专利名称：去氢碎叶紫堇碱和斯氏紫堇碱在制药中的应用的制作方法乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的一种发病率高、病程长、难治愈、 易反复的世界性疾病。据世界卫生组织统计，全球约有3. 5亿人为慢性肝炎患者或为无症 状的病毒携带者(HBsiVg携带者)。这些慢性肝炎的病人有转为肝硬化、肝癌的高危险性，每 年约有100多万人死于和肝炎、肝硬化及肝癌相关的疾病。我国是肝炎的高发病地区之一， 目前约有乙肝患者3000万。据统计，肝癌患者中有80%有乙型肝炎病毒感染的背景，目前 肝癌已成为继肺癌之后的致死率居第二位的癌症。乙型肝炎的发病机理复杂，至今尚不十分清楚，目前医学界对其治疗尚缺乏专属 性较强的治疗药物。现在临床上常用的抗乙肝药物多数为抗HIV逆转录酶抑制剂和抗疱疹 病毒DNA聚合酶抑制剂等核苷类似物、干扰素等药物，存在价格昂贵、副作用大和耐药性等 缺点，因此研制开发疗效好、价格低，副作用小的抗HBV的天然药物是目前新药研发的一个 热点。我国中医药学具有悠久的历史，中草药抗乙肝的实验和临床研究亦在不断深入，在这 些植物有效成分中，推测极有可能存在抗肝炎病毒活性的物质，所以，从天然产物中筛选具 有抗肝炎病毒活性的先导化合物是抗肝炎新药研发的一条重要途径。中药岩黄连，又名岩连，系罂粟科(Papaveraceae)紫堇属多年生草本植物石生黄 堇(Corydalis saxicola Bunting)的全草，被收载于《广西中药材标准》中。岩黄连主要 生长在广西、贵州等地，性凉、味苦，有清热解毒、利湿止痛、止血之功效，主治肝炎、热毒痈 疮、火眼、腹泻、腹痛、痔疮出血等症。目前，岩黄连的制剂主要为岩黄连注射液(国药准字 Z2004672O，其功能主治为清热解毒，用于急慢性肝炎属肝胆湿热证者。临床资料表明，岩 黄连对肝脏炎症有特效，同时具有抗肿瘤和保肝多重功效，经长期服用尚未发现毒副作用。柯珉珉等通过体外、半体内及体内法进行抗肿瘤活性实验，发现岩黄连总碱注射 液对小鼠肉瘤180、艾氏腹水癌及肝癌、腹水癌、大鼠肉瘤256均有一定的抑制作用，对癌细 胞呼吸亦有抑制作用。近年来，又有研究表明岩黄连总碱对小鼠免疫功能有增强作用，对大 鼠脑中的多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-ΗΤ)的代谢有一定的抑制作用。任仲轩等应用岩黄 连注射液治疗病毒性肝炎33例的疗效分析，结果显示岩黄连注射液可以有效的改善慢性、 急性肝炎患者的临床症状。孙兆翠报道运用岩黄连注射液配合介入疗法治疗原发性肝癌患 者，发现对缓解患者的临床症状、改善肝功能，尤其是提高患者血清白蛋白有显著的疗效。 在临床治疗肝纤维化过程中发现岩黄连和丹参注射液合用可以有效改善肝功能、减轻和抑 制肝纤维化，并同样证实其能促进肝细胞再生及促进胆汁排泄、增加消化和增进食欲。岩黄连注射液的主要有效成分被认为是生物碱类成分，以脱氢卡维丁 (dehydrocavidine)含量最高。陈重阳等研究报道了脱氢卡维丁对中枢神经系统有镇静作 用，对肠道平滑肌有解痉作用；在体外对多种细菌有效，对正常小鼠血糖无影响，并能增加肝糖原的生成。发明专利CN1005M270C公开了从岩黄连中制备脱氢卡维丁、脱氢阿朴卡维 丁及其组合物的制备方法以及在抗肝病药物、抗病毒药物、抗肿瘤及心律失常药物中的应 用。发明专利CN100595200C公开了脱氢卡维丁类似物及其在制备治疗极性和慢性病毒性 肝炎、肝损伤、流感、肿瘤、心律失常的药物中的应用。