专利名称：一种复合微生物肥料及其制备方法我国是一个农业大国，肥料在我国粮食生产中占有非常重要的地位。然而，在肥料的使用过程中存在一些不合理的因素，使得土壤肥力下降，肥料利用率降低；土壤结构遭到破坏，造成土壤板结、保水保肥能力下降，严重影响了农作物的产量和质量。 随着我国农业的发展，桔杆、粪便等废弃物的排放量也随之提高，这些废弃物得不到很好的利用，秸杆焚烧现象有增无减，大量的畜、禽粪便弃用，成为严重的污染源，解决这些有机废弃物的出路，保护环境，是当前急需解决的问题。另外，农作物正常生长，不仅需要足够数量的各种养分，而且各种养分要有适宜的比例，忽视了任何一个方面，都会引起作物养分失调。因此提供一种营养全面，各养分适当的肥料是目前急需解决的问题。中国专利文献CN101928186A (申请号201010115928. 6)公开了一种防治作物病虫害的复合微生物肥料，含有复合微生物菌剂，由以下原料按质量份配合而成；复合微生物肥料菌剂10 35份；复合微生物农药菌剂3 15份；杀虫增效剂I 5份；植物生长调节齐U I 5份；草炭20 60份；膨化鸡粪5 15份；无机肥料5 50份；粘合剂I 3份；所述复合微生物肥料菌剂由巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌配制而成；所述复合微生物农药菌剂由苏云金芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌按混合，再添加过碳酸钠型固态增氧剂混合发酵后用草炭吸附而成。上述肥料通过添加微生物农药使其具有防病虫的作用，但肥效和土壤改良效果一般。
本发明针对现有技术的不足，提供一种复合微生物肥料及其制备方法与应用。一种复合微生物肥料，由以下原料混合制得，均为重量份数酵母发酵粉渣200 500份，有机肥200 500份，尿素50 300份，K2S045(T200份，NH4H2P045(T200份，粘土 30 50份，复合微生物菌剂10 20份；所述的复合微生物菌剂是由胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)CICC23640、巨大芽抱杆菌(Bacillus megaterium) CICC21694、腊状芽抱杆菌(Bacilluscereus) CICC21687、苏云金芽抱杆菌(Bacillus thuringiensis) CICC20565、揭球固氣菌(Azotobacter chroococcum) ACCCl1104、粉状毕赤酵母菌(Pichia farinosa) ACCC20025、细黄链霉菌(Streptomyces microflavus) ACCC41134 经发酵制得。根据本发明优选的，上述复合微生物菌剂每克含有胶冻样芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus)CICC23640 活菌数 6 18 X IO8 个、巨大芽抱杆菌(Bacillus megaterium)CICC21694活菌数5 15X IO8个、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)CICC21687活菌数6 18X IO8 个、苏云金芽抱杆菌(Bacillus thuringiensis) CICC20565 活菌数 5 15X IO8个、揭球固氣菌(Azotobacter chroococcum) ACCCl1104活菌数3 9X IO8个、粉状毕赤酵母菌(Pichia farinosa) ACCC20025 活菌数 I 3X IO8 个、细黄链霉菌(Streptomycesmicrof lavus) ACCC41134 抱子数 3 9X IO8 个。根据本发明优选的，上述有机肥可将动物粪便和作物秸杆按现有技术进行堆肥发酵，也可按如下方法制备将2(T40重量份的作物秸杆粉和6(T80重量份的动物粪便混合均匀，调节pH6. 0 7. 0，加水调节含水率至40 60wt%，堆肥，待堆内温度达到5(T70°C时，发酵20 40天，然后烘干、粉碎，即得。·上述细黄链霉菌(Streptomyces microf lavus) ACCC41134、粉状毕赤酵母菌(Pichia farinosa)ACCC20025 和褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)ACCCl1104 均购自中国农业微生物菌种保藏管理中心。上述胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus) CICC23640、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium) CICC21694、腊状芽抱杆菌(Bacillus cereus) CICC21687 和苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CICC20565均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。