在化妆品组合物中作为抗刺激剂和抗老化促进剂的松果菊提取物制作方法

U·桑塔纳姆, R·L·魏恩考夫, L·R·帕兰克尔, B·哈里希安, V·德弗洛里奥

2003年6月18日

2001年3月1日

2000年3月6日

荷兰联合利华有限公司

A61K8/00GK1424904SQ01806087

刺激剂 物中 化妆品 组合 作为

1.一种减轻由羟酸引起的皮肤刺激或刺痛的方法，该方法包括局部施用在化妆上可接受的媒介物中的松果菊提取物2.权利要求1的方法，其中松果菊提取物以约0.01％-约10％的量使用3.一种化妆护肤组合物，该组合物包括(i)一种羟酸；(ii)紫松果菊提取物或苍白松果菊提取物；和(iii)化妆上可接受的媒介物4.权利要求3的组合物，其中所述羟酸以约0.01％-约20％的量存在5.权利要求4的组合物，其中所述羟酸的量为约2％-约12％6.权利要求3的组合物，其中所述组合物为一种水包油乳液7.权利要求3的组合物，其中所述组合物的pH为3-58.一种改善包含羟酸的化妆品组合物的抗老化效能的方法，所述方法包括将松果菊的提取物结合进所述组合物中9.松果菊提取物在生产用于减轻由羟酸引起的皮肤刺激或刺痛的药物中的用途10.权利要求9的用途，其中所述松果菊提取物以占组合物约0.01％-约10％重量的量存在11.一种改善皮肤的化妆外观的方法，所述方法包括局部施用在化妆上可接受的媒介物中的松果菊提取物和羟酸12.权利要求11的方法，其中所述松果菊提取物和羟酸均包含在同一媒介物中并且同时施用到皮肤上

