一种具有保护酒精性肝损伤功能的纯中药养生制剂的制作方法[0002]随着社会发展和世界人口的老龄化，酗酒问题的广泛存在，药物的滥用，使得化学性肝损伤已经成为一种常见病、多发病，严重影响人民的健康。在我国，化学性肝损伤人群中患病人数最广、比例最高的病症是酒精肝与脂肪肝。专家认为，酒精肝已成为现代社会不容忽视的隐形杀手。近年来，ALD的发病率也呈逐年增加的趋势，在一些地区已成为第二大肝病，浙江省2000年的酒精性肝病流行病学调查资料显示:人群酒精性肝病患病率为4.34%，其中酒精性肝硬化为0.68%，酒精性肝炎为1.51%，酒精性脂肪肝为0.94%，轻症酒精性肝损伤为1.21%。而且由于国内肝病主要由肝炎病毒引起，肝炎病毒携带者的数量更多，可能掩盖了实际上是酒精作为病因的肝病；同时酒精性肝病又常和肝炎病毒感染混合存在，起到叠加的致病的作用，更易并发肝硬化及肝癌。[0003]酒精性肝损伤属化学性肝损伤范畴，是由于长期过度饮酒，使肝细胞反复发生脂肪变性、坏死和再生所引起的一种疾病，包括了轻症酒精性肝损伤、酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化等病变。研究发现，每日饮酒80~150g[酒精(g) =饮酒量(ml)X酒精含量(％)X0.8(酒精密度)]，连续5年即可造成肝损伤；大量饮酒在20年以上，40%~50%会发生肝硬化，酒精性肝损伤已经成为仅次于病毒性肝炎的主要肝损伤原因。 [0004]因此，寻求有效的保护酒精性肝损伤的制剂已是人们关注的一个热点。[0005]本发明的目的是提供一种具有保护酒精性肝损伤功能的纯中药养生制剂，原料天然可长期服用、易吸收、效果显著。[0006]朝鲜蓟提取物[0007]朝鲜蓟，菊科菜蓟属多年生草本植物，学名Cynarascolymus L.，别名菜蓟、洋蓟、洋百合等，朝鲜蓟是药食两用的植物，朝鲜蓟内含有多酚类化合物如菜蓟素、黄酮类化合物、菊粉以及天门冬酰胺等物质，是一种具有高营养的保健蔬菜，经常食用可保护肝肾和增强肝脏排毒功能，有促进氨基酸代谢和降低胆固醇以及治疗消化不良、改善胃肠功能、防止动脉硬化、保护心血管等功效。
[0008]朝鲜蓟在欧洲是炙手可热的养肝补品，它含有水飞蓟素的类黄酮，对肝细胞有直接的影响。董国昌等分析朝鲜蓟的肝脏保健作用，主要有以下三个方面:首先，是属于很强的抗氧化黄酮素，德国的科学研究证实水飞蓟素具有抑制体内5-lipOXyenase ( —种加速体内氧化作用的酵素)的作用，并且增加肝脏细胞分泌GSH(抗氧化酵素)的浓度及稳定细胞膜(主要是肝细胞)的作用；再则水飞蓟素与肝细胞结合后，增加肝细胞的解毒及对抗有毒物质侵害的功能，其实水飞蓟素本身的抗氧化作用就具有解毒功效，降低侵犯肝细胞有毒物质的浓度。水飞蓟素的第三个保肝生理功能是肝细胞的修护及再生的促进作用，增加正常肝细胞中核普酸的蛋白质合成用。
[0009]枳犋子提取物:
[0010]积棋子为鼠李科(Rhamnaceae)拐率属(Hovenia Thunb)植物积棋子(HoveniaDulcis Thunb)的干燥成熟种子，具有止渴除烦、解酒毒、镇静、利尿之功效，主治酒毒、烦热、口渴、呕吐、二便不利等症。现代研究表明，枳犋子可加快乙醇的代谢，提高血中谷胱甘肽过氧化物酶的活力，降低乙醇所致的ALT、AST、MDA升高等作用。
[0011]宁静等研究枳犋子对大鼠酒精性脂肪肝的预防作用及其作用机制，采用高脂饮食和酒精灌胃法诱发大鼠酒精性脂肪肝模型，并用单味中药枳犋子进行早期及中期干预，90天后处死、取血及肝组织，检测肝功能、血清超氧化物岐化酶(SOD)及肝纤维化四项，并对大鼠肝脏行病理学检查。结果显示，灌胃90天后大鼠形成酒精性脂肪肝甚至肝炎模型，早期干预组的血清AST、ALT显著降低，肝脏脂肪变及炎症显著改善。由此得出，枳犋子具有一定的预防酒精性脂肪肝作用。
[0012]白术提取物:
[0013]本品为菊科植物白术AtractylodesmacrocephalaKoidz.的干燥根莖，苦、甘，温。归脾、胃经。健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎。有利尿、抗肿瘤、抗菌、消炎、抗糖尿病、抗衰老等作用。其配伍复方如消脂方、泽泻汤和益心通汤等均具有调节高脂血症的功效。现代药理研究证实，白术提取物具有很好的保肝作用。
[0014]陈皮提取物:
[0015]本品为芸香科植物橘CitrusreticulataBlanco及其栽培变种的干燥成熟果皮。苦、辛，温。归肺、脾经。具有理气降逆、调中开胃、燥湿化痰的功效，陈皮作为临床最常用的理气药之一，其主治病证广泛，作用部位也不应只局限于肺脾胃所在的中上二焦，还作用于下焦之肝气，使人体上中下三焦气机通畅。临床研究中，陈皮常作为配伍原料之一，用于酒精性肝病的治疗。
`[0016]山楂提取物
[0017]本品为蔷薇科植物山里红CrataeguspinnatifidaBge.var.majorN.EBr.或山楂CrataeguspinnatifidaBge.的干燥成熟果实，酸、甘，微温。归脾、胃、肝经。消食健胃，行气散瘀，化浊降脂。山楂提取物主要成分为三萜和黄酮及酚类化合物，尤其以黄酮类研究较多。黄酮及酚类化合物在自然界广泛存在，种类多样，具有多种药理活性，其中许多含黄酮及酚类化合物的药用植物具有保肝降脂作用。


