Slc25a13基因突变体及其应用的制作方法[0002]新生儿瓜胺酸血症2型(phaeohyphomycosis, OMIM号为605814),又叫新生儿朽1樣素缺乏所致的肝内胆汁郁积(Neonatal Intrahepatic Cho lestasis Caused By CtrinDeficiency, NICXD)，其属于氨基酸代谢缺陷症中瓜胺酸代谢病的一种，患者在出生一至五个月间便会发生胆汁郁积性黄疸，肝脏功能不正常，出现多种高胺基酸血症，半乳糖血症及脂肪肝等症状。严重者会导致生长迟缓，异常出血不止或贫血，低血糖，肝脏肿大，甚至肝脏衰竭。此疾病的发生率依照基因突变频率推估，台湾地区发生率约为1/14000。NIC⑶是一种常染色体隐性遗传病，SLC25A13基因是目前唯一已知和NICXD相关的基因。迄今为止，在SLC25A13基因上已发现多个突变位点与NICXD疾病相关，但也有多个NICXD患者并未发现突变。[0003]因而，目前对NICXD疾病的研究仍有待深入。
[0004]本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出新生儿瓜胺酸血症2型疾病(在本文中有时也称为“NICCD疾病”)的致病基因上的新突变。[0005]本发明是基于发明人的下列工作而完成的:发明人通过目标区域捕获测序的方法确定了 NICCD疾病的致病基因上的新突变。[0006]根据本发明的第一方面，本发明提出了一种分离的编码SLC25A13突变体的核酸。根据本发明的实施例，与SEQ ID NO:1相比，该核酸具有选自下列的至少一种突变:c.754G>A和c.1177+1G>A。根据本发明的实施例，发明人确定了多个SLC25A13基因的新突变体，这些新突变体与NICXD疾病的发病密切相关，从而通过检测这些新突变体在生物样品中是否存在，可以有效地检测生物样品是否易感NICCD疾病。
[0007]根据本发明的第二方面，本发明提出了一种分离的多肽。根据本发明的实施例，与SEQID NO:2相比，该分离的多肽具有选自下列的至少一种突变:p.Glu252Lys和p.Gly393Glyfs*2。根据本发明的一些具体示例，该多肽是由前述分离的编码SLC25A13突变体的核酸编码的。通过检测生物样品中是否表达该多肽，可以有效地检测生物样品是否易感NICXD疾病。
[0008]根据本发明的第三方面，本发明提出了一种筛选易感NICCD疾病的生物样品的方法。根据本发明的实施例，该筛选易感NICCD疾病的生物样品的方法包括以下步骤:从生物样品提取核酸样本；确定核酸样本的核酸序列；该核酸样本的核酸序列或其互补序列与 SEQ ID NO:1相比，具有选自c.754G>A和c.1177+1G>A的至少一种突变是生物样品易感 NICCD疾病的指示。通过根据本发明实施例的筛选易感NICCD疾病的生物样品的方法，可以有效地筛选易感NICXD疾病的生物样品。
[0009]根据本发明的第四方面，本发明提出了一种筛选易感NICCD疾病的生物样品的系统。根据本发明的实施例，该筛选易感NICCD疾病的生物样品的系统包括:核酸提取装置， 该核酸提取装置用于从生物样品提取核酸样本；核酸序列确定装置，该核酸序列确定装置与核酸提取装置相连，用于对核酸样本进行分析，以便确定核酸样本的核酸序列；判断装置，该判断装置与核酸序列确定装置相连，以便基于核酸样本的核酸序列或其互补序列与 SEQ ID NO:1相比，是否具有选自c.754G>A和c.1177+1G>A的至少一种突变，判断生物样品是否易感NICCD疾病。利用该系统，能够有效地实施前述筛选易感NICCD疾病的生物样品的方法,从而可以有效地筛选易感NICCD疾病的生物样品。
[0010]根据本发明的第五方面，本发明提出了一种用于筛选易感NICCD疾病的生物样品的试剂盒。根据本发明的实施例，该用于筛选易感NICCD疾病的生物样品的试剂盒包括:适于检测SLC25A13基因突变体的试剂，其中与SEQ ID NO:1相比，SLC25A13基因突变体具有选自c.754G>A和c.1177+1G>A的至少一种突变。利用根据本发明的实施例的试剂盒，能够有效地筛选易感NICXD疾病的生物样品。
[0011]本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。



[0012]本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中:
[0013]图1:显示了根据本发明实施例的筛选易感NIC⑶疾病的生物样品的系统及其组成部分的示意图，其中，A为根据本发明实施例的筛选易感NICCD疾病的生物样品的系统的示意图，B为根据本发明实施例的核酸提取装置的示意图，C为根据本发明实施例的核酸序列确定装置的不意图；`
[0014]图2:显示了根据本发明实施例的对患者及其父母和舅舅的SLC25A13基因突变位点c.1177+1G>A的Sanger测序验证峰图；以及
[0015]图3:显示了根据本发明实施例的对患者及其父母和舅舅的SLC25A13基因突变位点c.754G>A的Sanger测序验证峰图。

[0016]下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
[0017]SLC25A13基因突变体
[0018]根据本发明的第一方面，本发明提出了一种分离的编码SLC25A13突变体的核酸。根据本发明的实施例，与SEQ ID NO:1相比，该核酸具有选自下列的至少一种突变:c.754G>A和c.1177+1G>A，优选地，该核酸同时具有c.754G>A和c.1177+1G>A突变。在本文中所使用的表达方式“编码SLC25A13突变体的核酸”，是指与编码SLC25A13突变体的基因相对应的核酸物质，即核酸的类型不受特别限制，可以是任何包含与SLC25A13突变体的编码基因相对应的脱氧核糖核苷酸和/或核糖核苷酸的聚合物，包括但不限于DNA、RNA或cDNA。根据本发明的一个具体示例，前面所述的编码SLC25A13突变体的核酸为DNA。根据本发明的实施例，发明人确了多个SLC25A13基因的新突变体，这些新突变体与NICCD疾病的发病密切相关，从而通过检测这些新突变体在生物样品中是否存在，可以有效地检测生物样品是否易感NICCD疾病，也可以通过检测这些突变体在生物体中是否存在，可以有效地预测生物体是否易感NICXD疾病。
[0019]这些编码SLC25A13突变体的核酸，是本申请的发明人通过目标区域捕获测序的方法，针对患者样本进行测序，确定的NICCD疾病的致病基因上的新突变。
[0020]需要说明的是，SLC25A13基因的cDNA序列如下所示: