一种止血交联组合物、其制备方法和用途，以及由其所得的止血防粘连材料的制作方法 [0002] 因外伤或手术等引发的大出血可能在几分钟内就会因失血过多，来不及救治而危 及生命，是导致日常意外事故死亡的重要原因，其中尤以颈部、腋下、腹股沟等四肢与躯干 交界处的止血最为困难。这些部位血管丰富，且常规的止血带等压迫包扎止血方式不能起 到良好的止血效果。此外，外科手术中的出血问题也是导致手术失败的一个重要原因，特别 是对于脑、肝、脾、肺、肾等实质性脏器及肿瘤病变等组织的手术，单纯依靠传统的机械性物 理止血是远远不够的，且实质性脏器脆性大，血流量大，机械性止血易造成软组织损伤，严 重的可能影响器官的功能。同时，手术中的大创面渗血还可能遮挡医生手术视野，延长手术 时间，延误最佳手术时机，从而加大了手术风险。因此，应用于入院前紧急外伤和手术安全 领域的止血剂是目前研究的热点。及时、有效、安全的止血材料对挽救伤员生命、稳定伤情、 手术成功等有着十分重要的作用。 [0003] 目前市场上的止血产品包括如下几类：明胶海绵、可吸收止血纱布、壳聚糖止血 粉、纤维蛋白胶、淀粉多糖止血材料等。这些产品虽然在一定程度上满足了临床需要，但是 疗效均不理想。明胶海绵由动物胶原变性而成，具有良好的生物相容性和生物可降解性，具 有溶胶-凝胶可逆转性和极好的成膜性，因此目前被广泛地应用于临床止血。但是明胶制 品仍然存在着一些无法克服的缺陷，如明胶自身的吸水性差。这个特点决定了其并非是一 种理想的止血材料；此外，明胶制品亲水性差，吸水速率较慢；明胶制品（如明胶海绵）的 体内降解时间较长，通常可在人体内滞留数月之久，远远超过组织修复的时间，容易造成伤 口难以愈合及引发慢性炎症反应；而且，缝合步骤也会给病人造成了额外的痛苦和经济负 担，增加手术操作步骤，延长手术时间。 [0004] 多糖如淀粉是自然界最丰富的天然聚合物之一，其与人体组织具有良好的生物相 容性，无毒，无致敏反应。淀粉海绵曾在上世纪60年代应用于临床，但其质地硬脆，在较软 的脑组织上使用时不能施压，故不适用于脑部止血。由于淀粉海绵自身存在上述缺点，现在 已在临床中淘汰。 [0005] 含酰基或羧基的变性淀粉具有吸水膨胀率适中，吸水速度快，吸水倍率高，粘性 大，降解速度可调节等优点。目前以变性淀粉为原料的止血材料，临床效果较好。但是变性 淀粉成膜（或海绵）性不佳，机械性能和柔韧性较差，因此在临床上应用也受到了一定的限 制。 [0006] 总之，目前市面上的止血、防粘连材料均不能达到理想的止血防粘连效果，所以亟 需开发出一种既能高效止血防粘连，又能有效提高其机械性能、降解时间可控，能广泛应用 于临床的止血防粘连材料。


[0007] 为克服现有止血、防粘连材料性能上的缺陷，本发明的目的之一是提供一种可用 于止血、防粘连材料的止血交联组合物。
[0008] 本发明的目的之二是提供所述止血交联组合物的制备方法。
[0009] 本发明的目的之三是提供所述止血交联组合物的用途。
[0010] 本发明的目的之四是提供一种新的止血防粘连材料。
[0011] 本发明提供的止血交联组合物，其原料包括明胶以及含酰基或羧基的多糖。
[0012] 其中，所述含酰基或羧基的多糖选自含酰基或羧基的变性淀粉、氧化纤维素、羧甲 基纤维素、羧基化羟乙基或羟丙基纤维素、透明质酸钠、真菌多糖、羧甲基瓜耳胶、褐藻胶、 黄原胶或阿拉伯胶中的一种或多种。
[0013] 所述止血交联组合物中，其原料按重量份包括以下成分：
[0014] 明胶： 5?95份； 含酰基或羧基的多糖： 5?95份； 增塑剂： 0?15份； 发泡剂： 0?10份。
[0015] 其中，所述增塑剂选自丙三醇或聚乙二醇。
[0016] 其中，所述发泡剂选自阴离子表面活性剂或无机发泡剂。
