专利名称：Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液及其制备方法Nobiliside A是从黑乳海参中提取的一种具有抗肿瘤活性的三萜皂苷类化合物 (详见发明专利“黑乳海参中抗肿瘤化合物Nobiliside A及其单乙酰化衍生物”，专利公开 号:CN1740185)，化学结构式如下Nobiliside A不仅有良好的细胞毒性作用，而且还具有显著的新生血管形成抑制 作用，能诱导肿瘤内皮细胞和肿瘤细胞的调亡。已将Nobiliside A制成普通脂质体静脉注 射液并申请了专利(详见发明专利“抗肿瘤化合物Nobiliside A单乙酰化物脂质体静脉注 射液及其制备法”，专利公开号CN173%43)，实验结果显示=Nobiliside A普通脂质体静脉 注射液可以显著降低Nobiliside A体内外的溶血性，改善了 Nobiliside A对血管的刺激 和致炎作用。然而，当Nobiliside普通脂质体进入体内后，易被网状内皮系统(RES)摄取、 清除，Nobiliside普通脂质体在血液中的半衰期较短(半衰期通常为IOh左右)，还易对 RES丰富的器官(如肝脏和脾脏)造成蓄积毒性，靶组织的靶向性差，抑瘤效果不理想。隐形纳米脂质体又称为长循环纳米脂质体，这类脂质体粒径小，通常在IOOnm左 右。脂质体表面能形成空间位阻，有效阻止血浆蛋白的调理作用，使脂质体可以逃避RES的 发现和捕获，延长药物的血液循环时间，有利于进入肿瘤组织，并增进其对肿瘤组织的渗透 和滞留作用(EI^R效应)，使药物高浓度、长时间蓄积在肿瘤组织中，提高治疗效果(陶涛，脂 质体递药系统的临床研究进展[J].药学服务与研究，2008，8( :84-88)。然而至今未见有 关将Nobiliside A制成隐形纳米脂质体静脉注射液的报道。
本发明提供一种体内半衰期长、毒副作用小、疗效好、对肿瘤具有药物被动靶向功 能的Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液制剂。本发明Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液的组分和配比如下磷脂 胆固醇 PEG脂质 注射用水Nobiliside A旨月 磷胆固醇 PEG脂质 注射用水
1-50
0. 01-20
0. 1-20
余量
mg/mL mg/mL mg/mL
0.2 1 mg/mL 10-20 mg/mL
3-8
4-10
余量
mg/mL mg/mL其中，磷脂选自大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰 胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱中的一种或几种，优选大豆卵磷脂和/或蛋黄卵磷脂。PEG脂质选自聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、聚乙二醇-聚己内酯、聚乙二 醇-聚乙交酯丙交酯、聚乙二醇-聚乳酸、聚乙二醇-聚十六烷基氰基丙烯酸酯、聚氧乙烯 脂肪酸醚、聚氧乙烯甲基蓖麻油醚中的一种或几种，优选聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇 胺。制备方法为(1)制备类脂溶液按配比将磷脂、胆固醇和PEG脂质溶解在50mL氯仿中，然后按氯仿和无水乙醇的 体积比为1 2-1 4加入无水乙醇，得类脂溶液；(2)制备类脂薄膜将类脂溶液置于旋转蒸发器上，在50°C旋转减压蒸发1-1. 5h，去除有机相氯仿和 无水乙醇，类脂溶液即成一层均勻薄膜；(3)制备Nobiliside A隐形脂质体混悬液按配比加入Nobiliside A水溶液和余量的注射用水，使类脂薄膜从容器壁洗脱下 来并将其制成混悬液，即得Nobiliside A隐形脂质体混悬液；(4)制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液将Nobiliside A隐形脂质体混悬液按常规高压均质，微孔滤膜过滤灭菌，即得 Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液。本发明的关键是采用PEG脂质制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液。
