增强化疗疗效及治疗实体瘤的方法

J·J·小吉邦斯, G·杜卡特, J·卢卡斯, L·A·斯派克

2003年1月15日

2000年9月12日

1999年9月15日

惠氏公司

A61K31/407GK1391484SQ00812921

化疗 疗效 实体 治疗 增强

1.一种治疗哺乳动物实体瘤的方法，该方法包括对所述哺乳动物以有效量的一种生物反应调节剂及一种化学治疗剂的组合进行给药2.一种生物反应调节剂和一种化疗剂在制备治疗哺乳动物实体瘤药剂中的用途3.权利要求1或2所述的方法或用途，其中生物反应调节剂是细胞因子诱导剂4.权利要求3所述的方法或用途，其中细胞因子诱导剂是式I化合物，其结构是 其中，R1选自氢、取代或未取代(C1-C20)烷基、取代或未取代环烷基、取代或未取代环烷基烷基、乙烯基、乙炔基、取代或未取代氨基、取代或未取代酰氨基、取代或未取代芳基、取代或未取代芳烷基、取代或未取代芳氧基、取代或未取代烷氧基芳基、取代或未取代烷氧芳烷基及取代或未取代的含1-4个杂原子的单环或双环杂环基，杂原子选自氮、硫和氧原子；Ra和R3独立地选自氢、取代或未取代的(C1-C6)烷基、取代或未取代的烷氧基烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的环烷基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的烷氧芳烷基、乙烯基、乙炔基及取代或未取代的含1-4个杂原子的单环或双环杂环基，杂原子选自氮、硫和氧原子，对于R3，在所述杂环中杂原子不直接与-CH-X-部分的-CH-基键合；R2，Rb和Rc独立地选自羧基或被护羧基、羧基或被护羧基低级烷基和羧基酰胺；X是氧或氮；R4是H或氨基保护基；其中，上述取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、氨基、酰氨基、芳基、芳烷基、芳氧基、烷氧芳基、烷氧芳烷基和杂环基的取代基选自卤素、羟基、低级烷基、低级烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、氨基、单-或二-低级烷氨基、芳氨基、芳烷氨基、羧基、甲酰基、低级烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、低级烷基硫代基、芳基硫代基、芳烷基硫代基、芳基亚硫酰基、芳基亚硫酰基、芳烷基亚硫酰基、低级烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳烷基磺酰基及含1-4个选自氮、硫和氧的杂原子单环或双环杂环基；或其药物可接受的盐5.权利要求4所述的方法或用途，其中式I化合物是[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸或其药物可接受的盐6.权利要求1-5中任一项的方法或用途，其中所述化疗剂是微管剂或巨噬细胞活化剂7.权利要求6所述的方法或用途，其中，微管剂或巨噬细胞活化剂选自紫杉醇、docetaxel、长春新碱、长春碱、维诺利宾、阿霉素、doxirubicin、顺铂、卡铂、丝裂霉素C和博来霉素8.权利要求7所述的方法或用途，其中微管剂或巨噬细胞活化剂是紫杉醇和卡铂9.一种对需要进行化疗的哺乳动物的化疗增效的方法，该方法除了化疗方法外还包括用一种生物反应调节剂进行给药10.权利要求9所述的方法，其中的生物反应调节剂是细胞因子诱导剂11.