治疗消化功能紊乱的组合物和方法[0001]本申请是国际申请号PCT / US2009 / 042171，国际申请日2009年4月29日，进入中国国家阶段日期为2010年12月30日，中国申请号200980125500.5，发明名称为“治疗消化功能紊乱的组合物和方法”的分案申请。[0005]消化功能紊乱可包括口腔、食道、胃部或肠道的疾病和/或功能紊乱。一些常见的胃部功能紊乱和/或疾病包括胃炎、胃食道反流病(GERD)、嗜酸细胞性食管炎、酸反流、胃溃瘍、炎性肠病、肠易激综合征、和被Helicobacter pylori (幽门螺旋杆菌)感染。症状可包括灼痛、恶心、呕吐、腹泻、痢疾、食欲缺乏、体重减轻、消化不良和胃积气性消化不良。[0006]胃部功能紊乱可由下列因素引起:药物、饮食、生活方式因素(例如吸烟)、肥胖、妊娠或遗传背景。[0007]混合性结缔组织病(MCTD)是严重的自身免疫疾病，其中机体防御系统攻击自身(也称为Sharp综合征)。临床上，MCTD组合了系统性红斑狼疮和系统性硬皮病的特征，因此被认为是重叠综合征。MCTD通常引起:关节疼痛和/或肿胀、手指肿胀、全身乏力、雷诺现象(手指变得苍白并且对于寒冷或情绪应激的应答麻木)、肌肉发炎和/或虚弱、手部皮肤瘢痕形成、酸反流、食道功能障碍、吞咽困难、活动时呼吸急促、干咳。MCTD的症状广泛变化，并且各人的病症可能非常不同。[0008]用于胃部功能紊乱的治疗性治疗剂包括多种药物和抗酸剂。然而，目前可用的大部分胃部治疗具有明显的副作用，例如头痛、腹痛、腹泻、恶心、产气、咽喉痛、流鼻涕和眩晕。因此，需要更好的胃部治疗剂和治疗方法。本领域中存在着对治疗混合性结缔组织病(MCTD)的症状，例如酸反流、食道功能障碍、吞咽困难等的明显需求。[0009]发明概述[0010]具体实施方案涉及用于治疗消化功能紊乱或疾病、或其至少一种症状的方法，包括向需要所述治疗的受试者施用治疗有效量的电动改变的水性流体，所述电动改变的水性流体包括电荷稳定的含氧纳米结构的离子水溶液，所述纳米结构基本上具有小于约100纳米的平均直径并在离子水性流体中稳定成形，其量足以在所述流体接触活细胞时提供对细胞膜电位和细胞膜电导率中至少一种的调整，其中从而提供消化功能紊乱或其至少一种症状的治疗。在其他方面，电荷稳定的含氧纳米结构是流体中主要的电荷稳定的含气体纳米结构物种。在某些方面，流体中作为电荷稳定的含氧纳米结构存在的溶解氧分子的百分比是选自由以下组 成的组的百分比:大于0.01%;大于0.1%;大于1%;大于5%;大于10%;大于15% ;大于20% ;大于25% ;大于30% ;大于35% ;大于40% ;大于45% ;大于50% ；大于55% ;大于60% ;大于65% ;大于70% ;大于75% ;大于80% ;大于85% ;大于90% ；和大于95%。在另外方面，总溶解氧基本上以电荷稳定的含氧纳米结构存在。根据其他方面，电荷稳定的含氧纳米结构基本上具有小于选自由以下组成的组的尺寸的平均直径:90nm ；80nm ；70nm ；60nm ；50nm ；40nm ；30nm ；20nm ； IOnm ;和小于 5nm。根据另外方面，离子水溶液包括盐水溶液。在某些方面，所述流体是超氧合的。在其他方面，所述流体包含溶剂化电子形式。
[0011]具体方面提供电动改变的水性流体的改变包括所述流体暴露于流体动力诱导的局部电动效应。其他方面提供暴露于局部电动效应包括暴露于电压脉冲和电流脉冲的至少一种。在某些方面，所述流体暴露于流体动力诱导的局部电动效应，包括所述流体暴露于用以产生流体的装置的诱导电动效应的结构部件。在其他方面，所述消化功能紊乱或疾病、或其至少一种症状相关选自由以下组成的组的至少一种病症:胃炎；胃溃疡；十二指肠溃疡；胃食道反流病(GERD);酸反流；嗜酸细胞性食管炎；炎性肠病，包括克罗恩氏病；肠易激综合征；胃肠道感染或创伤，包括被幽门螺旋杆菌、沙门菌属、志贺菌属、葡萄球菌属、弯曲杆菌属、梭菌属、大肠杆菌、耶尔森菌属、弧菌属、念珠菌属、贾第虫属、溶组织内阿米巴、轮状病毒、诺如病毒、腺病毒和星状病毒感染；胃肠道炎症；混合性结缔组织病(MCTD);和溃疡性结肠炎。在甚至其他方面，所述消化功能紊乱或疾病、或其至少一种症状包括选自由以下组成的组的至少一种:酸反流，包括胃食道反流病(GERD);嗜酸细胞性食管炎；和胃肠道炎症。根据另外方面，所述消化功能紊乱或疾病、或其至少一种症状包括以下至少一种:酸反流，包括胃食道反流病(GERD);嗜酸细胞性食管炎。
[0012]具体方面还包括联合疗法，其中至少一种另外的治疗剂被施用至所述患者。根据某些方法，所述至少一种另外的治疗剂选自由以下组成的组:质子泵抑制剂，包括奥美拉唑、泮托拉唑、兰索拉唑、艾美拉唑、泰妥拉唑(tenatoprazole)和雷贝拉唑；组胺H2受体阻断剂，包括雷尼替丁、法莫替丁、西咪替丁和尼扎替丁 ；抗酸剂，包括氢氧化铝、氢氧化镁、碳酸铝、碳酸镁、碳酸钙、碳酸氢钠、水滑石和镁加铝-二甲基硅油；促动力药，包括伊托必利、多潘立酮、胃复安、红霉素、普卢卡必利和西沙比利；止泻药，包括碱式水杨酸铋、洛哌丁胺和diphenocylate ;皮质类固醇，包括氢化可的松、醋酸氢化可的松、醋酸可的松、巯氢可的松、波尼松龙、甲泼尼龙和强的松；解痉剂，包括双环维林、阿托品、甲硝阿托品、美贝维林、东茛菪碱和哌仑西平；免疫调节剂，包括硫唑嘌呤、巯嘌呤和甲氨蝶呤；抗生素，包括阿莫西林(青霉素)、克拉霉素、左氧氟沙星、甲硝唑；生物制品，包括英夫利昔单抗、依那西普、阿达木单抗、赛妥珠单抗和那他珠单抗；抗炎剂，包括4-氨基水杨酸和5-氨基水杨酸；轻泻剂，包括鲁比前列酮和替加色罗；海藻酸；硫糖铝；米索前列醇和莫沙必利及其组合。根据其他方面，所述至少一种另外的治疗剂选自由以下组成的组:质子泵抑制剂、组胺H2受体阻断剂、抗酸剂、促动力药、止泻药、抗胆碱能剂、皮质类固醇(吸入或其他方式)、全身用皮质类固醇、糖皮质激素、解痉剂、免疫调节剂、抗生素、生物制品、抗炎剂、轻泻剂及其组合。根据甚至其他方面，所述至少一种另外的治疗剂选自由以下组成的组:沙丁胺醇、布地奈德、艾美拉唑(Nexium)、和奥美拉唑(Prilosec)、及其活性衍生物。在另外方面,所述至少一种另外的治疗剂选自由以下组成的组=TSLP拮抗剂、TSLPR拮抗剂及其组合。在某些方面，所述拮抗剂选自由以下组成的组:特异性针对下列的中和抗体:TSLP或TSLP受体、可溶性TSLP受体分子、TSLP受体融合蛋白、TSLPR-免疫球蛋白Fe分子及其组合。
[0013]根据某些方面，所述电动改变的水性流体调整一氧化氮的局部或细胞水平。在其他方面，所述电动改变的水性流体促进选自由以下组成的组的至少一种细胞因子在施用部位的局部减少:IL_li3、IL-8、TNF-α和TNF-β。具体方面提供还包括通过同时或附加地用另一种抗炎剂治疗所述受试者来协同或非协同抑制或减少炎症。在另外方面，调整细胞膜电位和细胞膜电导率中至少一种包括:通过改变膜相关蛋白或组分的构象、配体结合活性或催化活性来调整细胞膜结构或功能。根据其他方面，所述膜相关蛋白包括选自由以下组成的组的至少一种:受体、跨膜受体、离子通道蛋白、细胞内附着蛋白、细胞黏附蛋白、和整联蛋白。根据其他方面，所述跨膜受体包括G蛋白偶联受体(GPCR)。在甚至其他方面，所述G蛋白偶联受体(GPCR)与G蛋白α亚基相互作用。在某些方面，所述G蛋白α亚基包括选自由以下组成的组的至少一种:G a s、G a 1、G a q和G α 12。在其他方面,至少一种G蛋白α亚基是G a q。
