专利名称：一种抗癌药物组合物的制作方法癌症的治疗主要包括手术、放疗及化疗等方法。在所用的各种化疗药物中，抗肿瘤抗生素的作用效果较为明显，已广泛应用于多种恶性肿瘤。由于抗肿瘤抗生素是通过与DNA结合而抑制RNA合成而发挥其抗肿瘤作用，而许多肿瘤细胞内的DNA修复功能在治疗之后明显增加，所以有效的降低或抑制肿瘤细胞内的DNA修复功能便成为当前研究的重点。最近发现，灭活或抑制细胞内的DNA修复蛋白能够增强部分肿瘤细胞对化疗的敏感性，参见多兰等“O6-苄基鸟嘌呤类似物对人肿瘤细胞对烷化剂的细胞毒敏感性的作用”《癌症研究》51期3367-3372页(1991年)(Dolan et al.，Cancer Res.，51，3367-3372，1991)。然而，肿瘤间质中的血管、结缔组织、基质蛋白、纤微蛋白及胶原蛋白等不仅为肿瘤细胞的生长提供了支架及必不可少的营养物质，还影响了化疗药物在肿瘤周围及肿瘤组织内的渗透和扩散，参见尼提等“细胞外间质的状况对实体肿瘤内药物运转的影响”《癌症研究》60期2497-503页(2000年)(Netti PA，Cancer Res.2000，60(9)2497-503)。由于实体肿瘤过度膨胀性增生，其间质压力、组织弹性压力、流体压力及间质的粘稠度均较其周围正常组织为高，因此，常规化疗，难于肿瘤局部形成有效药物浓度，单纯提高给药剂量又受到全身反应的限制，参见孔庆忠等“瘤内放置顺铂加系统卡莫司汀治疗大鼠脑肿瘤”《外科肿瘤杂志》69期76-82页(1998年)(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998Oct；69(2)76-82)。除此之外，低剂量的抗癌药物治疗不仅能够增加癌细胞的药物耐受性，而且还可促进其侵润性生长”，参见梁等“抗癌药物脉冲筛选后增加了人肺癌细胞的药物耐受性及体外侵润能力并伴有基因表达的改变”《国际癌症杂志》111期484-93页(2004年)(LiangY，et al.，Int J Cancer.2004；111(4)484-93)。由于决定治疗效果的主要因素是肿瘤局部的药物浓度以及肿瘤细胞对药物的敏感程度。而肿瘤间质中的血管、结缔组织、基质蛋白、纤微蛋白及胶原蛋白等不仅为肿瘤细胞的生长提供了支架及必不可少的营养物质，还影响了化疗药物在肿瘤周围及肿瘤组织内的渗透和扩散。
本发明抗癌药物组合物，包括抗癌有效量的抗癌有效成分和药用辅料，其中抗癌有效成分为抗肿瘤抗生素和鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物。上述抗肿瘤抗生素选自盐酸阿霉素(adriamycin、Doxorubicin)、表阿霉素(epiadriamycin，eDox，epiadriamycin)或表柔比星(Epirubicin)、丝裂霉素(Mitomycin)、丝裂霉素C(mitomycin C)、丝林霉素、放线菌素D(Dactinomycin)、放线菌素C、米托蒽醌(Mitoxangone or mitoxantrone，MTX)、更生霉素、道诺红菌素(daunorubicin，DNR)或柔红霉素(Daunorubicin)或正定霉素、博来霉素(Bleomycin，平阳霉素、博来霉素A5)、(盐酸)博来霉素、佐尔博霉素、环孢菌素A及新制癌菌素(neocarzinostain)、7-O-甲基诺加-4’-表阿霉素(7-o-methylnogallol-4’-epiadriamycin，mDox)、克拉霉素(Clarithromycin)、阿克拉霉素(AclacinomycinA、aclarubicin、ACLA、阿柔比星)、阿克拉霉素-B、氨柔比星(Amrubicin)、4’-(辣根联苯氨甲氧基苯醯腆胺)[4′-(acridinylamino)methansulfon-m-anisidide，m-AMSA]、4-去甲氧道诺红菌素(4-demethoxydaunorubicin)、地托比星、表柔比星(Epirubicin)、依索比星(Esorubicin)、卡柔比星、伊达比星(idarubicin，IDA)、罗多比星、流柔比星(Leurubicin)、美多比星、奈莫柔比星(Nemorubicin)、多柔比星、吡柔比星(Pirarubicin)、吡柔比星、奥柔比星(N-三氟毒素-14-戊酸盐、N-trifluoroacetyladriamycin-14-valerate，AD 32，valrubicin)、2-[4-(7-氯-2-喹喔啉基氧苯氧基)-丙酸((2-[4-(7-chloro-2-quinoxalinyloxyphenoxy)-propionic acid，XK469)、佐柔比星(Zorubicin)、N-(2-氯乙烷)-N-亚硝基脲基柔红霉素(N-(2-Chloroethyl)-N-nitrosoureidodaunorubicin，AD 312)、洛撒蒽醌、洛索蒽醌[Losoxantrone]、吡罗蒽醌[Piroxantrone]、替洛蒽醌[Teloxantrone]、癌霉素、派来霉素、硫酸派来霉素、抗生素1588、波外定、盐酸阿可达佐、阿可达佐、克大霉素、乙酰克大霉素(乙酰贵田霉素)、阿佐霉素(含氮霉素)、蛇形菌素(Diacetoxysciroenol)、三铁阿霉素、二乙氧醋酰阿霉素、环霉素、消癌菌素(carzinocidin)、嗜癌素(carzinophylin)、嗜癌霉素、瘤菌素、治癌菌素(carzinostatin，制癌菌素)、重氮霉素(diazamycine)、大菌素(macrocin)、大菌霉素(macrocinomycin)、丙氨菌素、丙氨肽霉素、阿乐盖、新丝菌素(neothricin，neothramycin)、大分子霉素(macromomycin或macromycin)、新塞那霉素、诺卡菌素(nocardin)、诺卡菌红素(nocardorubin)、诺卡型霉素(noformicin)、诺加霉素(诺加拉霉素，nogalamycin