千菌花菌菇复配多糖粉及其制备方法【技术领域】，具体涉及千菌花菌菇复配多糖粉及其制备方法。[0002]由于现代人的饮食、生活习惯等的不合理，工作、生活环境的恶劣，导致现在越来越多的人处于健康与非健康之间的一种亚健康状态。随着中过老龄化程度的加剧，老年人口的规模越来越大，根据2000年11月底全国第五次人口普查显示，65岁以上老年人口已达8811万人，占总人口的6.96%。影响我国人民群众身体健康的常见慢性病主要有心脑血管疾病、糖尿病、恶性肿瘤、慢性呼吸系统疾病等。慢性病发生和流行与经济社会、生态环境、文化习俗和生活方式等因素密切相关。伴随工业化、城镇化、老龄化进程加快，我国慢性病发病人数快速上升，现有确诊患者2.6亿人，是重大的公共卫生问题。慢性病病程长、流行广、费用贵、致残致死率高。慢性病导致的死亡已经占到我国总死亡的85%，导致的疾病负担已占总疾病负担的70%，是群众因病致贫返贫的重要原因，若不及时有效控制，将带来严重的社会经济问题。目前，市场上各种保健品参差不齐，效果也不尽相同，天然有效的保健品是目前研究的重点方向。[0003]国内外专家均以研究证明:所有的大型真菌(食用菌)，都含有免疫调节“多糖”。真菌多糖不是一般的“糖”，它是一种活性高分子化合物，对人体有很好的免疫促进作用。千菌花是由九大珍品菌菇配伍而成，它们分别是灰树花(免疫之王)，猴头菇(山珍猴头，海味燕窝)，姬松茸(巴西蘑菇)，白灵菇(阿魏侧耳，阿魏菇)，白背木耳(黑木耳)，茯苓(四时神药，)蛹虫草(北冬虫夏草，北虫 草)，庆元香菇(产自“中国香菇城”)，双孢蘑菇(洋蘑菇，二孢蘑菇)，这些珍品菌菇均含有优质的免疫促进多糖，千菌花的功效是基于各种珍品菌菇的免疫促进的叠加，远远高于其中单一菌菇的作用，对人体细胞的修复和人体免疫细胞保持活力提供了天然的活性营养成分，明显改善人体内微循环，能有效的调节改善免疫能力低下的人群。[0004]千菌花不仅是一种保健食品，而且它的研制还基于“清补消下”的中医理论，不仅科学，而且实用。清:清除体内毒素。补:补充微量元素，增强免疫力。消:增强消化、吸收的功能。下:除宿便，除积食。[0005]千菌花集九种极品菌菇之精华，经科学的方法提取其中的多糖，属于绿色天然的食品保健品，能有效的提高亚健康患者，老人，慢性病患者，患重病的人群等的细胞修复机能，促进他们的免疫机能的提高，延缓衰老，促进疾病的快速康复。
[0006]针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种千菌花菌菇复配多糖粉及其制备方法的技术方案，该千菌花菌菇复配多糖粉由9种菌菇多糖粉按照中医理论合理配伍，对人体细胞的修复和人体免疫细胞保持活力提供了天然的营养成分。特别适用于亚健康人群、老年人群、慢性疾病人群及各种患重症疾病的人群在家调理身体的天然菌菇
养生产品。
[0007]所述的千菌花菌菇复配多糖粉，其特征在于由以下重量百分比的组分构成:
灰树花多糖5%-30%、蛹虫草多糖5%-25%、猴头菇多糖5%-20%、姬松茸多糖5%_20%、香菇
多糖5%-30%、白灵菇多糖5%-25%、白背木耳多糖5%-30%、双孢蘑菇多糖5%_25%和茯苓多糖5%-20%。
[0008]所述的千菌花菌菇复配多糖粉，其特征在于由以下重量百分比的组分构成:
灰树花多糖10%-25%，蛹虫草多糖8%-20%，猴头菇多糖8%-15%’姬松茸多糖8%-15%’香
菇多糖10%-25%，白灵菇多糖8%-20%，白背木耳多糖10%-25%，双孢蘑菇多糖8%-20%，茯苓多糖 8%-15%。