[0014]具体方面提供调整细胞膜电位和细胞膜电导率中至少一种包括调整细胞内信号转导，所述调整细胞内信号转导包括调整钙依赖性细胞通信途径或系统。根据另外方面，调整细胞内信号转导包括调整磷脂酶C活性。根据其他方面，调整细胞内信号转导包括调整腺苷酸环化酶(AC)活性。
[0015]具体方面提供调整细胞膜电位和细胞膜电导率中至少一种，包括调整与至少一种病症或症状有关的细胞内信号转导，所述病症或症状选自由以下组成的组:胃炎；胃溃疡；十二指肠溃疡；胃食道反流病(GERD);酸反流；嗜酸细胞性食管炎；炎性肠病，包括克罗恩氏病、肠易激综合征；胃肠道感染或创伤，包括被幽门螺旋杆菌、沙门菌属、志贺菌属、葡萄球菌属、弯曲杆菌属、梭菌属、大肠杆菌、耶尔森菌属、弧菌属、念珠菌属、贾第虫属、溶组织内阿米巴、轮状病毒、诺如病毒、腺病毒和星状病毒感染；胃肠道炎症；混合性结缔组织病(MCTD);溃疡性结肠炎；疼痛；恶心；呕吐；腹泻；痢疾；便秘；胃气胀；咽喉痛；喉部或呼吸道刺激；口咽刺激和体重减轻或体重增加。
[0016]某些方面包括施用至细胞网或层，并且还包括调整其中的细胞内连接。根据某些方面，所述细胞内连接包括选自由紧密连接、间隙连接、黏附区和桥粒组成的组的至少一种。在其他方面，所述 细胞网或层包括选自由以下组成的组的至少一种:食管上皮；胃上皮；大肠上皮，包括其盲肠和结肠区域的上皮；小肠上皮，包括其十二指肠、空肠和回肠区域的上皮。在甚至其他方面，所述电动改变的水性流体是氧合的，并且其中流体中的氧在大气压下的存在量为至少8ppm、至少15ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm氧。
[0017]具体方面提供所述电动改变的水性流体包括溶剂化电子形式和电动改变或荷电的氧物种中的至少一种。在另外方面，其中所述溶剂化电子的形式或电动改变或荷电的氧物种以至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm、至少20ppm、或至少40ppm的量存在。在其他方面，所述电动改变的氧合水性流体包括由分子氧稳定的溶剂化电子。根据某些方面，通过口服、舌下、口含、肠胃外、直肠、局部或注射途径施用。根据另外方面，所述施用途径为通过经皮、阴道内、眼内、耳内、鼻内、吸入、或者可移植装置或材料的注入或插入。在其他方面，所述注射途径为皮下、肌肉内、动脉内、腹膜内、脑池内、膀胱内、鞘内或静脉注射。在甚至其他方面，所述电动改变的水性流体包括富氧水。
[0018]在某些方面，调整全细胞电导包括调整所述全细胞电导的至少一种线性或非线性电压依赖性贡献。[0019]具体方面提供一种适用于治疗特征为肠道不适的食道、胃或消化功能紊乱或病症、或所述食道、胃或消化功能紊乱或病症的症状的治疗剂的配制方法，包括:获得适用于治疗受试者的特征为肠道不适的食道、胃或消化功能紊乱或病症、或所述食道、胃或消化功能紊乱或病症的症状的治疗剂；和将所述治疗剂和一定量的电动改变的水性流体组合，所述电动改变的水性流体包含电荷稳定的含氧纳米结构的离子水溶液，所述纳米结构基本上具有小于约100纳米的平均直径并在离子水性流体中稳定成形，所述纳米结构的量足以在所述流体接触活细胞时提供对细胞膜电位和细胞膜电导率中至少一种的调整，其中从而提供适用于治疗特征为肠道不适的食道、胃或消化功能紊乱或病症、或所述食道、胃或消化功能紊乱或病症的症状的治疗剂的配制。
[0020]某些方面提供一种药物组合物，包含:适用于治疗受试者的特征为肠道不适的食道、胃或消化功能紊乱或病症、或所述食道、胃或消化功能紊乱或病症的症状的治疗剂；和一定量的电动改变的水性流体，所述电动改变的水性流体包含电荷稳定的含氧纳米结构的离子水溶液，所述纳米结构基本上具有小于约100纳米的平均直径并在离子水性流体中稳定成形，所述纳米结构的量足以在所述流体接触活细胞时提供对细胞膜电位和细胞膜电导率中至少一种的调整。
[0021]附图简述
[0022]图1是现有技术混合装置的局部横截面、局部框图。
[0023]图2是混合装置的示例性实施方案的框图。
[0024]图3是将第一材料递送到图2的混合装置的示例性系统的图解。
[0025]图4是图2的混合装置顶端部分的不完全局部横截面视图。
[0026]图5是图2的混合装置第一侧面部分的不完全横截面视图。
[0027]图6是图2的混合装置第二侧面部分的不完全局部横截面视图。
[0028]图7是位于图5的第一侧面部分与图6的第二侧面部分之间的图2的混合装置的侧面部分的不完全横截面视图。
[0029]图8是图2的混合装置的转子和定子的透视图。
[0030]图9是图2的混合装置的第一室内部的透视图。
[0031]图10是包括泵410的替代实施方案的图2的混合装置的第一室内部的不完全横截面视图。
[0032]图11是图2的混合装置的第二室内部的透视图。[0033]图12是混合装置的替代实施方案的侧面部分的不完全横截面视图。
[0034]图13是供混合装置的替代实施方案使用的壳体的中部替代实施方案的透视图。
[0035]图14是供混合装置的替代实施方案使用的轴承壳体的替代实施方案的不完全横截面视图。
[0036]图15是通过垂直于旋转轴的平面而取得的图2的混合装置的混合室的横截面视图，描绘了当转子的通孔接近(但不对齐)定子的孔隙时由空泡引起的旋转流类型。
[0037]图16是通过垂直于旋转轴的平面而取得的图2的混合装置的混合室的横截面视图，描绘了当转子的通孔对齐定子的孔隙时由空泡引起的旋转流类型。
[0038]图17是通过垂直于旋转轴的平面而取得的图2的混合装置的混合室的横截面视图，描绘了当之前对齐定子的孔隙的转子的通孔不再与其对齐时由空泡引起的旋转流类型。[0039]图18是转子的替代实施方案的侧视图。
[0040]图19是通过垂直于转子的旋转轴的平面而取得的放大的不完全横截面视图，描绘了在转子中形成的通孔和在定子中形成的通孔的交替构型。
[0041]图20是通过经过并沿转子的旋转轴延伸的平面而取得的放大的不完全横截面视图，描绘了在转子中形成的通孔和在定子中形成的通孔的构型。
[0042]图21是通过经过并沿转子的旋转轴延伸的平面而取得的放大的不完全横截面视图，描绘了在转子中形成的通孔和在定子中形成的通孔的替代偏移构型。
[0043]图22是可用来构建转子的通孔和/或定子的孔隙的形状的图解。
[0044]图23是可用来构建转子的通孔和/或定子的孔隙的形状的图解。
[0045]图24是可用来构建转子的通孔和/或定子的孔隙的形状的图解。
[0046]图25是可用来构建转子的通孔和/或定子的孔隙的形状的图解。
[0047]图26是在表面附近形成的双电层(“EDL”)的图解。
[0048]图27是混合室的内部的模型的透视图。
[0049]图28是图27的模型的横截面视图。
[0050]图29是实验装置的图解。
[0051]图30图解了用图2的混合装置中的氧处理并储存于各自在65度华氏温度封盖的500ml薄壁塑料瓶和1000ml玻璃瓶中的水中的溶解氧水平。
