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一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置制作方法

  • 专利名称
    一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置制作方法
  • 发明者
    刘权, 李兴起
  • 公开日
    2012年6月13日
  • 申请日期
    2011年10月18日
  • 优先权日
    2011年10月18日
  • 申请人
    黑龙江八一农垦大学
  • 文档编号
    C12M1/00GK202272869SQ20112039616
  • 关键字
  • 权利要求
    1.一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置,其特征在于该装置包括内管(1)和套管(2),套管(2)套装在内管(1)上,并且内管(1)的管沿架在套管(2)的管沿上,套管(2) 和内管(1)之间有容纳琼脂糖凝胶(4)的空腔2.根据权利要求1所述的一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置,其特征在于所述的内管(1)为锥形3.根据权利要求1所述的一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置,其特征在于所述的套管(2)分为管身、管底两部分,管底套装在管身上,并与管身螺纹连接4.根据权利要求1所述的一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置,其特征在于所述的内管(1)的管沿上开有进液口(3),进液口(3)与空腔相通
  • 技术领域
    一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置技术领域[0001]本实用新型涉及的是生物实验用品,具体的是一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置
  • 背景技术
  • 专利摘要
    本实用新型涉及的是一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置,包括内管(1)和套管(2),套管(2)套装在内管(1)上,并且内管(1)的管沿架在套管(2)的管沿上,套管(2)和内管(1)之间有容纳琼脂糖凝胶的空腔。本实用新型根据质粒分子不能通过琼脂糖凝胶交联所形成的孔径的原理设计而成,将质粒溶液放置到琼脂糖凝胶一侧的锥形凹槽内,由于盐离子可以进入琼脂糖凝胶交联形成的孔径,而质粒由于分子量大,无法通过琼脂糖凝胶交联形成的孔径,从而将质粒溶液中的盐离子脱去;本实用新型结构简单,质粒脱盐效果好。
  • 专利详情
  • 全文pdf
  • 权力要求
  • 说明书
  • 法律状态
专利名称:一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置的制作方法[0002]质粒的转化是指将质粒或以质粒为载体构建的重组子导入细菌的过程。其中,电转化法是质粒转化方法的一种。电转化法是利用瞬间高压在细胞上打孔,同时,DNA在电场力的作用下进入细胞,随后细胞复苏和弥合,从而实现质粒DNA的物理转移。为了避免电击时出现击穿,即产生电流,质粒溶液中应当尽量少的含有导电离子。然而,质粒通过酶切、与插入片段的连接后,体系为连接体系的缓冲液,离子浓度大,需要进行脱盐处理。[0003]目前,关于质粒溶液的脱盐主要有两种方法,一种是透析袋法,但透析袋法具有增大体系体积、粘附DNA的缺点,限制了其使用;第二种方法是质粒溶液经过琼脂糖凝胶电泳以后,对质粒进行切胶回收,纯化以后进行下一步操作,但切胶的过程容易造成质粒大片段的断裂,纯化的过程又会造成质粒的损失,不方便后续步骤的操作。因此,需要发明一种在不损伤质粒的前提下,对质粒溶液进行脱盐的装置。发明内容[0004]本实用新型的发明目的是针对上述问题提供一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置,解决目前质粒脱盐过程中容易对质粒造成断裂损伤,并且脱盐不彻底的问题。[0005]本实用新型通过以下技术方案来实现一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置,该装置包括内管和套管,套管套装在内管上,并且内管的管沿架在套管的管沿上,套管和内管之间有容纳琼脂糖凝胶的空腔。[0006]内管为锥形。[0007]套管分为管身、管底两部分,管底套装在管身上,并与管身螺纹连接。[0008]内管的管沿上开有进液口,进液口与空腔相通。[0009]采用上述技术方案的积极效果本实用新型根据质粒分子不能通过琼脂糖凝胶交联所形成的孔径的原理设计而成,将质粒溶液放置到琼脂糖凝胶一侧的锥形凹槽内,由于盐离子可以进入琼脂糖凝胶交联形成的孔径,而质粒由于分子量大,无法通过琼脂糖凝胶交联形成的孔径,从而将质粒溶液中的盐离子脱去;本实用新型还可以在琼脂糖凝胶的另一侧添加超纯水,从而在琼脂糖凝胶的两侧形成浓度差,在浓度差的驱使下,由琼脂糖凝胶扩散到超纯水中,一段时间后将会把质粒溶液中的盐离子完全置换出来;本实用新型结构简单,质粒脱盐效果好。[0010]图1是本实用新型的剖视图;[0011]图2是本实用新型的使用状态示意图。[0012]图中1内管、2套管、3进液口、4琼脂糖凝胶、5质粒溶液、6超纯水。[0013]以下结合附图对本实用新型作进一步说明[0014]图1是本实用新型的剖视图,如图所示,一种使用琼脂糖凝胶进行质粒脱盐的装置,该装置包括内管1和套管2,套管2套装在内管1上,并且内管1的管沿架在套管2的管沿上,套管2和内管1之间有容纳琼脂糖凝胶4的空腔。因为待脱盐的质粒溶液5体积很小,为了便于盛放体积较小的质粒溶液5,使凝固后的琼脂糖凝胶4形成一个锥形凹槽,将内管1设置为锥形。因为琼脂糖凝胶4中的水分毕竟有限,为了使脱盐效果更好,可将套管 2分为管身、管底两部分,管底套装在管身上,并与管身螺纹连接。这样管底可以取下,注入超纯水6后重新套装在管身上,目的是在琼脂糖凝胶4两侧形成浓度差。为了使操作时更加方便,在内管1的管沿上开有进液口 3,进液口 3与空腔相通,这样用移液器就可以将琼脂糖凝胶溶液通过进液口 3注入空腔。[0015]图2是本实用新型的使用状态示意图,如图所示,使用时,将内管1放置在套管2 内部,内管1的管沿架在套管2的管沿上。配制浓度为0. 8 1. 2%的琼脂糖溶液,即取 0. 8 1. 2g的琼脂糖粉末,倒入IOOg蒸馏水,加热熔化后,将熔化后的琼脂糖凝胶溶液用枪头通过进液口 3注入空腔,室温静置,待琼脂糖凝胶4凝固以后,将内管1拔出,这样琼脂糖凝胶4将会形成一个锥形凹槽。然后将管底拧下,注入一定量的超纯水6,再将管底套装在管身上。轻轻上旋管底,使超纯水6的液面完全与琼脂糖凝胶4的底面相接触即可。将待脱盐的质粒溶液5加入到琼脂糖凝胶4所形成的凹槽中,4°C静置1 池,用移液器吸出质粒溶液5即可。静置的过程中,质粒溶液5中的盐离子会与琼脂糖凝胶4中的水分发生交换,同时,位于琼脂糖凝胶4另一面的超纯水6几乎没有离子,这样会在琼脂糖凝胶4的两侧形成浓度差,使得盐离子在浓度差的作用下,由琼脂糖凝胶4扩散到超纯水6中,一段时间后将会把质粒溶液5中的盐离子完全置换出来,而质粒载体一般大小都在4 51Λ,根本无法通过浓度为0. 8 1. 2%的琼脂糖凝胶4形成的孔径。整个过程对质粒不会造成任何损伤,保证了质粒的完整性。


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