[0018]本发明提供了一种具有保护酒精性肝损伤功能的纯中药养生制剂，本制剂立足于中医药理论对化学性肝损伤的治则，朝鲜蓟保护肝肾促进肝脏排毒，枳犋子醒脾解酒毒，白术、陈皮健脾益气、理气和胃、燥湿，山楂消食健胃、化瘀降脂，五药合用，共奏健脾理气、和胃燥湿、散瘀降脂之功效，从而保护肝细胞、改善微循环、促进损伤组织修复、增强肝脏排毒功能，有效缓解酒精性肝损伤、脂肪肝等肝脏疾病的症状及肝脏病理的改变，延缓病情发展。同时，本制剂具有原料天然可长期服用、易吸收、效果显著等特点。
[0019]实现以上效果的制剂采用如下技术方案:
[0020]一种保护酒精性肝损伤的中药养生制剂，其特征在于:由以下重量百分比的原料制备而成:朝鲜蓟提取物10-50%、枳犋子提取物10-50%、白术提取物10-50%、陈皮提取物5-30%、山楂提取物10-50%。
[0021]优选的，由以下重量百分比的原料制备而成:朝鲜蓟提取物40%、枳犋子提取物10%、白术提取物30%、陈皮提取物10%、山楂提取物10%。
[0022]优选的，由以下重量百分比的原料制备而成:朝鲜蓟提取物35%、枳犋子提取物15%、白术提取物25%、陈皮提取物10%、山楂提取物15%。
[0023]优选的，由以下重量百分比的原料制备而成:朝鲜蓟提取物30%、枳犋子提取物20 %、白术提取物20 %、陈皮提取物10 %、山楂提取物20 %。
[0024]其中，所述的朝鲜蓟提取物的提取方法为:朝鲜蓟粗粉碎，8-12倍量水煎煮提取1-3次，每次1-3小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并进行真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0025]所述的枳犋子提取物的提取方法为:枳犋子，8-12倍量水煎煮提取1-3次，每次1-3小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0026]所述的白术提取物的提取方法为:白术粗粉碎，6-10倍量水煎煮提取1-3次，每次1-3小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0027]所述的陈皮提取物的提取方法为:陈皮，8-12倍量80-95%的乙醇60_80°C条件下回流提取2-4次，每次0.5-3小时，提取液回收乙醇并减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0028]所述的山楂提取物的提取方法为:山楂，加入8-12倍量70-95%的乙醇70_90°C条件下回流提取1-3次，每次1-3小时；提取液回收乙醇并减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0029]优选的，
[0030]所述的朝鲜蓟提取物的提取方法为:朝鲜蓟粗粉碎，10倍量水煎煮提取2次，每次I小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并进行真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0031]所述的枳犋子提取物的提取方法为:枳犋子，9倍量水煎煮提取2次，每次1.5小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。 [0032]所述的白术提取物的提取方法为:白术粗粉碎，8倍量水煎煮提取2次，每次1.5小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0033]所述的陈皮提取物的提取方法为:陈皮，9倍量75%的乙醇70°C条件下回流提取3次，每次I小时，提取液回收乙醇并减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0034]所述的山楂提取物的提取方法为:山楂,加入10倍量70%的乙醇80°C条件下回流提取2次，每次1.5小时；提取液回收乙醇并减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。

[0035]以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。
[0036]实施例1
[0037]朝鲜蓟粗粉碎，8倍量水煎煮提取I次，每次3小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并进行真空干燥及粉碎过80目筛即可。[0038]枳犋子，8倍量水煎煮提取3次，每次I小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0039]白术粗粉碎，6倍量水煎煮提取3次，每次3小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0040]陈皮，12倍量95%的乙醇80°C条件下回流提取4次，每次0.5小时，提取液回收乙醇并减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0041]山楂，加入12倍量80%的乙醇90°C条件下回流提取3次，每次I小时；提取液回
收乙醇并减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0042]按照重量比选取上述制备的朝鲜蓟提取物35%、枳犋子提取物15%、白术提取物25%、陈皮提取物10%、山楂提取物15%并加入适量羧甲基纤维素钠、微晶纤维素充分混合均匀并湿法制粒、干燥，再加入适量硬脂酸镁混合均匀直接压片即得片剂。每片重0.85g，每片折合成原生药量为5g。
[0043]实施例2
