专利名称：组合物和方法以及与其相关的用途的制作方法益生菌已经用于预防和治疗不同范围的障碍，例如动脉高血压、血管疾病、变态反应、癌症、特应性疾病、病毒或感染性疾病、龋齿、IBS、IBD、粘膜炎症、肠渗透性障碍、肥胖、代谢综合征、氧化性应激和腹痛。基于早期腹泻研究，已知益生菌减少胃肠道中的感染。该科学数据支持这样ー种假设益生菌对健康以及预防和治疗疾病的功效是基于改变胃肠道中小型生物群和置換病原体的能力。然而，目前特定益生菌还可以降低胃肠道外感染的证据增多。口腔、胃肠道和呼吸道中粘膜上皮表面不断抵抗传染原，例如病毒。这些表面上共生的小型生物群通过代谢和调节物质以及通过竞争营养物和粘膜上可用的粘附位点来保护机体对抗病原有机体。在生存期内小型生物群发展和变化，但是通常在健康个体中它包括多种细菌菌种。感染上或下呼吸道的急性呼吸道感染是儿童和老年人中最常见的健康问题，尽管发病率在所有年龄组都很高。这些呼吸道感染导致很多健康保健就诊和每年住院治疗期以及日间护理中心和工作的缺席。在多数烈性病例中，呼吸道感染可以导致老年人过早死亡。然而，大多数呼吸道感染是轻的，自限性病毒上呼吸道感染，也称为普通感冒。多个临床研究已经考察了益生菌对基本上健康的儿童或成人的呼吸道感染的作用。例如在学龄儿童中干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)降低了下呼吸道感染的发病率(Cobo Sanz JM.等人，2006，Nutr Hosp 21，547-51),同时相同的益生菌缩短了老年个体中所有感染的病程(Turchet P.等人，2003，JNutr Health Aging 7,75-7)。另外，在很多患有并发症的呼吸道感染和下呼吸道感染的儿童中在乳中的鼠李糖乳杆菌(LGG)显示出相对减少17% (Hatakka K.等人，2001，BMJ 322，1_5)，但是在马拉松运动员中，以基于乳的果汁饮料或胶囊形式的LGG对呼吸道感染没有作用(Kekkonen R.等人，2007，IntJ Sport Nutr Exerc Metab 17,352-363)。而且，LGG、鼠李糖乳杆菌 LC705 (LC705)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve) Bb99和费氏丙酸杆菌谢氏亚种(Propionibacteriumfreudenreichii ssp shermanii)的组合表现出降低儿童中的呼吸道感染(Hatakka K.等人，2007，Clin Nutr 26，314-321 ;Kukkonen K.等人，2008，Pediatrics 122，8-12)，但是在老年人中没有作用(Hatakka K.等人，2007，博士论文，http://urn. fi/URN :ISBN :978-952-10-3897-6)。在成人中，例如含有加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)和两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)以及维生素和矿物质的膳食补充剂表现出降低呼吸道感染的发病率(Winkler P.等人，2005，Int J ClinPharmacol Ther 43，318-26 ;de Vrese Μ.等人，2005，Clin Nutr 24,481-91)。不复杂的呼吸道感染很大程度上是用抗生素治疗的。然而，抗生素对病毒感染没有作用。因此，例如普通感冒的治疗主要是基于缓解症状的药物治疗和退烧药。某些抗病毒药物表现出抗流感病毒，但是目前没有有效的抗其它普通呼吸道病毒的抗病毒药物。