权利要求10所述的方法，其中细胞因子诱导剂是式I化合物，结构为 其中，R1选自氢、取代或未取代(C1-C20)烷基、取代或未取代环烷基、取代或未取代环烷基烷基、乙烯基、乙炔基、取代或未取代氨基、取代或未取代酰氨基、取代或未取代芳基、取代或未取代芳烷基、取代或未取代芳氧基、取代或未取代烷氧基芳基、取代或未取代烷氧芳烷基及取代或未取代的含1-4个杂原子的单环或双环杂环基，杂原子选自氮、硫和氧原子；Ra和R3独立地选自氢、取代或未取代的(C1-C6)烷基、取代或未取代的烷氧基烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的环烷基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的烷氧芳烷基、乙烯基、乙炔基及取代或未取代的含1-4个杂原子的单环或双环杂环基，杂原子选自氮、硫和氧原子，对于R3，在所述杂环中杂原子不直接与-CH-X-部分的-CH-基键合；R2，Rb和Rc独立地选自羧基或被护羧基、羧基或被护羧基低级烷基和羧基酰胺；X是氧或氮；R4是H或氨基保护基；其中，上述取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、氨基、酰氨基、芳基、芳烷基、芳氧基、烷氧芳基、烷氧芳烷基和杂环基的取代基选自卤素、羟基、低级烷基、低级烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、氨基、单-或二-低级烷氨基、芳氨基、芳烷氨基、羧基、甲酰基、低级烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、低级烷基硫代基、芳基硫代基、芳烷基硫代基、芳基亚硫酰基、芳基亚硫酰基、芳烷基亚硫酰基、低级烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳烷基磺酰基及含1-4个选自氮、硫和氧的杂原子的单环或双环杂环基；或其药物可接受的盐12.权利要求11所述的方法，其中式I化合物是[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧-庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸或其药物可接受的盐13.权利要求9-12中任一项的方法，其中化疗剂是微管剂或巨噬细胞活化剂14.权利要求13所述的方法，其中微管剂或巨噬细胞活化剂选自紫杉醇、docetaxel、长春新碱、长春碱、维诺利宾、阿霉素、doxirubicin、顺铂、卡铂、丝裂霉素C和博来霉素15.权利要求14所述的方法，其中微管剂或巨噬细胞活化剂是紫杉醇和卡铂16.一种用于同时、分别或顺序给药的含生物反应调节剂和化疗剂作为复合制剂的产品在治疗实体瘤中的应用17.权利要求16所述的产品，其中生物反应调节剂是细胞因子诱导剂18.权利要求17所述的产品，其中细胞因子诱导剂是式I化合物，结构为 其中，R1选自氢、取代或未取代(C1-C20)烷基、取代或未取代环烷基、取代或未取代环烷基烷基、乙烯基、乙炔基、取代或未取代氨基、取代或未取代酰氨基、取代或未取代芳基、取代或未取代芳烷基、取代或未取代芳氧基、取代或未取代烷氧基芳基、取代或未取代烷氧芳烷基及取代或未取代的含1-4个杂原子的单环或双环杂环基，杂原子选自氮、硫和氧原子；Ra和R3独立地选自氢、取代或未取代的(C1-C6)烷基、取代或未取代的烷氧基烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的环烷基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的烷氧芳烷基、乙烯基、乙炔基及取代或未取代的含1-4个杂原子的单环或双环杂环基，杂原子选自氮、硫和氧原子，对于R3，在所述杂环中杂原子不直接与-CH-X-部分的-CH-基键合；R2，Rb和Rc独立选自羧基或被护羧基、羧基或被护羧基低级烷基和羧基酰胺；X是氧或氮；R4是H或氨基保护基；其中，上述取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、氨基、酰氨基、芳基、芳烷基、芳氧基、烷氧芳基、烷氧芳烷基和杂环基的取代基选自卤素、羟基、低级烷基、低级烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、氨基、单-或二-低级烷氨基、芳氨基、芳烷氨基、羧基、甲酰基、低级烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、低级烷基硫代基、芳基硫代基、芳烷基硫代基、芳基亚硫酰基、芳基亚硫酰基、芳烷基亚硫酰基、低级烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳烷基磺酰基及含1-4个杂原子的单环或双环杂环基，杂原子选自氮、硫和氧；或其药物可接受的盐19.权利要求18所述的产品，其中式I化合物是[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸或其药物可接受的盐20.权利要求16-19所述的产品，其中化疗剂是微管剂或巨噬细胞活化剂21.权利要求20所述的产品，其中微管剂或巨噬细胞活化剂选自紫杉醇、docetaxel、长春新碱、长春碱、维诺利宾、阿霉素、doxirubicin、顺铂、卡铂、丝裂霉素C和博来霉素22.权利要求20所述的产品，其中微管剂或巨噬细胞活化剂是紫杉醇和卡铂

本发明涉及一种生物反应调节剂和一种化疗剂的组合在化疗增效及治疗实体瘤方面的应用用于实体瘤的癌症化疗经典方法着重使用细胞毒性药物，这种药物是针对基本代谢过程(抗代谢物)或干扰多种代谢过程的一般毒素(烷化剂)抗生素类药物(阿霉素、米托蒽醌、丝裂霉素C等)针对于核酸的复制或整合，因此，一般来说，对细胞有毒性类似地，微管活性化合物(taxanes、长春碱类)针对细胞的基本结构成分，也表现出对细胞的毒性近年来的趋势是组合具有不同作用机理的药物，这提高了一些实体瘤的生物反应率和生存率，包括乳癌、前列腺癌和小细胞肺癌然而，大多数实体瘤显示了低的生物反应率，对生存无明显影这类癌包括非小细胞肺癌、头颈癌、胃癌、胰腺癌、子宫颈癌、黑色素瘤、肾上腺皮质瘤及软组织肉瘤等特别是对于这些实体瘤及一般的实体瘤，需要有新的治疗方法美国专利5,312,831(及EP 652228)公开了诱导细胞因子产生的氨基甲酸乙酯和尿素类药物，用于癌的化疗、放疗、骨髓移植或感染后恢复嗜中性粒细胞，用治疗癌症、AIDS、再生障碍性贫血、骨髓发育不良综合征、感染性疾病，以及用于增强免疫反应美国专利4,666,890公开了一种合成的三肽，已报道有免疫调节剂的作用，用作抗肿瘤剂优于作为化疗佐剂所报道的细胞壁成分及其合成类似物均为将经q-连接于赖氨酸(Lys)或二氨基庚二酸(A2pm)的D-谷氨酸(D-Glu)部分与其它主肽链或侧面相接两端的脂酰基合并为一体的肽治疗的定义是对所治疗的实体瘤提供缓解病情的治疗或抑制其生长，或根治为达到本发明所定义范围的目的，生物反应调节剂是可激活体内天然免疫系统的物质，典型地包括细胞因子诱导剂和免疫佐剂细胞因子诱导剂是诱导细胞因子产生的物质，包括细胞因子如IL-1，TNF；天然产物，如胞壁酰二肽、脂多糖类和β-葡聚糖；合成的细胞因子诱导剂，如公开在美国专利5,312,831和4,666,890中的物质，此公开报道已被文献引用作为参考细胞因子诱导剂是本发明优选的生物反应调节剂特别优选的细胞因子诱导剂是公开在美国专利5,312,831(EP652228)的式I，结构为 其中，R1选自氢、取代或未取代(C1-C20)烷基、取代或未取代环烷基、取代或未取代环烷基烷基、乙烯基、乙炔基、取代或未取代氨基、取代或未取代酰氨基、取代或未取代芳基、取代或未取代芳烷基、取代或未取代芳氧基、取代或未取代烷氧基芳基、取代或未取代烷氧芳烷基及取代或未取代的含1-4个杂原子的单环或双环杂环基，杂原子选自氮、硫和氧原子；Ra和R3分别选自氢、取代或未取代的(C1-C6)烷基、取代或未取代的烷氧基烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的环烷基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的烷氧芳烷基、乙烯基、乙炔基及取代或未取代的含1-4个杂原子的单环或双环杂环基，杂原子选自氮、硫和氧原子，对于R3，在所述杂环中杂原子不直接与-CH-X-部分的-CH-基键合；R2，Rb和Rc分别选自羧基或被护羧基、羧基或被护羧基低级烷基和羧基酰胺；X是氧或氮；R4是H或