[0009]所述的千菌花菌菇复配多糖粉，其特征在于由以下重量百分比的组分构成:
灰树花多糖10%-18%，蛹虫草多糖10%-15%，猴头菇多糖10%-12%，姬松茸多糖10%_12%，
香菇多糖10%-18%，白灵菇多糖10%-15%，白背木耳多糖10%-18%，双孢蘑菇多糖10%_15%，茯苓多糖10%-12%。
[0010]所述的千菌花菌菇复配多糖粉，其特征在于所述的灰树花多糖由灰树花细粉水提后醇提得到，所述的蛹虫草多糖由蛹虫草菌丝体粗粉水提得到，所述的猴头菇多糖由猴头菇粗粉水提后醇提得到，所述的姬松茸多糖由姬松茸粗粉醇提后水提得到，所述的香菇多糖由香菇粗粉水提后醇提得到，所述的白灵菇多糖由白灵菇粗粉醇提后水提得到，所述的白背木耳多糖由白背木耳粗粉水提后醇提得到，所述的双孢蘑菇多糖由双孢蘑菇粗粉水提后醇提得到，所述的茯苓多糖由茯苓粗粉水提后醇提得到。
[0011]所述的千菌花菌菇复配多糖粉的制备方法，其特征在于包括以下工艺步骤:
(O制备灰树花多糖粉:取灰树花细粉，加25-35倍重量的水，提取3-5小时，压滤，加入1-2倍体积的95%乙醇醇沉，搅拌20-50分钟，放置10-16小时，过滤，回收乙醇,沉淀加入适量水溶解，相对密度为0.8-1.2，再经喷雾干燥，收集喷雾粉，过筛，得灰树花多糖粉；
(2)制备蛹虫草多糖粉:取蛹虫草菌丝体粗粉，加15-25倍重量的水，提取1-3小时，过滤，滤渣再加6-8倍重量的水，提取1-2小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至相对密度为
1.09-1.1，再经喷雾干燥，过筛，得蛹虫草多糖粉；
(3)制备猴头菇多糖粉:取猴头菇粗粉，加入20-25倍重量的水，提取1-3小时，过滤，滤渣加入6-8倍重量的水，提取1-2小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至相对密度为1.15-1.16，加入3-5倍重量的95%乙醇醇沉，搅拌，静置10-15小时，过滤，回收乙醇，经喷雾干燥，过筛，得猴头菇多糖粉；
(4)制备姬松茸多糖粉:取姬松茸粗粉，加入5-10倍重量的60%-85%乙醇，提取4-6小时,过滤，回收乙醇,滤渣加入15-25倍重量的水，提取1-3小时，过滤，滤渣再加入6-8倍重量的水，提取1-2小时，过滤，三次提取液合并，浓缩至密度为1.09-1.1，经喷雾干燥、过筛，得姬松茸多糖粉；
(5)制备香菇多糖粉:取香菇粗粉，加20-25倍重量的水，提取1-3小时，过滤，滤渣加入6-8倍重量的水，提取1-2小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.15-1.18，加入3-5倍重量的95%乙醇醇沉，搅拌20-50分钟，静置8-16小时，经喷雾干燥、过筛，得香菇多糖粉；
(6)制备白灵菇多糖粉:取白灵菇粗粉，加入5-10倍重量的60%-85%乙醇，提取4-6小时,过滤，回收乙醇,滤渣加入15-25倍重量的水，提取1-3小时，过滤，滤渣再加入6-8倍重量的水，提取1-2小时，过滤，三次提取液合并，浓缩至密度为1.09-1.1，经喷雾干燥、过筛，得白灵菇多糖粉；
(7)制备白背木耳多糖粉:取白背木耳粗粉，加20-25倍重量的水，提取1-3小时，过滤，滤渣加入6-8倍重量的水，提取1-3小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.15-1.18，加入3-5倍体积的95%乙醇醇沉，搅拌20-40分钟，静置8_16小时，经喷雾干燥、过筛，得白背木耳多糖粉；