[0052]图31图解了用图2的混合装置中的氧处理并储存于均在39度华氏温度制冷的500ml薄壁塑料瓶和1000ml玻璃瓶中的水中的溶解氧水平。
[0053]图32图解了用图2的混合装置中的氧处理的500ml饮料流体的溶解氧保留。
[0054]图33图解了用图2的混合装置中的氧处理的500ml布劳恩(braun)平衡盐溶液的溶解氧保留。
[0055]图34图解了另外一个实验，其中图2的混合装置用于通过使用图2的混合装置中的氮气处理水来从水中喷射氧。
[0056]图35图解了在标准的温度和压力下通过图2的混合装置从水中喷射氧。
[0057]图36是示例性纳米笼(nanocage)的图解。
[0058]图37A和37B图解了富氧的流体的瑞利散射效应；
[0059]图38图解了在富含气体的流体和去离子对照流体的存在下促有丝分裂测定的细胞因子特征；和
[0060]图39图解了在各种溶解氧饱和比下假单胞菌属(Pseudomonas)细菌的生长速率的差异。
[0061]图40A和40B图解了使用富氧的细胞培养基和不富含气体的培养基的伤口体外愈
入
口 ο
[0062]图41A到41F示出真皮和表皮体内伤口愈合的组织学横切片。
[0063]图42图解了用来检测酸性粘多糖例如透明质酸的处理和对照的愈合伤口中Hale染色的表达；
[0064]图43图解了用来检测处理和对照的愈合伤口中血管发生的Willebrand因子染色的表达；
[0065]图44图解了用来检测处理和对照的愈合伤口中弹性蛋白的Luna染色的检测；
[0066]图45图解了对于处理和对照的愈合伤口的每个视野的肥大细胞的数目；
[0067]图46图解了在使用本发明的富含气体的培养基和对照培养基的角膜成纤维细胞测定中在分开的时间点的死细胞的百分比，
[0068]图47图解了在聚合物袋中本发明的富含气体的流体的储存期限；
[0069]图48图解了在加压罐氧合的流体⑴、本发明的富含气体的流体⑵或对照去离子的流体(3)的存在下使脾细胞与MOG接触的结果。
[0070]图49-58示出细胞因子的全血样品评估结果。
[0071]图59-68示出支气管肺泡灌洗流体(BAL)样品评估的对应的细胞因子结果。
[0072]图69-75示出缓激肽B2膜受体被固定到氨丙基硅烷(aminopropylsilane) (APS)生物传感器上的研究。在图69中指明了样品板设置，并且根据如图71中所指明的样品设置对缓激肽与固定化受体的结合进行了评定。缓激肽结合的结果示于图72中。根据在图73中所指明的设置进一步滴定与受体结合的缓激肽。如图74所表明的，与B2受体结合的缓激肽是浓度依赖性的，并且与生理盐水相比在本发明公开的专利的富含气体的盐水流体中亲和力增加。与B2受体结合的缓激肽的稳定示于图75中。
[0073]图76-83示出显示本文公开的具体实施方案影响调节性T细胞的能力的数据。该研究涉及辐射抗原提呈细胞并引入抗原和T细胞。
[0074]图84示出本发明的电动产生的流体减少了鲑鱼降钙素和动物模型的血清摄入。结果与紧密连接的增强是一致的。
[0075]图85-89示出在肺组织中的紧密连接相关蛋白的表达水平，所述肺组织是来自用于产生图84的数据的动物模型。
[0076]图90-94示出从暴露于RDC1676-01 (通过具有添加的额外的氧的本专利装置处理的无菌盐水；本发明公开的富含气体的电动产生的流体(Rev))的人包皮角质形成细胞获得的数据，显示出NOSl和N0S3、以及Nostrin、N0S3的上调。
[0077]图95和96示出支持局部电动效应(电压/电流)的数据，所述电动效应发生在包括绝缘的转子和定子部件的混合装置中以允许在电动流体产生的过程中检测电压/电流效应。
[0078]图97A-C示出为进一步表征本发明的电动产生的流体的基本性质而进行的核磁共振(NMR)研究的结果。电动产生的流体增加了报告分子海藻糖溶质的13C-NMR线宽。[0079]图98和99不出为进一步表征本发明的电动广生的流体的基本性质而进彳丁的伏安研究(即方波伏安法(图98)和溶出极谱法(图99))的结果。在-0.14V、-0.47V、_1.02V和-1.36V观察到对电动产生的流体唯一的方波伏安峰差异(相比于对照)。对于电动产生的Revera和Solas流体在-0.9伏特看到明显的极谱峰(polaragraphic peak),并且非电动产生的空白和盐水对照流体的波谱在-0.19和-0.3伏特示出特征峰，所述特征峰在电动产生的流体的波谱中是不存在的。
[0080]图100-106示出评定电动产生的流体的测试对上皮细胞膜极性和离子通道活性的影响的膜片钳技术的结果。结果表明本发明的电动产生的流体影响全细胞电导的电压依赖性贡献。
[0081]图107A-D和108A-D示出数据，所述数据表明本发明的电动产生的流体(例如RDC1676-00、RDC1676-01、RDC1676-02和RDC1676-03)当单独或作为硫酸沙丁胺醇的稀释剂在雄性豚鼠中施用时保护免受醋甲胆碱诱导的支气管收缩。
[0082]图109-114示出为评定本发明的电动产生的流体在Brown Norway大鼠卵白蛋白敏化模型中的气道抗炎特性而进行的布地奈德实验的结果。本发明的电动产生的流体降低了嗜酸性粒细胞计数，示出在降低嗜酸性粒细胞计数上与布地奈德的强协同效应，降低Penh值，提高潮气量，降低Eotaxin (嗜酸性粒细胞趋化因子)的血液水平，在用本发明的电动产生的流体(例如Rev-60)单独或连同布地奈德一起处理所产生的激发后6小时显著增强两种主要的关键抗炎细胞因子ILlO和干扰素Y的血液水平，并且降低了 Rantes的全身水平。数据示出存在布地奈德750 μ g / kg与本发明的电动产生的流体(例如Rev-60)的实质的协同效应。
[0083]图115示出本发明的电动产生的流体(例如Rev-60和Solas)分别减少支气管上皮细胞(BEC)中的DEP诱 导的TSLP受体表达大约90%和50%，而生理盐水(NS)仅有边际效应。
[0084]图116示出本发明的电动产生的流体(例如Revera60和Solas)分别抑制支气管上皮细胞中的DEP诱导的细胞表面结合的MMP-9水平大约80%和70%，而生理盐水(NS)仅有边际效应。
[0085]图117A-C证实一系列膜片钳实验的结果，所述实验在两个时间点(15分钟(左组)和2小时(右组))和不同的电压方案中评价电动产生的流体(例如RNS-60和Solas)对上皮细胞膜极性和离子通道活性的作用。
[0086]图118A-C涉及图117A-C所涉及的实验，其示出在3种电压方案中(A，从OmV阶跃；B,从-60mV阶跃；C,从-120mV阶跃)和2个时间点(15分钟(空心圆)和2小时(实心圆))，RNS-60电流数据减去Solas电流数据所得到的图。
[0087]图119A-D证实一系列膜片钳实验的结果，所述实验利用不同的外部盐溶液和在不同的电压方案中(A和C组显示从OmV的阶跃，而B和D组显示从-120mV的阶跃)评价电动产生的流体(例如Solas (A和B组)和RNS-60 (C和D组))对上皮细胞膜极性和离子通道活性的作用。
