专利名称：原料含有水蛭素的药物组合物及其用途的制作方法脑血管疾病是指发生在脑部血管，因颅内血液循环障碍而造成脑组织损害的一组 疾病。人们生活中所讲的“脑血管意外”、“卒中”和“中风”都属于脑血管疾病。心脑血管病是全球范围造成死亡的最主要原因与其它任何原因相比，心脑血管 病每年造成的死亡最多。根据WHO公布的信息，2004年全球范围约有1710万人死于心脑 血管病，占全球死亡的四％。在这些死亡中，估计有720万死于冠心病，570万死于脑卒中。 到2030年，约2360万人将死于心脑血管病，主要死于心脏病和脑卒中。心脑血管疾病造成 的80%以上的死亡病例发生在低收入和中等收入国家。在这些国家中，罹患心脑血管疾病 和其它非传染性疾病的人不易获得符合其需要的有效和公平的医疗服务(包括早期检测 服务)，而且预防措施不足。因此，在低收入和中等收入国家中，许多人年纪轻轻就死于心脑 血管疾病，而且往往在生命最旺盛时离开人世。根据《2007年中国卫生统计年鉴》提供的数 据，2006年中国城市居民冠心病死亡率为57. 1/10万，占所有心脏病死亡的60. 9%。农村 居民冠心病死亡率为33. 74/10万，占心脏病总死亡的47%。总体上看城市地区冠心病死亡 率高于农村地区。2009年卫生部年鉴公布2008年我国因冠心病死亡的比例是121/10万， 为我国第二大致死原因。
基于上述原因，我们通过试验研究确定，原料为水蛭素、纤溶素和透明质酸酶的药 物具有治疗脑血管疾病的新用途，通过“对小鼠脑缺血的影响”、“对大鼠脑缺血的影响”等 试验，证明了水蛭素、纤溶素和透明质酸酶制备的新的药物组合物，对脑血管疾病，特别是 脑梗塞、内皮细胞损伤导致的脑血管疾病具有非常好的药理作用。本发明通过下述技术方案实现的。原料为水蛭素、透明质酸酶和纤溶素的药物组合物在制备治疗脑血管疾病的药物 中的应用。其中脑血管疾病是指脑梗塞。其中脑血管疾病是指血管内皮损伤导致的脑血管疾病。一种新的药物组合物，其中原料为水蛭素0. 1-1重量份，透明质酸酶1-5重量份， 纤溶素0. 1-0. 5重量份。该药物组合物具有治疗脑血管疾病的作用，特别是针对脑梗塞和 血管内皮损伤导致的脑血管疾病具有治疗作用。上述所述药物包括但不限于肠溶制剂。 上述所述肠溶制剂为肠溶片。 上述所述肠溶制剂为肠溶胶囊。上述所述肠溶制剂为肠溶微丸。药理试验例试验1对小鼠脑缺血的影响(结扎双侧颈总动脉合并血压下降法)试验动物KM小白鼠，23 士 2g。试验药物试验1组水蛭素。试验2组水蛭素0. Ig,纤溶素0. 2g。试验3组水蛭素0. lg，透明质酸酶lg，纤溶素0. 2g。试验4组水蛭素lg，透明质酸酶lg，纤溶素0. lg。试验5组水蛭素0. 3g，透明质酸酶4. 5g，纤溶素0. 3g。试验方法将小鼠随机分组模型组、试验药物组；试验药物组灌肠给药，给药量 lmg/kg，每天1次，模型组给予蒸馏水，等容不等量，灌肠给药，每天1次。各组给药5天后， 于末次给药1小时，用12%乌拉坦按1.0g/kg，腹腔注射麻醉后，将小鼠仰卧固定，经颈正 中切口，分离双侧颈动脉并套以“0”号丝线，将双侧颈动脉同时结扎阻断并确定无血流通过 后，30min后切断丝线灌流lOmin，再次阻断30min后，放开线，使血流再通。阻断的同时， 在距尾尖1. 5cm处剪断放血，放血量小于体重的6%，以造成全脑低灌流，放血后热凝止血。 术毕腹腔注射生理盐水1ml。于结扎前后动态观察并记录缺血30min和再灌注90min脑电 图变化。