岩黄连生物碱的已有药理活性研究主要是针对总生物碱及其主要成分脱氢卡维 丁、脱氢阿朴卡维丁等少数几种生物碱成分，且目前，普遍认为岩黄连治疗肝炎的活性物质 为脱氢卡维丁、脱氢阿朴卡维丁、脱氢异阿朴卡维丁等这少数几种生物碱，而从岩黄连中分 离报道的生物碱类成分有四十余种。去氢碎叶紫堇碱、斯氏紫堇碱分别为原小檗碱型季胺和叔胺生物碱类化合物，除 了存在于岩黄连中外，在罂粟科蓟罂粟属(Argemone Lirm.)、博落回属(MacleayaR. Dr.)、 紫堇属(CorydalisDC·)、白屈菜属(CtlelidoniumL.)、荷包牡丹属(Dicentra Bernh.)等 属中亦广泛存在，尤其在罂粟科植物岩黄连、巨紫堇、延胡索、刻叶紫堇、苦地丁等植物的全 草、叶及根中含量较多。迄今为止未见原小檗碱型生物碱成分——去氢碎叶紫堇碱、斯氏紫 堇碱抗乙肝病毒活性方面的研究报道，亦未见将其用于肝炎治疗的报道。
本发明的第一目的在于提供两种原小檗碱型生物碱——去氢碎叶紫堇碱、斯氏紫 堇碱在制药中的新应用。为实现上述目的，本发明采取了以下技术方案去氢碎叶紫堇碱和/或斯氏紫堇碱在制备抗乙肝病毒药物中的应用。优选地，所述去氢碎叶紫堇碱和斯氏紫堇碱的重量比为1 5-5 1。本发明的另一目的在于提供一种抗乙肝病毒的药物组合物。为实现上述目的，本发明采取了以下技术方案一种抗乙肝病毒的药物组合物，所述药物组合物的活性成分为去氢碎叶紫堇碱和 /或斯氏紫堇碱。优选地，所述活性成分为去氢碎叶紫堇碱和斯氏紫堇碱，所述去氢碎叶紫堇碱和 斯氏紫堇碱的重量比为1 5-5 1。优选地，所述活性成分的重量百分比含量为0. 5 95%。优选地，所述药物组合物可制成注射剂、口服液、胶囊、散剂、片剂、滴丸剂、悬浮 剂、乳剂或冻干粉针剂。本发明通过体外药理活性筛选，从岩黄连中分离得到两种具有抗乙型肝炎活性的 单体化合物。通过波谱数据(MS/H-NMR^C-NMR)分析，鉴定其结构分别为去氢碎叶紫堇碱 和斯氏紫堇碱，结构式如图Ia和图Ib所示。以去氢碎叶紫堇碱、斯氏紫堇碱或其组合为活性成分，以及含有一种或多种药学 上可接受的载体，采用常规的制备工艺，可以制备成抗乙肝病毒药物组合物。药学上可接 受的载体为稀释剂、赋形剂如水等；填充剂如淀粉、蔗糖等；粘合剂如纤维素衍生物、明胶 等；湿润剂如甘油；崩解剂如琼脂、碳酸钙或碳酸氢钠；吸收促进剂如季铵化合物；润滑剂 如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁或聚乙二醇等。另外还可以加入其它辅剂如甜味剂和香味剂寸。本发明所述抗乙肝病毒的药物组合物的使用剂量可随特定的给药方式、病症的严 重程度等而相应调整。与现有技术相比，本发明具有以下有益效果本发明采用乙肝表面抗原(HBsAg)诊断试剂盒、乙肝e抗原(HBeAg)诊断试剂盒， 分别对来自岩黄连原料的原小檗碱型生物碱去氢碎叶紫堇碱、斯氏紫堇碱进行了抗乙肝表 面抗原、乙肝e抗原试验，结果发现，它们具有显著的抗乙肝病毒活性，甚至比公认的岩黄 连抗乙肝活性成分——脱氢卡维丁、脱氢阿朴卡维丁的效果更加优异，因此，岩黄连生物碱 中，除了总生物碱及其主要成分脱氢卡维丁、脱氢阿朴卡维丁等少数几种成分可用于抗乙 肝病毒药物外，去氢碎叶紫堇碱、斯氏紫堇碱也可用于制备抗乙肝病毒的药物组合物，从而 为乙肝患者提供了新的治疗候选药物。图Ia为去氢碎叶紫堇碱的结构式；图Ib为斯氏紫堇碱的结构式。
值，记录结果，并计算受试药物对细胞增殖的抑制百分率。


本发明公开了去氢碎叶紫堇碱和斯氏紫堇碱在制药中的应用。本发明采用乙肝病毒表面抗原诊断试剂盒、乙肝病毒e抗原诊断试剂盒分别对原小檗碱型生物碱斯氏紫堇碱、去氢碎叶紫堇碱进行了抗乙肝表面抗原、乙肝e抗原试验，结果发现，它们具有显著的抗乙肝病毒活性，因此可用于制备抗乙肝病毒药物。