or nogaromycin)、丝裂红素(mitochromine or mitocromine)、多粘菌素E(Polymyxin E)、吡利霉素(Pirlimycin)、地红霉素(Dirithromycin)、安曲霉素、恶溶菌素、达佐霉素、橄榄霉素、链黑霉素、链黑霉素甲酯、链脲霉素、培洛霉素、嘌罗霉素、司帕霉素、他利霉素、羟硝氨糖环素、蒽霉素(氨茴霉素，安拉霉素)、甲基蒽霉素、艾菲地可宁、曲林菌素、(盐酸)卡米诺霉素、他利霉素、巨毛霉素、去甲柔毛霉素、氯脲霉素、色霉素A3、氯佐星(chlorozotocin)、去甲利福平、蒽环霉素-A、黑他七霉素、脱氧助间型霉素、嘌呤霉素、盐酸嘌呤霉素、雷查霉素、瑞必克霉素、桑霉素、抗癌霉素、西伯利亚霉素、他利霉素、米托佐罗、硒唑呋喃、斯潘格宁、盐酸锗螺胺、锗螺胺、螺妙斯定和抗癌锑等抗癌抗生素中的一种或多种。在上述所列的抗癌抗生素中，以丝裂霉素C、放线菌素D、米托蒽醌、更生霉素、道诺红菌素、博来霉素、7-O-甲基诺加-4’-表阿霉素、阿柔比星、阿克拉霉素-B、氨柔比星、4’-(辣根联苯氨甲氧基苯醯腆胺)、4-去甲氧道诺红菌素、地托比星、表柔比星、依索比星、卡柔比星、伊达比星、罗多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、多柔比星、吡柔比星、吡柔比星、奥柔比星、2-[4-(7-氯-2-喹喔啉基氧苯氧基]-丙酸、佐柔比星、N-(2-氯乙烷)-N-亚硝基脲基柔红霉素、洛撒蒽醌、洛索蒽醌、吡罗蒽醌、替洛蒽醌、阿可达佐、二乙氧醋酰阿霉素、治癌菌素、阿霉素、表阿霉素为优选，以丝裂霉素C、放线菌素D、米托蒽醌、更生霉素、道诺红菌素、博来霉素、阿柔比星、氨柔比星、地托比星、表柔比星、依索比星、卡柔比星、伊达比星、罗多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、多柔比星、吡柔比星、吡柔比星、奥柔比星、佐柔比星、洛撒蒽醌、洛索蒽醌、吡罗蒽醌、替洛蒽醌、阿可达佐、二乙氧醋酰阿霉素、阿霉素、表阿霉素为最优选，上述鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物选自，但不限于，2-氨基-6-氧嘌呤(2-amino-6-oxypurine)、鸟嘌呤(2-氨基-6-羟嘌呤)、苄基鸟嘌呤(benzylguanine)、O6-苄基鸟嘌呤(O6-BG)、O6-丁基鸟嘌呤(O6-butylguanines)、O6-甲基鸟嘌呤(O6-MG)、O6-烷基鸟嘌呤(O6-Alkylguanine)、O6-苄基-2’-脱氧鸟苷(O6-benzyl-2’-deoxyguanosine)、8-氨基-O6-苄基鸟嘌呤(8-Amino-O.sup.6-benzylguanine)、8-甲基-O6-苄基鸟嘌呤(8-methyl-O.sup.6-benzylguanine)、8-羟基-O6-苄基鸟嘌呤(8-hydroxy-O.sup.6-benzylguanine)、8-溴基-O6-苄基鸟嘌呤(8-bromo-O.sup.6-benzylguanine)、8-氧-O6-苄基鸟嘌呤(8-Oxo-O.sup.6-benzylguanine)、8-三氟甲基-O6-苄基鸟嘌呤(8-trifluoromethyl-O.sup.6-benzylguanine)、O6-苄基尿酸(O.sup.6-Benzyluric acid)、O6-苄基黄嘌呤(O.sup.6-Benzylxanthine)、O6-苄基-2-氟次黄嘌呤(O.sup.6-Benzyl-2-fluorohypoxanthine)、二乙酰-O6-苄基-8-氧鸟嘌呤(Diacetyl-O.sup.6-benzyl-8-oxoguanine)、O6-苄基-8-甲基鸟嘌呤(O.sup.6-Benzyl-8-methylguanine)、O6-苄基-8-氧代鸟嘌呤(O.sup.6-Benzyl-8-oxoguanine)、O6-苄基-8-溴化鸟嘌呤(O.sup.6-Benzyl-8-bromoguanine)、O6-苄基-8-三氟甲基鸟嘌呤(O.sup.6-Benzyl-8-trifluoromethylguanine)、O6-苄基-N2-甲基鸟嘌呤(O.sup.6-benzyl-N.sup.2-methylguanine)、O6-苄基-N2N2-二甲基鸟嘌呤(O.sup.6-benzyl-N.sup.2，N.sup.2-dimethylguanine)、O6-苄基-8-三氟甲基-9-甲基鸟嘌呤(O.sup.6-benzyl-8-trifluoromethyl-9-methylguanine)、O6-苄基-8-溴基-9-甲基鸟嘌呤(O.sup.6-benzyl-8-bromo-9-methylguanine)、O6-苄基-8-溴基-9-新戊酰氧甲基鸟嘌呤(O.sup.6-benzyl-8-bromo-9-(pivaloyloxymethyl)guanine)、O6-苄基-7-新戊酰氧甲基鸟嘌呤(O.sup.6-benzyl-7-(pivaloyloxymethyl)guanine)、O6-苄基-8-溴基-7-新戊酰氧甲基鸟嘌呤(O.sup.6-benzyl-8-bromo-7-(pivaloyloxymethyl)guanine)、8-氮杂-O6-苄基-7-新戊酰氧甲基鸟嘌呤(8-Aza-O.sup.6-benzyl-9-(pivaloyloxymethyl)guanine)、8-氮杂-O6-苄基-7-新戊酰氧甲基鸟嘌呤(8-Aza-O.sup.6-benzyl-7-(pivaloyloxymethyl)guanine)、8-氮杂-O6-苄基鸟嘌呤(8-Aza-O.sup.6-benzylguanine)、8-氮杂-O6-苄基-9-甲基鸟嘌呤(8-Aza-O.sup.6-benzyl-9-methylguanine)、乙酰基-O6-苄基-8-氧基鸟嘌呤(N.sup.2-Acetyl-O.sup.6-benzyl-8-oxoguanine)、O6-苄基-N2-甲基鸟嘌呤(O.sup.6-Benzyl-N.sup.2-methylguanine)、O6-苄基-N2N2-二甲基鸟嘌呤(O.sup.6-Benzyl-N.sup.2，N.sup.2-dimethylguanine)、2-氨基-6-氯-8-甲基嘌呤(2-Amino-6-chloro-8-methylpurine)、2，8-二氨基-6-氯嘌呤(2，8-Diamino-6-chloropurine)、O6-苄基-N2-鸟苷(O6-benzyl-N2-acetylguanosine)、O6-苄基-9-氰基鸟嘌呤(O6-benzyl-9-cyanomethylguanine(CMBG))、N(7)-甲基鸟嘌呤(N(7)-methylguanine)、O6-苄基-N2-鸟苷(O6-benzylguanosine(BGS))、O6-环烷基鸟嘌呤(O(6)-cycloalkylguanines)、O6-烯丙基鸟嘌呤(O(6)-allylguanine)、O6-(2-氧烷基鸟嘌呤(O(6)-(2-oxoalkyl)guanine)、O6-环链烯基鸟嘌呤(O(6)-Cycloalkenylguanines，O6-CAG)、1-环丁烯甲基鸟嘌呤(1-cyclobutenylmethylguanine，CBMG)、1-环戊烯基甲基鸟嘌呤(1-cyclopentenylmethylguanine，CPMG)或O6-溴噻吡二胺基鸟嘌呤(O(6)-(4-bromothenyl)guanine，O6-BTG)的一种或多种。上述鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物还包括它们的盐，如，但不限于，硫酸盐、磷酸盐、盐酸盐、乳糖酸盐、醋酸盐、天冬酸盐、硝酸盐、枸橼酸盐、嘌呤或嘧啶盐、琥珀酸盐及马来酸盐等。
鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物可单选或多选，以O6-苄基鸟嘌呤、O6-丁基鸟嘌呤、O6-甲基鸟嘌呤、O6-烷基鸟嘌呤、O6-苄基-2’-脱氧鸟苷、8-氨基-O6-苄基鸟嘌呤、8-甲基-O6-苄基鸟嘌呤、8-羟基-O6-苄基鸟嘌呤、8-溴基-O6-苄基鸟嘌呤和8-氧-O6-苄基鸟嘌呤为优选。
本发明抗癌药物组合物中的鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物除用于治疗各种癌症外，还可有效的增加肿瘤细胞对抗肿瘤抗生素的敏感性。
抗肿瘤抗生素在组合物中的重量百分比为0.01％-80％，以1％-40％为佳，以2％-30％为最佳。而鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物在组合物中所占的重量百分比因具体情况而定，一般而言，可从0.01％-80％，以1％-40％为佳，以2％-30％为最佳。以上均为重量百分比。抗肿瘤抗生素与鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物的重量比为1-9∶1到1∶1-9。
本发明抗癌药物组合物的抗癌有效成分优选如下，均为重量百分比1-40％的O6-苄基鸟嘌呤、O6-丁基鸟嘌呤、O6-甲基鸟嘌呤、O6-烷基鸟嘌呤、O6-苄基-2’-脱氧鸟苷、8-氨基-O6-苄基鸟嘌呤、8-甲基-O6-苄基鸟嘌呤、8-羟基-O6-苄基鸟嘌呤、8-溴基-O6-苄基鸟嘌呤或8-氧-O6-苄基鸟嘌呤与1-40％丝裂霉素C、放线菌素D、米托蒽醌、更生霉素、道诺红菌素、博来霉素、7-O-甲基诺加-4’-表阿霉素、阿柔比星、阿克拉霉素-B、氨柔比星、4’-(辣根联苯氨甲氧基苯醯腆胺)、4-去甲氧道诺红菌素、地托比星、表柔比星、依索比星、卡柔比星、伊达比星、罗多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、多柔比星、吡柔比星、吡柔比星、奥柔比星、2-[4-(7-氯-2-喹喔啉基氧苯氧基]-丙酸、佐柔比星、N-(2-氯乙烷)-N-亚硝基脲基柔红霉素、洛撒蒽醌、洛索蒽醌、吡罗蒽醌、替洛蒽醌、阿可达佐、二乙氧醋酰阿霉素、治癌菌素、阿霉素或表阿霉素的组合。
本发明抗癌药物组合物的抗癌有效成分最优选如下，均为重量百分比2-30％的O6-苄基鸟嘌呤、O6-丁基鸟嘌呤、O6-甲基鸟嘌呤或O6-烷基鸟嘌呤与1-40％丝裂霉素C、米托蒽醌、博来霉素、阿柔比星、氨柔比星、表柔比星、依索比星、卡柔比星、伊达比星、罗多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、多柔比星、吡柔比星、吡柔比星、奥柔比星、佐柔比星、洛撒蒽醌、洛索蒽醌、吡罗蒽醌、替洛蒽醌、阿霉素或表阿霉素的组合。
本发明抗癌药物组合物的药用辅料包括下列之一(1)生物相容性高分子多聚物，包括生物可降解的或生物不可降解的多聚物及其混合物或共聚物，(2)水溶性低分子化合物，(3)用于实现针剂和缓释剂等药物剂型的合适的添加剂及赋型剂。
上述生物可降解的多聚物包括天然的和/或合成的多聚物。合成的多聚物如，但不限于，聚酐类、聚羟基酸、聚酯(polyesters)、聚酰胺(polyamides)、聚原酸酯(polyorthoesters)、聚磷腈(polyphosphazenes)、对羧苯基丙烷(p-CPP)、葵二酸(sebacic acid)等；天然的多聚物如，但不限于，蛋白质及多糖，包括透明质酸、胶原蛋白、明胶、白蛋白、纤维蛋白原和琼脂糖等。
