专利名称：一种含钩藤具有抗衰老作用的组合物的制作方法一种含钩藤具有抗衰老作用的组合物随着社会的发展，人类寿命普遍延长，高龄老人明显增多，人口老龄化问题日益严 重，已经成为当今世界普遍关注的焦点。而现在广泛使用的抗衰老的西药，例如治疗阿尔茨 海默氏病的改善胆碱能神经传递类、促代谢类、激素类、影响自由基代谢类、钙离子拮抗剂 类等普遍具有各种各样的副作用。
清洁级健康KM小鼠，18_22g，雌雄各半，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提 供，许可证号SCXK (沪)2007-0005。1.2药物制备含钩藤抗衰老组合物由本院中药制剂室按传统方法水提、浓缩、消毒等制成浸 膏，本浸膏含生药3. 15g/ml，临用前置冰箱中4°C保存。1.3实验环境清洁级，合格证号SYXK(苏)2007-0(^6。2、方法2.1预试验取禁食16h以上的KM小鼠20只，早$各半，用含量为3. 15g生药/ml的含钩藤抗 衰老组合物按0. 5ml/10g体重的给药量(最大给药量)灌胃给药，此浓度为12号灌胃器能 抽吸的最大浓度。给药剂量为157. 5g/kg，观察一周，结果无动物死亡，若有死亡，则需降低 剂量再试。因无法按常规测定LD50，故进行最大给药量测定。2. 2正式试验选取健康KM小鼠30只，早$各半，平均体重早为18. 5 士 0. 5g ； $为19. 6 士 1. Igo 小鼠禁食(不禁水)约1 后，用含生药3. 15g/ml的含钩藤抗衰老组合物(预先温热至 20°C左右)按0.5ml/10g体重的最大给药量灌胃给药，剂量为157. 5g/kg。给药后小鼠正 常饲养于清洁级饲养室(室温21 士0. 50C ；相对湿度45 60% )，观察动物的活动、皮毛、 饮食、粪便有无异常改变，并观察有无中毒症状及死亡(若有死亡，则进行解剖及病理学检 验)，连续观察一周。一周后复称体重，处死动物进行解剖，观察心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸 腺、脑、甲状腺、胃、肠、膀胱、性腺(子宫、卵巢或睾丸和附睾)等主要脏器有无异常变化。3、结果在给药后5min后，动物活动明显减少，约15min后大多数小鼠伏下少动，少数静卧 不动，呈昏睡状(雌性有2只，雄性3只)，但轻敲笼具有抬头或躲避等反应。4小时内动物 极少进食，大便呈黄褐色。6小时后多数动物的活动、饮食、大便等逐渐恢复正常，仍有2只 动物(雌性1只，雄性1只)伏下少动。未见其它异常或不良反应，也无动物死亡。一周后 复称体重，早为四.3士1.68，$*32.9±1.0g。处死解剖动物后，其主要脏器均未见明显的 异常病变。小鼠灌胃给药的最大给药量为157. 5g/kg体重，未见明显的毒性反应。结论含钩藤抗衰老组合物的小鼠灌胃最大给药量约为157. 5g生药/kg体重，除给药后 因给药量过大动物有短时间的不适外，未见明显的毒性反应。人的剂量为0. 85g生药/kg 体重，给小鼠的剂量是人的185. 3倍。由此可见，在按人的常规剂量服用时是安全的。实施例2含钩藤抗衰老组合物的益智作用实验研究1、材料1. 1药品与试剂含钩藤抗衰老组合物由本院中药制剂室按传统方法水提、浓缩、消毒等制成浸 膏。临用将含钩藤抗衰老组合物加蒸馏水配至100ml，变成0. 85g生药/ml浸膏溶液，实验 中所用剂量均以生药量计。茴拉西坦胶囊(三乐喜)无锡凯西药业有限公司产品，批号20081023,0. Ig/ 粒。用前将三乐喜研成粉末，用蒸馏水按10粒/IOOml蒸馏水配成0. 01g/ml溶液。氢溴酸东莨菪碱上海禾丰制药有限公司产品，批号080201,0. 3mg/mL·亚硝酸钠南京化学试剂厂产品，批号20080506乙二醇上海久億化学试剂有限公司，批号20080403。使用前用蒸馏水配成40% 的乙醇。1. 2实验动物清洁级KM小鼠，18_22g，雌雄各半，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，许 可证号SCXK (沪)2007-0005。