氨基保护基；其中，上述取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、氨基、酰氨基、芳基、芳烷基、芳氧基、烷氧芳基、烷氧芳烷基和杂环基的取代基选自卤素、羟基、低级烷基、低级烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、氨基、单-或二-低级烷氨基、芳氨基、芳烷氨基、羧基、甲酰基、低级烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、低级烷基硫代基、芳基硫代基、芳烷基硫代基、芳基亚硫酰基、芳基亚硫酰基、芳烷基亚硫酰基、低级烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳烷基磺酰基及含1-4个杂原子的单环或双环杂环基，杂原子选自氮、硫和氧；或其药物可接受的盐取代基的定义及式I化合物的制备方法见美国专利5,312,831和EP652228式I细胞因子诱导剂可能含一个或多个不对称碳原子；在此情况下，式I化合物包括各种非对映体、外消旋体及其各种R和S异构体(entantiomers)上述化合物各种具体定义及这些定义的实例如下所示(摘自EP652228B)a)(C1-C20)烷基可以是一种具有1-20个碳原子的直链或支链低级烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基、异戊基、己基、异己基等b)环烷基可以是一种具有3-6个碳原子的环烷基，如环丙基、环丁基、环戊基或环己基c)环烷基烷基可以是一种具有4-12个碳原子的环烷基烷基，如环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、1-环丙基乙基、2-环丙基乙基、2-环丙基乙基、1-环丁基乙基、2-环丁基乙基、1-环戊基乙基、2-环戊基乙基、1-环己基乙基、3-环己基丙基、3-环戊基丙基、4-环己基丁基、4-环戊基丁基、4-环戊基戊基或4-戊基环己基d)酰氨基可以是酰基部分从一种酸，如有机羧酸或碳酸衍生的酰氨基每个酰氨基分子中包括脂肪基、芳基和/或杂环基这些具有酰基的脂酰基从脂肪酸中衍生，包括烷酰基(如甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基、α-乙基-己酰基、庚酰基、月桂酰基、硬脂酰基、二十二烷酰基)，一组化学式CH3(CH2)31CO，[CH3(CH2)21]2CHCO，[CH3(CH2)15]2CHCO，CH3(CH2)41CO等)；低级烷氧基羰基(如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、丁氧羰基、叔丁氧羰基、叔戊氧羰基等)等酰基部分也可以是芳酰基，酰基由一种取代或未取代芳基的酸衍生而来，其中，芳基可以包括苯基、甲苯基、二甲苯基、萘基等其适当的例子如下芳酰基(如苯酰基、甲苯酰基、二甲苯酰基、萘酰基、邻苯二甲酰基等)；芳烷氧基羰基(如苄氧羰基、二苯基甲氧羰基、三苯基甲氧羰基、α-萘基-甲氧羰基等)等酰基部分也可以是杂环酰基，其中酰基由一种具有杂环的酸衍生而来，包括杂环羰基，其中杂环部分是至少含有一个杂原子的5-6员杂环，其含有至少一个至四个杂原子，杂原子选自氮、氧和硫(如噻吩酰基、呋喃甲酰基、吡咯羰基、5-氧-2-吡咯烷羰基、烟酰基等)等e)芳基可以是一种具有6-15个碳原子的芳基，如苯基、联苯基、1-萘基或2-萘基f)芳烷基可以是一种具有7-15个碳原子的芳烷基，如苄基、1-萘基甲基、2-萘基甲基、5，6，7，8-四氢-1-萘基、5，6，7，8-四氢-2-萘基、苯乙基、3-苯基丙基或4-苯基丁基g)芳氧基可以是一种具有6-15个碳原子的芳氧基，如苯氧基、联苯氧基、1-萘氧基、或2-萘氧基h)烷氧芳基或烷氧基芳烷基可以是一种具有6-21个碳原子的烷氧芳基或烷氧基芳烷基，如苯酰基，或烷氧基苯甲基i)含1-4个杂原子的单环或双环杂环基，杂原子选自氮、硫和氧原子，可以是一种具有4-15个碳原子的杂