[0017] 所述止血交联组合物的原料还可包括凝血因子、生长因子、抗生素、银离子或银离 子络合物中的一种或多种。
[0018] 其中，所述凝血因子选自凝血酶、纤维蛋白酶、凝血因子XIII、凝血因子VII、凝血 因子VIII、抑肽酶、纤连蛋白及其组合物中的一种或多种。
[0019] 其中，所述生长因子选自血小板衍化生长因子、成纤维细胞生长因子、转化生长因 子-β、表皮生长因子、胰岛素样生长因子、神经生长因子、血管内皮生长因子、促进骨生长 因子ΒΜΡ-2、ΒΜΡ-7中的一种或多种。
[0020] 本发明提供的所述止血交联组合物的制备方法为：将含酰基或羧基的多糖、明胶 以及交联剂和活化剂溶于水中形成混合溶液，所述含酰基或羧基的多糖和所述明胶于其中 交联得到所述交联组合物的原浆，干燥即得所述交联组合物。
[0021] 其中，所述制备方法还包括混合交联之后进行透析，得到所述交联组合物的原浆。
[0022] 其中，所述制备方法还包括调节所述混合溶液的pH值为3?8,优选为4?5。
[0023] 其中，所述制备方法还包括在所述原浆中加入增塑剂和/或发泡剂。
[0024] 其中，所述制备方法还包括在所述原浆中加入凝血因子、生长因子、抗生素、银离 子或银离子络合物中的一种或多种。
[0025] 其中，所述交联剂选自1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基）碳二亚胺盐酸盐、1-二甲基 氨丙基乙基碳二亚胺、环己基甲基吗啉乙基碳二亚胺β - 丁烯硫酸化物、亚苯基乙基碳二 亚胺或1. 6-环六亚甲基二（碳二亚胺）。
[0026] 其中，所述活化剂选自Ν-羟基琥珀酰亚胺或Ν-羟基硫代琥珀酰亚胺。
[0027] 其中，所述活化剂与交联剂的摩尔比为1:5?5:1。
[0028] 其中，所述含酰基或羧基的多糖与所述交联剂的摩尔比为1:500?1:50。
[0029] 本发明提供了以上技术方案任一项所述止血交联组合物在制备以下任一种材料 中的用途：止血防粘连材料、组织损伤修复膜或支架、血管封堵或栓塞剂、药物缓释载体、体 内积液的吸收和封堵材料、溃烂伤口护创敷料。
[0030] 其中，所述止血防粘连材料为止血粉、止血颗粒、止血微球、止血膜、止血海绵、止 血泡沫、止血凝胶膜剂或止血喷雾。
[0031] 本发明提供的止血防粘连材料，其包含以上技术方案任一项所述的止血交联组合 物。
[0032] 其中，所述止血防粘连材料为止血粉、止血颗粒、止血微球、止血膜、止血海绵、止 血泡沫、止血凝胶膜剂或止血喷雾。
[0033] 本发明提供的止血交联组合物中，明胶在交联剂和活化剂的作用下胺基化，与多 糖的酰基或羧基发生反应得到交联物，所得交联物兼具明胶止血制品和多糖止血制品的特 点，克服了单一明胶止血制品体内降解时间长、单一多糖类止血产品机械性能差等缺点，同 时具有良好的机械性能和降解性能，而且还具有无毒、无刺激性、植入反应轻微、无致敏性、 无免疫原性和良好的生物相容性。与现有的止血制品相比，在吸收性能、止血和凝血性能、 降解性能等多个方面都有明显的提高。
[0034] 本发明提供的止血防粘连材料由于采用了性能优异的止血交联组合物，具有止血 效率高、机械性能好和体内降解时间可控等优点，能够满足止血产品、尤其是医用领域止血 防粘连产品的要求。本发明提供的止血防粘连材料可制成多种类型，能有效用于组织损伤 修复，血管封堵或栓塞、药物缓释、体内积液的吸收和封堵，溃烂伤口的护创和其他组织工 程修复等多个方面，具有广阔的市场应用前景。




[0035] 图1为实验例1的亲水性对比结果图，其中，图A、B分别代表市售明胶海绵与S1# 止血海绵；
[0036] 图2为实验例2的吸水速率对比结果图；
[0037] 图3为实验例3的凝血性能对比结果图；
[0038] 图4为实验例4的止血速度对比结果图。


[0039] 本发明的一个方面提供了一种止血交联组合物，其原料包括明胶以及含酰基或羧 基的多糖。
[0040] 其中，明胶可以为现有的任意种类、规格的明胶，还包括其改性的衍生物。在根据 本发明的止血交联组合物的一个实施方式中，明胶动力可以为180Bloom?270Bloom。
[0041] 其中，含酰基或羧基的多糖可以为现有的任意种类，还包括其改性的衍生物。在根 据本发明的止血交联组合物的一个实施方式中，含酰基或羧基的多糖包括但不限于含酰基 或羧基的变性淀粉、氧化纤维素、羧甲基纤维素、羧基化羟乙基或羟丙基纤维素、透明质酸 钠、真菌多糖、羧甲基瓜耳胶、褐藻胶、黄原胶、阿拉伯胶等等。
[0042] 在本发明一个优选的实施方式中，含酰基或羧基的多糖选自含酰基或羧基的变 性淀粉，尤其是羧甲基淀粉钠。变性淀粉的酰基或羧基取代度可以为〇. 01?1，可优选为 0. 2 ?0. 6。
[0043] 含酰基或羧基的多糖和明胶可以为任意的重量比，在根据本发明的止血交联组 合物的一个实施方式中，含酰基或羧基的多糖和明胶的重量比可以为5?95:95?5 ; 在本发明优选的实施方式中，含酰基或羧基的多糖和明胶的重量比例可以为以下比值： 95:5、85:15、80:20、75:25、70:30、65:35、60:40、55:45、50:50、45:55、40:60、35:65、30:70、 25:75、20:80、15:85 或 5:95。
[0044] 在根据本发明的止血交联组合物的一个实施方式中，其原料还可以包括一种或多 种的添加剂，如增塑剂、发泡剂等。
[0045] 在根据本发明的止血交联组合物的一个实施方式中，其原料按重量份包括：5? 95份的明胶、5?95份的含酰基或羧基的多糖、0?15份的增塑剂以及0?10份的发泡 剂。
[0046] 在本发明一个优选的实施方式中，止血交联组合物的原料按重量份包括：15?75 份的明胶、10?80份的含酰基或羧基的多糖、0?15份的增塑剂以及0?10份的发泡剂。
[0047] 在本发明一个优选的实施方式中，止血交联组合物的原料按重量份包括：20?60 份的明胶、15?70份的含酰基或羧基的多糖、0?10份的增塑剂以及0?5份的发泡剂。
[0048] 在本发明一个优选的实施方式中，止血交联组合物的原料按重量份包括：25?50 份的明胶、20?60份的含酰基或羧基的多糖、0?10份的增塑剂以及0?5份的发泡剂。
[0049] 在本发明一个优选的实施方式中，止血交联组合物的原料按重量份包括：30?45 份的明胶、25?50份的含酰基或羧基的多糖、0?5份的增塑剂以及0?5份的发泡剂。
[0050] 在本发明一个优选的实施方式中，止血交联组合物的原料按重量份包括：35?45 份的明胶、25?45份的含酰基或羧基的多糖、0?5份的增塑剂以及0?5份的发泡剂。 [0051 ] 在根据本发明的止血交联组合物的一个实施方式中，增塑剂可以为止血材料领域 任意种类的增塑剂，包括但不限于丙三醇、聚乙二醇等。
[0052] 在根据本发明的止血交联组合物的一个实施方式中，发泡剂可以为阴离子表面活 性剂、无机发泡剂等等，其中，阴离子表面活性剂包括但不限于脂肪酸钠、烷基苯磺酸钠、吐 温、泊洛沙姆、司盘、甘油脂肪酸酯、山梨醇脂肪酸酯等；无机发泡剂包括但不限于碳酸氢钠 等。
[0053] 在根据本发明的止血交联组合物的一个实施方式中，其原料还可以包括具有促进 血液凝固、伤口愈合、组织修复、抗菌消炎等作用的物质，包括但不限于凝血因子、生长因 子、抗生素、银离子、银离子络合物等。这些物质的添加量、添加种类没有特别限定，可根据 实际的治疗状况由本领域技术人员进行调节。
[0054] 在本发明一个优选的实施方式中，凝血因子包括但不限于凝血酶、纤维蛋白酶、凝 血因子XIII、凝血因子VII、凝血因子VIII、抑肽酶、纤连蛋白等。
