专利名称：呋喃苦参黄连素片的质量检测方法细菌性痢疾(简称菌痢)是由痢疾杆菌引起的常见肠道传染病，临床上以发热、 腹痛、腹泻、里急后重感及粘液脓血便为特征，其基本病理损害为结肠粘膜的充血水 肿、出血等渗出性炎症。肠炎是细菌、病毒、真菌和寄生虫等引起的胃肠炎、小肠炎和 结肠炎。临床表现有恶心、呕吐、腹痛、腹泻、稀水便或粘液脓血便。部分病人可有发 热及里急后重感觉，故亦称感染性腹泻。呋喃苦参黄连素片是一种抗菌消炎药。用于急 性菌痢，肠炎等。申请人对该药物进行了研究，以期探索如何有效控制该药物的质量， 以确保其临床疗效。
本发明所要解决的技术问题在于提供一种呋喃苦参黄连素片的质量检测方法。 本发明所制定的质量检测方法能全面有效地控制呋喃苦参黄连素片的质量，从而确保呋 喃苦参黄连素片的临床疗效。为解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案呋喃苦参黄连素片的质量 检测方法。所述的呋喃苦参黄连素片是由呋喃唑酮31.5g、苦参流浸膏150g、黄连素 32.5g与辅料适量制成1000片，呋喃苦参黄连素片的质量检测方法主要包括性状、鉴别、 检查、含量测定，其中含量测定是分别照分光光度法和照高效液相色谱法对制剂中呋喃 唑酮和黄连素的含量测定；鉴别包括以下步骤(1)取呋喃苦参黄连素片剥去包衣，研 细，称取相当于呋喃唑酮IOmg的细粉，加N，N-二甲基甲酰胺Iml使呋喃唑酮完全 溶解，加水50ml，摇勻，滤过，取滤液lml，加亚硝基铁氰化钠试液Iml与氢氧化钠试 液lml，摇勻，放置2分钟，溶液初显橄榄绿色，渐变为墨绿色；(2)取呋喃苦参黄连素 片，研细，称取0.5g，加热水10ml，强力振摇一分钟，即产生持续泡沫，在10分钟内不 消失；(3)取呋喃苦参黄连素片细粉0.5g，加甲醇15ml，超声处理30分钟，滤过，滤液 浓缩至约2ml，作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶 液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版二部附录VB的薄层色谱法试验，吸取上述 两种溶液各5 10μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以 丙酮甲苯乙酸乙酯浓氨水=3 2 1 0.1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；(4) 取上述鉴别(3)中供试品溶液0.5ml，稀释至5ml，作为供试品溶液；另取盐酸小檗碱对 照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版二部 附录VB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1 3μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素 钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯丁酮甲酸水=10 6 1 1为展开齐U，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。上述呋喃苦参黄连素片的质量检测方法，所述质量检测方法的性状为为糖衣 片或薄膜衣片，除去糖衣或薄膜衣后显黄色，味苦。前述呋喃苦参黄连素片的质量检测方法，所述质量检测方法的检查为应符合 中国药典2005年版二部附录IA片剂项下有关的各项规定。前述呋喃苦参黄连素片的质量检测方法，所述质量检测方法的含量测定包括以 下步骤(1)呋喃唑酮避光操作，取呋喃苦参黄连素片10片，除去包衣，称重，研细， 精密称取相当于呋喃唑酮15mg的细粉，置200ml量瓶中，加N，N-二甲基甲酰胺30ml 溶解，加水稀释至刻度，摇勻，滤过，精密量取续滤液5ml至50ml容量瓶中，加水稀释 至刻度，摇勻，作为供试品溶液；另精密称取呋喃唑酮对照品15mg同法配制，作为对照 品溶液；取上述两种溶液，照中国药典2005年版二部附录IVA分光光度法，在367nm和 438nm处分别测定吸收度，求出ΔΑ，计算呋喃唑酮的含量；标示量％=(Wr · ΔAx · Ρ/31.5XWx · ΔAr) X 100%式中对照品的称量(mg)；Δ Ar为对照品的吸收度差值(Δ Ar2- Δ Ari)；Wx为供试品的称重(mg)；Δ Ax为供试品的吸收度差值(Δ Ax2- Δ Axi)；P为平均片重(mg/片)；31.5为呋喃唑酮的标示量(mg/片)；(2)黄连素照中国药典2005年版二部附录VD高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇乙 腈0.02mol/l磷酸水溶液=10 27 63为流动相，检测波长为350nm，理论板数按盐 酸小檗碱峰计算应不低于2000 ；测定法取呋喃苦参黄连素片10片，研细，精密称取相当于盐酸小檗碱IOmg的 细粉，置IOOml容量瓶中，加流动相约80ml，超声处理45分钟，放冷，用流动相稀释至 刻度，摇勻，滤过，取续滤液，精密量取10 μ 1注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称 取盐酸小檗碱对照品适量，用流动相溶解并定量稀释制成每Iml中含盐酸小檗碱O.lmg的 溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。 