因此，仍需要有效的药物和治疗用于预防或治疗呼吸道感染。另外，很多先前的研究描述了益生菌对呼吸道感染的作用在不同年龄组之间有差 别(例如，婴儿、儿童、成人、老年人)。具有有益作用的一种菌株可以被用于治疗确定的症状，但是包含数种相同属或不同属的益生菌例如通过协同作用或相加作用可以提供进ー步或不同的益处。因此，针对患有呼吸道感染的不同年龄组需要最佳的益生菌或它们的组合以及优选的剂量和消耗周期。发明概述本发明的目的是提供用于预防或治疗呼吸道感染的新产品、方法和用途。事实上，本发明提供了用于这些目的的最佳益生菌或其组合。之前从未发现LC705或LGG和LC705对呼吸道感染的阳性作用，另外，之前从未显示出LGG对成人的呼吸道感染具有作用。本发明涉及包含由单独的鼠李糖乳杆菌LC705或由鼠李糖乳杆菌GG和鼠李糖乳杆菌LC705组成的益生菌的组合物。另外，本发明涉及包含由单独的鼠李糖乳杆菌LC705或鼠李糖乳杆菌GG和鼠李糖乳杆菌LC705组成的益生菌的组合物，其用作药物。另外，本发明涉及鼠李糖乳杆菌LC705単独或与鼠李糖乳杆菌GG —起在制备用于治疗和/或预防个体的呼吸道感染的组合物中的用途。而且，本发明涉及鼠李糖乳杆菌LC705単独或与鼠李糖乳杆菌GG —起在制备用于增强个体对弓I起呼吸道感染的病毒的抵抗力的组合物中的用途。而且，本发明描述了鼠李糖乳杆菌GG在制备用于治疗和/或预防成年个体的呼吸道感染的组合物中的用途。本发明还描述了鼠李糖乳杆菌GG在制备用于增强成年个体对引起呼吸道感染的病毒的抵抗力的组合物中的用途。本发明涉及鼠李糖乳杆菌在制备用于减少、延缓或抑制个体中的流感病毒复制的组合物中的用途。本发明涉及鼠李糖乳杆菌在制备用于增加预感染或正感染呼吸道感染的个体中的抗病毒细胞因子的组合物中的用途。 而且，本发明涉及鼠李糖乳杆菌LC705单独或与鼠李糖乳杆菌GG —起用于治疗和/或预防个体中的呼吸道感染。本发明涉及鼠李糖乳杆菌LC705単独或与鼠李糖乳杆菌GG —起用于增强个体对引起呼吸道感染的病毒的抵抗力。而且，本发明描述了鼠李糖乳杆菌GG用于治疗和/或预防成年个体中呼吸道感染。本发明还描述了鼠李糖乳杆菌GG用于增强成年个体对引起呼吸道感染的病毒的抵抗力。本发明涉及鼠李糖乳杆菌用于减少、延缓或抑制个体中的流感病毒复制。本发明涉及鼠李糖乳杆菌用于增加预感染或正感染呼吸道感染的个体中的抗病毒细胞因子。而且，本发明涉及治疗或预防个体中呼吸道感染的方法，其中该方法包括给个体施用包含鼠李糖乳杆菌LC705单独或与鼠李糖乳杆菌GG —起的组合物。本发明还描述了治疗或预防成年个体中呼吸道感染的方法，其中该方法包括给成年个体施用包含鼠李糖乳杆菌GG的组合物。而且，本发明涉及增强个体对引起呼吸道感染的病毒的抵抗力的方法，其中该方法包括给个体施用包含鼠李糖乳杆菌LC705单独或与鼠李糖乳杆菌GG —起的组合物。而且，本发明涉及減少、延缓或抑制个体中流感病毒复制的方法，其中该方法包括给个体施用包含鼠李糖乳杆菌的组合物。而且，本发明涉及增加预感染或正感染呼吸道感染的个体中抗病毒细胞因子的方法，其中该方法包括给个体施用包含鼠李糖乳杆菌的组合物。本发明提供了食品、饲料和制药エ业中进ー步发展的工具。另外，通过本发明，患有呼吸道感染的例如不同年龄组的患者可以获得更多有效和特异性的治疗。LGG、LC705或其组合可以以本身应用或作为另ー种产品的一部分应用，例如药物或食品。通过增加抗病毒蛋白质(例如IP- ο和IFN-α (图I)、Mxl、Mx2和RIG-I (图2))的表达以及通过阻止流感病毒的増殖，本发明的LGG、LC705或其组合对人体具有有益的抗病毒作用，这一点可以例如通过病毒结构蛋白质(例如NP和Ml (图5))的减少来观察。