本发明涉及松果菊(Echinacea)在降低含羟酸化妆品组合物的刺激性和促进抗老化效力方面的用途一些用于局部用产品的成分可能具有刺激性，对于具有“敏感性皮肤”的人群来说更是如此举个例子来说，已经证实羟酸(HA)能提供化妆功效，诸如改善光损伤或自然老化皮肤的外观、放松皮肤、治疗老年斑等遗憾的是，其高浓度使用时偶尔会伴随有皮肤过敏，例如施用后皮肤发红和有刺痛感这种刺激性可通过降低组合物中活性成分的量或通过减少活性物向皮肤的渗入来舒解但是两种方法均有损害效力的严重缺陷羟酸引起的刺激性可通过提高组合物的pH来降低，但是这种方法由于减少了渗入皮肤的羟酸而使效力降低理想的是在降低或消除羟酸的刺激性的同时维持其效力因此存在着对防止或减少可能由羟酸引起的皮肤过敏的组合物和方法的需求美国专利5,705,170(Kong等人)公开了一种可包含0.1-20％重量α-羟酸的草药脂肪团治疗和化妆品组合物这种组合物具有3-6的pH；在实施例中松果菊提取物以2％的水平使用美国专利5,667,791(Hersh等人)公开了一种可以以露、乳、油或凝胶形式使用的局部用组合物其一种示例性组合物包含0.047％的松果菊和0.018％的乳酸所述组合物被用于减小和修复X-射线辐射引起的皮肤损伤美国专利5,804,168(Murad)公开了可为乳油、膏、凝胶或软膏或乳液形式并可局部施用治疗太阳损伤皮肤的组合物所述组合物可包含松果菊和乳酸后者在实施例中以5.6％重量的量使用本发明提供了一种减少由局部施用含HA的组合物所引起的皮肤过敏的方法，所述方法包括局部施用松果菊提取物松果菊提取物可与HA在同一组合物中共同存在，或者可由不同组合物施加按照本发明，通过局部应用松果菊提取物，减少或消除了由HA引发的皮肤过敏此外，按照本发明已经发现松果菊具有显著提高HA的抗老化效力的另一宝贵作用因此，当松果菊提取物存在于组合物中时，HA可在没有降低效力的情况下以较少的量使用，从而甚至可进一步降低皮肤过敏的可能性本发明也包括含HA和紫松果菊(Echinacea Purpurea)或苍白松果菊(Echinacea pallida)的化妆护肤组合物除了在操作实施例和对比例以及其它清楚表明的情况外，本说明书中所有指示材料的量或反应条件、材料的物理性能和/或用途的数据均应理解为由词“大约”修饰除非另加说明，否则所有量均是以组合物的重量计在本发明的组合物中使用松果菊提取物是为了减少或消除由HA引起的皮肤过敏和/或提高HA的抗老化效果也称为金光菊提取物的松果菊提取物可购自供应商如BioBotanica松果菊提取物以0.1-20％、优选0.5-10％、最优选0.5-5％的浓度用于本发明的组合物和方法中松果菊提取物可从下面的松果菊属类植物获得窄叶松果菊(Echinacea angustifolia)、紫松果菊和苍白松果菊按照本发明，优选紫松果菊，因为它含有显示出作为本发明的一部分而具有抗刺激活性的菊苣酸紫松果菊也可以买得到苍白松果菊也含有菊苣酸，但是买不到所述羟酸可选自α-羟酸、β-羟酸(如水杨酸)、其它羟基羧酸(如二羟基羧酸、羟基二元羧酸、羟基三元羧酸)和它们的混合物或它们立体异构体(DL、D或L)的组合优选所述羟酸选自具有通式(1)的α-羟酸 式中M为H或者含1到27个碳原子的饱和或不饱和、直链或支化的烃链更优选所述羟酸选自乳酸、2-羟基辛酸、羟基月桂酸、乙醇酸和它们的混合物当存在立体异构体时，最优选L-异构体应理解根据组合物pH的不同，所述羟酸可以盐的形式如铵盐或钾盐或钠盐的形式存在虽然松果菊提取物可包括在具有任何pH(一般范围为2.5-10)的组合物中，但本发明方法在组合物处于酸性pH(特别是如果它们包含羟酸)、优选3-5、最优选3-4的pH时特别有用，因为这种组合物特别具有刺激性本发明的一项具体优点是可使用较大量的羟酸而不会引起皮肤过敏优选组合物中所存在的羟酸量为0.01-20％，更优选2-12％，最优选4-12％重量最优选乙醇酸和/或乳酸，因为尽管已经发现这些成分引起刺激性，但是这些成分在提供化妆效用方面特别有效本发明的组合物和方法还包括化妆上可接受的媒介物来作为组合物中活性成分的稀释剂、分散剂或载体，从而当组合物用于皮肤时促进其分布水以外的媒介物包括液体或固体润肤剂、溶剂、湿润剂、稠化剂和底粉一种特别优选的非水载体是聚二甲基硅氧烷和/或聚二甲基苯基硅氧烷本发明的硅氧烷可以是那些无论何处25℃下粘度为约10-10,000,000厘沲的硅氧烷特别需要的是低粘度和高粘度硅氧烷的混合物这些硅氧烷可以以Vicasil、SE和SF的商品名购自GeneralElectric Company和以200和550系列购自Dow Corning Company可用于本发明组合物的硅氧烷的量可为组合物的5-95％重量，优选为25-90％重量媒介物的量可为总组合物重量的约2-约99％重量，优选约50-约99％重量，最优选约80-99％重量按照本发明，所述媒介物中优选至少60％重量为水本发明的组合物优选为油水乳状液以便改善羟酸的皮肤递送(参见Sah A.