5PEG脂质含有亲水基团，PEG脂质修饰脂质体，在脂质体表面形成空间位阻，使得隐形纳米 脂质体不易被RES识别和摄取，因此隐形纳米脂质体在血液中的循环时间延长，使药物更 多地聚集到肿瘤组织；PEG脂质修饰脂质体，使隐形纳米脂质体粒径小于100·，也增加 Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液的稳定性。动物实验表明，本发明Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液制剂血液半衰 期长达15. 93小时；对肝脏和脾脏的毒副作用小，在肝脏和脾脏的Nobiliside A浓度比 Nobiliside A普通脂质体静脉注射液制剂分别减小了 3倍和4倍；抑瘤率比Nobiliside A 普通脂质体静脉注射液提高了约30%。本发明Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液制备方法简单，能有效提高 Nobiliside A的抑瘤率，降低Nobiliside A的毒副作用。


图1为Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液在大鼠体内的血药浓度-时间 曲线图。图2为Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液在小鼠肝脏内的药物浓度-时 间图。图3为Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液在小鼠脾脏内的药物浓度-时 间图。图4为Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液对荷瘤小鼠抑瘤率的曲线图。

将大豆卵磷脂4. 0g、蛋黄卵磷脂3. 5g、胆固醇3. Og和聚乙二醇-二硬脂酰磷脂 酰乙醇胺2.25g溶解在50mL氯仿中，再按氯仿和无水乙醇的体积比为1 3加入无水乙 醇150mL，得类脂溶液；将类脂溶液置于旋转蒸发器上，在50°C旋转减压蒸发1.证去除有机 相，类脂溶液即成一层均勻薄膜，加入15mL含有3. Og Nobiliside A的水溶液将薄膜洗脱 下来并制成混悬液，即为Nobiliside A的隐形脂质体混悬液；加入余量的注射用水定容至 150mL，然后按常规高压均质，0. 22 μ m微孔滤膜过滤灭菌，即得NobilisideA隐形纳米脂质 体静脉注射液。实施例9 制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液将大豆卵磷脂0. 5g、胆固醇0. 25g和聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺0. lg、聚 乙二醇-聚己内酯0. Ig溶解在50mL氯仿中，再按氯仿和无水乙醇的体积比为1 3加入 无水乙醇150mL，得类脂溶液；将类脂溶液置于旋转蒸发器上，在50°C旋转减压蒸发Ih去除 有机相，类脂溶液即成一层均勻薄膜，加入5mL含有0.02g Nobiliside A的水溶液将薄膜 洗脱下来并制成混悬液，即为Nobiliside A的隐形脂质体混悬液；加入余量的注射用水定 容至IOOmL,然后按常规高压均质，即得Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液。实施例10 制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射溶液将大豆卵磷脂2. Og、胆固醇1. Og和聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺2. Og、溶解 在50mL氯仿中，再按氯仿和无水乙醇的体积比为1 3加入无水乙醇150mL，得类脂溶液； 将类脂溶液置于旋转蒸发器上，在50°C旋转减压蒸发1. 2h去除有机相，类脂溶液即成一层 均勻薄膜，加入IOmL含有l.Og Nobiliside A的水溶液将薄膜洗脱下来并制成混悬液，即 为NobilisideA的隐形脂质体混悬液；加入余量的注射用水定容至200mL，然后按常规高压 均质，0. 22 μ m微孔滤膜过滤灭菌，即得Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液。实施例11 制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液将大豆卵磷脂1. Og、胆固醇0. 