上述聚酐类可选用，但不限于，芳香聚酐、脂肪族聚酐；其中芳香聚酐将解较慢，熔点高，有机溶剂中溶解度低，然而，芳香聚酐与脂肪族聚酐的共聚物却较为理想(美国专利4757128)。其代表物是聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)与葵二酸(SA)的共聚物)，而对羧苯基丙烷为芳香聚酐，葵二酸则是一个芳香二酸与一个脂肪二酸的共聚物。可选用的其它芳香或脂肪族聚酐的共聚物在其它美国专利中已有详细描述，如US 4857311；4888176；4789724。
上述聚羟基酸可选用，但不限于，聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚乳酸(PLA)与聚乙醇酸的混合物、乙醇酸和羟基羧酸的共聚物(PLGA)；当PLA和PLGA混合时，其含量重量百分比分别为0.1-99.9％和99.9-0.1％。聚乳酸的分子量可为，但不限于，5000-100,000，但以10,000-50000为优选，以10,000-20000为最优选；聚乙醇酸的分子量可为，但不限于，5000-100,000，但以10,000-50000为优选，以10,000-20000为最优选；以上聚羟基酸可单选或多选。当单选时，以聚乳酸(PLA)或羟基羧酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)为优选，共聚物的分子量可为，但不限于，1000-100,000，但以10,000-50000为优选；以10,000-20000为最优选；当多选时，以高分子多聚物或不同高分子多聚物组成的复合多聚物或共聚物为优选，以含不同分子量聚乳酸或葵二酸的复合多聚物或共聚物为最优选，如，但不限于，分子量为5000到10000的聚乳酸与分子量为20000到50000的聚乳酸混合、分子量为10000到20000的聚乳酸与分子量为30000到80000的PLGA混合、分子量为5000到10000的聚乳酸与葵二酸混合、分子量为30000到80000的PLGA与葵二酸混合。所指分子量均为由GPC测得的分子量峰值范围。
上述生物不可降解的多聚物包括，但不限于有机硅聚合物、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(Ethelene-vinyl acetate copolymer，EVAc)、聚丙烯腈(polyacrylonitriles)，聚氨基甲酸酯(polyurethanes)及聚磷腈(polyphosphazenes)等。组合物可通过直接扩散的方式将有效成分释放出来。
为调节药物释放速度或改变本发明抗癌组合物的其它特性，可以改变聚合物的单体成分或分子量、添加或调节药用辅料的组成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各种糖和盐等。其中糖可为，但不限于，木糖醇、低聚糖及甲壳素等，其中盐可为但不限于，钾盐和钠盐等。
本发明抗癌组合物所用的药用辅料可为上述药用辅料中的任何一种或多种物质，但以水溶性高分子聚合物为主选，在各种高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物为首选，混合物和共聚物可选自，但不限于，PLGA、乙醇酸和羟基羧酸的混合物、葵二酸与芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羟基羧酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和羟基羧酸共聚时的含量分别为重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是对羧苯基丙烷(p-CPP)，对羧苯基丙烷(p-CPP)与葵二酸共聚时的含量分别为重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
药用辅料在《药用辅料大全》(第123页，四川科学技术出版社1993年出版，罗明生和高天惠主编)中已有详细描述。另外，中国专利(申请号96115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)美国发明专利(专利号5,651,986)也列举了某些药用辅料。包括充填剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂、制(或致)孔剂、赋型剂或阻止剂。以上药用辅料有的具有多重作用，因此有的同种物质被列为不同的类别。本发明抗实体肿瘤组合物可选用的支持物可为上述药用辅料中的任何一种或多种物质，并不完全根据其分类或定义来限制组合物的技术特征。
抗癌药物组合物的有效成分可均匀地包装于整个药用辅料中，也可包装于载体支持物中心或其表面；可通过直接扩散或经多聚物降解的方式或如此两种方式将有效成分释放。除此之外，抗癌药物组合物的有效成分也可均匀地包装于脂质体中，或以现有技术方法制成微球。
本发明的特点在于所用的药用辅料除高分子聚合物外，还含有上述任意一种或多种其它药用辅料。添加的药用辅料统称为添加剂。添加剂可根据其功能分为充填剂、致孔剂、赋型剂、分散剂、等渗剂、保存剂、阻止剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂等。
药用辅料还可为流质，如，但不限于芝麻油、混悬液、蒸馏水、生理冲液、以及半固态物质，如果冻、糊剂、软膏等，上述药用辅料适用于含或不含添加剂的组合物。
本发明抗实体肿瘤药物组合物可制成多种剂型。如，但不限于，针剂、浑悬液、软膏、胶囊、缓释剂、植入剂、植入缓释剂等；呈各种形状，如，但不限于，颗粒样、片状、球形、块状、针状、棒状及模状。在各种剂型中，以体内植入剂、缓释剂或植入缓释剂为主。上述剂型和形状适用于含或不含添加剂的组合物。