环基，如吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、异噁唑基、噁唑基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、2，3-二氮杂萘基、naphthidinyl基、喹喔啉基、喹唑啉基、1，4-苯并二噁烷基、1，3-苯并二噁烷基、1，2，3-三唑基、1，3，4-三唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，3-噻二唑基、四唑基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、2-咪唑基、吗啉代基、piperizine N-氧化物基、哌嗪N-氧化物基、吗啉N-氧化物基、低级烷基吗啉代基如N-甲基吗啉代基、N-乙基吗啉代基或N-丙基吗啉代基、哌嗪基、哌啶子基、哌啶基、硫代吗啉代基或硫代吗啉基前述的取代基(a)-(i)可以是卤原子，如氯原子、氟原子或溴原子、羟基；低级烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；低级烷氧基，如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基；芳氧基，如苯氧基、1-萘氧基或2-萘氧基；芳烷氧基，如苄氧基、苯乙氧基、1-萘基甲氧基或2-萘基甲氧基；氨基；单-或二-低级烷氨基，如甲氨基、乙氨基、丙氨基、异丙氨基、丁氨基、仲丁氨基、异丁氨基、叔丁氨基、二甲氨基或二乙氨基；芳氨基，如苯氨基、1-萘氨基或2-萘氨基；芳烷氨基，如苄氨基、苯乙氨基、1-萘基甲氨基或2-萘基甲氨基；羧基；甲酰基；低级烷氧基羰基，如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基，异丙氧羰基、丁氧羰基、仲丁氧羰基，异丁氧羰基或叔丁氧羰基；芳氧基羰基，如苯氧羰基、1-萘氧羰基或2-萘氧羰基；芳烷氧基羰基，如苄氧羰基、苯乙氧羰基、1-萘基甲氧羰基或2-萘基甲氧羰基；巯基；低级烷基硫基如甲硫基、乙硫基、丙硫基、异丙硫基、丁硫基、仲丁硫基，异丁硫基或叔丁硫基；芳硫基如苯硫基、1-萘硫基或2-萘硫基；芳烷硫基如苄硫基、苯乙硫基、1-萘基甲硫基或2-萘基甲硫基；芳基亚硫酰基，如苯基亚硫酰基、1-萘基亚硫酰基或2-萘基甲硫酰基；芳烷基亚硫酰基，如苄基亚硫酰基、苯乙基亚硫酰基、1-萘基甲基亚硫酰基或2-萘基甲基亚硫酰基；低级烷基磺酰基，如甲磺酰基、乙基磺酰基、丙基磺酰基，异丙基磺酰基、丁基磺酰基，异丁基磺酰基、仲丁基磺酰基或叔丁基磺酰基；芳基磺酰基，如苯基磺酰基、1-萘磺酰基或2-萘磺酰基；芳烷基磺酰基，如苄基磺酰基、苯乙基磺酰基、1-萘基甲基磺酰基或2-萘基甲基磺酰基；或有4-15个碳原子和1-4杂原子的单环或双环杂环，杂原子选自氧、氮和硫，如吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、异噁唑基、噁唑基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、2，3-二氮杂萘基、naphthidinyl基、喹喔啉基、喹唑啉基、1，4-苯并二噁烷基、1，3-苯并二噁烷基、1，2，3-三唑基、1，3，4-三唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，3-噻二唑基、四唑基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、2-咪唑基、吗啉基、吗啉代基、吗啉N-氧化物基、低级烷基吗啉基如N-甲基吗啉代基，及N-乙基吗啉代基或N-丙基吗啉代基、哌嗪基、哌啶子基、哌啶基、硫代吗啉代基或硫代吗啉基此处所用环低级烷基”指C1-C6烷基被护羧基或被护羧基低级烷基的保护基包括本领域技术人员常规用于肽和氨基酸化学中的常用羧基保护基，如T.Green“Protecting Groups in Organic Synthesis”，J Wiley和Sons，1981.