(8)制备双孢蘑菇多糖:取双孢蘑菇粗粉，加20-25倍重量的水，提取1-4小时，过滤，滤渣加入6-8倍重量的水，提取1-3小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.15-1.18，加入3-5倍重量的95%乙醇醇沉，搅拌20-50分钟，静置8_16小时，经喷雾干燥、过筛，得双孢蘑菇多糖粉；
(9)制备茯苓多糖粉:取茯苓粗粉，加20-30倍重量的水，提取1-4小时，过滤，滤渣加入6-10倍重量的水，提取1-3小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.15-1.18，加入3_5倍重量的95%乙醇醇沉，搅拌20-50分钟，静置8-16小时，经喷雾干燥、过筛，得茯苓多糖粉；
(10)将所得的灰树花多糖粉、蛹虫草多糖粉，猴头菇多糖粉、姬松茸多糖粉、香菇多糖粉、白灵菇多糖粉、白背木耳多糖粉、双孢蘑菇多糖粉、茯苓多糖粉按所述的重量百分比称取混匀，按常规工艺制成市场上可接受的剂型。
[0012]所述的千菌花菌菇复配多糖粉的制备方法，其特征在于所述的剂型为粉剂。
[0013]本发明中的原料 灰树花、香菇产自“中国香菇城”庆元，生产基地均通过欧盟有机认证，有机证号:N0.110483、N0.110715。同时，也可以采用其它产地的灰树花和香菇。
[0014]本发明的有益效果是:本发明按照君臣佐使的中医理论进行复配设计，本发明复配的原料灰树花、蛹虫草多糖粉具有提供人体免疫力、抑制癌细胞生长、防止癌细胞转移的作用，为君药；猴头菇、姬松茸多糖粉具有抗肿瘤、修复细胞、增强免疫力、提供机体耐氧能力、调节人体酸碱平衡的功效，为臣药；香菇、白灵菇、白背木耳、双孢蘑菇多糖粉均能在一定程度上提高机体的免疫能力，具有一定的抗癌活性，经常食用能改善神经功能，降压、降血脂、抗衰老等，为佐药；茯苓多糖粉能增强机体免疫功能，具有明显的抗肿瘤作用，经常食用可健脾祛湿，助消化、壮体质，为使药。以上诸原料经合理配比，可协同增效，达到提高机体免疫能力，预防各类疾病，调理身体机能的目的，并且能明显改善人体微循环作用。

[0015]以下结合实施例来进一步说明本发明。
[0016]实施例1:千菌花菌菇复配多糖粉制备
(1)灰树花多糖粉的制备:将灰树花细粉IOOKg置于30倍水中提取4小时，过滤，加入
1.5倍95%乙醇(体积比)醇沉，搅拌30分钟，放置12小时，过滤，回收乙醇，沉淀加入适量水溶解至相对密度为1.02，经喷雾干燥，收集喷雾粉，过筛，得灰树花多糖粉；
(2)蛹虫草多糖粉的制备:取蛹虫草菌丝体粗粉lOOKg，加20倍水提取2小时，过滤，滤渣再加7倍量水，提取1.5小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.0,经喷雾干燥，过筛，得蛹虫草多糖粉；(3)猴头菇多糖粉的制备:取猴头菇粗粉IOOKg置于22倍水中提取2小时，过滤，滤渣再加入7倍量水，提取1.5小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至相对密度1.15，加入4倍95%的乙醇(质量比)醇沉，搅拌，静置12小时，过滤，回收乙醇，经喷雾干燥，过筛，得猴头菇多糖粉；