5g和聚乙二醇-聚己内酯0. 2g、聚乙二醇聚乙交 酯丙交酯0. Ig溶解在50mL氯仿中，再按氯仿和无水乙醇的体积比为1 2加入无水乙醇 IOOmL,得类脂溶液；将类脂溶液置于旋转蒸发器上，在50°C旋转减压蒸发1. 5h去除有机 相，类脂溶液即成一层均勻薄膜，加入5mL含有0.03g Nobiliside A的水溶液将薄膜洗脱 下来并制成混悬液，即为Nobiliside A的隐形脂质体混悬液；加入余量的注射用水定容至 IOOmL,然后按常规高压均质，0. 22 μ m微孔滤膜过滤灭菌，即得NobilisideA隐形纳米脂质 体静脉注射液。实施例12 制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液将大豆卵磷脂3. 5g、和二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱0. 5g、胆固醇2. Og和聚乙二醇-二 硬脂酰磷脂酰乙醇胺0. 75g、甲基蓖麻油醚0. 25g溶解在50mL氯仿中，再按氯仿和无水乙 醇的体积比为1 4加入无水乙醇200mL，得类脂溶液；将类脂溶液置于旋转蒸发器上， 在50°C旋转减压蒸发1. 4h去除有机相，类脂溶液即成一层均勻薄膜，加入5mL含有0. 2g Nobiliside A的水溶液将薄膜洗脱下来并制成混悬液，即为Nobiliside A的隐形脂质体 混悬液；加入余量的注射用水定容至200mL，然后按常规高压均质，0. 22 μ m微孔滤膜过滤 灭菌，即得Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液。实施例13 制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液将大豆卵磷脂0. 6g、和二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱0. 6g、胆固醇0. 55g和聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺0. 3g、甲基蓖麻油醚0. Ig溶解在50mL氯仿中，再按氯仿和无水 乙醇的体积比为1 3加入无水乙醇150mL，得类脂溶液；将类脂溶液置于旋转蒸发器上， 在50°C旋转减压蒸发1.池去除有机相，类脂溶液即成一层均勻薄膜，加入IOmL含有0. 05g Nobiliside A的水溶液将薄膜洗脱下来并制成混悬液，即为Nobiliside A的隐形脂质体混 悬液；加入余量的注射用水定容至IOOmL,然后按常规高压均质，0. 22 μ m微孔滤膜过滤灭 菌，即得Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液。实施例14 制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液将大豆卵磷脂1. 25g、蛋黄卵磷脂1. Og、胆固醇0. 15g和聚乙二醇-二硬脂酰磷脂 酰乙醇胺0. 6g、聚乙二醇-聚己内酯0. 3g溶解在50mL氯仿中，再按氯仿和无水乙醇的体积 比为1 4加入无水乙醇200mL，得类脂溶液；将类脂溶液置于旋转蒸发器上，在50°C旋转 减压蒸发1. 去除有机相，类脂溶液即成一层均勻薄膜，加入IOmL含有0. 15g Nobiliside A的水溶液将薄膜洗脱下来并制成混悬液，即为Nobiliside A的隐形脂质体混悬液；加 入余量的注射用水定容至150mL，然后按常规高压均质，0. 22 μ m微孔滤膜过滤灭菌，即得 Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液。实施例15 制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液将蛋黄卵磷脂0. Sg、二硬脂酰磷脂酰胆碱0. 7g、胆固醇0. 55g和聚乙二醇-二 硬脂酰磷脂酰乙醇胺0. 3g，聚氧乙烯脂肪酸醚0. 2g溶解在50mL氯仿中，再按氯仿和无水 乙醇的体积比为1 4加入无水乙醇200mL，得类脂溶液；将类脂溶液置于旋转蒸发器上， 在50°C旋转减压蒸发1. 去除有机相，类脂溶液即成一层均勻薄膜，加入5mL含有0. 055g Nobiliside A的水溶液将薄膜洗脱下来并制成混悬液，即为Nobiliside A的隐形脂质体混 悬液；加入余量的注射用水定容至IOOmL,然后按常规高压均质，0. 