由于本发明抗癌药物组合物可使常规化疗、免疫治疗、高热治疗、光化学治疗、电疗、生物治疗、激素治疗、磁疗、超声治疗、放疗及基因治疗等方法的作用效果加强。因此在局部缓慢释放的同时可与上述非手术疗法合用，从而使其抗癌效果进一步加强。
当与上述非手术疗法合用时，本发明抗癌药物组合物可与非手术疗法同时应用，也可在非手术疗法实施前几天内应用，其目的在于尽可能增强肿瘤的敏感性。鸟嘌呤衍生物、鸟嘌呤类似物对抗肿瘤抗生素有明显增效的作用，从而为根治各种人体及动物原发和转移实体肿瘤提供一种更有效的新的方法，具有非常高的临床应用价值。
本发明抗癌药物组合物可经各种途径应用，如经脉、动脉、皮下、肌肉、皮内、腔内、瘤内、瘤周等。给药途径取决于多种因素，如肿瘤所在部位、是否手术或转移、肿瘤体积大小、肿瘤类别、病人年龄、身体状况、生育状况及要求等。为于肿瘤所在部位获得有效药物浓度，可选择性地动脉灌注，腔内灌注(intracavitary)，腹腔(intraperitoneal)或胸腔(intrapleural)及椎管内(intraspinal)给药，也可脏器内放置，如肠腔内、膀胱内、宫腔内、阴道内、胃内及食道内等。在多种途径中，以局部给药，如以选择性动脉、瘤内、瘤周注射或放置为主，以瘤内、瘤周或瘤腔缓慢释放的形式为优选，如可选用可种缓释泵及缓释胶囊或体内缓释植入剂。
抗癌药物的用量取决于很多因素，如，但不限于，肿瘤体积、病人体重、给药方式、病情进展情况及治疗反应。鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物的有效剂量为0.01-200毫克/公斤体重，以1-100毫克/公斤体重为理想，以2-50毫克/公斤体重为最理想。抗肿瘤抗生素的有效剂量为0.01-100毫克/公斤体重，以1-50毫克/公斤体重为理想，以2-30毫克/公斤体重为最理想。
本发明抗癌药物组合物可以用于制备治疗人、宠物及各种动物的各种癌、肉瘤或癌肉瘤等实体肿瘤的药物，包括起源于大脑、中枢神经系统、肾脏、肝、胆囊、头颈部、口腔、甲状腺、皮肤、黏膜、腺体、血管、骨组织、淋巴结、肺脏、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宫、卵巢、子宫内膜、子宫颈、前列腺、膀胱、结肠、直肠的原发或转移的癌或肉瘤或癌肉瘤。
该抗癌药物组合物中还可加入其它药用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼药、抗凝药、止血药等。以上药用成分可单选或多选，可加入到含或不含添加剂的组合物，其含量因具体需要而定。
将上述有效成分包装于药用辅料中，然后局部应用。该组合物可经各种途径给药，以局部给药，如选择性动脉注射和直接瘤体内注射为佳，其中又以局部缓慢释放为最佳。当局部应用时，本发明抗癌药物组合物可直接置于人及动物原发或转移的实体肿瘤周围或瘤体内，也可直接置于原发或转移的实体肿瘤全部或部分切除后所形成的腔内。局部缓慢释放的同时还可结合放疗或化疗，用于增加放疗或化疗的作用效果。
本发明抗癌药物组合物主要成份以生物可容性物质为支持物，故不引起异物反应。支持物体内放置后可降解吸收，故不再手术取出。因在肿瘤局部释放所含药物，从而选择性地提高并延长局部药物浓度，同时可降低由常规途径给药所造成的全身毒性反应。
本发明的最佳剂型为生物可容性、可降解吸收的植入缓释剂，可因不同临床需要而制成各种形状。其主要成份的包装方法和步骤在美国专利中(US5651986)已有详细描述，包括若干种制备缓释制剂的方法如，但不限于，(i)把载体支持物粉末与药物混合然后压制成植入剂，即所谓的混合法；(ii)把载体支持物熔化，与待包装的药物相混合，然后固体冷却，即所谓的熔融法；(iii)把载体支持物溶解于溶剂中，把待包装的药物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸发溶剂，乾燥，即所谓的溶解法；(iv)喷雾干燥法；及(v)冷冻干燥法等。其中溶解法可用于微球的制造，抗癌药物组合物也可包装于脂质体中。
本发明抗癌药物组合物制备技术的特点在于将抗肿瘤抗生素和鸟嘌呤衍生物、鸟嘌呤类似物单独或联合包装于药用辅料中，按照一定比例将有效成份和药用辅料溶解，待充份混匀之后乾燥。待乾燥后立即成形并消毒分装。
本发明的体内外实验发现鸟嘌呤衍生物或鸟嘌呤类似物对抗肿瘤抗生素具有明显的增效作用。当二者联合局部应用，尤其是局部放置，不仅能够克服全身给药带来的毒性反应，而且解决了肿瘤局部药物浓度过低以及细胞对药物的敏感性问题。
试验一、鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物及抗肿瘤抗生素的体外抑瘤作用。
所用的肿瘤细胞包括CNS-1、C6、胃腺上皮癌(SA)、骨肿瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲状腺乳头状腺癌(PAT)、肝癌等。将以下鸟嘌呤衍生物或鸟嘌呤类似物及抗肿瘤抗生素按10ug/ml浓度加到体外培养24小时的各种肿瘤细胞中，继续培养48小时后计数细胞总数。其肿瘤生长抑制效果见表1所示。
表1
注O6-苄基鸟嘌呤(O6-BG)，为鸟嘌呤衍生物；而mDox(7-O-甲基诺加-4’-表阿霉素)、ACLA(阿柔比星)、Am(氨柔比星)和mAMSA(4’-(辣根联苯氨甲氧基苯醯腆胺)均为抗肿瘤抗生素。
试验二、鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物及抗肿瘤抗生素的体外抑瘤作用。
用试验一中所用的肿瘤细胞，将鸟嘌呤衍生物或鸟嘌呤类似物及抗肿瘤抗生素按10ug/ml浓度加到体外培养24小时的各种肿瘤细胞中，继续培养48小时后计数细胞总数。其肿瘤生长抑制效果见表2所示。