依然迫切需要向消费者提供对健康、特别是对呼吸道感染具有明确作用的新产品，并且以这样ー种形式生产，所述的形式使得它们易于以本身应用或作为另ー种产品的一部分应用，所述的产品例如药物或食品或饲料产品。附图简述图I显示了在由人单核细胞获得的巨噬细胞中LC705诱导抗病毒IFN-α的产生。该图中显示了用LGG或LC705刺激巨噬细胞6小时和24小时。LGG或LC705诱导抗病毒ΙΡ-10的产生，但是与LGG相比，LC705诱导ΙΡ-10的产生更多。图2显示了 LGG或LC705活化Mxl、Mx2和RIG-I的产生。但是与LGG相比，LC705活化IFN-α调节的抗病毒蛋白质(Mxl、Mx2、RIG-I)的产生更多。图3 显示了 LGG、LC705 及其组合增加 IL-1 β (图 3A)，LC705 增加 IFN- α (图 3Β)，和ぱ705以及11^和^705的组合增加了即-0 (图3C)的产生。另外，图3显示了在A型流感病毒感染过程中，与LGG相比，LC705以及LGG和LC705的组合增加抗病毒炎性活性(IL-Ιβ和TNF-a (图3A和3C))更多。在A型流感病毒感染过程中，与LGG相比，LC705以及LGG和LC705的组合增加抗病毒IFN- a的产生更多(图3B)。图4显示LGG、LC705或其组合降低A型流感病毒mRNA的合成，即降低或减缓病毒的复制。图4A显示LC705或者LGG和LC705的组合降低或减缓病毒感染过程中NP mRNA的产生。图4B显示LGG、LC705或其组合降低或减缓病毒感染过程中MlmRNA的产生。图4C显示LGG、LC705或其组合降低或减缓病毒感染过程中NSlmRNA的产生。图5显示LGG或LC705减少A型流感病毒的结构蛋白质(NP、Ml)的产生。发明详述益生菌被用于食品和饲料エ业很长时间，但是益生菌对广泛症状或疾病以及对特定目标群的作用仍然需要确定。本发明基于LGG和LC705对呼吸道感染具有有益作用的发现。同吋，LC705和LGG用作ー种最佳组合，用于增加抗病毒细胞因子的产生和阻止病毒扩增，从而降低呼吸道感染的风险。益生菌 益生菌是活的微生物，优选非致病微生物，当以足量施用于人或动物时，其促进宿主的健康(Fuller R 1989，J Appl Microbiol 66,365-378)。当作为食品或食品补充剂以足量食用时，益生菌将对宿舍产生有益的健康益处。益生菌在人或动物中的健康要求包括多种疾病的可能的预防和治疗。益生菌的促进健康作用包括例如平衡和维持肠内微生物区系、刺激免疫系统和抗癌活性。最好的已报道的益生菌包括鼠李糖乳酸杆菌(L. rhamnosus)GG、约氏乳杆菌(L. johnsonii) LAl、干酪乳杆菌(L. casei) Shirota 和双歧乳杆菌(Bifidobacteriumlactis)Bbl2。另外，在该文献中描述了很多其它益生菌，例如鼠李糖乳酸杆菌LC705。鼠李糖乳杆菌GG(LGG，EGG )菌株是最初来源于USA(US4839281A)的非致病革兰氏阳性分离群。LGG菌株是从人粪便中分离的，它能在pH 3下生长良好，并且甚至在更低的PH值以及高胆汁酸含量下存活。该菌株对粘液和上皮细胞表现出很好的粘附力，并且寄居GIT。由葡萄糖产生的乳酸产量很好当在MRS肉汤中生长时，该菌株产生I. 5-2%的乳酸。该菌株不能发酵乳糖，因此它不能由乳糖产生乳酸。该菌株发酵下列碳水化合物D-阿拉伯糖、核糖、半乳糖、D-葡萄糖、D-果糖、D-甘露糖、鼠李糖、半乳糖醇、肌醇、甘露醇、山梨醇、N-こ酰基葡糖胺、苦杏仁苷、熊果苷、七叶苷、水杨苷、纤维素ニ糖、麦芽糖、蔗糖、海藻糖、松三糖、龙胆ニ糖(gentibioSe)、D-塔格糖、L-岩藻糖和葡糖酸盐。