中提到的保护基它们包括甲硅烷酯、脂烃酯和芳酯如三甲基甲硅烷基酯、叔丁基二甲基甲硅烷基酯、乙酰酯、苯酰酯等被护氨基的保护基包括本领域技术人员常规用于肽和氨基酸化学中的常用氨基保护基，如T.Green，supra 218-287页中提到的保护基适宜保护基的选择是去除保护基的条件，要与该化合物的其它结构特点协调一致合适的保护基包括酰基，如叔丁氧羰基或苄氧羰基等相对于上述一般性描述，优选的式I化合物是其中R1选自取代或未取代(C1-C20)烷基、取代或未取代环烷基、取代或未取代环烷基烷基、取代或未取代芳基，取代或未取代芳烷基、取代或未取代芳氧基，取代或未取代烷氧基芳基，及取代或未取代的烷氧基芳烷基其中，前述芳基选自取代或未取代的苯基；Ra和R3分别选自氢、取代或未取代的(C1-C6)烷基；R2，Rb和Rc分别选自羧基或被护羧基、羧基或被护羧基低级烷基和羧氨基化物；X是氧或氮；R4是H或氨基保护基此外，本发明中最优选的式I化合物是其中有以下基团的那些式I化合物R1选自(C4-C14)烷基、环烷基、(C2-C8)烷基取代的环烷基、苯基、苄基、(C4-C8)烷基苯基和(C1-C6)烷基或烷氧基-苯甲基；Ra和R3独立地选自氢和(C1-C6)烷基；R2，Rb和Rc独立地选自羧基或被护羧基、羧基或被护羧基低级烷基和羧氨基化物；X是氧或氮；R4是H或氨基保护基特别优选的式I化合物是其中有以下基团的那些式I化合物R1选自正己基、4-正戊基环己基；R1和R3独立地选自氢或甲基；R2，Rb和Rc是羧基；X是氧或氮；R4是H特别优选那些具有如下D-异苏氨酸构型的式I化合物 其中，R3是甲基，R1和R2定义如前还特别优选在分子的二氨基庚二基丙胺酸部分具有如下立体化学结构的那些化合物 其中，R1是甲基，Rb，Rc和R4如前述定义在立体化学结构方面，下列式I化合物是最优选的 其中，R3和R1是甲基，X是氧，Rb，Rc，R1，R2，R4定义如前特别优选的细胞因子诱导剂是[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]丙氨酸或其药物可接受的盐(式I化合物)，该化合物已公开在美国专利5,312,831实施例28中美国专利5,312,831公开了几项标准药理学试验程序，该试验程序可使本领域的技术人员评价出化合物是否为生物反应调节剂如16-17栏的试验程序评价了IL-6，CSF和G-CSF产生的诱导作用优选的化疗剂是微管剂或巨噬细胞活化剂微管活性化合物是使微管不稳定的化合物，或通过防止微管蛋白的聚合(如长春新碱)或通过防止微管蛋白的解聚(如taxanes)使微管不稳定微管的装配与解配是一个动态过程，受到微管蛋白结合蛋白和蛋白磷酸化的影响(激酶)微管活性化合物包括taxanes类，如紫杉醇或docetaxel、长春新碱、长春碱、维诺利宾等巨噬细胞活化剂是可激活巨噬细胞活性的化合物，如阿霉素、doxirubicin和类似的蒽二酮类及蒽环类药、顺铂，卡铂、丝裂霉素C、博来霉素等优选的化疗剂是紫杉醇或卡铂，或两者的组合物本发明的微管剂或巨噬细胞活化剂或者可从商业途径得到，或者可用已出版的文献中的标准制备方法制备生物反应调节剂对化疗剂的增效作用已在体内标准药理学试验程序中进行了评价，在该程序中将人非小细胞型肺癌(NSCLC)细胞系移入有免疫缺陷的裸鼠胁腹部以下简要介绍所用试验程序及所获结果[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸用作有代表性的生物反应调节剂和紫杉醇用作有代表性的化疗剂从Charles Rive实验室得到6-8周龄Balb-c nu/nu雌性小鼠，实验用8-10周龄小鼠人非小细胞型肺癌(NSCLC)细胞系H-157来自美国组织培养物保藏所(ATCC)(Bethesda，MD)细胞用有10％胎牛血清的RPMI培养基培养小鼠经皮下注射7.5×106H-157 