[0088]图120A-D涉及图119A-D所涉及的实验，其示出对于Solas (A和B组)和Revera60 (C和D组)，在2种电压方案中(A和C组，从OmV阶跃;以及B和D组，从-120mV阶跃)从20mM CaCl2 (菱形符号)和40mM CaCl2 (方形符号)电流数据中减去CsCl电流数据(显示于图119中)所得到的图。
[0089]图 121A 示出对 RNS60-1 (rns60_ll μ m3D.jpg)的 Imm2AFM 扫描。小峰(“I”)表示疏水性纳米气泡，其具有~20nm宽和~1.5nm高或者更小。
[0090]图121B 示出对PNS60-l(pp60-llym3d.jpg)的 Imm2 扫描。该扫描揭示出峰(“2”)
(疏水性纳米气泡)，其基本上大于(~60nm宽和~5nm高)RNS60-1所观察到的峰。
[0091]发明详述
[0092]本文公开的某些实施方案涉及提供通过与受试者的部位接触或施用于受试者来治疗胃部功能紊乱的至少一种症状的组合物和方法、包含富含气体的流体的治疗组合物。在某些特定实施方案中，富含气体的流体包含富氧水。
[0093]消化系统相关的功能紊乱和病症
[0094]本文公开的某些实施方案涉及通过预防或缓解消化系统相关的病症或疾病的至少一种症状来治疗受试者的治疗组合物和方法。例如，本文公开的治疗组合物和/或方法可用于治疗或预防选自由以下组成的组的一种或多种病症或疾病:胃炎；胃溃疡；十二指肠溃疡；胃食道反流病(GERD);酸反流；嗜酸细胞性食管炎；炎性肠病，包括克罗恩氏病；肠易激综合征；胃肠道感染或创伤，包括被幽门螺旋杆菌、沙门菌属、志贺菌属、葡萄球菌属、弯曲杆菌属、梭菌属 、大肠杆菌、耶尔森菌属、弧菌属、念珠菌属、贾第虫属、溶组织内阿米巴、轮状病毒、诺如病毒、腺病毒和星状病毒感染；胃肠道炎症；溃疡性结肠炎；和其他病症或疾病。
[0095]根据某些方面，嗜酸细胞性食管炎是食道的变态反应性炎性病症，其中在食道中嗜酸性粒细胞的计数提高。症状包括吞咽困难、食物嵌塞和胃灼热。
[0096]电动产牛的流体:
[0097]如本文所用的“电动产生的流体”是指出于本文工作实施例的目的通过本文详细描述的示例性混合装置(还参见US200802190088和W02008 / 052143，通过引用将二者整体并入本文)而产生的 申请人:发明的电动产生的流体。如本文公开和呈现的资料所证明，电动流体表示相对于现有技术非电动流体，包括相对于现有技术氧合的非电动流体(例如压力罐氧合的流体及类似物)的新颖的且从根本上不同的流体。如在本文各方面中所公开的那样，电动产生的流体具有独特且新颖的物理和生物特性，包括但不限于以下:
[0098]在具体的方面，电动改变的水性流体包含电荷稳定的含氧纳米结构的离子水溶液，所述纳米结构实质上具有小于约100纳米的平均直径并在离子水性流体中稳定形成，其量足以提供在流体与活细胞接触之后对细胞膜电位和细胞膜电导率中的至少一种的调難
iF.ο
[0099]在具体的方面，电动产生的流体是指在流体动力诱导的、局部化(例如就全部流体体积而言是非均一的)的电动效应(例如电压/电流的脉冲)例如本文所述的装置部件-局部化效应的存在下产生的流体。在具体的方面，所述流体动力诱导的、局部化的电动效应与本文公开并讨论的表面相关的双层和/或流动电流效应联合。
[0100]在具体的方面，电动改变的水性流体适合于调节其中溶解的报告溶质(例如海藻糖(Trehelose))的13C-NMR线宽。NMR线宽效应是在测量例如在具体工作实施例中如本文所述的测试流体中的溶质“翻滚”的间接方法中。
[0101]在具体的方面，电动改变的水性流体的特征为以下至少一种:在-0.14V、-0.47V、-1.02V和-1.36V的任何一个的与众不同的方波伏安峰差异；在_0.9伏特的极谱峰；以及在-0.19和-0.3伏特不存在极谱峰，在-0.19和-0.3伏特的极谱峰是具体工作实施例中本文所公开的电动产生的流体所独有的。
[0102]在具体的方面，电动改变的水性流体适合于改变细胞膜电导率(例如在本文公开的膜片钳研究中测量的全细胞电导的电压依赖性贡献)。
[0103]在具体的方面，电动改变的水性流体是氧合的，其中在该流体中的氧的存在量为大气压下至少15ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的溶解氧。在具体的方面，电动改变的水性流体具有小于15ppm、小于IOppm的大气压下的溶解氧或大致环境氧水平。
[0104]在具体的方面，电动改变的水性流体是氧合的， 其中在该流体中的氧的存在量在大约8ppm与大约15ppm之间，并且在这种情况中有时在本文称作“Solas”。
[0105]在具体的方面，电动改变的水性流体包括溶剂化电子(例如，通过分子氧稳定)和电动改变和/或带电的氧物种的至少一种，并且其中在某些实施方案中所述溶剂化电子和/或电动改变或带电的氧物种的存在量为至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。
[0106]在具体的方面，电动改变的水性流体适合于改变细胞膜的结构或功能(例如改变膜相关蛋白的构象、配体结合活性或催化活性)至足以提供对细胞内信号转导的调节，其中在具体的方面，所述膜相关蛋白包括选自由以下组成的组的至少一种:受体、跨膜受体(例如G蛋白偶联受体(GPCR) ,TSLP受体、β 2肾上腺素能受体、缓激肽受体等)、离子通道蛋白、细胞内附着蛋白、细胞粘附蛋白和整联蛋白。在某些方面，发挥效应的G蛋白偶联受体(GPCR)与G蛋白的α亚基(例如G a s、G a 1、G a (j和G α 12)相互作用。
[0107]在具体的方面，电动改变的水性流体适合于调节细胞内信号转导，包括钙依赖性细胞通信途径或系统的调节(例如磷脂酶C活性的调节或腺苷酸环化酶(AC)活性的调节)O
[0108]在具体的方面，电动改变的水性流体的特征为在本文工作实施例和其他地方中描述的各种生物活性(例如细胞因子、受体、酶和其他蛋白质和细胞内信号传导途径的调控)。
[0109]在具体的方面，电动改变的水性流体表现出与乙酸格拉默干扰素、米托蒽醌和/或那他珠单抗的协同作用。在具体的方面，电动改变的水性流体降低如本文工作实施例所示的支气管上皮细胞(BEC)中的DEP诱导的TSLP受体的表达。
[0110]在具体的方面，电动改变的水性流体抑制在支气管上皮细胞(BEC)中DEP诱导的细胞表面结合的ΜΜΡ9水平，如本文工作实施例中所示。
[0111]在具体的方面，电动改变的水性流体的生物效应被白喉毒素抑制，表明β阻断、GPCR阻断和钙离子阻断影响电动改变的水性流体的活性(例如关于调节性T细胞的功能)，如在本文工作实施例中所示。
[0112]在具体的方面，电动改变的水性流体的物理和生物效应(例如改变细胞膜的结构或功能至足以提供对细胞内信号转导的调节的能力)在一个封闭的容器(例如，封闭的气密容器)中持续了至少两个月、至少三个月、至少四个月、至少五个月、至少六个月或更长时间。[0113]因此，其他方面提供所述电动产生的溶液和制备电动改变的氧合的水性流体或溶液的方法，所述方法包括:在相对运动的两个间隔的表面间提供流体材料流，并且在所述两个间隔的表面间界定混合体积，其中流动的流体材料在混合体积内和穿过混合体积的单次通过的滞留时间为大于0.06秒或大于0.1秒；和在适于将至少20ppm、至少25ppm、至少30、至少40、至少50或至少60ppm的氧(O2)溶解在材料中并电动改变流体或溶液的条件下将氧引入混合体积内的流动的流体材料。在某些方面，在小于100毫秒、小于200毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒内将氧注入材料中。在具体实施方案中，表面积与体积比为至少