该菌株在15-45°C下生长良好，最佳温度为30-37°C。LGG保藏于保藏权威美国典型培养物保藏中心，登录号ATCC 53103。鼠李糖乳杆菌LC705(LC705)菌株也是非致病革兰氏阳性分离群，但来源于芬兰。芬兰专利92498，Valio Oy中有更详细的LC705描述。LC705是链中出现的革兰氏阳性短杆菌，它是同型发酵的，弱的蛋白质水解，在+15_45°C下生长良好，不能由精氨酸产生氨，是过氧化氢酶-阴性的，当在MRS肉汤(LAB M)中生长时，该菌株产生具有光学活性L(+)构型的I. 6%的乳酸，该菌株分解柠檬酸盐(O. 169%)，从而产生ニこ酰基和3-羟基丁酮，该菌株至少使得下列碳水化合物(糖、糖醇)发酵核糖、半乳糖、D-葡萄糖、D-果糖、D-甘露糖、L-山梨糖、鼠李糖、甘露醇、山梨醇、甲基-D-葡糖苷、N-こ酰基葡糖胺、苦杏仁苷、熊果苷、七叶苷、水杨苷、纤维素ニ糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、松三糖、龙胆ニ糖、D-松ニ糖和D-塔格糖。LC705对粘液细胞吸附很弱，但是对上皮细胞中度吸附。该菌株在低pH值和高胆汁酸含量下活力良好。该菌株在5%盐度下存活良好，并且在10%盐度下存活非常好。LC705 由 Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH(DSM)保藏，登录号DSM7061。在本发明的一个实施方案中，鼠李糖乳杆菌是LGG。在本发明的另ー个实施方案中，鼠李糖乳杆菌是LC705。在本发明的特别的实施方案中，鼠李糖乳杆菌是LGG和LC705。组合物 本发明的组合物包含LGG和LC705益生菌。组合物中仅包含益生菌LGG和LC705。本发明的组合物可以选自但不限于食品、动物饲料、营养品、食物补充剂、食物成分、健康食物、药品和化妆品。组合物还可用作例如毎日膳食或药物的适合部分或补充剂。在本发明的一个优选实施方案中，组合物是药物、食物或饲料产品。在本发明的另一个实施方案中，组合物是功能食物，即具有任何促进健康和/或预防或治疗疾病性质的食物。优选地，本发明的食品选自乳制品、焙烤食品、巧克カ和糖果、糖和胶质糖果、谷物产品、零食、以浆果或水果为基础的产品和饮品/饮料。乳制品包括但不限于乳、酸乳、酸奶和其它发酵的乳制品例如乳酪和涂味品、乳粉、儿童食品、婴儿食品、幼儿食品、婴儿配方、果汁和汤。本发明的组合物可以是药物组合物并且可以例如以固体、半固体或液体形式应用，例如片剂、丸剤、小丸、胶囊剂、溶液剂、乳剂或混悬剂形式。优选地，组合物是用于ロ服施用或用于肠内、吸入或静脉内应用。另外，它可以在个体已经感染呼吸道感染之前或之后施用于个体。除了益生菌之外，组合物还可以包含药物或营养可接受的和/或技术上需要的载体(例如水、葡萄糖或乳糖)、佐剂、赋形剂、辅助的赋形剂、杀菌剂、稳定剂、增稠剂或着色剂、香料、粘合剂、填充剂、润滑剂、助悬剂、甜味剂、矫味剂、胶凝剂、抗氧化剂、防腐剤、缓冲剂、PH调节剂、润湿剂、启动剂或相应组合物中常规存在的组分。任何不是益生菌的试剂可以例如选自上面提及的组。组合物的试剂，例如成分或组分，或是商购获得的或是通过本领域已知的常规技术制备的。在本发明的特别的实施方案中，组合物包含由LGG和LC705组成的益生菌试剂和任选的非益生菌试剂。“非益生菌试剂”意指不是益生菌的任何试剂。本发明的组合物包含足够量的LGG和/或LC705，以产生所需的作用。在本发明的优选实施方案中，LGG和LC705的比例(细菌数)等于I : I。在本发明的另ー个优选实施方案中，LGG与LC705的比例(细菌数)是2 1、3 1、4 1、5 1、6 1、7 I、8 1、9 : I或10 : I。