NSCLC瘤细胞瘤生长到80-150mg大时，用游标卡尺测定瘤的长度(l)与宽度(w)用公式l×w2/2计算瘤的体积以mm3计的体积可直接转为假定的单位密度毫克注射7日后，将小鼠随机(注射日为第0日)分为10组，平均瘤重量为100mg治疗组在第0日注射紫杉醇(30mg/kg)以及在第1日和第8日注射药物溶剂(vehicle)或[R(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸(100μg/kg)在第7和14日，接受紫杉醇加[R(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸组的动物，其瘤生长速度比起未经用药的对照组或仅接受紫杉醇治疗的组有明显抑制作用在第7日测得单独用紫杉醇组抑制瘤生长情况(经student’s t检验，p≤0.05)，在用紫杉醇一天后加用[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸，抑制程度明显增强在第14日，单独用紫杉醇组抑制程度与对照组无显著差异；而在第0日接受紫杉醇和在第1和第8日注射[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸的组，比起未作治疗的对照组或仅用紫杉醇的组，仍有明显抑制作用所得结果见表1在下表中，[R(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸的代号是CI表1 CI加紫杉醇对裸鼠异种移植的肿瘤细胞生长的抑制作用 a数据来自5次单独的评价(平均值±标准差)，每次评价时，每组10只小鼠治疗组在第0日接受紫杉醇(30mg/kg)，在第1和第8日注射溶剂或CI(100μg/kg)bP≤0.05与空白对照组或仅用紫杉醇组相比(Student’s t检验)cP≤0.05与空白对照组相比在第1和第8日仅用[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸(100μg/kg)的荷瘤小鼠的评价试验进行了几次(数据未出示)，无一次显示出仅用[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸本身对裸鼠的肿瘤细胞生长有抑制作用[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸不能直接抑制体外肿瘤细胞生长，也不能增强紫杉醇在细胞培养中对肿瘤细胞生长的抑制作用对生物反应调节剂和化疗剂的作用也进行了临床研究评价[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸作为代表性的生物反应调节剂，紫杉醇和卡铂作为代表性的化疗剂在此研究中，对晚期癌症患者在第一轮化疗(卡铂和紫杉醇)前约7日给予[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸(0轮)患者在之后约21日进行第二轮化疗，并在第二轮化疗后第1日和第8日给予[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]丙氨酸，剂量如下表所示69％的患者临床有效，肿瘤或者完全消失，或者部分减小，或使病情稳定在16位受治患者中，6位被拟诊断为NSCLC在该组中，有3人完全应答，1人部分应答，1人病情稳定，只有1人病情发展用标准化疗方案(紫杉醇和卡铂)进行化疗的预期完全应答率仅有约5％，6个受治患者中有3人显示出完全应答是完全出乎意料的在此治疗方案中，紫杉醇剂量是175-200mg/m2，卡铂的曲线下面积(AUC)剂量为6mg/ml×min临床试验结果总结于下表在下表中，[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]丙氨酸用CI表示表2 用紫杉醇、卡铂和CI组合对晚期癌症患者的治疗结果 