前述呋喃苦参黄连素片的质量检测方法，呋喃苦参黄连素片含呋喃唑酮应为标 示量的90.0% 110.0%，含盐酸小檗碱应为标示量的90.0% 110.0%。前述呋喃苦参黄连素片的质量检测方法，所述的苦参流浸膏是这样制备的取 选好洗净的苦参，粉碎，加入6 8倍的硫酸水溶液浸煮3次，第一次的浸煮时间为3 小时，第二次的浸煮时间为2小时，第三次的浸煮时间为1小时，分别滤过，合并滤液， 并将滤液调至中性，浓缩流浸膏。前述呋喃苦参黄连素片的质量检测方法，总体来说，呋喃苦参黄连素片的质 量检测方法主要包括性状、鉴别、检查、含量测定，呋喃苦参黄连素片是由呋喃唑酮 31.5g、苦参流浸膏150g、黄连素32.5g与辅料适量制成1000片，性状为糖衣片或薄膜衣片，除去糖衣或薄膜衣后显黄色，味苦；鉴别(1)取呋喃苦参黄连素片剥去包衣，研细，称取相当于呋喃唑酮IOmg 的细粉，加N，N-二甲基甲酰胺Iml使呋喃唑酮完全溶解，加水50ml，摇勻，滤过，取 滤液lml，加亚硝基铁氰化钠试液Iml与氢氧化钠试液lml，摇勻，放置2分钟，溶液初 显橄榄绿色，渐变为墨绿色；(2)取呋喃苦参黄连素片，研细，称取0.5g，加热水10ml，强力振摇一分钟，艮P 产生持续泡沫，在10分钟内不消失；(3)取呋喃苦参黄连素片细粉0.5g，加甲醇15ml，超声处理30分钟，滤过，滤 液浓缩至约2ml，作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶 液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版二部附录VB的薄层色谱法试验，吸取上述 两种溶液各5 10 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以 丙酮甲苯乙酸乙酯浓氨水=3 2 1 0.1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；(4)取上述鉴别(3)中供试品溶液0.5ml，稀释至5ml，作为供试品溶液；另 取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药 典2005年版二部附录VB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1 3μ1，分别点于 同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯丁酮甲酸水= 10 6 1 1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；检查应符合中国药典2005年版二部附录IA片剂项下有关的各项规定；含量测定呋喃唑酮避光操作，取呋喃苦参黄连素片10片，除去包衣，称 重，研细，精密称取相当于呋喃唑酮15mg的细粉，置200ml量瓶中，加N，N_二甲基甲 酰胺30ml溶解，加水稀释至刻度，摇勻，滤过，精密量取续滤液5ml至50ml容量瓶中， 加水稀释至刻度，摇勻，作为供试品溶液；另精密称取呋喃唑酮对照品15mg同法配制， 作为对照品溶液；取上述两种溶液，照中国药典2005年版二部附录IVA分光光度法，在 367nm和438nm处分别测定吸收度，求出ΔΑ，计算呋喃唑酮的含量；标示量％=(Wr · ΔAx · Ρ/31.5XWx · ΔAr) X 100%式中对照品的称量(mg)； Δ Ar为对照品的吸收度差值(Δ Ar2- Δ Ari)；Wx为供试品的称重(mg)；Δ Ax为供试品的吸收度差值(Δ Ax2- Δ Axi)；P为平均片重(mg/片)；31.5为呋喃唑酮的标示量(mg/片)；黄连素照中国药典2005年版二部附录VD高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇乙 腈0.02mol/l磷酸水溶液=10 27 63为流动相，检测波长为350nm，理论板数按盐 酸小檗碱峰计算应不低于2000 ；测定法取呋喃苦参黄连素片10片，研细，精密称取相当于盐酸小檗碱IOmg的 细粉，置IOOml容量瓶中，加流动相约80ml，超声处理45分钟，放冷，用流动相稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，精密量取10 μ 1注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取盐酸小檗碱对照品适量，用流动相溶解并定量稀释制成每Iml中含盐酸小檗碱O.lmg的 溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。为了验证本发明的可行性，申请人进行了以下实验研究。一、性状的研究根据十批样品试制情况，呋喃苦参黄连素片(以下简称本品)性状为糖衣片或 薄膜衣片，除去糖衣或薄膜衣后显黄色，味苦。