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一种载玻片原位培养羊水细胞及核型处理分析的方法
专利
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一种靶向敲除家蚕核型多角体病毒复制非必需基因的方法
专利
专利摘要: 本发明涉及一种靶向敲除家蚕核型多角体病毒BmNPV复制非必需基因的方法,所述方法以BmNPV为材料,通过PCR对其一个复制非必需片段两端的同源序列进行扩增并克隆至载体pUC19中;通过重叠PCR法依次拼接BmNPV的IE1早期启动子、标记基因(EGFP)、终止序列SV40polyA,并克隆至上述载体pUC19获得重组转移载体pUC19-lef7-IE1-EGFP-SV40polyA-gp64;将该载体与野生BmNPV的基因组共转染BmN细胞,经同源重组获得带有荧光标记的重组病毒RBmNPV-EGFP;将其基因组DNA与不带有标记基因的转移载体pUC19-lef7-gp64共转染BmN细胞,通过同源重组获得不带有荧光标记基因的重组病毒RBmNPV。本发明解决了重组病毒基因组中带有标记基因的问题,提高了阳性重组病毒的筛选效率,且此标记基因可以被反复利用。
胡娟
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