22 μ m微孔滤膜过滤灭 菌，即得Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液。实施例16 制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液将蛋黄卵磷脂0. lg、二硬脂酰磷脂酰胆碱0. lg、胆固醇0.004g和聚乙二醇-聚 乳酸0. 0035g，聚氧乙烯甲基蓖麻油醚0. 0005g溶解在50mL氯仿中，再按氯仿和无水乙醇 的体积比为1 4加入无水乙醇200mL，得类脂溶液；将类脂溶液置于旋转蒸发器上，在 50°C旋转减压蒸发1. 5h去除有机相，类脂溶液即成一层均勻薄膜，加入5mL含有0. 004g Nobiliside A的水溶液将薄膜洗脱下来并制成混悬液，即为Nobiliside A的隐形脂质体混 悬液；加入余量的注射用水定容至200mL，然后按常规高压均质，0. 22 μ m微孔滤膜过滤灭 菌，即得Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液。施例17 制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液将二硬脂酰磷脂酰胆碱0. Sg、二棕榈酰磷脂酰胆碱0. Sg、胆固醇0. Sg和聚乙二 醇-聚乳酸0. 35g，聚乙二醇-聚十六烷基氰基丙烯酸酯0. 25g溶解在50mL氯仿中，再按氯 仿和无水乙醇的体积比为1 3加入无水乙醇150mL，得类脂溶液；将类脂溶液置于旋转蒸 发器上，在50°C旋转减压蒸发1. 5h去除有机相，类脂溶液即成一层均勻薄膜，加入IOmL含 有0.06g Nobiliside A的水溶液将薄膜洗脱下来并制成混悬液，即为Nobiliside A的隐 形脂质体混悬液；加入余量的注射用水定容至IOOmL,然后按常规高压均质，0. 22 μ m微孔 滤膜过滤灭菌，即得Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液。施例18 制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液
将大豆卵磷脂1. lg、蛋黄卵磷脂0. 5g、二硬脂酰磷脂酰胆碱0. lg、二棕榈酰磷脂 酰胆碱0. lg、胆固醇0. 6g和聚乙二醇-聚乳酸0. 3g，聚乙二醇-聚己内酯0. 6g溶解在 50mL氯仿中，再按氯仿和无水乙醇的体积比为1 3加入无水乙醇150mL，得类脂溶液；将 类脂溶液置于旋转蒸发器上，在50°C旋转减压蒸发1. 5h去除有机相，类脂溶液即成一层均 勻薄膜，加入IOmL含有0. 12g Nobiliside A的水溶液将薄膜洗脱下来并制成混悬液，即为 Nobiliside A的隐形脂质体混悬液；加入余量的注射用水定容至150mL，然后按常规高压 均质，0. 22 μ m微孔滤膜过滤灭菌，即得Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液。施例19 制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液将大豆卵磷脂0. Sg、蛋黄卵磷脂0. 5g、二硬脂酰磷脂酰胆碱0. 4g、胆固醇0. 7g和 聚乙二醇-聚乳酸0. 3g，聚乙二醇-聚己内酯0. 2g溶解在50mL氯仿中，再按氯仿和无水 乙醇的体积比为1 3加入无水乙醇150mL，得类脂溶液；将类脂溶液置于旋转蒸发器上， 在50°C旋转减压蒸发1.证去除有机相，类脂溶液即成一层均勻薄膜，加入IOmL含有0. 08g Nobiliside A的水溶液将薄膜洗脱下来并制成混悬液，即为Nobiliside A的隐形脂质体混 悬液；加入余量的注射用水定容至IOOmL,然后按常规高压均质，0. 22 μ m微孔滤膜过滤灭 菌，即得Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液。施例20 制备Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液将大豆卵磷脂0. 5g、蛋黄卵磷脂0. 5g、二硬脂酰磷脂酰胆碱0. 5g、二肉豆蔻酰磷 脂酰胆碱0. 5g、胆固醇1.2g和聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺0. 8g，聚乙二醇-聚己内 酯0. Sg溶解在50mL氯仿中，再按氯仿和无水乙醇的体积比为1 4加入无水乙醇200mL， 得类脂溶液；将类脂溶液置于旋转蒸发器上，在50°C旋转减压蒸发1. 