茯苓纯菌种的培养方法有哪些？

（1）肉引 即新鲜茯苓菌核的切片为种子。种苓要选皮色紫红，内白色，浆汁足，个体结实，近圆形，有裂纹，重2千克左右的壮苓。

（2）木引 指肉引接种的木料。它可节约鲜茯苓用量。5月上旬，选质地松泡的幼树干，剥皮留筋锯成50厘米长段木，或用4厘米粗松枝。接种要用新挖出的鲜苓。1千克肉引可接15千克松木料。将苓种肉引片紧贴木料，再覆土3厘米厚，到8月木料就可长成木引。挖出选黄白色，筋皮下有明显菌丝，具有茯苓香气的为好。木引栽培茯苓产量低，但可达到复壮引种目的。老产区仍在用。

（3）菌丝引 是经人工纯培养的茯苓菌丝。由选好的新鲜种苓用清水冲洗去泥沙，用纱布擦去水分，以75%酒精进行表面灭菌，无菌刀切开种苓，由其中挑取内部约黄豆大一块苓肉，放在备好的斜面PDA培养基上，22～25℃培养，苓肉周围可出现白色绒状菌丝，7～10天可长满斜面。选择生长旺盛无杂菌的试管作母种。母种可用来扩繁原种。

原种培养基配方有两种：

一号配方：

松木屑75%

米糖（或麦麸）22%

石膏粉1%

蔗糖 2%

二号配方基本同上，只是把松木屑改为松木丁（大小1厘米见方）和松木屑两种。松木丁可占60%，松木屑为15%，其他不变。制备时先将除蔗糖以外的其他物料混和拌匀。蔗糖溶于适量水中，再以蔗糖水拌混合料，以手握料指缝可有水渗出但不滴下为度。装广口瓶或塑料袋及消毒同灵芝。

栽培种培养基配方基本同原种，原种也可作栽培种用。但现在栽培种多为木片种。培养料为：

松木片 12×2×1（厘米）66%

松木屑 10%

细糠或麦麸 21%

石膏粉 1%

蔗糖2%

制作时，先用适量水溶化蔗糖，再用蔗糖水煮松木片半小时，使干木片吸足水分。松木屑、细糠和石膏粉也事先拌匀，然后和煮过的木片再拌和在一起，使含水量在65%左右，拌好的料装入0.5千克装的广口瓶中。加棉塞，包牛皮纸、消毒等程序同前。

接种培养：原种及栽培种培养基经消毒后降温到30℃以下，即可用母种接原种，每支母种可接3～4瓶原种瓶。栽培种用长好菌丝的木丁5～6块接入培养。同法可依次无菌操作接多瓶。完成接种后，将其放25～28℃条件下培养，原种瓶经20～25天，栽培种瓶经25～30天菌丝可长好。瓶壁可见旺盛爬壁的白菌丝。菌丝布满木片。木片断面微黄易折断。如断面棕黄，可能菌种衰老影响生活力。因此菌种培养好后应及时用，否则要低温存放防老化。