12、至少20、至少30、至少40或至少50。
[0114]其他方面提供制备电动改变的氧合的水性流体或溶液的方法，所述方法包括:在两个间隔的表面间提供流体材料流，所述两个间隔的表面在其间界定了混合体积；在适于在小于100毫秒、小于200毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒内将至少20ppm、至少25ppm、至少30、至少40、至少50或至少60ppm的氧扩散到材料中的条件下将氧引入在混合体积中的流动的材料中。在某些方面，在混合体积内的所述流动的材料的滞留时间为大于0.06秒或大于0.1秒。在具体实施方案中，表面积与体积比为至少12、至少20、至少30、至少40或至少50。
[0115]另外的实施方案提供制备电动改变的氧合的水性流体或溶液的方法，所述方法包括使用用于通过混合第一材料和第二材料来产生输出混合物的混合装置，所述装置包括:第一室，其被构造为接纳来自第一材料来源的第一材料；定子；具有旋转轴的转子，所述转子被设置在定子内并且被 构造为环绕其中的旋转轴旋转，所述转子和定子的至少一个具有多个通孔；在转子和定子之间界定的混合室，所述混合室与第一室流体联通并且被构造为接纳来自第一室的第一材料，并且所述第二材料经由转子和定子中的一个中所形成的多个通孔供给混合室；第二室，其与混合室流体联通并且被构造为接纳来自混合室的输出材料；以及安装在第一室内的第一内部泵，所述第一内部泵被构造为将第一材料从第一室抽吸到混合室中。在某些方面，第一内部泵被构造为在第一材料进入混合室之前对第一材料施加以圆周速度。
[0116]其他实施方案提供制备电动改变的氧合的水性流体或溶液的方法，所述方法包括使用用于通过混合第一材料和第二材料来产生输出混合物的混合装置，所述装置包括:定子；具有旋转轴的转子，所述转子被设置在定子内并且被构造为环绕其中的旋转轴旋转；在转子和定子之间界定的混合室，所述混合室具有:开放的第一末端，第一材料通过该开放的第一末端进入混合室；和开放的第二末端，输出材料通过该开放的第二末端离开混合室，第二材料通过转子和定子的至少一个进入混合室；第一室，其与所述混合室的开放的第一末端的至少大部分联通；以及第二室，其与所述混合室的开放的第二末端联通。
[0117]其他方面提供根据上述方法的任何一种制备的电动改变的氧合的水性流体或溶液。
[0118]舰
[0119]炎症可以作为对外来材料尤其是微生物来源入侵受试者的防御性反应产生。此外，机械创伤、毒素和瘤形成可以诱导炎性反应。白细胞的积聚和随后的激活是大部分形式的炎症发病的中心事件。炎症的缺乏可能危害宿主，使其对恶化的感染或创伤敏感。诸如延长的炎性反应的过量炎症可能导致炎性疾病，所述炎性疾病包括但不限于:糖尿病、动脉硬化、白内障、慢性皮肤病、再灌注损伤和癌症；感染后综合征，例如感染性脑膜炎、风湿热；以及风湿性疾病，如系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎。这些疾病每年影响着世界范围内数百万的人们，并且引起死亡率和发病率增加。这些不同疾病过程中炎性反应的共性使得其调节成为预防或治疗人类疾病的主要要素。
[0120]促炎性细胞因子的过量产生参与了大量炎性疾病和自身免疫疾病的发病。TNFa分泌是炎性级联引发的主要事件(Brennan F.Μ.,等人.Lancet, 1989, 2:244-7 ；HaworthC，等人Eur.J.1mmunol.1991,21:2575-2579)并且其直接促进这些疾病的引发和维持。其他细胞因子也发挥作用，包括白细胞介素I β (IL-Ιβ)、IL-6、IL-8、IL-12、一氧化氮(NO)、IFN-Y、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)以及IL-10。这些细胞因子的某些(例如，IL-8)可以增加或加重炎性反应，而其他(例如，IL-10)可以降低或减轻炎性反应。
[0121]免疫系统的细胞尤其是巨噬细胞会对激活性刺激物反应而分泌这些细胞因子中的一些。细胞因子的靶细胞可以在任何身体隔室局部化并且可经由长距离机制作用或可以作用于邻近的细胞。因此，细胞因子可以以局部的或全身的方式调控炎症。 [0122]消化功能紊乱
[0123]具体实施方案涉及使用本发明的电动改变的流体来治疗肠道功能紊乱。根据具体方面，肠道功能紊乱是微生物感染的结果。所述微生物可以是细菌、病毒、真菌或寄生虫。引起肠道功能紊乱的细菌微生物包括但不限于沙门菌属、志贺菌属、葡萄球菌属、空肠弯曲杆菌、梭菌属、大肠杆菌、耶尔森菌属和弧菌属。引起肠道功能紊乱的病毒微生物包括但不限于轮状病毒、诺如病毒、腺病毒和星状病毒。真菌感染微生物可以是念珠菌属。寄生虫微生物包括但不限于原生动物。引起肠道功能紊乱的原生动物包括但不限于贾第虫属和变形虫属溶组织内阿米巴。
[0124]消化系统病症或紊乱的症状通常包括疼痛、恶心、呕吐、腹泻、痢疾、便秘、胃气胀、咽喉痛、喉部或呼吸道刺激、口咽刺激、体重减轻或体重增加等。
[0125]治疗方法
[0126]术语“治疗”是指包括逆转、缓解、抑制疾病、功能障碍或病症或它们的一种或多种症状的进展或预防疾病、功能障碍或病症或它们的一种或多种症状；并且“治疗”和“治疗上”是指如本文所定义的治疗的行为。
[0127]“治疗有效量”是在实施本文所提供的本发明的过程中所使用的任何化合物的任何量，所述量足以逆转、缓解、抑制疾病、功能障碍或病症或它们的一种或多种症状的进展或预防疾病、功能障碍或病症或它们的一种或多种症状。
[0128]本文的某些实施方案涉及通过预防或缓解与某些病症或疾病(例如消化功能紊乱)相关的炎症的至少一种症状来治疗受试者的治疗组合物和方法。例如，本文所公开的治疗组合物和/或方法可有用于治疗或预防选自下组的一种或多种病症或疾病:胃部功能紊乱和/或疾病，包括胃炎、胃食道反流病(GERD)、嗜酸细胞性食管炎、酸反流、胃溃疡；炎性肠病；肠易激综合征；和被Helicobacter pylori (幽门螺旋杆菌)感染。
[0129]本文的另外实施方案涉及使用补液疗法(rehydration therapy)的治疗方法,其已经多年被用于对抗与腹泻和/或痢疾有关的脱水，特别是胃肠炎，例如由沙门菌属、志贺菌属、葡萄球菌属、空肠弯曲杆菌、梭菌属、大肠杆菌、耶尔森菌属、弧菌属、贾第虫属、溶组织内阿米巴、念珠菌属、轮状病毒、诺如病毒、腺病毒或星状病毒引起的胃肠炎。补液疗法的施用可以通过口服、皮下、腹膜内、鼻胃(NG)管饲(例如通过NG管补液)、直肠内、静脉内或动脉内(例如静脉内或动脉内输注)途径来进行。医务人员通常鼓励ORT以补充由于腹泻而在大便中损失的水分。典型的ORT含有盐和糖的溶液。根据某些实施方案，使用本发明的电动产生的水性流体制备盐和糖的溶液以形成ORT。根据其他实施方案，本发明的流体制备的ORT之后可根据普通的步骤和方案施用。
