单唾液酸四己糖神经节苷脂gm1的制备方法

张丽莉, 李红英

2003年5月7日

2001年10月30日

2001年10月30日

齐鲁制药厂, 王安民, 张明会

C12P19/44GK1415756SQ0113205

唾液酸 四己 gm 神经节

1.一种单唾液酸四己糖神经节苷脂GM1的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤(1)发酵菌种制备取冻干管藏菌种，接种于营养琼脂斜面培养基上，于37℃培养1天，取出于冰箱放置，取少量于营养琼脂液体培养基中，于37℃±1℃摇瓶培养1天，取出于冰箱中存储备用(2)GM1的制备取浓度为0.1％-10％分离GM1后的其它神经节苷脂原料，溶于水中，加入2-5％发酵菌种，调PH6-8，于32℃±5℃培养3-5天即得，纯度达20％-65％，经层析得纯品2.一种如权利要求1所述的单唾液酸四己糖神经节苷脂GM1的制备方法，其特征在于其中所用的发酵菌种为短杆菌属QL-1株

本发明涉及生物技术领域，具体涉及单唾液酸四己糖神经节苷脂GM1的制备方法GM1是最重要的神经节苷脂之一，在中枢神经系统病变的治疗中起重要作用GM1除具有上述神经节苷脂的共同作用外，还可以通过维持中枢神经细胞膜上的Na+-K+-ATP酶及Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性，起到维持细胞内外离子平衡、减轻神经细胞水肿、防止细胞内Ca2+积聚的作用因此GM1具有促进神经重构的作用，即通过促进各种形态、生物化学、组织化学、神经生理及行为参数的改善，最终可以加速神经细胞的修复，最大程度地恢复原有的神经功能临床用于中枢神经系统(包括大脑和脊髓)的急性创伤或血管性损伤神经节苷脂是一混合体，用动物脑组织分离制备的是含GM1的混合体神经节苷脂传统的分离GM1方法是用硅胶柱从混合神经节苷脂中分离，操作步骤繁琐，耗时长，并消耗大量有机溶剂，其中提取的GM1含量仅为脑组织含量的万分之一，收率低，成本高本发明公开的神经节苷脂GM1的制备方法包括下列步骤1.发酵菌种制备取冻干管藏菌种，接种于营养琼脂斜面培养基上，于37℃培养1天，取出于冰箱放置，取少量于营养琼脂液体培养基中，于37℃±1℃摇瓶培养1天，取出于冰箱中存储备用2.GM1的制备取浓度为0.1％-10％分离GM1后的其它神经节苷脂原料，溶于水中，加入2-5％发酵菌种，调pH5-8，于32℃±5℃培养，3-5天后，薄层色谱法检测即得到发酵完全的GM1溶液，纯度达20％-65％，经层析得纯品本发明制备GM1的发酵菌种为短杆菌属(Brevibacterium sp.)QL-1株，于2000年12月11日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.0522该菌种是从齐鲁制药厂土壤中分离，经筛选并诱变后获得本发明公开的GM1制备方法较现有方法提取率提高100％该方法操作简便、成本低廉，为GM1大规模生产提供了可能