专利名称：一套鉴定筛选耐热瓠瓜砧木的方法瓢瓜(Bottlegourd, Lagenaria siceraria (Molina) Standi.),别名瓢子、扁蒲、葫芦，隶属葫芦科葫芦属一年生攀援草本植物。它根系发达，作为黄瓜、西瓜和甜瓜等重要瓜类作物的嫁接砧木，能有效提高植株对不良环境的适应性。在我国，大部分地区夏季露地气温在35°C以上，保护地气温则高达40°C以上，高温胁迫是制约瓜类作物夏季栽培和周年供应的主要因素。选育耐热性强的瓠瓜砧木品种，通过嫁接提高瓜类作物耐热性，是解决上述问题的有效途径。建立可靠的耐热性鉴定方法，是快速筛选耐热材料进行品种选育的基础。当前瓠瓜砧木耐热性鉴定多运用田间自然鉴定法，该法易受环境影响，准确性低，耗时长，不能满足品种选育过程中对快速筛选目的材料的要求。随着西瓜、甜瓜、黄瓜等瓜类作物市场需求不断增大，嫁接越夏栽培技术逐年推广，耐热瓠瓜砧木品种的选育日益迫切。为此，发明一套利用人工胁迫、结合统计手段，快速、准确、可靠的耐热性鉴定筛选方法已成为当务之急。
针对以上问题，本发明提供一套鉴定筛选耐热瓠瓜砧木的方法，即利用瓠瓜高温种子发芽和苗期电导率测定，计算相对发芽率 (40-45。。/30-35。。)、 相对发芽指数 (40-450C /30-35。。) 和相对电导率(6h/tlh)三项鉴定指标，应用SPSS13. O软件聚类功能，进行瓠瓜耐热种质鉴定筛选。本发明的优点与广占田地、耗费人工的常规田间自然鉴定相比，本发明鉴定流程简单，耗时短，成本低，逆境可控，结果更准确，且对于批量材料的筛选更方便。四图1为本发明实施例中37份瓠瓜高温胁迫下相对发芽率
(40-45Γ /30-35Γ )、 相对发芽
指数 (40-45。。/30-35。。) 和相对电导率 (6h/0h) 耐热性聚类分析图。
五
进行说明。(I)瓠瓜高温种子发芽选取37份瓠瓜材料饱满无病虫正常种子各90粒，首先在55-60 °C水中温烫20min，再在30°C温水中浸种12h。浸种结束后，取出种子浙干水分，均匀摆放在铺有四层纱布的培养皿(PL-9)内，发芽密度为15粒/培养皿，用去离子水保湿。分作两组(45粒/组，3培养皿/组)，分别在30-35°C和40-45°C条件下黑暗发芽。按照国际种子检验规程1996版，以种子胚芽长达种子一半时为发芽标准。每天用去离子水冲洗种子I次，并统计当天发芽数，发芽于两周后停止。依照下列公式，计算30-35°C和40-45°C两个温度下瓠瓜种子的发芽率和发芽指数发芽率=(种子总发芽数/供试种子数)X 100%
发芽指数=Σ (GT/DT)，其中，GT是在时间t日的发芽数，DT是相应的发芽日数。依照下列公式，计算40-45°C下瓠瓜种子的相对发芽率和相对发芽指数相对发芽率
(40-45。。/30-35。。) =发芽率 (40-45。。) /发芽率 (30-35Γ )相对发芽指数
(40-45。。/30-35。。) =发芽指数 (40-45。。) /发芽指数 (30-35Γ )(2)苗期高温电导率测定播种37份瓠瓜材料各16株，待植株长至两叶一新(第3叶为幼叶)，转入光照培养箱，在45-50°C条件下热处理6h。分别在热处理前和处理6h取样,测定电导率。每次取样避开主叶脉用直径为O. 6cm打孔器随机取圆片，每株取圆片一个，重复3次。取样后，首先测定的电导率值记为ECtl ;45°C水浴15min，冷却后测定值为EC1 ;100°C水浴15min，冷却后测定值为EC2。根据下列公式计算处理前和处理6h电导率电导率=(EC2-EC0)/ (EC1-EC0)依照下列公式，计算处理6h的相对电导率相对电导率(6h/(ih)=电导率(6h)/电导率(oh)(3) SPSS 13. O软件聚类功能进行瓠瓜耐热种质鉴定筛选。利用SPSS13. O 软件聚类程序Analysis-Classify-Hierarchical
Cluster，选择37份瓠瓜材料相对发芽率(4(l_45r/3(l_35r)、相对发芽指数(4(ι-45 /3(ι-35 )和相对电导率(6h/oh)作为变量，进行聚类。相对发芽率和相对发芽指数与耐热性呈正比，相对电导率与耐热性呈反比。依照聚类结果，鉴定筛选耐热材料4份，分别是23、24、27和30号；6、
26、7、20、11、21和5号七份材料被鉴定为不耐热；其余材料耐性适中。


本发明题为《一套鉴定筛选耐热瓠瓜砧木的方法》，属于生物领域。建立可靠的耐热性鉴定方法，是快速筛选耐热材料进行品种选育的基础。田间自然鉴定法易受环境影响，不能准确筛选目标材料。为此，发明一套利用人工胁迫、结合统计手段、快速准确鉴定瓠瓜砧木耐热性的方法已成为当务之急。技术方案为利用瓠瓜高温种子发芽和苗期电导率测定，计算相对发芽率(40-45℃/30-35℃)、相对发芽指数(40-45℃/30-35℃)和相对电导率(6h/0h)三项鉴定指标，应用SPSS13.0软件聚类功能，进行瓠瓜耐热种质鉴定筛选。发明以更简易的操作流程、更低的时间和人工成本，对瓠瓜砧木材料进行更准确更快速更便捷的耐热性鉴定。