1. 3 仪器MG-2迷宫，张家港市生物医学仪器厂生产。1. 4动物实验环境清洁级，合格证号SYXK(苏)2007-0(^6。2、方法2. 1记忆获得障碍实验2. 1. 1 预选将小鼠放入Y迷路箱内适应环境5-8分钟，然后驱赶至I臂(起步区)停留aiiin 后给予电击(35V)，小鼠受电击后逃至II臂安全区(有光亮)为正确反应，否则为错误反 应。待小鼠逃入安全区后，使停留30秒，将小鼠取出放回I臂，停留1分钟后再予第二次电 击，依次重复训练。选取达到连续2次直接逃至安全区前的电击训练次数< 3次，且自由活 动较敏捷的小鼠，供试验用。2. 1.2分组给药将小鼠分为实验高、中、低剂量、阳性对照、模型对照、正常对照共6组，每组20只， 雌雄各半。实验组高剂量每天灌胃以17g生药/kg体重(20倍人的等效量)，中剂量8. 5g/ kg体重，低剂量4. 25g/kg体重，阳性对照组每天给茴拉西坦溶液(三乐喜)0. 2g生药/kg 体重(20倍人的等效量)，模型对照组与正常组每天给0. 2ml/10g体重的蒸馏水，每天灌胃 一次，连续给药3周。2. 1.3学习训练最后一天给药后50min用氢溴酸东莨菪碱造模，尔后进行学习训练，除正常组外， 各组小鼠每只腹腔注射氢溴酸东莨菪碱(5mg/kg体重)。训练时，将小鼠放入I臂起步区停留:3min后给予电击(35V)，按I — II — III — I 或I — III — II — I连续试验a项小鼠到达安全区停留0. 5min，然后取出放回原臂，Imin 后给予下次电击，达到连续2次直接逃至安全区后，以逃入的安全区作为起步区进行电击 训练。当小鼠在三臂均达到连续2次直接逃至安全区后，进行b项试验小鼠在I臂起步区 停留Imin后给予电击，逃至安全区停留0. 5min，再以此区作为起步区予以电击，连续循环 电击训练(每两次电击之间休息lmin)，以小鼠连续10次(或9/10)正确反应(直接逃入 安全区)作为空间辨别记忆指标，每回连续学习的电击总次数一般不超过30次。最后将a 项和b项相加作为训练成绩，统计学习成绩。2. 1.4记忆测试训练后24h测试，测试方法同训练，测试后处死。统计学习成绩，作为测试成绩。2. 2记忆巩固障碍实验2. 2. 1 预选同记忆获得障碍实验。2. 2. 2分组给药同记忆获得障碍实验。2. 2. 3学习训练最后一次给药后一小时进行学习训练，训练方法同前。2. 2. 4记忆测试训练后除正常组外，其余各组立即用亚硝酸钠按100mg/kg体重进行腹腔注射， 24h后进行测试，测试方法同前，测试后处死。统计学习成绩。2. 3记忆再现障碍实验2. 3. 1 预选同记忆获得障碍实验。2. 3. 2分组给药同记忆获得障碍实验。2. 3. 3学习训练最后一次给药后一小时进行学习训练，训练方法同记忆获得障碍实验。2. 3. 4记忆测试训练后24h进行测试，测试前30分钟用40%的乙醇灌胃0. lml/10g,正常对照组 灌以等体积的生理盐水。测试方法同记忆获得障碍实验，测试后处死。统计学习成绩。2. 4 统计全部数据用^ ± 31)表示，进行组间t检验统计。3、结果3. 1对记忆获得障碍的影响实验组的训练成绩与测试成绩皆显著好于模型组(P < 0. 01)，而和正常组相比则 比较接近，无明显差异；模型组无论训练成绩还是测试成绩都正常组显著地差(P < 0.01)。 因此模型的制作是成功的，含钩藤抗衰老组合物对小鼠记忆获得障碍模型有明显的益智作 用，见表2-1。表2-1含钩藤抗衰老组合物对小鼠记忆获得障碍的影响(；土SD，η = 20)

本发明属于中药材药物活性成分提取与临床应用的领域，尤其是使用特定提取剂从中药材钩藤、茯苓、陈皮、麦冬、人参、防风、甘草中提取具有抗衰老提高智力的组合物。采用乙醇、蒸馏水作为提取剂，提取液经浓缩后得含药物活性成分的组合物浸膏。动物试验表明该提取组合物对小鼠记忆获得障碍模型有明显的益智作用、促进小鼠记忆功能的改善及延缓衰老。在该组合物中通过加入不同的剂型辅料，即可制成片剂、胶囊剂、滴丸剂、溶液剂、缓控释剂和注射剂等常见药物剂型。同时，该种组合物还具有服用安全的突出优点。