[0055] 在本发明一个优选的实施方式中，生长因子包括但不限于血小板衍化生长因子 (TOGF)、成纤维细胞生长因子（FGF)、转化生长因子-β (TGF-β)、表皮生长因子（EGF)、胰 岛素样生长因子（IGF)、神经生长因子（NGF)、血管内皮生长因子（VGEF)、促进骨生长因子 BMP-2、BMP-7 等。
[0056] 本发明的另一个方面提供了前述止血交联组合物的制备方法，该方法为：将含酰 基或羧基的多糖、明胶以及交联剂和活化剂溶于水中形成混合溶液，含酰基或羧基的多糖 和明胶于混合溶液中交联得到本发明所述交联组合物的原浆，干燥后即得本发明的交联组 合物。
[0057] 在根据本发明的制备方法的一个实施方式中，多糖、明胶等原料可分别溶于水中 形成水溶液后再进行混合交联，也可以不限顺序地加入到水中形成溶液进行交联。在本发 明一个优选的实施方式中，将含酰基或羧基的多糖、明胶、交联剂和活化剂分别溶于水中形 成溶液，然后将所得水溶液混合进行交联，配制水溶液时的温度可以为10?40°C，每种原 料溶于水后进行充分搅拌以形成均一的水溶液，否则可能影响交联的效果，搅拌时间可以 为0. 1?5小时。
[0058] 在根据本发明的制备方法的一个实施方式中，原料混合交联时的温度可以为 10?40°C，交联的时间可以为0. 5?24小时，具体视反应情况确定。原料混合交联时还可 用酸性溶液或缓冲液调节水溶液的pH值为3?8,优选的pH值可以为4?5,更优选的pH 值可以为4. 3?4. 8。
[0059] 在根据本发明的制备方法的一个实施方式中，混合交联完毕后，可采用离心、透析 等分离方式除去交联剂等小分子物质，得到交联组合物原浆。
[0060] 在根据本发明的制备方法的一个优选实施方式中，交联组合物的制备过程包括以 下步骤：
[0061] (1)将含酰基或羧基的多糖加入水中，搅拌得质量百分比浓度约为1?10%多糖 溶液，调节溶液的pH值至3?8,添加活化剂、交联剂并搅拌均匀；
[0062] (2)将明胶加入水中，搅拌得质量百分比浓度约为1?10%明胶溶液；
[0063] (3)将步骤⑵所得溶液加入步骤⑴的溶液中，调节所得混合溶液的pH值至3? 8,搅拌交联，得交联组合物料液；
[0064] (4)将步骤（4)所得交联组合物料液透析10?48小时，得交联组合物原浆，干燥 后即得交联组合物。
[0065] 其中，上述过程中的步骤（1)、（2)顺序不限，可互换顺序，亦可同时进行。
[0066] 在根据本发明的制备方法的一个实施方式中，还包括得到交联组合物的原浆后， 在原浆中加入增塑剂和/或发泡剂。其中，增塑剂可以为止血材料领域任意种类的增塑剂， 包括但不限于丙三醇、聚乙二醇等；发泡剂可以为阴离子表面活性剂、无机发泡剂等等，其 中，阴离子表面活性剂包括但不限于脂肪酸钠、烷基苯磺酸钠、吐温、泊洛沙姆、司盘、甘油 脂肪酸酯、山梨醇脂肪酸酯等；无机发泡剂包括但不限于碳酸氢钠等。
[0067] 在根据本发明的制备方法的一个实施方式中，还包括得到交联组合物的原浆后， 在所述原浆中加入凝血因子、生长因子、抗生素、银离子或银离子络合物中的一种或多种。 其中，凝血因子包括但不限于凝血酶、纤维蛋白酶、凝血因子XIII、凝血因子VII、凝血因子 VIII、抑肽酶、纤连蛋白等；生长因子包括但不限于血小板衍化生长因子、成纤维细胞生长 因子、转化生长因子-β、表皮生长因子、胰岛素样生长因子IGF、神经生长因子、血管内皮 生长因子、促进骨生长因子BMP-2、BMP-7等。
[0068] 在根据本发明的制备方法的一个实施方式中，交联剂可以为碳二亚胺类交联剂， 包括但不限于1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基）碳二亚胺盐酸盐（EDC)、1-二甲基氨丙基乙 基碳二亚胺（ETC)、环己基甲基吗啉乙基碳二亚胺β-丁烯硫酸化物（CMC)、亚苯基乙基碳 二亚胺、1.6-环六亚甲基二（碳二亚胺）等等。
