荧光显微镜,是从生物或非生物样品荧光 - 磷光通过观察现象,观察目标显微镜是。有时会同时观察到反射光或透射光图像。用于生物学 / 医学研究,临床测试和渗透测试。
普通光学显微镜,但做观察的光源如钨卤素灯,用于观察与荧光的样品的荧光显微镜超高压水银灯和氙灯、紫外线LED、激光通过使用荧光它可以在材料的激发波长下进行照明。
激发光的紫外线邻近如(UV激发·334 / 365nm)下·蓝色光(B激发·435分之405/ 490nm处)·绿色光(G激发·546纳米)被使用。通常使用超高压汞灯作为激发光源。这是因为可以进行紫外线的激发。由于其工作原理,超高压水银灯需要专用的高压电源,并且还需要定期更换水银灯泡。因此,近年来,以小型化和易于维护为目的,开发了使用紫外线LED的产品。
?
在使用紫外线的情况下,可能会对人体造成不良影响,因此,通过在紫外线的散射部位附近设置紫外线截止滤光片,可以保护人体。超高压水银灯发出的光含有UV-C,对人体特别有害。
在结构上,它大致分为透射型荧光显微镜和落射照明型荧光显微镜。透射荧光显微镜具有更简单的结构并且具有悠久的历史,但是如今,由于技术上的创新,主要使用了具有许多改进性能的余辉荧光显微镜。
透射荧光显微镜
与普通光学显微镜(生物显微镜)一样,从下方照射激发光。此时,在光源上安装滤光片(激发滤光片),仅照射激发光的波长。
使用暗场聚光器以激发光照射样品制备
只有样品产生的荧光和样品散射的激发光才能到达目镜。
使用仅透射目标荧光波长的滤光器(吸收滤光器),仅提取荧光。
观察荧光
落射照明荧光显微镜
落射荧光显微镜原理
从右光源发出的光(彩虹色线)仅限于具有由激发滤光片激发的波长的光,并成为激发光(深蓝线)。
激发光被二向色镜反射并通过物镜照射样品。
激发样品产生的荧光(黄绿色线)通过物镜到达目镜。
荧光笔直,不会被二向色镜反射。
吸收滤光器去除除荧光之外的其他波长的光。
荧光到达目镜并用肉眼观察/用相机拍摄
以落射照明(同轴照明)照射激发光。二向色镜用作落射照明的反射镜(可以将激发滤光片用作辅助镜),并且仅以激发光的波长照射样品。
只有样品产生的荧光和样品散射的激发光才能到达目镜。
使用仅透射所需荧光波长的吸收滤光片仅提取荧光。
观察荧光
透射荧光显微镜结构简单且价格便宜,但是增加激发光的强度是有局限的,不能与相衬观察相结合,厚样品在目镜侧产生荧光。现在,落射照明荧光显微镜已经成为主流,因为相关的光学技术由于其制造难度而进行了革新。通过更改光源,某些显微镜与透射和落射照明观察方法兼容。
原理用紫外线穿过物镜的激励光,以执行激励具有紫外线的高透光率,由透镜材料的荧光的产生(自发荧光,下同)以下的物镜是必要的。为此目的开发的物镜称为Fluor(荧光剂/荧光剂,在德语中是指萤石)。
是一种用于测量含量很低的生物活性化合物的仪器。 免疫荧光技术简介: 是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技术(比如流式细胞仪)测定含量。 相关原理: 设计了免疫荧光定量分析仪,用以对人体血液和尿液中的各种分析物(CRP、PCT、NT-proBNP、cTnI等)含量进行快速准确的定量分析。光源采用大功率LED灯珠,采用窄带干涉滤光片对激发光和荧光进行滤光,采用内置运放的光电转换芯片OPT101进行荧光强度的检测。采用步进电机驱动,皮带传动方式带动双排滚珠宽体滑块在单根精密直线导轨上滑动,实现对检测样品的扫描式检测。通过与标准仪器进行对比试验,结果表明样机在小型化、快速性以及低成本的基础上,测量结果准确,测量精度高,稳定性好,能满足临床应用要求。