[0044]朝鲜蓟粗粉碎，10倍量水煎煮提取2次，每次2小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并进行真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0045]枳犋子，10倍量水煎煮提取3次，每次2小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
`[0046]白术粗粉碎，8倍量水煎煮提取2次，每次I小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0047]陈皮，10倍量80%的乙醇60°C条件下回流提取2次，每次I小时，提取液回收乙醇并减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0048]山楂，加入10倍量80%的乙醇80°C条件下回流提取2次，每次2小时；提取液回
收乙醇并减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0049]按照重量比选取上述制备的朝鲜蓟提取物40%、枳犋子提取物10%、白术提取物30%、陈皮提取物10%、山楂提取物10%充分混合，加入适量糊精、蔗糖，混匀制粒，干燥即得颗粒剂。
[0050]实施例3
[0051]朝鲜蓟粗粉碎，10倍量水煎煮提取2次，每次I小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并进行真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0052]枳犋子，9倍量水煎煮提取2次，每次1.5小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0053]白术粗粉碎，8倍量水煎煮提取2次，每次1.5小时；提取液减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0054]陈皮，9倍量75%的乙醇70°C条件下回流提取3次，每次I小时，提取液回收乙醇并减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0055]山楂，加入10倍量70%的乙醇80°C条件下回流提取2次，每次1.5小时；提取液
回收乙醇并减压浓缩至稠浸膏并真空干燥及粉碎过80目筛即可。
[0056]按照重量比选取上述制备的朝鲜蓟提取物30%、枳犋子提取物20%、白术提取物20%、陈皮提取物10%、山楂提取物20%充分混合，并加入质量硬脂酸镁混合均匀直接装入胶囊中制成胶囊剂，每粒胶囊含内容物0.4g。
[0057]实施例4实验例
[0058]I材料和方法
[0059]1.1样品:实施例3制备的受试物日摄入量为1.6g/60kgBW。
[0060]1.2实验动物与饲料:选用辽宁长生生物有限公司繁殖的SPF级180_220g雄性SD大鼠50只，实验动物生产许可证号为SCXK (辽)2010-0001。无菌块状鼠料由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，生产许可证号为SCXK (京)2009-0008。
[0061]1.3试验条件:屏障系统动物实验室，恒温恒湿，温度22+1.5°C，湿度50% +10%,工作照度200-2801X，人工照明12h黑夜12h，噪音<60dB，实验动物使用许可证号为SYXK (辽)2011-0005。
[0062]1.4仪器与试剂:电子天平(感量0.01g)、紫外/可见分光光度计、全自动生化分析仪(使用原厂定标液、质控液和试剂)、冷冻切片机、动物组织病理影像分析系统。过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)试剂盒，还原型谷胱甘肽(GSH)试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。
[0063]1.5剂量分组:按厂家推荐人体日摄入量的30倍、15倍、5倍设计，分为0.SOg/kgBW、0.40g / kgBW、0.13g / kgBW三个实验组、酒精肝损伤模型对照组和空白对照组。分别称取受试物8.00g,4.0Og和1. 3饨，加入蒸馏水调至IOOmL,样品配制浓度为0.080g /mL、0.040g / mL、0.013g/mL.使用时新鲜配制。灌胃方式给予试验用样品，模型对照组和空白对照组给予样品溶剂，按体重调整试验用样品灌胃容量(灌胃容量按IOml / kgBW计算)，每天灌胃I次，连续30天。试验结束时各实验组和模型对照组一次灌胃给予50%乙醇12ml / kgBW，空白对照组给予蒸馏水，禁食16h断头处死动物，测定肝组织中的丙二醛、还原型谷胱甘肽、甘油三酶含量及病理组织学检查。
[0064]1.6检验方法
[0065]1.6.110%肝组织匀浆制备:取定量肝脏，生理盐水冲洗、拭干、称重、剪碎，置匀浆机中，加入冷生理盐水，以15000r / min匀浆10s，间歇30s，反复进行3次，制成10%组织匀浆(在冰水中进行)，2000r / min离心15m面，取上清液待测。
[0066]1.6.2肝匀浆中过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)测定方法:
[0067]1.6.2.110%肝组织匀浆MDA含量测定操作步骤:
[0068]