酵母发酵粉渣是酵母生产中剩余的残渣，可通过市场购买。优选的，酵母发酵粉渣中有机质含量45-55wt%，钾含量8-15wt%。上述复合微生物肥料的制备方法，步骤如下(I)将胶冻样芽孢杆菌CICC23640、巨大芽孢杆菌CICC21694、蜡状芽孢杆菌CICC21687和苏云金芽孢杆菌CICC20565分别接种于液体种子培养基，均在30 37°C条件下液体培养18 24h，然后按l(T20wt%的接种量接种于液体发酵培养基中，在30 37°C培养:T5天，用草炭吸附，35 45 °C烘干，粉碎，过筛；分别制得含有胶冻样芽孢杆菌CICC23640活菌数3 8X IO9个/g的菌剂A、含有巨大芽孢杆菌CICC21694活菌数3 8X IO9个/g的菌剂B、蜡状芽孢杆菌CICC21687活菌数3 8X IO9个/g的菌剂C和苏云金芽孢杆菌CICC20565活菌数3 8X IO9个/g的菌剂D ;(2)将褐球固氮菌ACCC11104接种于液体种子培养基中，在25 30°C条件下液体培养18 24h，然后按l(T20wt%的接种量将褐球固氮菌接种于液体发酵培养基中，在25 30°C培养3飞天，用草炭吸附，35 45°C烘干，粉碎，过筛，制得含有褐球固氮菌ACCCl1104活菌数I 5X IO9个/g的菌剂E ;(3)将粉状毕赤酵母菌ACCC20025接种于液体种子培养基中，的25 30°C条件下液体培养48 72h，然后按l(T20wt%的接种量将粉状毕赤酵母菌接种于液体发酵培养基中，在25 30°C培养3飞天，用草炭吸附，35 45°C烘干，粉碎，过筛，制得含有粉状毕赤酵母菌ACCC20025活菌数I 5X IO9个/g的菌剂F ；(4)将细黄链霉菌ACCC41134接种于固体培养基，在25 30°C条件下培养48 72h，加入无菌水调整孢子浓度至IO8个/mL，然后按l(T20wt%的接种量接种于液体发酵培养基中，在25 30°C培养5 7天，用草炭吸附，35^45V烘干，粉碎，过筛，制得含有细黄链霉菌ACCC41134孢子数I 5X109个/g的菌剂G ;(5)将步骤(I) (4)制得的菌剂A、菌剂B、菌剂C、菌剂D、菌剂E、菌剂F和菌剂G按重量比广3 T3 T3 T3 T3 T3 T3的比例混合，制得复合微生物菌剂；(6)将酵母发酵粉渣、有机肥、尿素、K2S04、NH4H2P04、粘土与步骤(5)制得的复合微生物菌剂按比例混合，制得复合微生物肥料。根据本发明优选的，所述步骤(I)中的液体种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得酵母膏5g,蛋白胨 10g, NaCllOg,加蒸懼水至 IOOOmL, pH7. 0 8. 0 ；根据本发明优选的，所述步骤(I)中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得玉米面15 25g，豆浆 30 40mL，葡萄糖 3 8g，(NH4)2SO4 3 7g，KH2PO4 0. I 0. 5g，MnSO4O. ro. 3g, MgSO4 7H20 0. I 0. 3g，加水至 800 IOOOmL, pH7. 0 8. O。 根据本发明优选的，所述步骤(2)中的液体种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得葡萄糖20g, K2HPO4 lg, MgSO4 7H20 0. 2g, FeSO4 7H20 0. 25g, Na2MoO4 2H20 0. 5g,CaCO3O. 5g，加水至 IOOOmL, pH7. 0 7. 5。根据本发明优选的，所述步骤(2)中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得蔗糖15 20g，MgSO4 7H20 0. 2 0. 5g, K2HPO4 0. 2 0. 5g, NaCl 0. 2 0. 5g,CaCl2 *2H200. 05 0. lg，酵母膏2 5g，微量元素液2 3滴，加水至800 IOOOmL, pH7. 0 7. 5 ；上述微量元素液组分如下Na2MoO4 2H20 5g, H3BO3 5g，蒸馏水定容至 1000mL。根据本发明优选的，所述步骤(3)中的液体种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得5。Be 麦芽汁 IOOOmL ；根据本发明优选的，所述步骤(3)中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得鹿糖30 50g,可溶性淀粉I 3g,酵母粉30 50g,蛋白胨8 15g, NaCl 3 8g,pH6. 5 7. O。根据本发明优选的，所述步骤(4)中的固体培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得马铃薯汁IOOOmL,葡萄糖20g，琼脂20g ；根据本发明优选的，所述步骤(4)中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得棉籽饼2(T40g，玉米面l(Tl5g，可溶性淀粉8 12g，蔗糖:T5g，(NH4)2SO4 I 2g，NaC12 4g，CaCO3 3 5 克，K2HPO4 0. 