在本发明的另ー个优选实施方案中，LC705与LGG的比例(细菌数)是 2 1、3 1、4 1、5 1、6 1、7 1、8 : 1、9 : I 或 10 : I。除了鼠李糖乳杆菌益生菌之外，用于治疗和/或预防呼吸道感染，用于增强对引起呼吸道感染的病毒的抵抗力，用于减少、延缓或抑制流感病毒复制或者用于增加抗病毒细胞因子的组合物还可以包含其它益生菌或相应组合物中常规存在的任何其它试剂。组合物可以通过本领域已知的任何常规方法制备。LGG和/或LC705可以例如加入至任何产品中，或者在完成最終产品过程中在制备之前或之后与任何试剂混合。呼吸道感染和治疗呼吸道感染包括上呼吸道和下呼吸道的感染。上呼吸道感染包括从鼻子到下呼吸树的呼吸道粘膜(除肺泡)的炎症。因此，上呼吸道感染包括鼻腔(鼻子、鼻窦)、咽和喉。上呼吸道感染选自但不限于普通感冒、鼻窦炎、耳部感染、耳炎、乳突炎、咽炎、扁桃体炎、会厌炎、气管炎、喉炎和支气管炎。上呼吸道感染的症状包括鼻充血、咳嗽、鼻炎、鼻塞、鼻漏、咽喉痛、发烧、面部压力、头痛、食欲減退和/或打喷嚏。下呼吸道感染包括气管、主支气管和肺。侵袭下呼吸道的感染可以选自但不限于肺炎、胸膜炎、支气管炎、细支气管炎和肺气肿，并且症状包括例如呼吸短促、虚弱、高烧、咳嗽和/或疲劳。大量细菌菌种寄生在上呼吸道，而下呼吸道通常基本上没有微生物。当暴露于病原体并经历数小时至数天(例如1-7天)的潜伏期后，出现上或下呼吸道感染的症状，并且可能持续例如3至10天，或甚至更长(数周)。症状的性质和持续时间取决于病原体、病原体数量以及个体的年龄和免疫情况。除了急性感染之外，病原体还可以引起慢性感染。慢性感染通常由急性感染引起，并且可以持续数天至終生。 本文所用的“感染”意指病原微生物在细胞或组织中侵袭和繁殖，S卩“感染”还意指由感染引起的状态。感染可以引起损伤并且通过多种细胞或毒性机制发展成疾病。然而，不是所有的感染都会导致临床疾病；已知75%的受感染的人发展成症状性疾病(GwaltneyJM 和 Hayden FG, 1992，NEngl J Med 326，644-5)。引起呼吸道感染的病原体可以是细菌或病毒。在某些情况下，感染是这两者的結果。引起呼吸道感染(即上和/或下呼吸道感染)的细菌或病毒选自流感嗜血菌(Haemopnilus influenzae)、月市炎链球囷(Streptococcus pneumoniae)、卡他莫拉菌(Moraxella catarrhal i s)、酿胺链球菌(Streptococcus pyogenes)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)、肺炎衣原体(Chlamydiae pneumoniae)、普通感冒(流行性感冒)病毒、鼻病毒、腺病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、肠道病毒、冠状病毒和Epstein-Barr病毒。上述组还可以包括侵袭呼吸道的任何其它细菌或病毒。引起呼吸道感染的病毒(可以用本发明的组合物预防或治疗的)可以选自但不限于普通感冒(流行性感冒)病毒、鼻病毒、腺病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病韋、肠道病韋、冠状病韋和Epstein-Barr病韋。在本发明的一个实施方案中，呼吸道感染是流感病毒感染。在本发明的优选实施方案中，流感病毒选自A型流感病毒和B型流感病毒。A型和B型流感病毒属于单链RNA病毒和正粘病毒科家族。A型流感病毒寄生于禽类并且引起“禽流感”，其还称为禽流感(birdflu or avian flu)。