[0069] 在根据本发明的制备方法的一个实施方式中，活化剂包括但不限于N-羟基琥珀 酰亚胺（NHS)、N-羟基硫代琥珀酰亚胺等等。
[0070] 在根据本发明的制备方法的一个实施方式中，活化剂与交联剂的摩尔比可以为 1:5 ?5:1 〇
[0071] 在根据本发明的制备方法的一个实施方式中，含酰基或羧基的多糖与交联剂的摩 尔比可以为1:500?1:50。
[0072] 本发明的第三个方面提供了前述止血交联组合物的用途，可用于制备止血防粘连 材料、组织损伤修复膜或支架、血管封堵或栓塞剂、药物缓释载体、体内积液的吸收和封堵 材料、溃烂伤口护创敷料、以及其他组织工程修复支架等等。
[0073] 在根据本发明的用途的一个实施方式中，止血防粘连材料为医用可吸收止血防粘 连材料，包括但不限于止血粉、止血颗粒、止血微球、止血膜、止血海绵、止血泡沫、止血凝胶 膜剂、止血喷雾等等。
[0074] 本发明的第四个方面提供了一种止血防粘连材料，其包括本发明所述的止血交联 组合物。
[0075] 在根据本发明的止血防粘连材料的一个实施方式中，止血防粘连材料为医用可吸 收止血防粘连材料，包括但不限于止血粉、止血颗粒、止血微球、止血膜、止血海绵、止血泡 沫、止血凝胶膜剂、止血喷雾等等。
[0076] 在根据本发明的止血防粘连材料的一个实施方式中，止血防粘连材料可以通过现 有的止血材料剂型制备。
[0077] 为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将进一步描述本发明的示例 性实施例的技术方案。
[0078] 以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。其中，明胶 (180-270Bloom)、多糖、EDC、NHS均为市售产品，其它试剂、材料等如未特别说明均为市售产 品。
[0079] 实施例1止血交联组合物原浆的制备
[0080] 将200mg羧甲基淀粉钠置于50ml的洁净烧杯中，溶于6ml去离子水，用0. IN HC1 调节溶液pH为4?5之间。将100mg明胶溶于5ml去离子水中，在40°C下搅拌2小时制得 均匀的明胶溶液。搅拌下向羧甲基淀粉溶液中滴加交联剂/活化剂的混合水溶液〇. 6ml，该 混合溶液中含40mg的碳二亚胺（EDC)和20mg的N-羟基琥珀酰亚胺（NHS)。搅拌上述溶液 5min后，加入已制好的明胶溶液，控制所得混合溶液的pH为4?5之间，在40°C水浴中搅 拌1小时，使溶液中的多糖和明胶发生充分交联。通过透析的方法洗涤，去除交联中的交联 剂等小分子物质，得到原浆产品1#。
[0081] 利用相同的方法，调节羧甲基淀粉钠和明胶的量，分别在含200mg(溶于6ml水 中）羧甲基淀粉钠中加入明胶水溶液（200mg、500mg、1000mg、2000mg分别溶于10ml、25ml、 50ml、100ml水中）；交联剂和活化剂加入量保持不变，分别制得交联原浆2#，3#，4#，5#。
[0082] 实施例2止血交联组合物原浆的制备
[0083] 将0. 5g羧甲基纤维素钠溶于50ml蒸馏水配制成溶液。将lg明胶溶于50ml蒸馏 水中配成明胶溶液。室温搅拌下向羧甲基纤维素溶液中滴加交联剂/活化剂的混合水溶液 3ml，该混合溶液中含lOOmg的碳二亚胺（EDC)和50mg的N-羟基琥珀酰亚胺（NHS)。搅拌 上述溶液5min后，加入已制好的明胶溶液，在40°C水浴中搅拌1小时，使溶液中的多糖和 明胶发生充分交联。通过透析的方法洗涤，去除交联中的交联剂等小分子物质，得到交联原 浆。