列入质量检测方法正文。二、鉴别方法的研究(1)取本品剥去包衣，研细，称取细粉适量(约相当于呋喃唑酮IOmg)，加N， N-二甲基甲酰胺Iml使呋喃唑酮完全溶解，加水50ml，摇勻，滤过，取滤液lml，加亚 硝基铁氰化钠试液Iml与氢氧化钠试液lml，摇勻，放置约2分钟，溶液初显橄榄绿色， 渐变为墨绿色。(2)取本品，研细，称取0.5g，加热水10ml，强力振摇一分钟，即产生持续泡 沫，在10分钟内不消失。(3)取本品细粉0.5g，加甲醇15ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至约 2ml,作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对 照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版二部附录VB)试验，吸取上述两种溶液 各5 10 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以丙酮-甲 苯乙酸乙酯浓氨水=3 2 1 0.1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋 钾试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。(4)取鉴别3中供试品溶液0.5ml，稀释至5ml，作为供试品溶液；另取盐酸小檗 碱对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国 药典2005年版二部附录VB)试验，吸取上述两种溶液各1 3μ1，分别点于同一以羧甲 基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯丁酮甲酸水=10 6 1 1 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照 品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。三、检查项的研究检查应符合片剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版二部附录IA)。四、含量测定的研究呋喃唑酮(避光操作)取本品10片，除去包衣，称重，研细，精密称取适量(约 相当于呋喃唑酮15mg)置200ml量瓶中，加N，N- 二甲基甲酰胺30ml溶解，加水稀释 至刻度，摇勻，滤过，精密量取续滤液5ml至50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇勻， 作为供试品溶液。另精密称取呋喃唑酮对照品15mg同法配制，作为对照品溶液。取上 述两种溶液，照分光光度法(中国药典2005年版二部附录IV A)，在367nm和438nm处 分别测定吸收度，求出ΔΑ，计算呋喃唑酮的含量。标示量％=(WR · ΔAX · Ρ/31.5XWX · ΔAR) X 100%式中WR为对照品的称量(mg)；Δ AR为对照品的吸收度差值(Δ AR2- Δ ARl)；WX为供试品的称重(mg)；Δ AX为供试品的吸收度差值(Δ ΑΧ2- Δ AXl)；P为平均片重(mg/片)；31.5为呋喃唑酮的标示量(mg/片)；黄连素照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-乙腈-0.02mol/l磷酸水溶液[10 27 63]为流动相，检测波长为350nm，理论板数按盐酸 小檗碱峰计算应不低于2000。测定法取本品10片，研细，精密称取适量(约相当于盐酸小檗碱IOmg)，置 IOOml容量瓶中，加流动相约80ml，超声处理45分钟(250W 30kHz)，放冷，用流动相 稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，精密量取10 μ 1注入液相色谱仪，记录色谱图；另 精密称取盐酸小檗碱对照品适量，用流动相溶解并定量稀释制成每Iml中含盐酸小檗碱 O.lmg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。以上实验研究结果表明，本发明的方法合理、可行，是控制呋喃苦参黄连素片 质量较好的方法。本发明的有益效果与现有技术相比，本发明建立了呋喃苦参黄连素片的质量 检测方法，对呋喃苦参黄连素片的性状、鉴别、检查和含量测定进行了研究和筛选，所 采用的质量检测方法科学合理，准确度高，重现性好，能全面有效地控制呋喃苦参黄连 素片的质量，达到了有效控制药物质量的目的，从而确保了该制剂的临床疗效。下面结合对本发明作进一步的说明。

本发明公开了一种呋喃苦参黄连素片的质量检测方法，该质量检测方法主要包括性状、鉴别、检查、含量测定，其中性状为糖衣片或薄膜衣片，除去糖衣或薄膜衣后显黄色，味苦；含量测定是分别照分光光度法和照高效液相色谱法对制剂中呋喃唑酮和黄连素的含量测定。本发明所采用的质量检测方法科学合理，准确度高，重现性好，能全面有效地控制呋喃苦参黄连素片的质量，从而确保了该制剂的临床疗效。