4h去除有机相，类脂 溶液即成一层均勻薄膜，加入IOmL含有0. Ig Nobiliside A的水溶液将薄膜洗脱下来并制 成混悬液，即为Nobiliside A的隐形脂质体混悬液；加入余量的注射用水定容至IOOmL,然 后按常规高压均质，0. 22 μ m微孔滤膜过滤灭菌，即得Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉 注射液。动物实验1. Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液在大鼠体内的药代动力学实验材料与试剂Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液(由实施例1制备，下 同)；瑞舒伐他汀钙(上海医药工业研究院)；肝素钠(上海第一生化药业有限公司)；甲醇 (色谱纯，Sigma-Aldrich, USA)。质谱条件API 3000型三重四极串联质谱仪，电喷雾离子源(Turbo Ionspray)和 Analyst 1. 4数据处理系统(美国应用生物系统有限公司)Agilent 1100液相色谱系统 (美国Agilent公司)；离子喷雾电压为3. 50kV ；雾化温度400°C;雾化气(N2)为900L .h—1 ； 加热辅助气(N2)为8. OL · rnirT1 ；帘气CUR为8. OL · mirT1 ；碰撞气(N2) 4. OL · mirT1 ；扫描时 间为0.2s;采用负离子方式检测；扫描方式为多反应监测(MRM)；用于定量分析的离子反 应分别为 m/zll83. 4-m/z 96. 9amu (Nobiliside Α)和 m/z 421. 2 > m/z 101. Oamu (内标 瑞舒伐他汀钙)。色谱条件色谱柱WatersXbridge C18 (2. 1 X 50mm, 3 μ m)；预柱Waters Xbridge C18 (2. 1 X 10讓，3 μ m)；流动相甲醇水(70 30，V/V)；流速0. 2mL/min ；柱温30°C。动物SD大鼠，雄性，200士20g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，生产许可证号 SCXK (沪)(2007-2005)。实验方法取SD雄性大鼠10只，随机分成两组，每组5只，分别为Nobiliside A普 通脂质体静脉注射液组和Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液组，给药剂量均为按体 重尾静脉注射 lmg/kg,分别于给药后 5min, IOmin, 15min, 30min, 45min, lh，2h，4h，8h，12h， 24h，48h和72h眼眶取血0. 3mL,置于加有肝素钠的离心管内，摇勻，15000rpm离心5min, 取ΙΟΟμ 1血浆样品置离心管中，加入甲醇20μ 1，加入内标溶液500μ K200ng/mL)，涡旋 lmin, 15000rpm离心5min，取上清液进行LC/MS/MS分析，分别测定Nobiliside A的含量， 取平均值并作图，结果见图1。由图1可见，Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液的药时曲线下面积(AUC) 是Nobiliside A普通脂质体静脉注射液的AUC的8倍，Nobiliside A血液消除半衰期由 Nobiliside A普通脂质体静脉注射液的10. 5 延长到了 22. 9池。说明将Nobiliside A 制备成本发明制剂能够使Nobiliside A的血液循环时间延长。2. Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液在小鼠体内的组织分布实验材料与试剂、质谱条件、色谱条件同上。动物ICR小鼠，雄性，体重20士2g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，生 产许可证号 SCXK ( ψ ) (2007-2005)。取ICR小鼠50只，随机分成两组，每组25只，分别为Nobiliside A普通脂质体 静脉注射液组和Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液组，给药剂量均为按体重尾静 脉注射lmg/kg，分别于给药后5min、lh、a!