表2
注O6-bGO6-丁基鸟嘌呤，为鸟嘌呤衍生物；Epi表柔比星、Eso依索比星、IDA伊达比星、Leu流柔比星，均为抗肿瘤抗生素。
试验三、鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物及抗肿瘤抗生素的体外抑瘤作用。
用试验一中所用的肿瘤细胞，将鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物及抗肿瘤抗生素按10ug/ml浓度加到体外培养24小时的各种肿瘤细胞中，继续培养48小时后计数细胞总数。其肿瘤生长抑制效果见表3所示。
表3
注O6-MGO6-甲基鸟嘌呤，为鸟嘌呤衍生物，即抗肿瘤抗生素增效剂；Pira吡柔比星；AD32奥柔比星；Zoru佐柔比星；AD312N-(2-氯乙烷)-N-亚硝基脲基柔红霉素均为抗肿瘤抗生素。
试验四、鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物及抗肿瘤抗生素的体外抑瘤作用。
用试验一中所用的肿瘤细胞，将鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物及抗肿瘤抗生素按10ug/ml浓度加到体外培养24小时的各种肿瘤细胞中，继续培养48小时后计数细胞总数。其肿瘤生长抑制效果见表4所示。
表4
注O6-AGO6-烷基鸟嘌呤，为鸟嘌呤衍生物，即抗肿瘤抗生素增效剂；Loso洛索蒽醌；Puro吡罗蒽醌；Telo替洛蒽醌；XK4692-[4-(7-氯-2-喹喔啉基氧苯氧基]-丙酸均为抗肿瘤抗生素。
试验五、鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物及抗肿瘤抗生素的体外抑瘤作用。
用试验一中所用的肿瘤细胞，将以下鸟嘌呤衍生物或鸟嘌呤类似物及抗肿瘤抗生素按10ug/ml浓度加到体外培养24小时的各种肿瘤细胞中，继续培养48小时后计数细胞总数。其肿瘤生长抑制效果见表5所示。
表5
注O6-苄基鸟嘌呤(O6-BG)，为鸟嘌呤衍生物；阿霉素(Dox)、表阿霉素(eDox)、丝裂霉素C(mitC)、放线菌素D(DacD)均为抗肿瘤抗生素。
试验六、鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物及抗肿瘤抗生素的体外抑瘤作用。
用试验一中所用的肿瘤细胞，将以下鸟嘌呤衍生物或鸟嘌呤类似物及抗肿瘤抗生素按10ug/ml浓度加到体外培养24小时的各种肿瘤细胞中，继续培养48小时后计数细胞总数。其肿瘤生长抑制效果见表6所示。
表6
注O6-甲基鸟嘌呤(O6-MG)，为鸟嘌呤衍生物；米托蒽醌(MTX)、道诺红菌素(DNR)、新制癌菌素(Neo)和博来霉素(Bleo)均为抗肿瘤抗生素。
试验1到6的结果表明，所用鸟嘌呤或鸟嘌呤衍生物及各种抗肿瘤抗生素在该浓度时对体外培养肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，但二者合用时具有明显的增效作用。
本发明抗癌药物组合物的制备方法如下1.将称重的药用辅料放入容器中，加一定量的有机溶剂溶解均匀，有机溶剂的量不严格限定，以充分溶解为宜。
2.加入称重之抗癌有效成份重新摇匀。药物与药用辅料的用量比例因具体要求而定。
3.去除有机溶剂。真空干燥或低温干燥法均可。
4.将干燥后的固体组合物根据需要制成各种形状。
5.分装后射线灭菌(射线剂量因体积而异)备用。也可用其它方法灭菌。

下面通过实施例对本发明做进一步说明，但不限于此。
实施例一将80mg分子量为10000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷溶解混匀后，加入10mg阿霉素和10mgO6-苄基鸟嘌呤，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到含重量百分比10％阿霉素和重量百分比10％O6-苄基鸟嘌呤的抗癌药物组合物。
实施例二如实施例一所述，所不同的是有效成分为1-40％的O6-苄基鸟嘌呤、O6-丁基鸟嘌呤、O6-甲基鸟嘌呤、O6-烷基鸟嘌呤、O6-苄基-2’-脱氧鸟苷、8-氨基-O6-苄基鸟嘌呤、8-甲基-O6-苄基鸟嘌呤、8-羟基-O6-苄基鸟嘌呤、8-溴基-O6-苄基鸟嘌呤或8-氧-O6-苄基鸟嘌呤与1-40％丝裂霉素C、放线菌素D、米托蒽醌、更生霉素、道诺红菌素、博来霉素、7-O-甲基诺加-4’-表阿霉素、阿柔比星、阿克拉霉素-B、氨柔比星、4’-(辣根联苯氨甲氧基苯醯腆胺)、4-去甲氧道诺红菌素、地托比星、表柔比星、依索比星、卡柔比星、伊达比星、罗多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、多柔比星、吡柔比星、奥柔比星、2-[4-(7-氯-2-喹喔啉基氧苯氧基]-丙酸、佐柔比星、N-(2-氯乙烷)-N-亚硝基脲基柔红霉素、洛撤蒽醌、洛索蒽醌、吡罗蒽醌、替洛蒽醌、阿可达佐、二乙氧醋酰阿霉素、治癌菌素、阿霉素或表阿霉素的组合。
以上为重量百分比。
实施例三将70mg分子量为10000的聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷溶解混匀后，加入20mg丝裂霉素C和10mg O6-丁基鸟嘌呤，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到含20％丝裂霉素C和10％O6-丁基鸟嘌呤的抗癌药物组合物。将抗癌药物组合物置于小白鼠皮下，定时取出测药物含量，根据剩余药物量，并计算累计释放百分数(％)。结果发现，药物在30天内均匀释放80-95％。均为重量百分比。