所有已知的病毒亚型是在禽类中地方流行的。然而，A型流感病毒还可以感染动物，并且在人类中已经至少检测出称为H1N1、H2N2、H3N2和H5N1的亚型。仅已知B型流感病毒感染人和海豹，不同于A型流感病毒，B型流感病毒不会引起流感流行。病毒颗粒不会自己生长或繁殖，并且它们也缺少蛋白质合成和能量产生的基因信息。这就是为什么它们依赖于宿主细胞。不同呼吸道病毒的致病机制在不同病毒之间有差异。致病机理事件的理解主要是基于鼻病毒感染。鼻病毒主要通过细小的气溶胶粒子以及通过与受感染的分泌物直接或间接接触来传播。在感染初期，鼻病毒通过结合主要位于鼻咽中的ICAM-I受体(细胞间粘附受体分子I)来侵袭宿主。细胞内侵袭和复制后，病毒鼻内传播至咽部。复制引起宿主的炎性和免疫响应,通过释放炎性介质导致血管扩张,增加血管通透性和细胞浸润。促炎细胞因子的浓度升高导致消灭或中和病毒所需的炎性反应的级联(van Kempen Μ.等人,1999, Rhinology37, 97-103)。
流感病毒通过ー种主要的病毒表面糖蛋白(血凝素(HA))结合到细胞表面受体上来感染宿主上皮细胞。宿主呼吸道不仅是流感病毒感染的部位，而且也是防御病毒感染的部位。抗流感病毒感染的防御机制包括数种效应细胞和分子。病毒被先天免疫机制最初发现并且非特异性破坏，所述的先天免疫机制不是抗原特异性的，并且不需要延长的诱导周期。数种组分，例如粘液、巨噬细胞、树突细胞(DCs)、天然杀伤(NK)细胞、干扰素(IFN) α、β和其它细胞因子，以及补体组分參与先天免疫系统。上皮细胞中存在的病毒诱导IFN-α和IFN-β产生。另夕卜，巨噬细胞分泌的细胞因子例如IL-l、IL-6、TNF-a和IL-12活化NK细胞。NK细胞释放IFN-Y，IFN-Y影响感染细胞的溶胞作用。干扰素与细胞表面受体的结合増加了很多基因的转录，其进ー步加快例如细胞因子的产生。干扰素还可以活化核糖核酸酶，其降解病毒RNA，并且干扰素可以中断蛋白质合成，间接抑制病毒复制(Tamura S.和Kurata T. ,2004, Jpn J Infect Dis 57 :236-247 ；Tamura S.等人，2005, Jpn J InfectDis, 58 :195-207)。然而，如果病毒避免了早期防御机制，它们被适应性免疫机制发现并且特异性消除，所述的适应性免疫机制可以被流感病毒组分通过呼吸道中巨噬细胞和DCs上的Toll-样受体(TLRs)强化。识别病毒的巨噬细胞和DCs通过MHC-I (人类中HLA-I和 HLA-II)和MHC-2蛋白质向T-和B-淋巴细胞呈递病毒抗原。这系列事件启动了适应性免疫响应。激活了抗体的产生，以中和病毒(Tamura S.和Kurata T. , 2004, Jpn J Infect Dis57 :236-247 ；Tamura S.等人，2005，Jpn J Infect Dis, 58 :195-207)。免疫响应的改变可以通过任何适合的医学、生理学或生物学试验来监测，例如任何生物样品或个体的体外、离体或体内试验。可以例如在细胞培养物(体外)中利用例如外周血单核细胞(PBMC)、人单核细胞、巨噬细胞和树突细胞研究益生菌菌株的性质。离体试验的实例包括测定嗜中性粒细胞和单核细胞的吞噬作用、突发性氧化作用即嗜中性粒细胞和单核细胞的过氧化物产生、天然杀伤(NK)细胞活性、淋巴细胞增殖和通过PBMC、组织巨噬细胞、单核细胞或淋巴细胞产生细胞因子。体内试验包括但不限于测定对疫苗的响应(例如疫苗特异性抗体或疫苗特异性抗体形成细胞)、迟发型超敏反应和对衰减的病原体的响应。保护宿主抵抗病原体侵袭的主要细胞是巨噬细胞，其吃棹，即吞噬病原体或产生细胞因子。细胞因子补养其它免疫细胞并且介导炎症。