[0130]与炎症和/或消化功能紊乱相关的许多病症或疾病已用类固醇，甲氨蝶呤，包括环磷酰胺、环孢菌素、硫唑嘌呤和来氟米特在内的免疫抑制药物，诸如阿司匹林、扑热息痛和C0X-2抑制剂之类的非类固醇抗炎剂、金剂和抗疟药治疗来治疗。
[0131]与消化功能紊乱相关的许多病症或疾病已用类固醇(包括皮质类固醇，例如氢化可的松、醋酸氢化可的松、醋酸可的松、巯氢可的松、波尼松龙、甲泼尼龙和强的松)以及通常的酸中和与抑制药物来治疗。一些例子包括抗酸剂、硫糖铝、H2阻断剂、质子泵抑制剂、促动力药、止泻剂、解痉剂、免疫调节剂、生物制品、抗炎剂、轻泻剂、海藻酸、米索前列醇和莫沙必利。抗酸剂通常中和胃酸，增加胃与十二指肠的pH。通常，抗酸剂含有钙、镁、铝或其他反应性离子。
[0132]H2阻断剂(例如西咪替丁、法莫替丁、尼扎替丁和雷尼替丁)是胃壁细胞的组胺诱导的酸分泌的可逆阻断剂。质子泵抑制剂(包括奥美拉唑、兰索拉唑、雷贝拉唑、泮托拉唑、艾美拉唑和泰妥拉唑)通过特异性抑制胃壁细胞的质子-钾ATP酶系统来抑制胃酸分泌。
[0133]促动力药(包括伊托必利、多潘立酮、胃复安、红霉素、普卢卡必利、和西沙比利)是主要效果为改变肠道转运的速度的药物。解痉剂(包括双环维林、阿托品、甲硝阿托品、美贝维林、东茛菪碱和哌仑西平)抑制胃部和肠道的痉挛。
[0134]免疫调节剂(包括硫唑嘌呤、巯嘌呤和甲氨蝶呤)是增强免疫系统的药剂。生物制品(包括英夫利昔单抗、依那西普、阿达木单抗、赛妥珠单抗、和那他珠单抗)是由经常调整免疫系统的活生物体制备的药物，对于肠道功能紊乱，大部分生物制品是抗体或其衍生物。抗抗炎剂(包括4-氨基水杨酸和5-氨基水杨酸)降低消化道的炎症。轻泻剂(包括鲁比前列酮和替加色罗)诱导肠道运动或软化大便。这些治疗剂可组合本文所述的公开的实施方案的任一种使用。在某些实施方案中，抗生素(包括阿莫西林、克拉霉素、左氧氟沙星和甲硝唑)的治疗方案可组合任一种公开的特征，特别是如果怀疑或证实细菌感染(例如被幽门螺旋杆菌、沙门菌属、志贺菌属、葡萄球菌属、空肠弯曲杆菌、梭菌属、大肠杆菌、耶尔森菌属、弧菌属或其他细菌感染)。
[0135]这些药物具有多种缺点和副反应，包括注射部位反应、皮疹、上呼吸道感染、自身免疫功能紊乱和对感染的易感性增加。另外，多种抗炎药物需要静脉(IV)或皮下(SC)施用，这和更便捷和顺应性更好的口服或局部皮肤途径相反。因此，仍存在开发用于和炎症有关的病症和疾病的新的药物和治疗方法的需要。
[0136]联合疗法
[0137]另外的方面提供本文公开的发明方法，进一步包括联合疗法，其中，将至少一种另外的治疗剂施用于患者。在某些方面，所述至少一种另外的治疗剂选自:类固醇；甲氨蝶呤；免疫抑制药物，包括环磷酰胺、环孢霉素、硫唑嘌呤和来氟米特；非留体抗炎剂，例如阿斯匹林、扑热息痛和C0X-2抑制剂；金剂；抗疟治疗剂；类固醇(包括皮质类固醇,例如氢化可的松、醋酸氢化可的松、醋酸可的松、巯氢可的松、波尼松龙、甲泼尼龙、和强的松)；抗酸剂；硫糖铝*阻断剂；质子泵抑制剂；促动力药；止泻剂；解痉剂；免疫调节剂；生物制品；抗炎剂；轻泻剂；海藻酸；米索前列醇和莫沙必利。
[0138]电动产生的富含气体的流体和溶液的抗炎活性
[0139]根据本发明的某些方面，本文所公开的富含气体的流体和/或溶液具有抗炎特性和作用，并且可用作治疗受与炎性神经变性有关的疾病或功能障碍折磨的受试者的抗炎剂。图38显示来自健康血液供体的经过刺激的淋巴细胞的细胞因子特征的实验结果。如图38中可以看到的，本发明的富含氧的流体(水)引起特定细胞因子的下调，尤其是IL-6、IL-8 和 IL-1 β。
[0140]促炎性细胞因子的产生增加参与了大量炎性疾病和自身免疫疾病的发病。TNFa分泌是炎性级联引发的主要事件(Brennan F.Μ.,等人.Lancet, 1989, 2:244-7 ；HaworthC，等人Eur.J.1mmunol.1991,21:2575-2579)并且其直接促进炎性疾病和自身免疫疾病的引发和维持。其他促炎性细胞因子也发挥有作用，包括白细胞介素I β (IL-Ιβ)、IL-6、IL-8、IL-12、一氧化氮、IFN-Y和GM-CSF，而诸如IL-10的抗炎性细胞因子则可以降低疾病。免疫系统的细胞尤其是巨噬细胞会对激活性刺激物反应而分泌这些细胞因子中的许多。[0141]炎性过程中涉及了多种细胞类型。单核细胞、巨噬细胞和其他免疫细胞的TNFa过量产生是大量疾病发病的关键因素。巨噬细胞和T细胞在免疫反应的引发和维持中尤其发挥重要的作用。一旦被病理的或免疫原性刺激物激活，巨噬细胞便通过释放包括下列的大量细胞因子而反应:TNF- a、IL-1 β、IL-8, IL-12、一氧化氮(NO)、IL-6, GM-CSF, G-CSF,M-CSF以及其他。T细胞释放IL-2、IL-4、INF-y和其他炎性细胞因子。这些细胞因子激活其他的免疫细胞，并且一些也可以作为独立的细胞毒性剂起作用。巨噬细胞和T细胞来源的炎性介质的过量释放可特定地导致正常细胞和周围组织损伤。
[0142]促炎性细胞因子参与了 HIV-AIDS和其他病毒感染，包括巨细胞病毒感染、流感病毒感染和疱疹病毒家族感染。TNFa增强人巨细胞病毒的主要即时早期增强子/启动子的基本活性，并且在前期单核细胞(premonocytic cell)中的潜伏性HCMV感染再激活中起作用(Prosch S.，等人 Virologyl995, 208:197-206)。
[0143]此外，大量炎性细胞因子促进患脓毒症或内毒素性休克的患者的发病率。例如，TNFa和IL-Ιβ在脓毒症、败血性休克和内毒素性休克中具有已经充分确定的重要作用。这些细胞因子的水平增加伴随有发热、低血压和休克(Smith J.W.等人J.Clin.0ncol.1992，10:1141-1152 ；Chapman P.B.，等人 J.Clin.0ncol.1987,5:1942-1951)以及磷脂酶 A2(Gronich J.，等人 J.Clin.1nvest.1994,93:1224-1233)和 NO 合成酶的基因表达的诱导。
[0144]NO从平滑肌细胞的诱导在败血性休克期间介导了平均动脉压和全身血管阻力的降低，这表明了 NO的基本作用。因此，对IL-8、IL-li3和NO的靶下调作用可以有益于治疗炎性疾病或病患，包括脓毒症、败血性休克和内毒素性休克。
[0145]TNFa的过度产生促进诸如糖尿病和类风湿性关节炎的大量自身免疫疾病的临床特征。系统性红斑狼疮(SLE)也会被IL-1 β和TNF a水平增加促进。在狼疮患者中，血清C反应性蛋白、IL-1 β和TNFa水平高于对照，这表明炎性反应的增加在该疾病中起作用(Liou L.B.Clin.Exp.Rheumatol.2001，19:515-523)。具有一种形式的 SLE 即神经精神性红斑狼疮(NPLE)的患者的研究表明表达TNF α的mRNA的外周血单核细胞的数目以及NO代谢物的脑脊液水平与NPLE疾病的严重程度相关(Svenungsson E.,等人.Ann.Rheum.Dis.2001，60:372-9)。
