专利名称：头孢他啶他唑巴坦钠药物组合物脂质体注射剂的制作方法头孢他啶(Ceftazidime CAZ)又名头孢噻甲羧肟、复达欣等，为半合成第三代头 孢菌素类抗生素，抗菌活力较强，抗菌谱较广，对革兰阳性或阴性菌均具有较强作用。对革 兰阳性菌、阴性菌产生的β内酰胺酶具有高度的稳定性，对绿脓杆菌、大肠杆菌、克雷白杆 菌、变形杆菌、肠球菌、沙门菌、志贺菌、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、金葡菌、溶血性链球菌、 肺炎球菌及产气杆菌等具有强的抗菌活性，特别是对于绿脓杆菌作用最强抗生素。头孢他啶的抗菌作用机制为影响细菌细胞壁的合成，能抑制转肽酶在细胞壁合成 的最后一步交叉连接中的转肽作用，使交叉连接不能形成，从而影响细胞壁合成，导致细菌 溶菌死亡。他唑巴坦钠为继舒巴坦钠和克拉维酸之后的新型青霉烷砜类β -内酰胺酶抑制 剂，其结构式在舒巴坦钠的基础上增加一个三氮唑环，以提高抑酶活性。他唑巴坦钠的抑酶 作用强于舒巴坦，且稳定性由于克拉维酸，尤其对超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)有较强的抑 制作用，是目前很有市场前景的内酰胺酶抑制剂，且具有毒性低、抑酶活性强、稳定性 好等优点。目前多将头孢他啶与他唑巴坦钠制成复合制剂，可大大提高头孢他啶的抗菌活 性，减少细菌耐药性。现有上市的本类产品头孢他啶与他唑巴坦钠注射剂，普遍存在药物活性成分不稳 定，长期存放有关物质生产较多，含量降低，这不仅降低了药效，而且带来用药风险，危害患 者利益。CN 1418632 A公开了注射用头孢他啶和和他唑巴坦钠的复方制剂，头孢他啶和和 他唑巴坦钠的重量比为3 1。由头孢他啶和他唑巴坦钠按3 1(重量比)配比组成复 方制剂。首先制备他唑巴坦钠，由他唑巴坦150g与注射用水制成混合悬浮液，加入碳酸氢 钠溶液调节PH值至6. 3士0. 1得到他唑巴坦钠溶液，经过注射用活性炭脱色、除菌滤过、冷 冻干燥得到他唑巴坦钠冻干粉，粉碎后得到他唑巴坦钠粉；再将头孢他啶450g与他唑巴坦 钠混合均勻，分装1000瓶，即得头孢他啶和他唑巴坦钠按3 1(重量比)配比组成复方制 剂。该文献虽然披露了头孢他啶和他唑巴坦钠按3 1治疗学意义上的最佳组合配比，但 是其制备方法导致其药剂学的稳定性却难以满足临床用药的需要。黄红谦等人的文献《注射用头孢他啶/他唑巴坦钠的稳定性考察》介绍经影响因 素实验、加速实验、长期实验之后，注射用头孢他啶/他唑巴坦钠外观、PH值、水分、含量、降 解产物等变化，证明现有技术中的注射用头孢他啶/他唑巴坦钠的稳定性是难于接受的。根据本发明人的进一步研究，发现已有的头孢他啶和他唑巴坦钠按3 1(重量 比)组合虽然在临床运用非常广泛，但是采用目前现有技术的制备工艺放大生产之后，冻干粉复溶之后的溶液仍存在浑浊，可见异物不合格的现象，而且溶液稳定性很差，要求在短 时间内用完，否则活性成分极易变质，导致药品质量下降，不适于注射。脂质体(Liposome)最初是由英国学者Bangham和Mandlish将磷脂分散在水中 进行电镜观察时发现的。磷脂分散在水中自然形成多层囊泡，每层均未脂质的双分子层；囊 泡中央和各层之间被水相隔开，双分子层厚度约为4nm。后来，将这种具有类似生物膜结构 的双分子小囊称为脂质体。脂质体可分为多室脂质体和胆识脂质体。单室脂质体又分为小 单室脂质体和大单室脂质体。Bangham和Mandlish最初发现的就是多室脂质体，它们较易 制备，尺寸一般为0. 5-5微米。小单室脂质体为球形，尺寸一般为20-50纳米；大单室脂质体 的尺寸为微米数量级。1971年英国莱门等人开始将脂质体用于药物载体，主要作用机理是 将药物粉末或溶液包裹在脂质体双层脂质膜所封闭的水相中或嵌入脂质体双层脂质膜中， 这种微粒具有类细胞结构，进入人体内主药被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功 能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，从而 提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。目前用作药物载体的脂质 体多为大单室脂质体，粒径一般位于100-1000纳米之间。脂质体技术作为一新型药物制剂，具有以下的优点(1)增加药物的溶解性；(2) 降低药物的毒性；C3)赋予药物器官靶向性，对肝、肺、脾、淋巴组织有较强的亲和力，使得 脂质体所载的药物在这些脏器局部维持高浓度，从而起到药物器官靶向性作用；(4)增加 药物的缓释作用；(5)提高对药物的保护作用。本发明针对头孢他啶不稳定，长期存放有关物质变大，含量降低等缺点，试将头孢 他啶他唑巴坦钠与脂质体技术相结合，对药物稳定性和毒副作用具有意想不到的效果。