实施例四如实施例三所述，所不同的是有效成分为2-30％的O6-苄基鸟嘌呤、O6-丁基鸟嘌呤、O6-甲基鸟嘌呤、O6-烷基鸟嘌呤、O6-苄基-2’-脱氧鸟苷、8-氨基-O6-苄基鸟嘌呤、8-甲基-O6-苄基鸟嘌呤、8-羟基-O6-苄基鸟嘌呤、8-溴基-O6-苄基鸟嘌呤或8-氧-O6-苄基鸟嘌呤与2-30％丝裂霉素C、放线菌素D、米托蒽醌、更生霉素、道诺红菌素、博来霉素、7-O-甲基诺加-4’-表阿霉素、阿柔比星、阿克拉霉素-B、氨柔比星、4’-(辣根联苯氨甲氧基苯醯腆胺)、4-去甲氧道诺红菌素、地托比星、表柔比星、依索比星、卡柔比星、伊达比星、罗多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、多柔比星、吡柔比星、奥柔比星、2-[4-(7-氯-2-喹喔啉基氧苯氧基]-丙酸、佐柔比星、N-(2-氯乙烷)-N-亚硝基脲基柔红霉素、洛撒蒽醌、洛索蒽醌、吡罗蒽醌、替洛蒽醌、阿可达佐、二乙氧醋酰阿霉素、治癌菌素、阿霉素或表阿霉素的组合。
以上为重量百分比。
实施例五将70mg分子量为20000的聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷溶解混匀后，加入20mg表阿霉素和10mg O6-甲基鸟嘌呤，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到含20％表阿霉素和10％O6-甲基鸟嘌呤的抗癌药物组合物。将抗癌药物组合物防于小白鼠皮下，定时取出测药物含量，根据剩余药物量，并计算累计释放百分数(％)。结果发现，药物在30天内均匀释放80-95％。均为重量百分比。
实施例六如实施例五所述，所不同的是有效成分为5-20％的O6-苄基鸟嘌呤、O6-丁基鸟嘌呤、O6-甲基鸟嘌呤、O6-烷基鸟嘌呤、O6-苄基-2’-脱氧鸟苷、8-氨基-O6-苄基鸟嘌呤、8-甲基-O6-苄基鸟嘌呤、8-羟基-O6-苄基鸟嘌呤、8-溴基-O6-苄基鸟嘌呤或8-氧-O6-苄基鸟嘌呤与5-20％丝裂霉素C、放线菌素D、米托蒽醌、更生霉素、道诺红菌素、博来霉素、7-O-甲基诺加-4’-表阿霉素、阿柔比星、阿克拉霉素-B、氨柔比星、4’-(辣根联苯氨甲氧基苯醯腆胺)、4-去甲氧道诺红菌素、地托比星、表柔比星、依索比星、卡柔比星、伊达比星、罗多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、多柔比星、吡柔比星、奥柔比星、2-[4-(7-氯-2-喹喔啉基氧苯氧基]-丙酸、佐柔比星、N-(2-氯乙烷)-N-亚硝基脲基柔红霉素、洛撒蒽醌、洛索蒽醌、吡罗蒽醌、替洛蒽醌、阿可达佐、二乙氧醋酰阿霉素、治癌菌素、阿霉素或表阿霉素的组合。均为重量百分比。
实施例七将70mg乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)放入容器中，加100毫升二氯甲烷溶解混匀后，加入20mg米托蒽醌和10mg O6-烷基鸟嘌呤，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到含20％米托蒽醌和10％O6-烷基鸟嘌呤的抗癌药物组合物。将抗癌药物组合物防于小白鼠皮下，定时取出测药物含量，根据剩余药物量，并计算累计释放百分数(％)。结果发现，药物在30天内均匀释放80-95％。均为重量百分比。
实施例八将70mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)为30∶70的共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷溶解混匀后，加入15mg吡柔比星和15mg8-氨基-O6-苄基鸟嘌呤，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到抗癌药物组合物含15％吡柔比星和15％8-氨基-O6-苄基鸟嘌呤。将含药复合物防于小白鼠皮下，定时取出测药物含量，根据剩余药物量，并计算累计释放百分数(％)。结果发现，药物在30天内均匀释放90-95％。均为重量百分比。
实施例九如实施例一、三、五、七或八所述，所不同的是所用药用辅料分别为下列组合之一或其组合a)分子量为5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乳酸(PLA)；b)分子量为5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)；c)乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)；d)对羧苯基丙烷(p-CPP)与葵二酸(SA)的共聚物(聚苯丙生)，对羧苯基丙烷∶葵二酸重量百分比为10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40，均为重量比；e)木糖醇、低聚糖、甲壳素、钾盐、钠盐、透明质酸、胶原蛋白、明胶或白蛋白。
实施例十验证鸟嘌呤衍生物和抗肿瘤抗生素的体内抑瘤作用。
以大白鼠为试验对象，将2×105个肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表7)。第一组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为O6-苄基鸟嘌呤(O6-BG)，第3到6组分别为mDox(7-O-甲基诺加-4’-表阿霉素)、ACLA(阿柔比星)、Am(氨柔比星)和mAMSA(4’-(辣根联苯氨甲氧基苯醯腆胺)。第7到10组分别为O6-BG与mDox、ACLA、Am(氨柔比星)和mAMSA的联合。所有药物均经瘤内注射，剂量为5mg/kg。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表7)。