[0146]在动物模型中，IL-1和TNFa在多种急性和慢性反应中起重要作用。此外，IL-11、IFNa和IFNP还可以上调炎性反应。相反地，几种细胞因子可以参与下调炎性反应(即，IL-4、IL-10、IL-13以及其他)。如在实施例1中所示，与具有T3抗原的本发明的富含气体的流体接触的细胞显示出比在具有T3抗原的对照培养基中增加的IFN- Y水平，而具有T3抗原的本发明的富含气体的培养基中IL-8低于具有T3抗原的对照培养基。此外，在具有PHA的本发明的富含气体的培养基中IL-6、IL-8和TNF-a水平低于具有PHA的对照培养基，而具有PHA的本发明的富含气体的流体中的IL-1 β水平与具有PHA的对照培养基相比则较低。在单独的本发明的富含气体的培养基中，IFN-Y水平高于对照培养基。这些结果与抗炎性微环境一致。
[0147]NO被认为是炎性反应的介质和调节剂。它对病原具有细胞毒性特性，但是也可能对受试者自身的组织具有有害作用。(Korhonen等人，Curr Drug TargetsInflammAllergy4 (4):471-9, 2005)。NO与可溶性的鸟苷酸环化酶反应形成环尿苷一磷酸(cGMP)，该环尿苷一磷酸介导许多NO的作用。NO也可以与分子氧和过氧化物阴离子相互作用产生可以改变各种细胞功能的活性氧物种。NO的这些间接作用对炎症具有显著的作用，其中大量NO由诱导型NO合成酶(iNOS)产生并且活性氧物种由激活的炎性细胞合成。 [0148]NO可以由角质形成细胞、成纤维细胞、内皮细胞和可能的其他细胞产生。NO的一些血管作用包括血管舒张、抑制血小板对血管内皮的粘附、抑制白细胞对血管内皮的粘附以及清除超氧化物酶。(Shah 等人，Env.Health Persp.v.106 (5):1139-1143)。
[0149]此外，已经显示NO合成的抑制延缓伤口收缩、改变胶原组织并改变新生表皮(neoepidermis)厚度。(Amadeu 和 Costa, J.Cutan.Pathol.33:465-473, 2006)。伤口中肥大细胞迁移和血管发生也受NO抑制的影响。(出处同上)不受任何具体的机制理论束缚，在某些实施方案中，本发明的富含气体的流体可以调节局部的NO和/或细胞NO的产生或降解，这与本文所公开的实施例部分所说明的伤口愈合作用谱一致。由于调控途径不同，在某些实施方案中，本发明的富含气体的流体可以增加NO产生和/或延迟NO降解，而在其他的某些实施方案中，本发明的富含气体的流体可以降低NO产生和/或促进NO降解。
[0150]特定地，用富含氧的盐水溶液处理伤口显示在第4天至第11天和第3天与第11天之间伤口愈合增加，用富含氧的盐水溶液处理的伤口中新表皮迁移速度为用生理盐水溶液处理的伤口的表皮迁移的2至4倍，如本文的实施例9所示。该研究还显示在第15天和第22天之间，如通过较早地形成了较多成熟的表皮层所证明的，用富含氧的盐水溶液处理的伤口以较快的速率分化。在所有阶段，在用富含氧的盐水溶液处理的伤口内没有出现与正常愈合相伴随的表皮中所出现的增厚。
[0151]因此，根据伤口愈合作用谱，但不受任何具体理论限制，据信富含氧的盐水溶液可以在伤口内调节NO的局部水平和/或细胞水平。NO在伤口愈合中调节生长因子、胶原沉积、炎症、肥大细胞迁移、表皮增厚和新血管形成。此外，一氧化氮是由受氧调节的诱导型酶产生的。[0152]在肥大细胞迁移的情况下，对于富含氧的溶液还出现了迁移早晚的差异。这与关于NO合成抑制领域中已知的情况一致(Amadeu和Costa, J.Cutan Pathol33:465-473,2006)。
[0153]现在参考图41A至41F，各图解比较了存在或不存在富含氧的盐水溶液的猪表皮组织的伤口愈合结果。如可以看到的，在第1、4和16天进行了对照伤口和使用富含氧的盐水溶液的伤口的愈合观察。
[0154]图41A图解第I天对照伤口的伤口愈合。如可以看到的，伤口显示出表皮/真皮增厚和轮廓损失。图41B图解第I天使用富含氧的盐水溶液处理的伤口的伤口愈合。伤口显示出通常在新伤口上正常的表皮/真皮厚度和正常的轮廓。
[0155]现在参考图41C和41D，图解了第4天对照伤口的伤口愈合和第4天用富含氧的盐水溶液处理的伤口的伤口愈合。对于图41C中所图解的对照伤口，伤口显示出600微米的表皮突出物。在图41D中的用富含氧的盐水溶液处理的伤口中，图示了 1200微米的表皮突出物。因此，在实验的前4天，使用富含氧的盐水溶液处理的伤口中产生的表皮突出物显示出为未用富含氧的盐水溶液处理的伤口两倍的表皮生长速率。[0156]现在参考图41E，图解了第16天的对照伤口。该伤口与图41F中所图解的用富含氧的盐水溶液处理的伤口所示出的相比，显示出具有表皮/真皮轮廓损失的较低分化的表皮。图41F在伤口中显示出更加分化的表皮和更正常的表皮/真皮轮廓。
[0157]在炎症过程的前两个阶段，外来体被破坏，例如，如果外来体为生物体；或外来体周围的组织被松散，例如，如果外来体为碎片。在愈合阶段，炎症开始消退；各血管和血管模式变得再次正常；并且创伤修复开始。修复过程的三个主要事件为(I)通过成纤维细胞增殖形成新的结缔组织；(2)上皮再生；和(3)长出新的毛细血管。
[0158]甚至在炎症消退之前，成纤维细胞就开始由周围的正常组织向损伤区域移动，在所述正常组织中，成纤维细胞通常以休眠状态存在。它们通过沿纤维蛋白链的变形运动迁移并将它们本身分布在整个愈合区域。一旦固定在损伤组织的位置内，它们便开始合成胶原并分泌这种蛋白，这种蛋白将其自身安排在纤维中。纤维以其纵轴在最大应力方向将其自身定向。随着胶原束硬度增加，成纤维细胞逐渐退化并紧密地连接至该束，并且损伤区域转化为疤痕组织。
[0159]疤痕组织形成的同时，在伤口边缘的完整的表皮细胞开始以一个片层增殖并向损伤区域中心移动。随着炎症消退，增加了对直接血液来源的需要，并且在创伤部位出现了血管发生。
[0160]炎症是涉及多种细胞类型的复杂过程。例如，肥大细胞释放触发早期血管舒张的介质，伴随着内皮细胞的分离和在内皮下层的胶原纤维的暴露。血管内形成的细胞间隙内的纤维捕获血小板并触发介质从这些细胞释放。
[0161]除血小板之外，暴露的胶原纤维还与滤过加宽的血管壁的孔的血浆蛋白相互作用，包括血液凝固级联、增加血管舒张、增加血管透性和趋化性的触发因子。
[0162]此外，补体级联可以被以下几种刺激物激活:损伤的血管、损害的细胞释放的蛋白水解酶、任何参与的细菌的膜组分和抗原-抗体复合体。激活的补体组分的一些充当趋化因子，负责白细胞向发炎区域的流动，而其他则促进吞噬作用并参与细胞裂解。