本发明旨在面对现有上市本品因制备技术手段的限制，参阅众多相关资料和大量 实验总结，发现以特定赋形剂和制备工艺的脂质体制备技术对主药包裹后可以解决一系列 的问题，现对本发明实现内容陈述如下本发明的目的之一是提供一种头孢他啶他唑巴坦钠脂质体注射剂，主要包括以下 组分头孢他啶、他唑巴坦钠、脂质体膜材和附加剂。基于重量份计，头孢他啶3份、他唑巴 坦钠1份、脂质体膜材3-20份、附加剂2. 2-15份。优选地，基于重量份计，头孢他啶3份、他唑巴坦钠1份、脂质体膜材5-12份、附加 剂3. 6-8份。其中，头孢他啶和他唑巴坦钠的重量比3 1，规格为2.4g(头孢他啶1.8g与他唑 巴坦钠0. 6g)和1. 2g (头孢他啶0. 9g和他唑巴坦钠0. 3g)。进一步地，制剂中还包含冻干支持剂5-20份和抗氧化剂1-3份。优选地，基于重量份计，本发明的注射剂包含，头孢他啶3份、他唑巴坦钠1份、月旨 质体膜材5-12份、附加剂3. 6-8份、冻干支持剂5-20份和抗氧化剂1_3份。制备脂质体注射剂常用的膜材料为磷脂和附加剂，其中磷脂通常可选用天然磷脂 和合成磷脂，所述天然磷脂为蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄磷脂、蛋黄磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰丝 氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂、大豆磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸、 大豆磷脂酰肌醇中的一种或几种；所述合成磷脂为二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰甘 油、二硬脂酸磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰 甘油中的一种或几种。常用附加剂的膜材料有胆固醇、十八胺、磷脂酸、去氧胆酸钠和泊洛沙姆188。用于 制备脂质体注射剂的膜材料还有磷脂酰乙醇胺、胆固醇乙酰脂、谷载醇、牛胆酸钠、磷脂酰 丝胺酸、硬脂酰胺、单硬脂酰磷脂酸、单硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二鲸蜡基磷酸盐(DCP)、二棕 榈酰磷脂酰乙醇胺、单棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二豆蔻酰磷脂酰乙醇胺。附加剂一般用来调节 膜结构，改变荷电性质，如胆固醇能使脂质体双分子层膜固化，从而减少自由基的生成，降 低了氧化水平，使脂质体稳定性显著增强。常用的冻干支持剂有甘露醇、甘氨酸、山梨醇、木糖醇、葡萄糖、乳糖、海藻糖，冻干 支持剂用来支持冻干后的成形性，起到骨架的作用。常用的抗氧剂有亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、焦亚硫酸钠、维生素E、维生素C、谷胱甘 肽、没食子酸丙酯，抗氧剂用来起到保护活性成分免受氧化的作用，对稳定性的提高起到很 大的作用。根据上面所述的头孢他啶钠他唑巴坦钠药物组合物脂质体注射剂，其中脂质体膜 材优选为二油酰磷脂酰胆碱和大豆磷脂酰丝氨酸的组合，最优选是优选3 1的组合。根据上面所述的头孢他啶他唑巴坦钠药物组合物脂质体注射剂，其中附加剂优选 为胆固醇乙酰脂和十八胺的组合，最优选是2 1的组合。根据上面所述的头孢他啶他唑巴坦钠药物组合物脂质体注射剂，其在于冻干支持 剂优选为甘露醇和甘氨酸的组合，最优选是3 2的组合。根据上面所述的头孢他啶他唑巴坦钠药物组合物脂质体注射剂，其中抗氧化剂优 选为维生素C和亚硫酸氢钠的组合，最优选是1 1的组合。