(4)姬松茸多糖粉的制备:取姬松茸粗粉lOOKg，加入7倍量75%乙醇提取5小时，过滤，回收乙醇，滤渣加入20倍水，提取2小时，过滤，滤渣再加入7倍水提取1.5小时，过滤，三次提取液合并，浓缩至密度为1.0，经喷雾干燥、过筛，得姬松茸多糖粉；
(5)香菇多糖粉的制备:取香菇粗粉IOOKg置于22倍水中提取2小时，过滤，滤渣加入7倍水，提取1.5小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至相对密度为1.16，加入4倍95%乙醇醇沉，搅拌30分钟，静置12小时，经喷雾干燥、过筛，得香菇多糖粉；
(6)白灵菇多糖粉:取白灵菇粗粉lOOKg，加入7倍量75%乙醇，提取5小时，过滤，回收乙醇，滤渣加入20倍水，提取2小时，过滤，滤渣再加入7倍水，提取1.5小时，过滤，三次提取液合并，浓缩至密度为1.0，经喷雾干燥、过筛，得白灵菇多糖粉；
(7)白背木耳多糖粉:取白背木耳粗粉IOOKg加20倍水，提取2小时，过滤，滤渣加入7倍水，提取1.5小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.16，加入4倍95%乙醇醇沉，搅拌30分钟，静置12小时，经喷雾干燥、过筛，得白背木耳多糖粉；
(8)双孢蘑菇多糖:取双孢蘑菇粗粉IOOKg加22倍水，提取2小时，过滤，滤渣加入7倍7K，提取1.5小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.16，加入4倍95%乙醇(质量比)醇沉，搅拌30分钟，静置12小时，经喷雾干燥、过筛，得双孢蘑菇多糖粉； (9)茯苓多糖粉:取茯苓粗粉IOOKg加25倍水，提取3小时，过滤，滤渣加入7倍水，提取2小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.16，加入4倍95%乙醇(质量比)醇沉，搅拌30分钟，静置12小时，经喷雾干燥、过筛，得茯苓多糖粉；
(10)按灰树花多糖粉15%，蛹虫草多糖粉13%，猴头菇多糖粉8%、姬松茸多糖粉12%、香菇多糖粉14%、白灵菇多糖粉8%、白背木耳多糖粉10%、双孢蘑菇多糖粉12%、茯苓多糖粉8%，将各组分称取后，混合均匀，制成粉剂，得到千菌花菌菇复配多糖粉。
[0017]实施例2:千菌花菌菇复配多糖粉制备
(1)灰树花多糖粉的制备:将灰树花细粉IOOKg置于25倍水中提取5小时，过滤，加入I倍95%乙醇(体积比)醇沉，搅拌50分钟，放置10小时，过滤，回收乙醇,沉淀加入适量水溶解至相对密度为0.8，经喷雾干燥，收集喷雾粉，过筛，得灰树花多糖粉；
(2)蛹虫草多糖粉的制备:取蛹虫草菌丝体粗粉lOOKg，加15倍水提取3小时，过滤，滤渣再加6倍量水，提取2小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.09，经喷雾干燥，过筛，得蛹虫草多糖粉；
(3)猴头菇多糖粉的制备:取猴头菇粗粉IOOKg置于20倍水中提取3小时，过滤，滤渣再加入8倍量水，提取I小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至相对密度1.16，加入5倍95%的乙醇(质量比)醇沉，搅拌，静置10小时，过滤，回收乙醇，经喷雾干燥，过筛，得猴头菇多糖粉；