a完全无明显病症部分肿瘤减少≥50％稳定病情未进一步发展发展病情有发展bCI的剂量用有代表性的生物反应调节剂和化疗剂进行体内标准药理学试验和临床试验的结果表明，生物反应调节剂与化疗剂的组合可用来增强标准化疗的疗效，用于对实体瘤的治疗尤其是，本发明的组合物可用于治疗非小细胞型肺癌、神经胶质瘤、卵巢癌、乳癌、前列腺癌、头颈癌、肾癌、胰腺癌、肝癌、结肠癌及软组织肉瘤等本发明中所用的组合疗法可以同时进行，或交错进行在进行化疗期间，生物反应调节剂可在不同时间给药因此，术语组合并不意味着必须同时给药，或作为一个整体的药剂例如在临床研究中的一种典型的有用的治疗方案是患者在接受第一个疗程化疗前，先接受生物反应调节剂治疗典型的化疗方法是之后化疗重复几周，这种情况下，生物反应调节剂可在第二疗程化疗给药一日或多日后给药这种交错给药可持续在整个治疗期对于同时给药，组合的成分可配制成单一剂型，但组合的成分都预先配制成为分次给药剂型专门的化疗剂的配方是本领域技术上众所周知的(并且大部分所用的是市售的或已在临床试验中应用的已经配制的)，这些化疗剂可用典型的静脉或口服给药；但随每种药剂和患者的不同，化疗剂也可用非肠道注射、直肠、阴道、经皮、皮下、局部、经鼻给药或癌变部位直接输注本发明生物反应调节剂也可以口服、静脉、非肠道、直肠、阴道、经皮、皮下、局部、经鼻给药或癌变部位直接输注生物反应调节剂可根据标准文献方法学进行配制例如式I化合物与[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]丙氨酸的配方参见美国专利5,312,831不是市售的或不能在临床试验中得到的生物反应调节剂与化疗剂(或所得到的不适合使用)可以单独配制，或与一种或几种药物可接受的用于给药的载体例如，溶剂、稀释剂等一同配制可以片剂、胶囊、分散粉剂、颗粒剂、悬浮剂形式等口服用药，如含量为0.05％-5％的悬浮剂，如含10％-50％糖的糖浆剂，如含20％-50％乙醇的酏剂等，或非肠道的无菌注射溶液或含0.05％-5％在等张介质中的悬浮液这种药物制剂可以含有0.05％至90％的活性成分与载体组合通常含量多为5％至60％(重量)用于片剂和胶囊给药的配方中可有固体载体，包括淀粉、乳糖、磷酸二钙、微晶纤维素、蔗糖和高岭土，液体载体可以包括无菌水、聚乙二醇、非离子表面活性剂及食用油，如玉米油、花生油和芝麻油，只要适合于活性成分的性质和所需给药的特定剂型即可通常用制备于药物组合物中的佐剂可以是调味剂、着色剂、防腐剂及抗氧化剂，如维生素E、维生素C、BHT和BHA组合中的这些成分可以注射给药或腹腔内给药这些活性成分可以游离碱或药物可接受的盐的形式在水中与适当的表面活性剂，如羟丙基纤维素混合，制备成溶液或悬浮液可用甘油、液状聚乙二醇或二者在油中的混合物制备分散剂在通常的贮存和使用条件下，这些制剂含一种防腐剂，以防微生物的生长适于注射用的药物剂型包括无菌水溶液或分散剂及用于临时配制无菌溶液或分散剂的无菌粉末各种注射剂型都必须是无菌的，且须有一定的流动性，使其易于放置于注射器中在制造和贮存条件下，制剂必须稳定，而且必须能够抗微生物，如细菌、霉菌的污染载体必须是一种溶剂或分散介质，如含水、醇、多元醇(如甘油、丙二醇及液体聚乙二醇)及其适宜的混合物和植物油预计在治疗过程中，应根据患者对治疗和对标准化疗方法固有的毒性反应，对所用化疗剂和生物反应调节剂的剂量进行调整比如根据骨髓抑制或肝功降低的情况，减少化疗剂的用量预计化疗剂的起始剂量是没有生物反应调节剂存在的起始量比如对于用紫杉醇，卡铂和[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N’-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸组合的疗法，预计紫杉醇的量是135-225mg/m2，优选剂量是175-200mg/m2，卡铂的曲线下面积(AUC)剂量为5-7mg/ml×min，优选量是6mg/ml×min设计的生物反应调节剂剂量随其诱导免疫系统的强度而改变对于细胞因子诱导剂，则根据诱导细胞因子产生的能力而改变对于[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-赖氨酰基]-丙氨酸，预计初始剂量范围在0.005-2μg/kg，优选剂量是0.01-1μg/kg