虽然，脂质体的制备工艺早已成为常规技术，但是不同的制备工艺和赋形剂的选 择并非显而易见的，本发明人通过长期的创造性劳动获得采用以上特定成分和含量配比的 赋形剂制备的脂质体制剂具有预料不到的技术效果，提高了包封率和复溶之后的溶解性和 可注射性。本发明的另一个目的是提供头孢他啶他唑巴坦钠药物组合物脂质体注射剂，其中 制备步骤为(1)首先制备了空白脂质体，将活性成分溶于空白脂质体中，产生包裹，有技术手 段形成较好的包封率。(2)将以及被脂质体膜材包裹的主药和冻干支持剂和抗氧化剂配成无菌溶液，按 装量分装于西林瓶中，进行常规冻干。根据上面所述的头孢他啶他唑巴坦钠药物组合物脂质体注射剂，其所述的脂质体 制备可以选择为以下多种方法薄膜法由旋转蒸发仪将脂质体膜材溶液用于有机溶剂后制备脂质体薄膜，然后 将主药、冻干支持剂、抗氧化剂溶于薄膜溶液中制备药物脂质体溶液；乙醇注入法将脂质体膜材溶于乙醇中，用微量输液器缓慢将溶于含主药、冻干支 持剂、抗氧化剂的缓冲盐注入，制备药物脂质体溶液；冷冻干燥法直接配置脂质体膜材溶液和药物溶液混合，保温超声处理，后由高速组织捣碎机剧烈振摇获得药物脂质体溶液。本发明的另一个目的是提供头孢他啶他唑巴坦钠药物组合物脂质体注射剂的制 备方法，其中制备步骤包括(1)将脂质体膜材和附加剂溶解于有机溶剂中，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有 机溶剂，获得了磷脂薄膜；(2)在磷脂薄膜中加入pH值6. 2的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂 薄膜完全水化，用高质均质器制备空白脂质体；(3)将头孢他啶、他唑巴坦钠、抗氧剂溶于注射用水中经微孔滤膜过滤，加入空白 脂质体混合，55°C超声处理30min ；再和溶有冻干支持剂的水溶液混合均勻；(4)按规定装量分装于西林瓶中，置于冷冻干燥机内进行冻干，检测合格后包装入库。进一步的，冻干工艺为a、预冻将分装好的药液按1 ；TC /分钟速度降温至-50 _35°C，保温冷冻3 小时；b、升华将预冻好的药物抽真空，至15Pa，然后在7 9小时内勻速缓慢升温 至-22 -18°C，保温1 2小时，再在4 6小时内勻速升温至10 15°C ；c、干燥将升华完毕阶段结束后的药物在4小时内勻速升温至30°C，保温干燥3 小时，检测合格后包装入库。优选地a、预冻将分装好的药液按2V /分钟速度降温至_40°C，保温冷冻3小时；b、升华将预冻好的药物抽真空，至15 ，然后在8小时内勻速缓慢升温至_20°C， 保温2小时，再在5小时内勻速升温至10°C ；c、干燥将升华完毕阶段结束后的药物在4小时内勻速升温至30°C，保温干燥3 小时，检测合格后包装入库。上述所述的制备方法中，所述的有机溶剂可以是甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、异丙醇、 乙腈、三氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺中的一种或几种，优选体积比为1 3的异丙醇和乙腈 的混合溶剂。本发明提供的头孢他啶他唑巴坦钠脂质体注射剂及其制备方法，具有以下优点(1)活性成分头孢他啶和他唑巴坦钠通过脂质体技术进行包裹，极大提高了稳定 性，长期放置含量和有关物质几乎没有明显变化，保障了药品的质量；(2)脂质体制备技术简单易操作，适合于工业化生产，成本低；(3)提高了药品质量，减少了毒副作用。头孢他啶90g他唑巴坦钠30g二油酰磷脂酰胆碱112. 5g大豆磷脂酰丝氨酸37. 5g胆固醇乙酰脂72g十八胺36g甘露醇90g甘氨酸60g亚硫酸氢钠15g维生素C15g制备工艺(1)将112. 5g 二油酰磷脂酰胆碱、37. 5g大豆磷脂酰丝氨酸、72g胆固醇乙酰酯、 36g十八胺溶解于IOOOml体积比为1 3的异丙醇和乙腈的混合溶剂中，于旋转薄膜蒸发 器上减压除去混合溶剂，获得了磷脂薄膜；(2)在磷脂薄膜中加入pH值6. 2的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液500ml，振摇lOmin， 搅拌使磷脂薄膜完全水化，用高质均质器制备空白脂质体；(3)将90g头孢他啶、30g他唑巴坦钠、15g亚硫酸氢钠、15g维生素C溶于500ml 注射用水中经0. 