巨噬细胞是组织内的白血细胞，并且通过单核细胞分化可以体外培养。在本发明中，在体外模型中应用来自健康成人的巨噬细胞用于研究益生菌对人个体的作用。用LGG和/或LC705刺激巨噬细胞并且用流感病毒感染巨噬细胞。为了活化免疫响应，巨噬细胞产生细胞因子、趋化因子和抗微生物物质。细胞因子是细胞通讯中应用的信号传导分子(即蛋白质、多肽或糖蛋白)。它们通常由遭遇病原体的免疫细胞分泌，从而活化并且补养进一歩的免疫细胞，以增加对病原体的系统响应。每种细胞因子具有匹配细胞表面的受体，因此，随后的细胞内信号传导的级联改变了细胞功能。细胞内信号传导可能导致例如数种基因和它们的转录因子的上调和/或下调，引起其它细胞因子的产生，针对其它分子的表面受体的数量増加或通过反馈抑制作用抑制它们自身的作用。细胞因子可以分成两组类型1，增强细胞因子响应的那些(例如IFN-Y、TGF-β)，和类型2，有利于抗体响应(例如IL-4、IL-10、IL-13)。促炎细胞因子肿瘤坏死因子a (TNF- α )、白介素-I β (IL-1 β )和IL-6以及干扰素(IFNs)是对微生物感染响应产生的首批细胞因子。微生物感染过程后期产生的细胞因子直接对细胞-介导的辅助T细胞I型(Thl)或体液Th2型免疫的响应。趋化因子是小细胞因子家族(约8-10千道尔顿大小，在保守区有4个半胱氨酸残基)，其诱导附近敏感细胞的定向的趋化性。某些趋化因子(例如IP-10)被认为是炎性的。这些蛋白质通过与G蛋白-偶联的跨膜受体的相互作用发挥它们的生物学作用。检测免疫响应变化的试验包括但不限于基于检测信号传导通路活化以及检测标志物基因的转录或翻译水平或蛋白质(例如抗体或受体)量的那些。目前单个标志物不用
于测定细胞或有机体的免疫响应。然而，优选的标志物可以选自但不限于TNF-α、IL-12、IL-10、IL-Iβ、IFN-α 、IL-Iα 、IL-6,IL-18、IFN-y,IL_4、TGF_P 和 IP-IO0已知益生菌刺激诱导巨噬细胞中IL-I β、IL_6和TNF-α的产生(Miettinen Μ.等人，2008，J Leukoc Biol. 84 :1092-1100)，但是巨噬细胞中从没有显示出在流感病毒感染中LGG或LC705诱导的作用。在本发明中，LGG和/或LC705增加了抗病毒蛋白质(IP-10、TNF-a、IL-1 β、IFN-a和IFN-β (图I和3))和IFN-α可诱导的细胞因子或蛋白质(Mxl、Mx2和RIG-I (图2))，从而减弱病毒功能。病毒功能减弱还通过病毒结构蛋白质量減少来检测(图4和5)。在本发明中，LGG和/或LC705増加了抗病毒细胞因子的产生，从而參与灭活病毒。该现象也称为“增强抗病毒抵抗力”。“抗病毒细胞因子”意指有助于破坏或中和病毒的细胞因子。在本发明的优选实施方案中，抗病毒细胞因子选自IFN-α、IFN-β、IL-I β、TNF-a和IP-10。I型干扰素(IFN-a/β)例如在抵抗流感病毒感染中是必需的。IFN-α可诱导的细胞因子或蛋白质包括但不限于Mxl、Mx2、RIG-l和IP-10。Mxl蛋白是粘液病毒(流感病毒)抵抗I蛋白(干扰素可诱导蛋白p78(小鼠))，其在人类中也称为MxA。细胞质蛋白Mxl是发动蛋白家族和大GTP酶家族的成员。干扰素可诱导的Mxl蛋白通过干扰病毒复制中病毒核壳(NP)的作用表现出抗流感病毒活性。Mx基因表达主要由I型IFNs调节。来自IFNs的信号传导通路诱导Mx基因的IFN-刺激的应答元件(ISRE)上游的活化(Hug H.等人，1988. Mol Cell Biol8,3065-3079)。另外，病毒感染或施用双链RNA (dsRNA)本身能产生快速和有效的Mx基因活化(Hug H.