The Netherland 的 0PTIMAR 和来自 MartekCorporation, 6480 Dobbin Road, Columbia, MD 21045，USA 的 ARASC0 。除了 ARA以外，还可以提供一种或多种其它PUFA。这可以是除ARA以外的另一种 n-6PUFA (例如C18、C20或C22脂肪酸)，或者它可以是一种n_3脂肪酸(例如C18、C20或 C22脂肪酸)，特别是EPA和/或DHA。每种可以用在本发明中的PUFA可以是游离脂肪酸、 脂肪酸酯(例如甲基或乙基酯)的形式，后者例如磷脂或甘油三酯。如果制剂包含一种n-3脂肪酸，优选地它是EPA或DHA。如果它是DHA，那么制剂 优选地适合于释放与ARA相同的剂量，例如每天400至600mg的DHA。或者，或另外，如果制 剂包含EPA，那么它优选地适合于每天释放150mg至Ig的EPA，例如250至500mg EPA/天。如果制剂每天服用(食入或摄取)一次，那么它可以含有150mg至Ig ARA。如果每天两次，那么制剂可以含有75mg至0. 5g ARA，每天三次则含量为50mg至330g ARA等，更 频繁给药则按此比例。同样的计算结果也适用于可能存在的其它PUFA，例如DHA。如果制剂包含一种以上PUFA，那么每种PUFA的量可以用相对比例表示。例如，如 果另外提供一种n-3PUFA，那么ARA :n-3PUFA (例如DHA或EPA)之比可以是1 5至5 1， 优选为2 1至1 3，最佳为1 1至1 2。可以对PUFA的相对量进行平衡，以便补充、 增加(或者至少不显著降低)PUFA水平，因个体条件而异。优选地，PUFA以油的形式存在。它可以是纯净的油、精制(例如化学和/或酶 学处理)或浓缩的油。这种油可以包含10至100% PUFA，但是含量也可以是20至45%， 最佳为30至45%的所需PUFA，例如ARA，如果是微生物油的话。当然，这种油可以含有 在这些百分浓度内的一种或多种PUFA。油可以是从单一细胞或微生物来源衍生的单一 的油，或者它可以是来自这些或其它(例如植物或海产)来源的两种或多种油的掺合 物或混合物。油可以含有一种或多种抗氧化剂(例如生育酚、维生素E、棕榈酸盐)，其 浓度例如为50至800ppm，例如100至700ppm。适合于制备PUFA的方法描述在国际专 利申请 PCT/EP97/01446(W0-A-97/36996)、PCT/EP97/01448(W0-A-97/37032)和 PCT/ US92/00517 (W0-A-92/13086)中。本发明在第二方面涉及包含ARA和DHA的(药物)组合物，ARA DHA之比为1 1 至1 2。已经发现PUFA的这种比例可提供良好的平衡，能够增加体内DHA水平，并且不会 因DHA含量过高而降低ARA水平。DHA可以来自天然(例如海产)来源或来自微生物来源 (例如来自藻类)。第三方面涉及包含0. 1至3或5% ARA的食用制剂(例如食品)。优选地，含量 为0.5至1.5或2%，最佳为0.3至0.8%。第一方面内容已经讨论了适合的食品。优 选的制备婴儿配方的方法公开在国际申请PCT/EP97/01447 (W0-A-97/35487)和PCT/ EP/97/01449 (W0-A-97/35488)中。适合的制剂可以包括油类，例如用于口服。油可以服用其本身，或者它可以例如包 封在一种外壳内，因此可以是胶囊剂的形式。外壳或胶囊可以包含明胶和/或甘油。制剂 可以含有其它成分，例如矫味剂(例如柠檬或酸橙矫味剂)。本发明已经发现了在正常、健康、吃得好的个体(如果基于适当的饮食，通常预期 他们不会受益)中提高PUFA水平的用途。不过，它也可以用于低PUFA水平或缺乏的个体。因此，本发明在第四方面涉及ARA在妇女中的用途(例如用作饮食或营养增补剂 或者用于药物制备)，该妇女是a.妊娠的，年龄为15至20岁；b.妊娠的，年龄为40至60岁，例如50至55岁；c.妊娠的，怀有第四、第五个或以上的孩子；d.妊娠的，怀有双胞胎、三胞胎或四胞胎；e.妊娠的，妊娠1至3个月；f.