、24h和4 各处死5只，分别取每只小鼠肝、脾 各lOOmg，各组织分别剪碎后，各加入0. 3mL生理盐水按常规勻浆，取100 μ 1勻浆液置于离 心管中，加入甲醇20 μ 1，加入内标瑞舒伐他汀钙甲醇溶液O00ng/mL)500l·! 1，涡旋lmin， 15000rpm离心5min，取上清液进行LC/MS/MS分析，分别测定NobilisideA的含量，取各时 间点的平均值并作图，结果见图2、图3。由图2和图3可见，在富含网状内皮细胞的肝脏和脾脏中，注射Nobiliside A隐 形纳米脂质体静脉注射液组的小鼠Nobiliside A含量明显低于Nobiliside A普通脂质体 静脉注射溶液组，说明本发明制剂能降低对肝脏和脾脏的毒副作用。3. Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液对小鼠S180淋巴肉瘤的治疗实验阳性对照药为注射用环磷酰胺(CTX)，山西普德药业有限公司，生产批号 20100308，200mg/10mL支，使用时用生理盐水稀释。动物ICR小鼠，雄性，体重20士2g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，生 产许可证号 SCXK ( ψ ) (2007-2005)。瘤株小鼠S180淋巴肉瘤(由中国科学院上海药物所提供)。将小鼠淋巴瘤S180瘤株按常规腹腔传代接种，接种1周左右将小鼠颈椎脱臼处 死，抽出腹水，用生理盐水稀释，制成1-2Χ IO7个/mL细胞悬液；取ICR小鼠80只，分别给每 只小鼠右前肢腋窝部皮下注射瘤株稀释液0. 2mL,待瘤体长到150mm3左右，随机分为八组， 每组10只，分别为阴性对照组、阳性对照组、Nobiliside A普通脂质体静脉注射溶液低、 中、高剂量组和Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射溶液低、中、高剂量组，Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液和Nobiliside A普通脂质体静脉注射溶液的高、中、低剂量 组给药剂量均依次为按体重ang/kg，lmg/kg, 0. 5mg/kg,阳性对照组给药剂量为CTX 20mg/kg,尾静脉注射给药，每天一次，每次0. 2mL，阴性对照组尾静脉注射等体积生理盐水，连续 给药7天，观察瘤体生长情况。停药M小时后，处死动物，分别称体重、瘤重，按照下列公式 计算出药物对肿瘤的抑制率抑瘤率(1-给药组的平均瘤重/空白组的平均瘤重)X 100%疗效评价标准肿瘤抑制率< 40%为无效；肿瘤抑制率> 40%，并经统计学处理ρ <0.05为有效。用肿瘤抑制率作图，见图4。图中，CTX表示阳性对照组；C low, C middle, C high依次表示Nobiliside A普通脂质体静脉注射液低、中和高剂量组；S low,S middle, S high依次表示Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液低、中和高剂量组。由图4可见，Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射溶液低、中、高剂量组的抑瘤 率依次为38. 9%,45. 和63. 7%，显著高于Nobiliside A普通脂质体静脉注射溶液低、 中、高剂量组的抑瘤率10. 7%,21. 2%和32. 3，说明本发明Nobiliside A隐形纳米脂质体 静脉注射溶液能显著提高Nobiliside A对肿瘤的抑制率。


本发明涉及医药技术领域，是具有抗肿瘤活性的Nobiliside A的一种隐形纳米脂质体静脉注射液制剂及其制备方法，组分和配比为Nobiliside A 0.01-100mg/mL；磷脂1-50mg/mL；胆固醇0.01-20mg/mL；PEG脂质0.1-20mg/mL；注射用水，余量。动物实验表明，本发明Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液制剂比Nobiliside A的普通脂质体静脉注射液制剂半衰期长，对肝脏和脾脏的毒副作用小，抑瘤率比Nobiliside A普通脂质体静脉注射液提高了约30％。本发明Nobiliside A隐形纳米脂质体静脉注射液制备方法简单，能有效提高Nobiliside A的抑瘤率，降低Nobiliside A的毒副作用。