，“配方差异和产品结构对α-羟酸(乳酸)对皮肤递送影响的体外研究(An in-vitro study of the effect of formulation variables and product structure onthe delivery of alpha-hydroxy acid(Lactic acid)to skin)”，硕士论文，俄亥俄州辛辛那提大学药学院药学系，1996年7月)这种传送的改善通常伴随着刺激性/刺痛的增加，使得松果菊提取物在这种乳状液中的使用特别重要在本发明的优选水包油乳液中，水占所述组合物的至少50％重量，最优选50-70％重量任选的益肤物质和化妆品助剂各种类型的活性成分都可存在于本发明的化妆品组合物中活性物质被定义为不同于润肤剂和仅改善组合物的物理性能的成分的益肤剂虽然并不限于该范畴，常规实例包括抗皱纹化合物和防晒制品以及皮肤褐色剂(skin tanning agent)防晒制品包括常用于防护紫外光的物质示例性化合物有二氧化钛、PABA的衍生物、肉桂酸酯和水杨酸酯例如，可使用甲氧基肉桂酸辛酯和2-羟基-4-甲氧基二苯酮(也称为羟苯甲酮)甲氧基肉桂酸辛酯和2-羟基-4-甲氧基二苯酮可分别以Parsol MCX和Benzophenone-3的商品名购置在所述乳状液中防晒剂的实际用量可根据所需防护太阳紫外光辐射的程度不同而不同本发明化妆品组合物内的另一类基础成分是稠化剂稠化剂通常以占组合物0.1-20％重量、优选约0.5-10％重量的量存在示例性的稠化剂有可以Carbopol的商品名购自B.F.Goodrich Company的交联聚丙烯酸酯材料也可使用树胶诸如汉生胶、角叉菜胶、明胶、刺梧桐树胶、果胶和刺槐豆胶在某些情况下稠化功能可通过也用作硅氧烷或润肤剂的物质提供例如，超过10厘沲的硅胶和酯如硬脂酸甘油酯具有双重功能底粉可混入到本发明的化妆品组合物中这些底粉包括白垩、滑石、漂白土、高岭土、淀粉、绿土、化学改性的硅酸铝镁、有机改性的蒙脱土、水合硅酸铝、热解法二氧化硅、铝淀粉琥珀酸辛烯酯和它们的混合物其它小助剂组分也可混入到化妆品组合物中这些成分可包括着色剂、遮光剂和香料这些其它组分物质的量可从占组合物0.001％重量到最多20％重量本发明的组合物主要将用作局部施用于人们皮肤上的产品，特别是作为调理和光滑皮肤、防止或减轻皱纹、老化和/或光损伤皮肤外观、或淡化或均化皮肤颜色和色调的用剂使用时，将少量的组合物(如1到100ml)从适当的容器或涂布器施用到暴露的皮肤区域，并且如果需要可再用手或手指或适合的装置涂抹开和/或擦到皮肤上下面的具体实施例进一步说明本发明，但是本发明并不受其限定下面的实施例证实松果菊提取物可有效抑制由AHAS提高的IL-1所引起的PGE2的诱发所以松果菊提取物可有效减轻HA所引起的刺激在96孔组织培养处理板(Corning-Costar，Corning，NY)中以每孔7500个细胞的密度种下新生儿皮肤成纤维细胞(5-9代)所用的培养基为Dulbecco的改良Eagle培养基(DMEM)，补充有2mM L-谷氨酰胺、10％牛胎血清和抗生素以及抗真菌剂溶液(均来自LifeTechnologies)的高-葡萄糖(Gibco/Life Technologies，Gaithersburg，MD)48小时后，每孔均用200μl无血清DMEM洗两次，并向细胞中加入200μl在含1 ng/ml IL-1a的DMEM+L-谷氨酰胺中的+/-活性物6小时后，显微镜检查细胞的定性成活率，收获培养基并冷冻直到分析各处理均一式四份地进行使用商品PGE2试剂盒(Amersham，Buckinghamshire，England)进行酶免疫测定将PGE2-专一抗体预涂布在一套微量滴定孔上所述测定以在未标记PGE2(标准品或样品)和定量的过氧化物酶标记PGE2之间对有限量的良好结合的PGE2-专一抗体的竞争为基础应用0，1，2，4，8，16和32pg/孔或50μl培养/孔的标准以及50μl/孔pH7.5的0.1M磷酸盐缓冲液，在4℃下培养3小时培养结束后，在所有孔中加入50μl/孔的辣根过氧化物酶结合的PGE2并将板在4℃温育1小时将板用含0.5％吐温20的0.01M磷酸盐缓冲液(pH 7.5)以300μl/孔洗涤4次加入150μl/孔在20％二甲基甲酰胺中的3，3’，5，5’-四甲基联苯胺/过氧化氢底物并将所述板在室温下准确温育30分钟通过加入100μl/孔1M硫酸使反应停止使用DynatechMR7000小平板分光光度计(Dynatech，Chantilly，VA)通过读取450nm下的吸光度测定孔中的颜色画出标准曲线并从曲线推出样品中PGE2的量通过所述化合物抑制IL-1a诱导的PGE2的能力评价受试化合物的消炎能力并表达成由受试化合物+IL-1a处理的细胞所产生的PGE2与单独由IL-1a处理的细胞所产生的PGE2的比该比值越低，消炎活性越大使用斯氏t-检验测定统计显著性表1 