因体外受精(IVF)而妊娠，或者正在接受IVF治疗(包括登记或参加IVF过程) 但还没有妊娠；g.妊娠的，妊娠20周或以上；h.妊娠的，并且是营养不良的、营养低劣或勉强的，患有营养不良或吸收障碍，或缺乏一种或多种必需脂肪酸(例如PUFA)；i.试图妊娠的；j.妊娠的，用于促进子宫内生长或胎儿健康；或者k.哺乳的，用于增加妇女母乳的ARA或EPA水平。在(h)情况下，这些条件在西欧是相当罕见的，但是在非洲或有些亚洲国家(例如 巴基斯坦)妇女可以见到。对妊娠妇女来说，(j)中对胎儿的益处不总是可预测的或立即可见的，这是由于在 流体在母亲与胎儿之间的运输上存在个体差异。胎盘与胎儿的联系(脐带)可以在大小和 生理条件上是各不相同的，因此在过去，为母亲补充PUFA没有必然意味着胎儿也将接受到 这些PUFA，从而同样受益。第五方面涉及ARA对50岁以上、优选为超过65岁的人(男性或女性)的用途(用 作饮食或营养增补剂)。第六方面涉及ARA对妊娠或哺乳期的除人以外的哺乳动物的用途(用作饮食或营 养增补剂)。ARA优选地每天摄取150至700mg，最佳为每天250至500mg。本发明在第七方面涉及ARA在药物制备中的用途，该药物用于(有助于)预防、防 止、改善或治疗与例如血液中的异常或低水平n-3或n-6PUFA有关的疾病或病症。本发明 因此发现了在具有低水平ARA的受治疗者中的用途，例如那些不能或不能有效转化亚油酸 (LA)为ARA的受治疗者。因此，适合的患者可能患有Δ 6-去饱和酶机能障碍、无效或缺乏。已经建立起PUFA缺乏的(小鼠)模型，用于模拟营养不良的后果。这种模型已经 显示出本发明制剂的有益效果，包括在妊娠期间，对母亲和胎儿都是有益的。它还可以刺激 胎盘转移不足和子宫内生长迟缓，并且显示出本发明制剂补充个体(和胎儿，如果妊娠的 话)营养的益处，如发明各方面所述。申请人:已经发现，某些疾病或病症、特别是神经元疾病与低水平的体内PUFA、特别 是血液中低水平的ARA有关。因此认为，ARA或PUFA均衡给药将能够有助于预防、防止、改 善或治疗这些疾病或病症。有关疾病包括神经元疾病，例如精神分裂症、囊性纤维变性、自 发性免疫球蛋白A肾病、多发性硬化、色素性视网膜炎、Usher综合征、乳糜泻、黄斑变性、帕 金森氏病、骨质疏松症、阿耳茨海默氏病或苯丙酮尿症。第八方面涉及ARA与可选的DHA的用途，用于促进人或除人以外的雌性哺乳动物 的泌乳和/或生殖效率或成功性或生育力。本发明在第九方面涉及ARA与DHA的用途，(在食用制剂中)ARA DHA按一定 比例可增加血液中的ARA水平。优选地，ARA DHA之比为1 5至5 1，例如1 1至 1 2。本发明特别适用于具有低ARA水平的那些人，例如糖尿病患者、嗜酒者、药物滥用 者、吸烟者或者具有异常或低免疫水平或免疫受损的受治疗者。第四至第九方面的用途包括ARA(和可选的DHA)本身或作为制剂对受治疗者(个 体，人或动物)的给药方法，其中该受治疗者需要这种给药或者将从这种给药中受益，或者 包括在指定目的药物的制备中的用途。如果必要的话，制剂可以排除GLA和/或DGLA。ARA(和DHA，如果有的话)的剂量或含量优选地是这样的，它提高必需脂肪酸(EFA)充足指数(其定义是20:4n-6(ARA)水平除以20 3n_9脂肪酸(蜜酒酸)(mead acid) 水平)和/或EFA平衡指数(其定义是22:6n-3(DHA)水平除以22:5n_6水平)。这里，各 水平包括在血液(例如在红细胞内)、脑、胎盘、肝、肠、血浆或胎儿中的水平。本发明在一方面上的优选特性和特征同样适用于另一方面，不过在细节上作必要 的修改。公开了包含花生四烯酸(ARA)的食用制剂，例如多不饱和脂肪酸(PUFA)，例如药物组合物或营养增补剂。它们适合于释放150mg至1g/天的ARA，并且可以含有其它PUFA，例如二十二碳六烯酸(DHA)。DHA剂量为400至600mg/天，ARA∶DHA之比可以是1∶5至5∶1。还公开了包含ARA和DHA的药物组合物，ARA∶DHA之比为1∶1至1∶2，它们作为包含0.1至5％ARA的食品。这些制剂可用于增加体内ARA水平，例如用于妊娠妇女或患有与低ARA水平有关的疾病或病症的人。