3 0. 5g，加水至 800 1000mL，pH7. 0 8. O。本发明所述复合微生物肥料中有机质含量达2(T40%，N、P、K总含量达6 25%，有效活菌数达0. 3^0. 9亿个/g。本发明产品可作为底肥，施用量为5(Tl00kg/亩，整地时施入土壤中。有益效果I、本发明在肥料中添加了具有固氮、解磷、解钾作用的多种微生物，可以增加土壤的含氮量，提高了化学肥料的利用率，有利于改良土壤结构，提高作物产量和品质；同时，月巴料中的微生物能够产生多种代谢产物，这些代谢产物可以有效的抗病抗虫害；2、本发明采用酵母发酵粉渣作为原料，酵母发酵粉渣是酵母发酵后的残渣，有机质含量达50%以上，钾含量达10%以上，另外还含有氮、氨基酸、维生素、菌体蛋白等营养成份，将其添加到肥料中，即为肥料提供了丰富的营养成分，又实现了废弃物的合理利用；同时还添加动物粪便和植物秸杆，有利于营养成分的均衡，提高土壤肥力；3、杀虫、施肥一次完成，即减少了虫害的发生，又提高了作物的品质和产量；4、本发明制备工艺简单，生产过程不需要大型设备，生产成本低，对环境污染低。具体实施方法下面结合实施例对本发明做进一步阐述，但本发 明所保护范围不限于此。实施例中所述细黄链霉菌(Streptomyces microflavus) ACCC41134、粉状毕赤酵母菌(Pichia farinosa)ACCC20025 和褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)ACCCl1104均购自中国农业微生物菌种保藏管理中心。实施例中所述胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus) CICC23640、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium) CICC21694、腊状芽抱杆菌(Bacillus cereus) CICC21687 和苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CICC20565均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。实施例中所述酵母发酵粉渣购自安琪酵母公司，有机质含量约50wt%，钾含量约10wt%o实施例中所述培养基的原料均为本领域常用市售产品，配制方法按本领域现有技术制备；实施例中所用其他化学试剂均为常用市售产品。实施例中所述有机肥按如下方法制备将30重量份的作物秸杆粉和70重量份的猪粪便混合均匀，调节pH7. 0，加水调节含水率至60wt%，堆肥，待堆内温度达到60°C时，发酵30天，然后烘干、粉碎至2mm，即得。实施例I一种复合微生物肥料的制备方法，步骤如下(I)将胶冻样芽孢杆菌CICC23640、巨大芽孢杆菌CICC21694、蜡状芽孢杆菌CICC21687和苏云金芽孢杆菌CICC20565分别接种于液体种子培养基，在30°C条件下液体培养24h，然后按10wt%的接种量接种于液体发酵培养基中，在30°C培养3天，用草炭吸附，45 °C烘干，粉碎，过筛；分别制得含有胶冻样芽孢杆菌CICC23640活菌数6 X IO9个/g的菌剂A、含有巨大芽孢杆菌CICC21694活菌数5 X IO9个/g的菌剂B、蜡状芽孢杆菌CICC21687活菌数6 X IO9个/g的菌剂C和苏云金芽孢杆菌CICC20565活菌数5 X IO9个/g的菌剂D ；所述步骤(I)中的液体种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得酵母膏5g,蛋白胨 10g, NaCllOg,加蒸懼水至 IOOOmL, pH7. 0 ；所述步骤(I)中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得玉米面2Og,豆衆 40mL,葡萄糖 5g，(NH4)2SO4 5g, KH2PO4 0. 3g, MnSO4 0. 2g,MgSO4 7H20 0. 2g，加水至 IOOOmL, pH7. 0。(2)将褐球固氮菌ACCCl1104接种于液体种子培养基中，在28°C条件下液体培养24h，然后按10wt%的接种量将褐球固氮菌接种于液体发酵培养基中，在28°C培养3天，用草炭吸附，45°C烘干，粉碎，过筛，制得含有褐球固氮菌ACCCl 1104活菌数3 X IO9个/g的菌剂E ；根据本发明优选的，所述步骤(2)中的液体种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得葡萄糖20g, K2HPO4 lg, MgSO4 7H20 0. 2g, FeSO4 7H20 0. 25g, Na2MoO4 2H20 0. 5g,CaCO3 0. 5g，加水至 IOOOmL, pH7. 2。根据本发明优选的，所述步骤(2)中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得蔗糖15g, MgSO4 7H20 0. 2g, K2HPO4 0. 2g, NaCl 0. 2g, CaCl2 2H20 0. 05g，酵母膏2g，微量元素液2滴，加水至IOOOmL, pH7. 2 ；