实施结扎术以脑电图呈条直线为标准。气管套管接小动物呼吸机，进行人工通气 (通气量20ml/kg，频率70-80次/分)。(1)采用卒中指数评分和神经病学症状评分标准。卒中指数评分总分25分，O 3为“症状组”;3 9分为“中间组”，可能有损伤； > 10分明显有损伤。毛发脏乱颤抖1分，运动减少或迟钝1分，耳触觉迟钝3分，头翘 起3分，后肢外展呈“八”字3分，上睑下垂1分，转圈3分，惊厥或爆发运动3分，极度 MM 6 分。神经病学症状评分标准总分10分，O分正常，1 3分轻度损伤，4 6分中度损 伤，7 10分严重损伤。有自发探究0分，刺激时能走动1分，正常步态0分，共济失调 1分，爬行2分，无步态3分；能进食0分，不能进食1分；能饮水0分，不能饮水1分； 疼痛刺激可移动0分，仅头或躯干运动1分，肢体回缩或无反应2分。(2)脑含水量测定取全脑分离出大脑皮层，称其湿重后在100°C烤箱中烤干Mh，连续烤干3次，取其 平均值计算脑含水量。试验结果结果见表1。 表1对小鼠脑缺血的影响 泔别卒屮指数分数抻经病学症状分数脑含水量 %模型组15±39±231.3±3.6试验1组8±16±118.9±2.7**试验2组7±25±115.5±1.6**试验3组4±14±19.4±0.8**Δ&试验4组3士 14±19.1±1.0**Δ&实验5组4士 13±18.9±0.8**Δ&注与模型组比较呷< 0. 01 ；与试验1组比较Δ P < 0. 05 ；与试验2组比较&Ρ < 0. 05。试验2对小鼠脑缺血的影响(插线法阻断大脑中动脉法)试验动物昆明种小鼠，20_25g。试验药物试验1组水蛭素。试验2组水蛭素0. lg，透明质酸酶lg。试验3组水蛭素0. lg，透明质酸酶lg，纤溶素0. lg。试验4组水蛭素lg，透明质酸酶lg，纤溶素0. 5g。试验5组水蛭素0. 8g，透明质酸酶1. 5g，纤溶素0. 2g。试验试剂2%红四氮唑(TTC)溶液；10%甲醛液。试验仪器激光多普勒血流测定仪；计算机图像分析系统。模型制备将小鼠随机分组模型组、试验药物组；试验药物组灌肠给药，给药量 lmg/kg,每天1次，模型组给予蒸馏水，等容不等量，灌肠给药，每天1次。给药5天后，于 末次给药1小时，小鼠颈部正中切口，手术显微镜下暴露左侧颈总动脉(CCA)和颈外动脉 (ECA)。电凝并剪断颈外动脉分支枕动脉和颈内动脉(ICA)颅外段分支翼腭突动脉。于CCA 分叉处切断ECA，自断口送入末端呈球型5-0单股尼龙线，直视下将线头转入ICA，向上至遇 阻力为止，线头末端至CCA分叉处距离为(11.0 士 0.5)mm。再灌注小鼠在插线后1小时或 2小时后，将尼龙线自ECA断口徐徐拔出，实现再灌流。缺血后M小时，将小鼠麻醉、断头， 取脑，于脑切片器中距额极l、3、5、7mm处冠状切开大脑，将脑片浸入37°C的2%红四氮唑 (TTC)溶液中孵育30分钟，取出置于10%甲醛液中固定、拍照。采用计算机图像分析系统 (NIH1.61)处理摄影图像，计算梗塞面积。试验结果结果见表2。表2对小鼠脑缺血影响表2对小鼠脑缺血的影响

本发明属于中药技术领域，本发明公开了原料为水蛭素、透明质酸酶和纤溶素的药物组合物，及其药物组合物在制备治疗脑血管疾病的药物中的应用。本发明通过“对小鼠脑缺血的影响“、”对大鼠脑缺血的影响”等试验，证明了水蛭素、纤溶素和透明质酸酶制备的药物对脑血管疾病，特别是脑梗塞、内皮细胞损伤导致的脑血管疾病具有非常好的药理作用。