专利名称：用于对母猪进行人工授精的猪精液物质组合物的制作方法人工授精技术多年来已经用于几种家畜物种的授精。对于猪的人工授精，大多数饲养雌性以《群》进行以便分组干预并将其集中起来，而降低对这些动物的观察和工作时间。生理上，仔猪断奶才能导致母猪在断奶后平均5天进入发情的周期的重新开始。因此，一般在周三和周四使小猪一起断奶，就足以使母猪10%在星期日发情，50%在星期一发情，30%在星期二发情和其余10%在该周其余几天发情。发情期的平均持续时间为从24到72h。首次发情的母猪发情一般持续较长时间。在这些事件发生期间，饲养员会根据他/她的习惯，采取许多可变的时间段，每12或24小时进行授精。为了覆盖这些雌性，饲养员使用平均每周期2. 6剂量，每个剂量含有22亿个精子。为了降低干涉次数而同时确保该雌性动物生殖道内精子的良好利用度，必须长时间应用一些装置/手段来获得授精。随时间缓释囊封精液的概念描述于专利EP 0922451中而基于含有液体核的囊使用，该液体核含有猪精液物质的悬浮液以及可生物降解和/或生物相容性的聚合物，整个猪精液物质都包覆有由海藻酸盐构成的并含有二价或三价金属的膜，可选地为交联的。通常情况下，二价金属的海藻酸盐膜选自海藻酸钙、海藻酸锶和海藻酸锌。三价金属的海藻酸盐优先选自铝、铁或铬的海藻酸盐。大量的多糖，如海藻酸盐、壳聚糖、果胶、胶质、卡拉胶、黄原胶，都具有通过物理或化学改性，例如PH值的改性，温度的改性或通过加入合适的反离子而自发形成水凝胶的特性。例如，海藻酸钠是褐藻(如巨藻(Marcycystis pyrifera),褐藻海带(Laminariadigitata),球形褐藻(Ascophyllum nodosum))细胞壁的天然聚阴离子多糖，占这种褐藻干重高达40%。海藻酸盐由甘露糖醛酸和可溶于水中的古洛糖醛酸混合物，但在二价或三价阳离子存在时形成凝胶。诸如EDTA的化合物也具有捕捉这些离子和解构所获得的凝胶的行为。猪精子对于由突发热冲击以及由渗透压或pH的变化及其自动力所引起的应力非常敏感。这种改变可能由于在精子能育力获得现象之后精子向凋亡演变而出现。这种现象通过出现凝集一在细胞死亡之前的最终阶段而观察到。本发明的目的本发明的目的是提供一种包含用于对母猪进行人工授精的猪精液物质而没有现有技术缺点的新型组合物。本发明的目的还在于提供获得这种组合物的方法，以及包含一个或几个含有所述组合物或所述组合物的成分的瓶状容器和采用这种组合物进行母猪授精的装置(探针)的试剂盒。本发明的具体目的旨在提供这种组合物，其特征在于降低的毒性或精液(囊封的和/或游离的)物质中存在的精子的应力降低而同时容许有效而延长时间地向母猪给予精子。
本发明的第一个目的涉及一种用于对母猪进行人工授精并包含加入(incorporate,结合入)猪精液物质的囊的猪精液物质组合物,这种组合物包覆有并没有现有技术缺点的海藻酸盐膜。 具体而言，在本发明的组合物中，存在于囊中的猪精液物质中的精子浓度包含每毫升9亿至20亿个精子。另外，本发明的猪精液物质的组合物可以包括猪精液物质的游离部分，即并不存在于囊中而未包覆有(二价或三价离子的)海藻酸盐膜的游离部分。在这种情况下，猪精液物质的游离部分中存在的精子浓度包括每毫升2500万至3500万个精子这意味着本发明的组合物包括100万至30亿(优选15亿至25亿)囊封(encapsulated,包封的)的精子和/或15亿至20亿(优选15亿至25亿)个游离精子，即未囊封的精子。优选在本发明的组合物中，所选择的离子是钡，但是也可以是另外的金属离子，优选二价，如钙离子或另一种碱土离子。本发明另一方面涉及获得本发明的组合物的方法，基本上包括以下步骤-收集猪精液物质并经过一个或几个用于提取这种猪精液物质中最初存在的超过50%、优选超过65%、更优选超过75%的精清(或精衆,seminal plasma)和在这种提取操作之后收集富含精子的猪精液物质的步骤。-随后将所述富含精子并加入2%或8%的二价或三价离子，优选钡离子的猪精液物质悬浮而逐滴加入到海藻酸盐单价金属离子，优选钠离子的溶液中，而形成包覆所述富含精子的精液物质的囊。-随后收集所获得的囊(以便形成猪精液物质的囊封部分)并优选与猪精液物质的游离部分(或称游离部分的猪精液物质)混合。在本发明的方法中，用于提取猪精清的步骤包括一个或几个用于离心这种猪精液物质的步骤而随后进行一个或几个用于去除经过离心的介质的上清液中存在的精清和收集富含精子的猪精液物质的步骤或由上述步骤组成。本发明的另一目的涉及包含一个或多个含有根据本发明的所述猪精液物质的组合物或所述组合物的成分，尤其是游离部分和/或囊封部分的瓶状容器，以及能够采用这种组合物对母猪进行人工授精的授精装置和可选含有这种组合物稀释剂，尤其是猪精液物质游离部分的稀释剂，如产品Gedil 的瓶状容器。表I :5%或10%氯化钡(BaCl2)对游离精液中存在的精子运动性的影响。该表中提及的两个值(X-Y)就是两个测定的结果针对100的第一值(X)意味着在100范围内的X个精子具有超过20 U m/s的运动性(X称之为《运动性的》精子)针对100的第二值(Y)是指这些相同的100个精子中的Y个精子具有大于或等于80 u m/s的相同位移速率(Y称之为“进取性(progressive) ”精子)。样品~5% BaCl2~10% BaCl2~公猪 1CG053368-1958-12~公猪 2CG655845-2029-07
~公猪 3Lwc Derby 40-1024-05
~公猪 4DB212569-3040-15
~公猪 5PF218250-2648-28轰1:2%氯化钡(BaCl2)对游离精液中存在的精子的运动性的影响


本发明涉及一种用于对母猪进行人工授精并包含含有由猪精液物质制成的悬浮液并包覆有二价或三价离子的海藻酸盐的膜的囊的猪精液物质组合物，其中囊中存在的所述猪精液物质悬浮液内的猪精子浓度是在每毫升9亿至15亿个精子之间。