上述微量元素液组分如下Na2MoO4 2H20 5g, H3BO3 5g，蒸馏水定容至 1000mL。(3)将粉状毕赤酵母菌ACCC20025接种于液体种子培养基中，的28°C条件下液体培养48h，然后按15wt%的接种量将粉状毕赤酵母菌接种于液体发酵培养基中，在30°C培养4天，用草炭吸附，45°C烘干，粉碎，过筛，制得含有粉状毕赤酵母菌ACCC20025活菌数IO9个/g的菌剂F ；根据本发明优选的，所述步骤(3)中的液体种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得5。B6 麦芽汁 IOOOmL;根据本发明优选的，所述步骤(3)中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得鹿糖40g,可溶性淀粉2g,酵母粉40g,蛋白胨10g, NaC15g, pH7. O。(4)将细黄链霉菌ACCC41134接种于固体培养基，在28°C条件下培养72h，加入无菌水调整孢子浓度至IO8个/mL，然后按15wt%的接种量接种于液体发酵培养基中，在28°C培养7天，用草炭吸附，45°C烘干，粉碎，过筛。制得含有细黄链霉菌ACCC41134孢子数3 X IO9个/g的菌剂G。根据本发明优选的，所述步骤(4)中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得棉籽饼30g,玉米面 IOg,可溶性淀粉 IOg,鹿糖 5g, (NH4)2SO4 Ig7NaCl 3g, CaCO3 5克，K2HPO4 0. 4g，加水至 IOOOmL, pH7. O。(5)将步骤(I广(4)制得的菌剂A、菌剂B、菌剂C、菌剂D、菌剂E、菌剂F和菌剂G按重量比I :1:1:2:2:2: I的比例混合，制得复合微生物菌剂，总菌数为3. 8 X IO9个/g ;(6 )将酵母发酵粉渣 250kg、有机肥 250kg、尿素 250kg、K2SO4 100kg、NH4H2PO4100kg、粘土 50kg与步骤(4)制得的复合微生物菌剂20kg混合,将混合好的复合混料通过输送机输送到造粒机造粒，低温烘干即制得复合微生物肥料。所得复合微生物肥料中有机质含量大于20wt%，N、P、K总含量大于25wt%,有效活菌数大于0.7亿个/g。实施例2
如实施例I所述的制备方法，不同之处在于，步骤(5)中，将制得的菌剂A、菌剂B、菌剂C、菌剂D、菌剂E、菌剂F和菌剂G按重量比I :1:2:3:1:1: I的比例混合，制得复合微生物菌剂，总菌数为4. 5 X IO9个/g。实施例3将酵母发酵粉渣340kg、有机肥 200kg、尿素 200kg、K2SO4 100kg、NH4H2PO4 110kg、粘土 50kg与实施例2中制得的复合微生物菌剂15kg混合,将混合好的复合混料通过输送机输送到造粒机造粒，低温烘干即制得复合微生物肥料。 所得肥料有机质含量25wt%’ N、P、K总含量大于25wt%’有效活菌数大于0. 6亿个
/g°实施例4 如实施例I所述的制备方法，不同之处在于，步骤(5)中，将酵母发酵粉渣250kg、有机肥320kg、尿素200kg、K2S04 1 00kg、NH4H2PO4 80kg、粘土 50kg与步骤(4)制得的复合微生物菌剂15kg混合，将混合好的复合混料通过输送机输送到造粒机造粒，低温烘干即制得复合微生物肥料。所得肥料有机质含量大于25wt%’ N、P、K总含量大于20wt%，有效活菌大于0. 5亿个/g。实施例5复合微生物肥料的应用采用随机区组法，小区面积100m2，设3个重复，以实施例I和实施例3中的复合微生物肥料作为底肥施用50kg/亩。分别为处理组I、处理组2。以施用专利CN101928186A中实施例I的肥料作为底肥施用50kg/亩，为处理组3。以不施用肥料区作为对照区。采用棋盘式取样方法，记载每小区虫害株数，按下列公式计算防治效果防治效果(％)=(对照区虫害株数-处理区虫害株数)/对照区虫害株数X 100%上述组别，除所施底肥不同，后期追肥及管理均相同。检测结果表I不同处理对白菜产量的影响


本发明涉及一种复合微生物肥料及其制备方法，由以下原料混合制得酵母发酵粉渣，有机肥，尿素，K2SO4，NH4H2PO4，粘土，复合微生物菌剂；所述的复合微生物菌剂是由胶冻样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、褐球固氮菌、粉状毕赤酵母菌、细黄链霉菌经发酵制得。本发明具有固氮、解磷、解钾作用的多种微生物，可以增加土壤的含氮量，提高了化学肥料的利用率，有利于改良土壤结构，提高作物产量和品质；同时，肥料中的微生物产能够生多种代谢产物，这些代谢产物可以有效的抗病抗虫害。