[0084] 实施例3止血交联组合物原浆的制备
[0085] 将lg羧甲基壳聚糖用50ml稀醋酸（pH = 4?5)配成溶液，将0. lg明胶溶于2. 5ml 蒸馏水配成明胶溶液。室温搅拌下向羧甲基壳聚糖溶液中滴加交联剂/活化剂的混合水溶 液6ml，该混合溶液中含200mg的碳二亚胺（EDC)和lOOmg的N-羟基琥珀酰亚胺（NHS)。搅 拌上述溶液5min后，加入已制好的明胶溶液，在40°C水浴中搅拌1小时，使溶液中的多糖和 明胶发生充分交联。通过透析的方法洗涤，去除交联中的交联剂等小分子物质，得到交联原 浆。
[0086] 实施例4止血粉的制备
[0087] 将290g羧甲基淀粉钠溶于5L水中，搅拌下充分溶胀，并滴入0. 1N的盐酸水溶液 调节溶液的pH值至4. 9。持续搅拌中，向其中加入0· 8mol EDC和0· 8mol NHS的混合交联 剂/活化剂（以水溶液形式）。然后添加29g/L明胶溶液2. 5L。保持反应温度40°C，控制 所得混合溶液的pH值为4. 9。反应2小时后，通过透析的方法去除交联过程中的交联剂等 小分子物质，得到原浆。将原浆投入喷雾干燥机的物料斗中，设置进风温度为130°C ±2°C， 出风温度90°C ±2°C，雾化频率为700rpm，横流泵转速为12rpm。待进出口温度基本稳定后， 收集干燥好的物料得羧甲基淀粉钠-明胶止血粉。
[0088] 实施例5止血膜的制备
[0089] 分别配置羧甲基淀粉钠（580mg溶解于20ml水中）溶液、碳二亚胺EDC/NHS溶液 2ml (含EDC、NHS各为1. 6mmol)，和明胶溶液（145mg溶于5ml蒸馏水）混合，在实施例1所 述交联条件下交联反应2小时。反应后经过透析，得到交联组合物原浆。取出原浆，用匀质 器达成均匀浆液，浇入模具中，_30°C冷冻，然后在真空条件下冷冻干燥48小时得到海绵状 固体，压片制膜得到止血膜。
[0090] 实施例6止血海绵的制备
[0091] 应用实施例1中制备3#的羧甲基淀粉钠、明胶和交联剂/活化剂的配方，交联时 间分别为〇. 511、111、211、411、241 1，制备交联组合物原浆。将透析清洗后的原浆用搅拌器打成 均匀浆液，倒入一长方形模具中，在_20°C下低温保存箱中预冷24小时，再放入冷冻干燥机 中，在-50°C、真空小于10帕下冷冻干燥48小时，分别得到止血防粘连海绵S1#、S2#、S3#、 S4#、S5#。
[0092] 实施例7含抗菌剂止血海绵的制备
[0093] 应用实施例1中制备3#的羧甲基淀粉钠、明胶和交联剂/活化剂的配方，交联时 间分别为lh，制备交联组合物原浆。将透析清洗后的原浆用搅拌器打成均匀浆液，每100g 浆液中加入5ug?100ug抗菌剂，充分搅拌，倒入一长方形模具中，在_20°C下低温保存箱中 预冷24小时，再放入冷冻干燥机中，在-50°C、真空小于10帕下冷冻干燥24-48小时，得到 含抗菌剂的止血防粘连海绵。
[0094] 实施例8含生长因子止血海绵的制备
[0095] 应用实施例1中制备2#的羧甲基淀粉钠、明胶和交联剂/活化剂的配方，交联时 间分别为lh，制备交联组合物原浆。将透析清洗后的原浆用搅拌器打成均匀浆液，每100g 浆液中加入5ug?50ug生长因子，倒入一长方形模具中，在-20°C下低温保存箱中预冷24 小时，再放入冷冻干燥机中，在_50°C、真空小于10帕下冷冻干燥24-48小时，得到含生长因 子的止血防粘连海绵。
[0096] 实施例9含发泡剂和塑化剂止血海绵的制备