表7
注O6-BGO6-苄基鸟嘌呤，为鸟嘌呤衍生物；而mDox、ACLA、Am(氨柔比星)和mAMSA均为抗肿瘤抗生素。
实施例十一验证鸟嘌呤衍生物对抗肿瘤抗生素的体内抑瘤作用的增效作用。
以大白鼠为试验对象，将2×105个肿瘤细胞(肝癌)皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表8)。第一组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为鸟嘌呤类似物(O6-苄基鸟嘌呤，O6-BG)，第3到6组分别为抗肿瘤抗生素表柔比星、依索比星、伊达比星和流柔比星。第7到10组分别为鸟嘌呤类似物O6-BG与表柔比星、依索比星、伊达比星、流柔比星的联合。所有药物均经瘤内注射，剂量为5 mg/kg。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表8)。
表8
实施例十二鸟嘌呤衍生物及抗肿瘤抗生素的体内抑瘤作用。
以大白鼠为试验对象，将2×105个肿瘤细胞(乳腺癌)皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表9)。第1组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为鸟嘌呤衍生物；第3到6组分别为抗肿瘤抗生素。第7到10组分别为鸟嘌呤衍生物不同抗肿瘤抗生素的联合。所用药物均来自实施例六，经瘤内放置，组合物剂量为5mg/kg，药物在组合物中的重量百分比为20％。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表9)。
表9
注O6-丁基鸟嘌呤(O6-bG)，为鸟嘌呤衍生物；，而吡柔比星、奥柔比星、佐柔比星和均为抗肿瘤抗生素。
实施例十到十二的试验结果表明，与对照组相比，鸟嘌呤衍生物及抗肿瘤抗生素单独应用对体内肿瘤生长均有明显抑制作用(P＜0.05)。而联合应用具有明显的增效作用(P＜0.001)。
实施例十三、局部应用鸟嘌呤衍生物对抗肿瘤抗生素的增效作用。
以大白鼠为试验对象，将2×105个肉瘤细胞(S180)皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表10)。第一组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为O6-甲基鸟嘌呤(O6-MG)，第3到6组分别为洛索蒽醌、吡罗蒽醌、替洛蒽醌和米托蒽醌。第7到10组分别为O6-MG与洛索蒽醌、吡罗蒽醌、替洛蒽醌或XK469的联合。鸟嘌呤衍生物来自实施例六，其在组合物中的重量百分比为20％，经瘤内放置一天后经腹腔注射抗肿瘤抗生素。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表10)。
表10
注O6-甲基鸟嘌呤(O6-MG)，为鸟嘌呤衍生物，即抗肿瘤抗生素增效剂；XK469为2-[4-(7-氯-2-喹喔啉基氧苯氧基]-丙酸。后者与洛索蒽醌、吡罗蒽醌和替洛蒽醌均为抗肿瘤抗生素。
实施例十四、局部应用鸟嘌呤衍生物和抗肿瘤抗生素对肿瘤的抑制作用。
按照实施例十二所述的方法比较鸟嘌呤衍生物和抗肿瘤抗生素对肠癌生长的抑瘤作用。第一组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为阿霉素(Dox)，第3到6组分别为O6-苄基鸟嘌呤(O6-BG)、O6-丁基鸟嘌呤(O6-bG)、O6-甲基鸟嘌呤(O6-MG)和O6-烷基鸟嘌呤(O6-AG)。第7到10组分别为Dox与O6-苄基鸟嘌呤、O6-丁基鸟嘌呤、O6-甲基鸟嘌呤和O6-烷基鸟嘌呤的联合。所有药物均经瘤内放置，缓释制剂按照本发明实施例六所述工艺制作。缓释制剂重量为30毫克，所有药物的含量均为12％。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表11)。
表11
实施例十五、局部应用鸟嘌呤衍生物和抗肿瘤抗生素对肿瘤的抑制作用。
按照实施例十二所述的方法比较鸟嘌呤衍生物和抗肿瘤抗生素对肠癌生长的抑瘤作用。第一组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为米托蒽醌(MTX)，第3到6组分别为O6-苄基鸟嘌呤(O6-BG)、O6-丁基鸟嘌呤(O6-bG)、O6-甲基鸟嘌呤(O6-MG)和O6-烷基鸟嘌呤(O6-AG)。第7到10组分别为MTX与O6-苄基鸟嘌呤、O6-丁基鸟嘌呤、O6-甲基鸟嘌呤和O6-烷基鸟嘌呤的联合。所有药物均经瘤内放置，缓释制剂按照本发明实施例六所述工艺制作。缓释制剂重量为30毫克，所有药物的含量均为12％。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表12)。
表12
以上实施例十三到十五的试验结果表明，鸟嘌呤衍生物及抗肿瘤抗生素单独应用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)。然而联合应用具有明显的增效作用(P＜0.001)，属意外发现，且具有普遍意义。


一种抗癌药物组合物，属于药物技术领域。抗癌有效成分为抗肿瘤抗生素和鸟嘌呤衍生物。其中鸟嘌呤衍生物可抑制细胞内的DNA修复功能，并能降低肿瘤细胞对抗肿瘤抗生素的耐受性，而药用辅料主要为生物可容性可降解吸收的高分子多聚物，在其降解吸收的过程中能将抗癌药物缓慢释放于肿瘤局部，因此在明显降低其全身毒性反应的同时还可于肿瘤局部维持有效药物浓度。该抗癌药物组合物肿瘤局部放置该组合物不仅能够降低药物的全身毒性反应，同时还能选择性地提高肿瘤局部的药物浓度，增强化疗药物及放射治疗等非手术疗法的治疗效果。