等人，1988. Mol Cell Biol 8, 3065-3079 ；Ronni T.等人，1995. J Immunol154,2764-2774)。在所有情况下，Mx诱导是对病毒真正的初级应答，而不是对病毒诱导的IFN的次级应答。细胞通过同时合成Mx蛋白(其留在细胞内)和IFNs(其释放进入细胞环境)能够快速对感染反应。该干扰素诱导邻近未感染细胞中Mx蛋白的表达，从而最初感染的细胞很快被病毒保护的细胞屏障分开。因此，病毒无法有效扩散，给予免疫系统足够时间来巩固其特有的防御线并且消除病毒。细胞质蛋白Mx2(粘液病毒(流感病毒)抵抗2)，在人类中称为MxB，是发动蛋白家族和大GTP酶家族的成员。该蛋白质还具有核形，其位于核被膜下异染色质区中的颗粒型。核定位信号(NLS)出现在核形的氨基末端。该蛋白质是通过IFN-a上调的。RIG-1(DDX58，视黄酸可诱导的基因I蛋白，DEAD-盒蛋白58)是IFN-a可诱导的RNA解螺旋酶。RIG-I包含2个CARD域，ー个解螺旋酶ATP-结合域和ー个解螺旋酶C-端域。RIG-I具有在防止病毒复制中双链RNA-诱导的先天抗病毒响应的必需功能。在A型流感病毒感染的情况中，还已知RIG-I是通过单链RNA活化的。A型流感病毒NSl蛋白结合RIG-I，其防止 RIG-I 的抗病毒作用(Pichlmair A.等人，2006，Science, 314 (5801) :997-1001)。干扰素(IFN)-可诱导的蛋白IO(IP-IO)是细胞因子的趋化因子家族成员，并且在对IFN-Y、IFN-α和脂多糖响应的多种细胞中被诱导。已经在包括内皮细胞、上皮细胞和造血细胞的多种细胞上检测到IP-10结合位点。已经显示A型流感病毒升高了 IP-10基因表达。在本发明方法和用途中，鼠李糖乳杆菌施用于个体，用于减少、延缓或抑制流感病毒复制。可以通过测定病毒mRNA或结构蛋白质的量来研究病毒的复制效率。LGG和/或LC705減少、延缓或抑制流感病毒复制，因此，减轻或预防感染通常引起的症状。用于测定病毒复制效率的适合的流感病毒蛋白质可以例如包括但不限于NP (核蛋白)、NSl (非结构蛋白I)、聚合酶蛋白PB1、PB2或PA、外部糖蛋白HA (血凝素)或NA (神经氨酸酶)、Ml (基质蛋白)、M2或NS2。在本发明中，研究了 LGG和/或LC705对mRNA或NP、NSl和Ml蛋白质的作用，并且LGG和/或LC705减少或减缓它们所有的产生。NSl是非结构蛋白1，其阻止细胞核的宿主mRNA的转运、妨碍RIG-I介导的IFN-响应，并且抑制抗病毒条件。例如，NP是核蛋白，其连接每个基因片段并且调节向细胞核的转运。Ml是基质蛋白质，其位于病毒脂膜的内部基质中。Ml的积累是病毒芽殖所需要的。


本发明涉及生命科学和食品、饲料或制药工业领域。特别地，本发明涉及包含由单独的鼠李糖乳杆菌LC70或由鼠李糖乳杆菌GG和鼠李糖乳杆菌LC705组成的益生菌的组合物。本发明还涉及用作药物的组合物。另外，本发明涉及鼠李糖乳杆菌LC705单独或与鼠李糖乳杆菌GG一起在制备用于治疗和/或预防呼吸道感染和用于增强个体对引起呼吸道感染的病毒的抵抗力的组合物中的用途。另外，本发明描述了鼠李糖乳杆菌GG在制备用于治疗/或预防成人呼吸道感染和用于增强成年个体对引起呼吸道感染的病毒的抵抗力的组合物中的用途。另外，本发明涉及鼠李糖乳杆菌在制备用于减少、延缓或抑制流感病毒复制和用于增加预感染或正感染呼吸道感染的个体的抗病毒细胞因子的组合物中的用途。另外，本发明涉及治疗或预防个体或成年个体中呼吸道感染、增强个体或成年个体对引起呼吸道感染的病毒的抵抗力，减少、延缓或抑制个体的流感病毒复制和增加预感染或正感染呼吸道感染的个体的抗病毒细胞因子的方法。