(4)姬松茸多糖粉的制备:取姬松茸粗粉lOOKg，加入5倍量85%乙醇提取6小时，过滤，回收乙醇，滤渣加入25倍水，提取3小时，过滤，滤渣再加入6倍水提取2小时，过滤，三次提取液合并，浓缩至密度为1.09，经喷雾干燥、过筛，得姬松茸多糖粉；(5)香菇多糖粉的制备:取香菇粗粉IOOKg置于20倍水中提取3小时，过滤，滤渣加入8倍水，提取2小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至相对密度为1.18，加入5倍95%乙醇醇沉，搅拌20分钟，静置8小时，经喷雾干燥、过筛，得香菇多糖粉；
(6)白灵菇多糖粉:取白灵菇粗粉lOOKg，加入10倍量60%乙醇，提取6小时，过滤，回收乙醇，滤渣加入15倍水，提取3小时，过滤，滤渣再加入8倍水，提取I小时，过滤，三次提取液合并，浓缩至密度为1.09，经喷雾干燥、过筛，得白灵菇多糖粉；
(7)白背木耳多糖粉:取白背木耳粗粉IOOKg加25倍水，提取3小时，过滤，滤渣加入8倍水，提取3小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.15，加入5倍95%乙醇醇沉，搅拌40分钟，静置16小时，经喷雾干燥、过筛，得白背木耳多糖粉；
(8)双孢蘑菇多糖:取双孢蘑菇粗粉IOOKg加25倍水，提取4小时，过滤，滤渣加入8倍水，提取I小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.15，加入5倍95%乙醇(质量比)醇沉，搅拌50分钟，静置8小时，经喷雾干燥、过筛，得双孢蘑菇多糖粉；
(9)茯苓多糖粉:取茯苓粗粉IOOKg加30倍水，提取4小时，过滤，滤渣加入10倍水，提取I小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.15，加入5倍95%乙醇(质量比)醇沉，搅拌50分钟，静置8小时，经喷雾干燥、过筛，得茯苓多糖粉；
(10)按灰树花多糖粉30%，蛹虫草多糖粉20%,猴头菇多糖粉5%、姬松茸多糖粉5%、香菇多糖粉10%、白灵菇多糖粉15%、白背木耳多糖粉5%、双孢蘑菇多糖粉5%、茯苓多糖粉5%，将各组分称取后，混合均匀，制成粉剂，得到千菌花菌菇复配多糖粉。
[0018]实施例3:千菌花菌菇复配多糖粉制备
(1)灰树花多糖粉的制备:将灰树花细粉IOOKg置于35倍水中提取3小时，过滤，加入2倍95%乙醇(体积比)醇沉，搅拌20分钟，放置16小时，过滤，回收乙醇,沉淀加入适量水溶解至相对密度为1.2，经喷雾干燥，收集喷雾粉，过筛，得灰树花多糖粉；
(2)蛹虫草多糖粉的制备:取蛹虫草菌丝体粗粉lOOKg，加25倍水提取I小时，过滤，滤渣再加8倍量水，提取I小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.1，经喷雾干燥，过筛，得蛹虫草多糖粉；
(3)猴头菇多糖粉的制备:取猴头菇粗粉IOOKg置于25倍水中提取I小时，过滤，滤渣再加入6倍量水，提取2小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至相对密度1.15，加入3倍95%的乙醇(质量比)醇沉，搅拌，静置15小时，过滤，回收乙醇，经喷雾干燥，过筛，得猴头菇多糖粉；
(4)姬松茸多糖粉的制备:取姬松茸粗粉lOOKg，加入10倍量60%乙醇提取4小时，过滤，回收乙醇，滤渣加入15倍水，提取I小时，过滤，滤渣再加入8倍水提取I小时，过滤，三次提取液合并，浓缩至密度为1.1，经喷雾干燥、过筛，得姬松茸多糖粉；
