Tert基因突变检测特异性引物和液相芯片制作方法_许嘉森,杨惠夷专利（Tert,引物,基因突变）-早鸽网

Tert基因突变检测特异性引物和液相芯片制作方法

专利名称

Tert基因突变检测特异性引物和液相芯片制作方法
发明者

许嘉森, 杨惠夷
公开日

2013年12月18日
申请日期

2012年5月31日
优先权日

2012年5月31日
申请人

益善生物技术股份有限公司
文档编号

C12Q1/68GK103451267SQ201210177502
关键字

Tert 引物基因突变特异性检测
权利要求

1.一种TERT基因突变检测液相芯片，其特征是，包括有 (A).针对TERT基因不同突变位点分别设计的野生型和突变型的ASPE引物对每条ASPE引物由5’端的tag序列和3’端针对目的基因突变位点的特异性引物序列组成，所述特异性引物序列为针对T174G位点的SEQ ID N0.15及SEQ ID N0.16，针对C98T位点的SEQ IDN0.17 及 SEQ ID N0.18，针对 G162A 位点的 SEQ ID N0.19 及 SEQ ID N0.20，针对G168A 位点的 SEQ ID N0.21 及 SEQ ID N0.22，针对 C209T 位点的 SEQ ID N0.23 及 SEQ IDN0.24，针对 G151T 位点的 SEQ ID N0.25 及 SEQ ID N0.26，和 / 或针对 A129T 位点的 SEQ IDN0.27 及 SEQ IDN0.28 ;所述 tag 序列选自 SEQ ID N0.1 -SEQ ID N0.14 ； (B).有ant1-tag序列包被的、具有不同颜色编码的微球,所述ant1-tag序列与微球连接中间还设有间隔臂序列；所述ant1-tag序列选自SEQ ID N0.29-SEQ ID N0.42，且所述ant1-tag序列能相应地与(A)中所选的tag序列互补配对； (C).用于扩增出需要检测的、具有相应突变位点的目标序列的引物2.根据权利要求1所述的TERT基因突变检测液相芯片，其特征是，所述扩增引物为针对 T174G 位点的 SEQ ID N0.43 及 SEQ ID N0.44，针对 C98T 位点的 SEQ ID N0.45 及SEQ IDN0.46，针对 G162A 位点的 SEQ ID N0.47 及 SEQ ID N0.48，针对 G168A 位点的 SEQID N0.49 及 SEQ ID N0.50，针对 C209T 位点的 SEQ ID N0.51 及 SEQ ID N0.52，针对 G151T位点的 SEQ IDN0.53 及 SEQ ID N0.54，和 / 或针对 A129T 位点的 SEQ ID N0.55 及 SEQ IDN0.563.根据权利要求1或2所述的TERT基因突变检测液相芯片，其特征是，所述ASPE引物为针对T174G位点的由SEQ ID N0.1和SEQ ID N0.15组成的序列及由SEQ ID N0.2和SEQ IDN0.16组成的序列，针对C98T位点的由SEQ ID N0.3和SEQ ID N0.17组成的序列及由SEQ IDN0.4和SEQ ID N0.18组成的序列，针对G162A位点的由SEQ ID N0.5和SEQID N0.19组成的序列及由SEQ ID N0.6和SEQ ID N0.20组成的序列，针对G168A位点的由SEQ ID N0.7和SEQID N0.21组成的序列及由SEQ ID N0.8和SEQ ID N0.22组成的序列，针对C209T位点的由SEQID N0.9和SEQ ID N0.23组成的序列及由SEQ ID N0.10和SEQID N0.24组成的序列，针对G151T位点的由SEQ ID N0.11和SEQ ID N0.25组成的序列及由SEQ ID N0.12和SEQ IDN0.26组成的序列，和/或针对A129T位点的由SEQ ID N0.13和 SEQ ID N0.27 及由 SEQ IDN0.14 和 SEQ ID N0.28 组成的序列4.根据权利要求1所述的TERT基因突变检测液相芯片，其特征在于，所述间隔臂为5-10 个 T5.用于TERT基因突变检测的特异性引物，其特征在于，所述特异性引物序列为针对 T174G 位点的 SEQ ID N0.15 及 SEQ ID N0.16，针对 C98T 位点的 SEQ ID N0.17 及 SEQIDN0.18，针对 G162A 位点的 SEQ ID N0.19 及 SEQ ID N0.20，针对 G168A 位点的 SEQ IDN0.21 及 SEQ ID N0.22，针对 C209T 位点的 SEQ ID N0.23 及 SEQ ID N0.24，针对 G151T 位点的 SEQ IDN0.25 及 SEQ ID N0.26，和 / 或针对 A129T 位点的 SEQ ID N0.27 及 SEQ IDN0.28
技术领域

[0001]本发明属于分子生物学领域，涉及医学和生物技术，具体的是涉及一种TERT基因突变检测特异性引物和液相芯片
专利摘要

本发明公开了一种TERT因突变检测液相芯片和特异性引物，该液相芯片主要包括有每种由5’端的tag序列和3’端针对目的基因突变位点的特异性引物序列组成的ASPE引物，所述特异性引物序列为针对T174G位点的SEQ?ID?NO.15及SEQ?ID?NO.16，针对C98T位点的SEQ?ID?NO.17及SEQ?ID?NO.18，针对G162A位点的SEQ?ID?NO.19及SEQ?ID?NO.20，针对G168A位点的SEQ?ID?NO.21及SEQ?ID?NO.22，针对C209T位点的SEQ?ID?NO.23及SEQ?IDNO.24，针对G151T位点的SEQ?ID?NO.25及SEQ?ID?NO.26，和/或针对A129T位点的SEQ?IDNO.27及SEQ?ID?NO.28；包被有ant?i-tag序列包被的微球；扩增引物。本发明所提供的检测液相芯片的检测结果与测序法的吻合率高达100％，实现多个突变位点的野生型和突变型并行检测。
专利说明

TERT基因突变检测特异性引物和液相芯片

专利详情
全文pdf
权力要求
说明书
法律状态

Tert基因突变检测特异性引物和液相芯片的制作方法[0002]TERT 称端粒酶逆转录酶(Telomerase reverse transcriptase),位于 5 号染色体5P13.3上，TERT基因是一种核糖核蛋白，位于端粒末端，在维持端粒功能上发挥主要作用，对于染色体的复制和抑制细胞的衰老都是必需的，端粒功能异常会影响基因的稳定性，从而增加肿瘤形成的风险。TERT基因编码端粒酶催化亚单位，参与人体的细胞无限增殖和癌细胞发病机制，也是癌症发展过程中的关键基因，和很多癌症的发生有关系，与基底细胞癌、肺癌、膀胱癌、前列腺癌、宫颈癌、甲状腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌和恶性胶质瘤等的发生有相关性。[0003]目前，TERT基因突变检测方法主要有:微阵列技术，荧光定量PCR技术和基质辅助激光解析电离时间飞行质谱技术(MALD1-T0F-MS)，微阵列技术存在成本昂贵、复杂、检测灵敏度较低、重复性差、分析范围较狭窄，探针的合成与固定比较复杂等问题，另外由于杂交位于固相表面，有一定程度的空间阻碍作用。荧光定量PCR技术存在灵敏度低，样品易污染、假阳性率高的缺点，基质辅助激光解析电离时间飞行质谱技术一种软电离技术，在蛋白质等生物大分子的检测中有着强大而成熟的功能，但是在核酸检测领域，由于核酸分子本身的特殊性，检测受到一定的限制。 [0004]本发明目标检测的TERT基因突变位点，如表所示:[0005]

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