专利名称：一种琼脂糖凝胶电泳产物回收方法一般在各个分子生物学的实验室里，从琼脂糖凝胶中回收DNA，是一种常规的实验操作。是进行基因克隆、测序和转基因工作的基础。例如可收集特定酶切片断用于克隆或制备探针，回收PCR产物用于再次鉴定等。其从早期的凝胶电泳片断回收要花费1-2个小时，到各大品牌纷纷推出了多种不同用途，不同价钱的快速凝胶回收试剂盒，一下子将胶回收的时间缩短到10多分钟，操作也大大简化。回收实验中两个最重要的技术指标是纯度和回收率前者未达标时会严重影响以后的酶切、连接、标记等酶参与的反应；后者不理想时往往会大大增加前期的工作量。在现有的PCR产物回收技术中大概有以下几种。即试剂盒法、牙签法、琼脂糖凝胶电泳法、沉淀法、挤压法、冻融法这样几种。然而，实际上产物凝胶回收这种看似简单的操作的过程中，仍存在着一个被大家忽略，但是却会直接影响回收产物数量和质量乃至影响实验人员健康的细微之处。这就是“如何切胶”，无论采取哪种方法，切胶都是避不开的必经之路，并且，切胶完成的好坏将直接决定回收产物的纯度和回收率。目前切胶的方法主要是手工切胶和利用专业的切胶仪进行切胶。手工切胶的过程是当溴酚蓝迁移至足够距离时(至少2cm以上)，在长波紫外灯下观察，而后用清洗过的刀片在目的片段前切下与目的片段同长，宽度适当(一般2cm左右)的胶块。完成此看似简单的操作过程有两个途径，一是将胶移离紫外灯的照射，凭观察后的记忆盲切，二是直接在紫外灯的照射下，进行切胶。还有一种切胶的方法则是利用现有的专业紫外切胶仪来完成切胶工作。但是手工切胶技术存在诸多不足一、紫外灯的照射，凭观察后的记忆盲切。这种方法的缺点是显而易见的1.在将胶移离紫外灯这个操作过程中，要多次的接触胶，不仅在此过程中容易造成胶的碎裂损伤，并且增加了污染DNA产物的几率，更加重要的是EB染料的有害性，这种有害性表现在三个方面接触致癌性，紫外观测的诱变性，以及麻烦的后处理。但是要说到EB 的替代品，好像又都不是那么合心意，比如STOR类染料在紫外下不稳定，容易降解，一些像是GelRed之类的染料虽然毒性低，但是价格却不菲。2.移离紫外灯后凭之前观察的记忆进行盲切，虽然可以避免上诉方法所提及的缺点，但是致命的却是很容易造成产物回收的遗漏，不准确。直接影响回收产物的数量和质量。二、直接在紫外灯的照射下进行切胶方法的缺点主要有1.此法虽然克服了上诉方法的缺点，但是实验人员在没有紫外防护的情况下直接将手甚至更多部位暴露在紫外灯下，由于紫外线灯放射的紫外线能量较大，如果没有防护措施，极易损害眼睛和皮肤，可加速皮肤老化及增加导致皮肤癌的机会。经过查证可知，人3的眼睛若在紫外线照射2分钟以上，就有可能因超过人体安全界限而受到伤害；如果直接照射15分钟后，会使眼角膜损伤。长期接触强紫外线会引发失明。2.此种方法操作时，势必要将胶置于紫外光下更长的时间，那么就增加了紫外激发时对核酸样品造成的诱变和损伤，以至于克隆效率低下，甚至表达蛋白错误和突变，严重影响后续的实验。另外，使用切胶仪也存在许多不足之处1.大部分专业切胶仪价格不菲，这在其普及推广上有很大的局限性；2.大部分切胶仪均结构复杂，需要专业的人员安装维护，其安装维护费用不菲；3.对实验室的安装条件有一定的要求，不是每个实验室都可配备的设备；4.体积巨大不便携带，操作相对复杂。因此，实验人员亟需要一种既能够保护自身安全，又能搞提高试验效率，且价格低廉的琼脂糖凝胶电泳回收装置，但是关于琼脂糖凝胶电泳产物回收装置及其使用方法目前还未见报道。