(5)香菇多糖粉的制备:取香菇粗粉IOOKg置于25倍水中提取I小时，过滤，滤渣加入6倍水，提取I小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至相对密度为1.15，加入3倍95%乙醇醇沉，搅拌50分钟，静置16小时，经喷雾干燥、过筛，得香菇多糖粉；
(6)白灵菇多糖粉:取白灵菇粗粉lOOKg，加入5倍量85%乙醇，提取4小时，过滤，回收乙醇，滤渣加入25倍水，提取I小时，过滤，滤渣再加入6倍水，提取2小时，过滤，三次提取液合并，浓缩至密度为1.1，经喷雾干燥、过筛，得白灵菇多糖粉；
(7)白背木耳多糖粉:取白背木耳粗粉IOOKg加22倍水，提取I小时，过滤，滤渣加入6倍水,提取I小时,过滤,两次滤液合并,浓缩至密度为1.18，加入3倍95%乙醇醇沉，搅拌20分钟，静置8小时，经喷雾干燥、过筛，得白背木耳多糖粉；
(8)双孢蘑菇多糖:取双孢蘑菇粗粉IOOKg加20倍水，提取I小时，过滤，滤渣加入6倍水，提取3小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.18，加入3倍95%乙醇(质量比)醇沉，搅拌20分钟，静置16小时，经喷雾干燥、过筛，得双孢蘑菇多糖粉；
(9)茯苓多糖粉:取茯苓粗粉IOOKg加20倍水，提取I小时，过滤，滤渣加入6倍水，提取3小时，过滤，两次滤液合并，浓缩至密度为1.18，加入3倍95%乙醇(质量比)醇沉，搅拌20分钟，静置16小时，经喷雾干燥、过筛，得茯苓多糖粉；
(10)按灰树花多糖粉15%，蛹虫草多糖粉15%，猴头菇多糖粉10%、姬松茸多糖粉10%、香菇多糖粉10%、白灵菇多糖粉10%、白背木耳多糖粉10%、双孢蘑菇多糖粉10%、茯苓多糖粉10%，将各组分称取后，混合均匀，制成粉剂，得到千菌花菌菇复配多糖粉。
[0019]实施例4细胞生物学实验
1.实验方法
对实施例1中配比的千菌花菌菇复配多糖粉进行细胞活性评价。
[0020]细胞活性评价指标:细胞抑制率(％)
细胞抑制率=(1-样品组吸光度A值/空白对照组)X 100%
2.实验步骤
2.1细胞培养
实验选用人肝癌细胞H印G2、人非小细胞肺癌细胞A549、人胃癌细胞SGC、BGC:培养于含10%胎牛血清的高糖DMEM培养液，37°C、5%C02和100%饱和湿度条件下孵育培养，细胞每2天传代I次。传代前先用D-Hanks液洗涤。2次，0.25%胰蛋白酶37°C条件下消化约3-5min, 1:2或1:3传代分瓶培养。
[0021]2.2细胞毒活性测试
用MTT法测试目标化合物对人肝癌细胞H印G2、人胃癌细胞SGC/BGC、人乳腺癌细胞MCF-7的体外抗肿瘤活性。取处于指数生长期的状态良好的细胞，胰蛋白酶消化，使贴壁细胞脱落，制成细胞悬液。将细胞悬液接种后，培养箱中培养，加入受试化合物，混合物用双蒸水溶解后，离心，灭菌，调整浓度分别为010625，01125，0125，015，112mg/mL，培养72 h.加入MTT，培养箱中反应.吸去上清液，加入DMS0，在平板摇床上振摇.用酶联免疫检测仪在波长570 nm处测定每孔的吸收度，并计算细胞抑制率
2.3细胞培养上清液中NO的水平
采用经典的Griess反应，利用NO检测试剂盒检测细胞上清液中的NO稳定氧化代谢产物亚硝酸盐(N02-)水平。依照实验分组细胞培养72h后，取细胞培养上清液50 μ L加入到96孔平底酶标板中，严格按照试剂盒说明书操作，540 nm处用自动酶联免疫标记仪测定吸光度值。根据标准品绘制标准曲线，求出所测样品的对应浓度。
[0022]3.实验结果
3.1样品对细胞增值活性的变化
表1样品不同浓度对不同的细胞抑制率