aPGE2的产生显著降低从表1的结果可以看出松果菊提取物显著降低了体外IL-1a诱导的PGE2的产生还测试了另一种松果菊属即E-angustofolia的提取物，其活性显著低于紫松果菊(表1a)表1a a与窄叶松果菊相比，PGE2的产生显著降低；b与对照品相比，PGE2的产生显著降低据报道，松果菊包含各种化合物，包括多糖如海胆苷和咖啡酸酯如菊苣酸为了找出松果菊提取物中哪种化合物对本测试中的活性具有贡献，在PGE2试验中测定了菊苣酸，发现在0.001％时起作用(表1b)表1b aPGE2的产生显著降低紫松果菊中菊苣酸含量在0.6-2.1％的范围(Botanicals，APhytocosmetic Desk reference；F.S.D Amelio，Sr.，CRC Press，1999)从上表1可以看出，在0.1％的松果菊有效浓度下，菊苣酸浓度为0.0006％-0.002％，并且在该浓度范围内的菊苣酸能有效减少刺激性此外据报道，紫松果菊中具有丰富的菊苣酸，而窄叶松果菊中实际上却则缺乏菊苣酸(Botanicals，A Phytocosmetic Desk reference；F.S.D Amelio，Sr.，CRC Press，1999)虽然据说苍白松果菊含有菊苣酸，但其浓度不为人知而且苍白松果菊尚未商品化所以，紫松果菊是优选的物种斑片在星期一上午900施加并在星期二上午900取下(24小时暴露)一套新的斑片在星期二下午300施加并在星期三上午900取下(18小时暴露)第三套斑片在星期三下午300施加并且在星期四上午900取下(18小时暴露)最后一套斑片在星期四下午300施加并在星期五上午900取下(18小时暴露)每次取下斑片时，将该部位用热水清洗并轻轻拭干然后将试验部位用外科皮肤标记笔标记以确保找对评级和随后施加斑片的部位在重新施加斑片前在星期二、星期三、星期四和星期五的下午300评价试验部位预期受试部位将出现皮肤过敏诸如中度发红、干燥和/或发痒也可能出现受试部位的肿胀如果评价中受试部位出现中度发红或肿胀，则在该特定受试部位不再重加斑片由两个经训练的检查者在一致的光照下目视评级每个臂上的试验部位受试部位按严重顺序评级在第一评价期评级反应的检查者在整个研究中连续地每天评级所述部位在评价反应时，出现最严重反应的部位给最低分出现第二严重反应的部位给第二低分，依此类推不存在强行评级如果两个或多个部位没有反应或者具有相同反应(部位间没有差异)，则给予评级的平均值如果一个部位由于过敏的程度而被中断，则该部位保持其停止给药时得到的评级统计分析由斑片处理得到的评级结果通过非参数统计方法进行统计比较在每个评价点使用Friedman秩和检验，每个成员作为一个组(即每个成员测试每种试验处理)，将含抗刺激剂的试验材料与相应的只含羟酸的对照品进行比较p值＜0.10即可被认为具有统计显著性使用刺激性试验方法测试含表3所示成分的组合物测试了17个受试者获得的结果列于表3秩和越高，刺激性越小紫松果菊被用于下面的实施例乳液基础配方 在下面的实施例中加入另外的成分代替水用氢氧化铵或盐酸调节pH乙醇酸为购置时的70％活度表2a a刺激性显著低于组合物2，p＜0.05表2b a刺激性显著低于组合物2，p＜0.05表2c a刺激性显著低于组合物2，p＜0.1由表2a、b、c的结果可以看出，松果菊提取物(组合物3)显著降低了由2号组合物(含8％乙醇酸)引起的刺激性方法该研究是12周两种配方两侧对比使用试验在本研究中招收了两前臂皮肤具有中度光损伤的受试者每个成对比较最少15个合格的受试者来完成研究在受试者间随机分配产品并左/右平衡使用指示受试者在家在左/右臂上使用合适的产品并且每天两次每次施加约1克，持续12周在0周(处理前)、4周、8和12周对光损伤皮肤情况进行目视评价使用下面的10点分级对光损伤皮肤进行临床(目视)评价0＝无1-3＝轻度4-6＝中度7-9＝严重进行下面的成对比较成对比较I基础配方A对基础配方A+8％乙醇酸使用与实施例2相同的基础配方A使用紫松果菊成对比较II基础配方A+8％乙醇酸对基础配方+8％乙醇酸+5％松果菊使用Pratt-Lehmann版Wilcoxon signed秩检验对由处理而引起的离基线的平均变化进行统计评价，在该分析中受试者作为一数组此外，为了比较成对比较内两种处理间离基线的变化程度，还使用了Pratt-Lehmann版Wilcoxon signed秩检验获得的结果列于表3A和3B表3A对光损伤皮肤的平均改善(成对比较I) 表3B对光损伤皮肤的平均改善(成对比较II) **基础配方A+8％乙醇酸+5％松果菊提供了比基础配方A+8％乙醇酸显著更大的改善(p＜0.05)实施例4-8举例说明了本发明的局部用组合物所述组合物可以以常规方式加工它们适合于化妆用途具体来说所述组合物适合用于皱褶、粗糙、干燥、易剥落、老化和/或紫外光损伤皮肤以改善其外观和感觉以及用于健康皮肤以防止或推迟其变差