为了克服上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种琼脂糖凝胶电泳产物回收方法，其能够避免实验人员多次触碰胶体，降低DNA污染的几率，提高DNA回收的效率， 具有结构简单，使用方便的特点。为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是一种琼脂糖凝胶电泳产物回收装置，包括标度底板、活动标尺和两侧挡板，所述的标度底板上设有刻度。所述的活动标尺上设有刻度。所述的标度底板上的刻度为镶嵌在其内部的黑色刻度标尺。所述的活动标尺上的刻度为镶嵌在其内部的黑色刻度标尺。所述的两侧挡板上设有凹槽。所述的活动标尺两端设有支架，支架上设有凸起，凸起与挡板上的凹槽吻合，活动标尺镶嵌在两侧挡板的凹槽中。所述的琼脂糖凝胶电泳产物回收装置均采用透明的有机塑料制成。基于上述装置，一种琼脂糖凝胶电泳产物回收方法，它包括以下步骤(a)将电泳后的琼脂糖凝胶从电泳槽中取出，然后将其放置在琼脂糖凝胶电泳产物回收装置上，将胶的一侧紧靠在标度底板上；(b)调整活动标尺，使其靠近目测到的目的条带；(c)将调整好的琼脂糖凝胶电泳产物回收装置放入紫外箱中，调整位置；(d)关上紫外箱门，打开紫外灯，观察条带；(e)根据所观察的目的条带，利用琼脂糖凝胶电泳产物回收装置上的刻度标尺，对目的条带精确定位，并且记下其刻度坐标；(f)关闭紫外灯，将琼脂糖凝胶电泳产物回收装置取出，根据之前记下的刻度坐标，在脱离紫外灯的条件下切胶。本发明与现有技术相比，具有以下优点1、本发明避免实验人员多次触碰胶体，降低DNA污染的几率，提高DNA回收的效率；2、本发明减少了胶体置于紫外光下的时间，减少了紫外激发时对核酸样品造成的诱变和损伤进而影响后续的实验的风险；3、本发明降低了实验人员接触EB的次数，从而起到保护实验人员的目的；4、本发明在非紫外的可见光下操作，实验操作人员更安全，真正杜绝了紫外线对实验人员的伤害；5、本发明设计独具匠心，制作工艺不复杂，小巧便携，使用简单方便，价格低廉。 图1是本发明一种琼脂糖凝胶电泳产物回收装置结构示意图。
(a)将电泳后的琼脂糖凝胶从电泳槽中取出，然后将其放置在本发明琼脂糖凝胶电泳产物回收装置上，将凝胶的一侧紧靠在标度底板1上；(b)调整活动标尺2，使其靠近目测到的目的条带，以便精确的定位；(c)将调整好的琼脂糖凝胶电泳产物回收装置放入紫外箱中，调整位置；(d)关上紫外箱门，打开紫外灯，观察条带；(e)根据所观察的目的条带，利用琼脂糖凝胶电泳产物回收装置上的刻度标尺，对目的条带精确定位，并且记下其刻度坐标；(f)关闭紫外灯，将琼脂糖凝胶电泳产物回收装置取出，根据之前记下的刻度坐标，在脱离紫外灯的条件下切胶。本发明在使用过程中，利用标度底板1上添加的黑色刻度线，可以实现目的条带的精确定位，在切胶的时候，可以有效提高凝胶回收的质量和数量，尽管在凝胶下面铺垫有琼脂糖凝胶电泳产物回收装置，但是由于琼脂糖凝胶电泳产物回收装置的材质以及其颜色，毫不影响对凝胶的分析观察；本发明可以减少实验人员对凝胶的接触次数，一方面可以减少实验人员对含有EB胶的接触次数，另一方面，也可以减少对产物DNA的污染，以免影响后续试验；本发明还可以有效减少实验人员照射紫外灯的时间，防止紫外线照射对实验人员的伤害；另外，本发明的制备使用的材料为透明有机塑料，材质普遍，价格低廉，工艺不复杂，适合广大的实验室推广，因此，本发明具有广阔的市场前景，非常适合于各个实验试剂耗材开发公司大批量生产销售，可以迅速的得到推广，带来一定的社会经济效益。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。


本发明为一种琼脂糖凝胶电泳产物回收方法，避免了实验人员多次触碰胶体，降低DNA污染的几率，提高DNA回收的效率；减少了胶体置于紫外光下的时间，减少了紫外激发时对核酸样品造成的诱变和损伤进而影响后续的实验的风险；本发明设计独具匠心，制作工艺不复杂，小巧便携，使用简单方便，价格低廉。