45 μ m微孔滤膜过滤，加入空白脂质体混合，55°C超声处理30min ；再和溶 有90g甘露醇和60g甘氨酸的水溶液500ml混合均勻；(4)按规定装量分装于西林瓶中，置于冷冻干燥机内进行冻干a、预冻将分装好的药液按2V /分钟速度降温至_40°C，保温冷冻3小时；b、升华将预冻好的药液抽真空，至15 ，然后在8小时内勻速缓慢升温至_20°C， 保温2小时，再在5小时内勻速升温至10°C ；c、干燥将升华完毕阶段结束后的药液在4小时内勻速升温至30°C，保温干燥3 小时，制得头孢哌酮钠他唑巴坦钠药物组合物脂质体注射剂。对比例1头孢他啶他哔巴坦钠药物组合物脂质体的制备(普通方法)处方(100瓶)头孢他啶90g他唑巴坦钠30g二油酰磷脂酰胆碱112. 5g大豆磷脂酰丝氨酸37. 5g胆固醇乙酰脂72g十八胺36g甘露醇90g甘氨酸60g亚硫酸氢钠15g维生素C15g制备工艺(1)将112. 5g 二油酰磷脂酰胆碱、37. 5g大豆磷脂酰丝氨酸、72g胆固醇乙酰酯、36g十八胺溶解于IOOOml体积比为1 3的异丙醇和乙腈的混合溶剂中，于旋转薄膜蒸发 器上减压除去混合溶剂，获得了磷脂薄膜；(2)在磷脂薄膜中加入pH值6. 2的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液500ml，振摇lOmin， 搅拌使磷脂薄膜完全水化，用高质均质器制备空白脂质体；(3)将90g头孢他啶、30g他唑巴坦钠、15g亚硫酸氢钠、15g维生素C溶于500ml 注射用水中经0. 45 μ m微孔滤膜过滤，加入空白脂质体混合，再和溶有90g甘露醇和60g甘 氨酸的水溶液500ml混合均勻；(4)按规定装量分装于西林瓶中，置于冷冻干燥机内进行冻干将分装好的药液 按2°C /分钟速度降温至-30°C，然后在8小时内勻速缓慢升温至30°C ；保温干燥2小时， 制得头孢哌酮钠他唑巴坦钠药物组合物脂质体注射剂。实施例和对比例比较本发明优选的辅料配比和冻干工艺的比较以下表格中以本发明所筛选的辅料和用量以及制备工艺为实验因素设计了以下 的各实施例和对比例，其中实施例1-4采用本发明的制备工艺进行，所用辅料和用量在本 发明的优选范围之内，对比例1-4中所用辅料或辅料用量在本发明优选范围之外，或者有 的采用普通冻干工艺进行，在试验例中考察结果对本发明的优势进行对比说明。表1 实施例和对比例的比较成分实施例1实施例2实施例3实施例4对比例1对比例2对比例3对比例4細他啶90g90g180g180g90g90g180g180g他唑巴坦钠30g30g60g60g30g30g60g60g二油S 脂細旦 碱112. 5g270g225g540g112. 5g270g130g540g短憐脂鹏氨 酸37. 5g90g75g180g37. 5g/43g180g卵磷脂磷魏乙 醜//1//90g//胆固醇乙Itfl旨72g160g144g320g72g/120g320g胆固醇/////160g//十撤36g80g72g160g36g80g40g160g甘露醇90g360g180g720g90g/180g720g山梨醇/////360g//慨酸60g240g120g480g60g240g120g480g维生素C15g45g30g90g15g90g30g/亚硫藏钠15g45g30g90g15g/30g180g本发明工艺VV44/VV/翻冻干工艺////V//4试验例1 包封率的测定取实施例1-4和对比例1-4制得的脂质体混悬液IOml置于已处理的透析袋中，将 透析袋浸入透析液(即制备脂质体的水化介质)100ml中，置磁力搅拌器上搅拌，定时更换 透析液，1 后将透析液中内容物取出置IOOml量瓶中，加入5%乳化剂OP的乙醇溶液IOml 破乳，用水定容至刻度。分别取述的实施例1-2和对比例1-3的溶液各20 μ 1，进样分析，计算出脂质体中包裹头孢他啶和他唑巴坦钠的量Wil，根据公式包封率=XiOOVo 计算包封率。 表2包封率测定结果
本发明公布了一种头孢他啶他唑巴坦钠药物组合物脂质体注射剂，其是由以下重量份数计的组分制成头孢他啶3份、他唑巴坦钠1份、脂质体膜材3-20份、附加剂2.2-15份、冻干支持剂5-20份和抗氧化剂1-3份。通过将头孢他啶他唑巴坦钠制成脂质体，极大提高了制剂的稳定性，提高了药品质量，减少了毒副作用，而且具有靶向性，提高了疗效。