[0163]此外，据信本发明的富含气体的流体或溶液还可以调控炎症的至少一方面所涉及的至少一种细胞因子，所述细胞因子包括但不限于MAF(巨噬细胞活化因子)、丽IF(巨噬细胞迁移抑制因子)、MCF(巨噬细胞趋化因子)、LMIF(白细胞迁移抑制因子)、HRF(组胺释放因子)、TF (转移因子)、白细胞介素(IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15 等)、TNF-α、TNF-β、干扰素(IFN- α、IFN- β、IFN- y、IFN- ζ、IFN- δ等)、G-CSF (粒细胞集落刺激因子)、GM-CSF (粒细胞巨噬细胞CSF) ,M-CSF (巨噬细胞CSF)、多潜能-CSF (IL-3)、成纤维细胞生长因子(aFGF、bFGF)、EGF(表皮生长因子)、NGF(神经生长因子)、H)GF(血小板源生长因子)、VEGF(血管内皮生长因子)、转化生长因子(TGF-a ,TGF-β等)、NAP_2 (嗜中性白细胞活化蛋白2)、PF_4(血小板因子4)、血小板球蛋白、MCP-1 (单核细胞趋化蛋白I)、MCP-3、MIP-1 a ,MIP-1 β -+(巨噬细胞炎性蛋白)、RANTES (激活后调节的正常T细胞表达和分泌的细胞因子(regulatedupon activation normal T expressed and presumably secreted chemokine))、HSP (热休克蛋白)、GRP(葡萄糖调节蛋白)、泛素以及其他细胞因子。 [0164]因此，在某些实施方案中，富含气体的流体和/或治疗组合物可以增加抗炎性分子或细胞因子的产生和/或分泌或降低抗炎性分子或细胞因子的降解，从而减轻或预防炎症和/或消化功能紊乱的至少一种症状。在其他实施方案中，本发明的富含气体的流体和/或治疗组合物可以降低促炎性分子或细胞因子的产生和/或分泌或增加促炎性分子或细胞因子的降解，从而减轻或预防炎症和/或消化功能紊乱的至少一种症状。
[0165]先前的研究已显示了抗MOG抗体在脱髓鞘作用的增大和EAE (实验性自身免疫脑脊髓炎)恶化中的关键作用，EAE是用于类风湿性关节炎的人自身免疫疾患的动物模型系统。(Linington,等人 1992.J.Neuroimmunol.40:219-224)。此外，抗MOG 的抗体参与了多发性硬化病的发病。(Berger等人N.Engl.J.Med.2003Jull0;349(2) =139-45) ?
[0166]如在图48和实施例12中所示的，本发明所发明的富含气体的流体放大了淋巴细胞对之前引发动物的抗原的反应。如图48中所示，当在用本发明的包含溶剂化电子的富含气体的流体重构的流体中培养时，与加压的、氧合的流体(压力罐)或对照去离子化流体相t匕，淋巴细胞增殖对MOG激发的反应更高。
_7] 本发明的电动产生的富含气体的流体和溶液
[0168]一种流体用另一种流体扩散或富集可产生这两种流体的溶液或悬浮液。具体而言，用气体(例如氧)富集液体可能对包括治疗性处理的某些应用是有益的。如本文所用“流体” 一般地可指对于任何具体公开的实施方案的液体、气体、蒸汽、液体和/或气体的混合物或者它们的任何组合。此外，在某些实施方案中“液体”一般地可指纯的液体或者可指凝胶、溶胶、乳液、流体、胶体、分散体或混合物以及它们的任何组合；以上任何一种粘度可不同。
[0169]在本文所公开的具体实施方案中，溶解的气体包括环境空气。在一个优选的实施方案中，溶解的气体包括氧。在另一个实施方案中，溶解的气体包括氮氧化物。
[0170]存在几种领域认可的富含气体液体(例如富氧水)的方法。例如，涡轮机充气系统可在叶轮的一组旋转叶片附近释放空气，叶轮将空气或氧与水混合，或者水可被喷洒到空气中以提高其氧含量。另外，市场上的其他系统将空气或氧注入到水中并且使水/气体经历大规模涡旋。水中氧的自然存在水平通常是不超过IOppm(百万分率)，这被认为是100%的溶解氧的水平。在某些装置上的测试已示出在理想条件下，所述装置能够向上达到大约20ppm或水的自然氧水平的两倍。在某些实施方案中，氧水平可能甚至更高。
[0171]在本文所公开的某些实施方案中，本发明的富含气体的流体提供了抗炎益处。本文所公开的某些实施方案涉及包含以下物质的治疗组合物:本发明的富含气体的流体以及任选的至少一种另外的治疗剂，如药物、金属、肽、多肽、蛋白、核苷酸、碳水化合物或糖基化蛋白、脂肪(包括油或蜡)或预防或减轻与炎症相关的病症或疾病的至少一个症状的其他药剂。
[0172]另外，本文公开的某些实施方案包括有关消化道炎症的治疗组合物和方法。影响消化道的多种适应症是由于炎症引起的，所述炎症包括但不限于胃炎、胃食道反流病(GERD)、嗜酸细胞性食管炎、酸反流、胃溃疡、炎性肠病、肠易激综合征、克罗恩氏病、和被Helicobacter pylori (幽门螺旋杆菌)感染。
[0173]本文提供的具体实施方案涉及如本文所定义的扩散器处理的治疗性流体，所述流体包括:流体主材料；扩散到该主材料中的输注材料；和任选地在该主材料中分散的至少一种治疗剂，其中该输注材料包括在该主流体中的氧微泡，其中大多数的微泡在尺寸上小于0.2微米或者优选地小于0.1微米。在某些实施方案中，在输注的流体主材料中的溶解氧水平可保持在大气压下大于约30ppm持续至少13小时。在其他具体的实施方案中,在输注的流体主材料中的溶解氧水平可保持在大气压下大于40ppm持续至少3小时。
[0174]在另外的实施方案中，输注的流体主材料还包括盐水溶液。在其他的实施方案中，输注的流体主材料在大气压 下于密封容器内保持至少约20ppm到约40ppm的溶解氧水平持续至少100天、优选至少365天的时间。在某些实施方案中，输注的流体主材料可具有大气压下至少50ppm的溶解氧水平。
[0175]在某些实施方案中，输注的流体主材料在氧已扩散到其中之后对通过它的激光束发光表现出瑞利散射持续以选择的时间段。
[0176]表1说明了在用富含氧的盐水溶液处理的愈合伤口和在本发明的富含气体的富含氧的盐水溶液的样品中进行的各种分压测量。
[0177]表1
[0178]
组织氧测量
探针Z082B0

在空气中:171nunHg 23°C

列分压(mmHg)

BI~32-36

B2~169-200

1.一种用于治疗消化功能紊乱或疾病、或其至少一种症状的方法，包括向需要所述治疗的受试者施用治疗有效量的电动改变的水性流体，所述电动改变的水性流体包括电荷稳定的含氧纳米结构的离子水溶液，所述纳米结构基本上具有小于约100纳米的平均直径并在离子水性流体中稳定成形，所述纳米结构的量足以在所述流体接触活细胞时提供对细胞膜电位和细胞膜电导率中至少一种的调整，其中从而提供消化功能障碍或其至少一种症状的治疗。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述电荷稳定的含氧纳米结构是所述流体中主要的电荷稳定的含气体纳米结构物种。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述流体中作为所述电荷稳定的含氧纳米结构存在的溶解氧分子的百分比是选自由以下组成的组的百分比:大于0.01%、大于0.1%、大于I %、大于5% ;大于10% ;大于15% ;大于20% ;大于25% ;大于30% ;大于35% ;大于40% ;大于45% ;大于50% ;大于55% ;大于60% ;大于65% ;大于70% ;大于75% ;大于80% ;大于85% ;大于90% ;和大于95%。
4.根据权利要求1所述的方法，其中总溶解氧基本上以所述电荷稳定的含氧纳米结构存在。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述电荷稳定的含氧纳米结构基本上具有小于选自由以下组成的组的尺寸的平均直径:90nm ；80nm ；70nm ；60nm ；50nm ；40nm