[0097] 将50mg甘油脂肪酸酯加入纯化水浸泡1个小时后置于搅拌器内搅拌均匀，然后 向搅拌器内的溶液中加入50mg聚乙二醇400,以300r/min的中速搅拌均勻，然后边搅拌边 向搅拌器内的溶液中加入实施例1的3#交联原浆，再使不锈钢搅拌器以600r/min的高速 搅拌，待发泡液的体积膨大至原来的4-5倍时，将发泡液注入硅胶模具盘里，尽快放入速冻 箱，使其快速预冻2小时；将预冻完全的泡液脱模，得海绵半成品，将其在真空条件下依次 进行第一次升华及保温、升华及保温操作结束后，则得到疏松多孔的医用止血防粘连海绵。
[0098] 实施例10止血凝胶膜剂的制备
[0099] 应用实施例1中的反应步骤和条件，制成并清洗实施例1中制备的5#交联组合物 原浆，向其中加入120mg甘油和25mg吐温-80,在20-50°C下充分搅拌，倒入模具中，将该模 具放入真空干燥箱中干燥48h，制成复合凝胶膜材料。
[0100] 实施例11止血喷雾剂的制备
[0101] 由实施例1方法制备的原浆液透析清洗后得到的交联组合物和溶剂水配制而成。 止血喷雾剂中原料组分及含量为：交联羧甲基淀粉钠-明胶6-20g，水加至100g。称取交联 羧甲基淀粉钠-明胶6-20g，自动过滤器上加蒸馏水至100g，搅拌均匀，检验合格后灌入带 有阀门的喷雾瓶。
[0102] 实验例1止血海绵的亲水性测定实验
[0103] 止血海绵的亲水性测定实验所用的样品为实施例6的止血海绵S1#和市售明胶海 绵（江西省祥恩医疗科技发展有限公司）。所用的仪器为接触角测量仪（GBX公司MCAT接 触角测量仪）。
[0104] 具体的实验步骤如下：首先调整水平（水准泡居中），上移工作台以工作台的上边 缘线为基准，旋转摄像系统，使摄像窗口的上或下边与之平行。再把试样置于工作台上放平 压紧，利用微量进样器调整液滴的量，使在针头形成液滴，转动旋钮使工作台上移，让试样 表面与液滴接触，再下移工作台，试样上即可留下液滴，此时开始记时。通过工作台和摄像 系统的调节，使液滴显示清晰后，点击"冻结"按钮，即可进行接触角的测量。接触角测量结 果如图1所示。在相同的时间内（3秒），S1#止血海绵的接触角约为63°，市售明胶海绵 的接触角约为138°，达到S1#止血海绵接触角的两倍。
[0105] 以上结果说明S1#止血海绵的亲水性明显优于市售明胶海绵的亲水性，此性质决 定了止血海绵的吸水速度大大快于明胶海绵的吸水速度，更加适用于做止血护创材料。
[0106] 实验例2止血海绵的体外吸水速率实验
[0107] 体外吸水速率实验采用毛细管实验方法测定。毛细管实验法即在酸式滴定管 (25ml)内注水，使酸式滴定管零刻度液面与砂心漏斗滤板下端平齐。将滤纸放入砂心漏斗， 与滤板完全接触。
[0108] 调整酸式滴定管至零刻度，各称取0. 05g止血海绵（由实施例6的方法制备S1# 样品）和市售明胶止血海绵（江西省祥恩医疗科技发展有限公司），在滤纸上均匀铺开，放 入砂心漏斗，打开滴定管活塞，从液面开始下降起每隔20s也就是2〇S、4〇S、6〇S等等分别计 时，观察液面下降距离，计算样品吸水速度。结果参见图2,图2结果表明S1#淀粉-明胶止 血海绵的吸水速率明显高于市场上购买的明胶海绵止血产品。
[0109] 实验例3止血海绵的体外凝血实验
[0110] 无菌脱纤维羊全血由北京冬歌生物技术有限公司提供，实验方法如下：切取海绵 样品1. 5cmX lcmXO. 5cm，所用的止血海绵样品为实施例6的S1#样品，对照样品为可吸收 明胶海绵（江西省祥恩医疗科技发展有限公司）。将准确切取的样品分别放入玻璃试管中， 每支试管中加入lml无菌脱纤维羊全血，放入37°C水浴中加热，每隔5s钟将试管倾斜，观察 血液是否凝固。结果如图3所示。
[0111] 图3的结果表明，本发明提供的止血海绵的凝血性能明显优于对照样品明胶海 绵。
[0112] 实验例4止血海绵的兔耳静脉止血实验
[0113] 新西兰大白兔10只，雄性，体重约2500?3000g。将供试家兔耳部脱毛、消毒，无 菌条件下于家兔左右耳缘末1/3处，用消毒手术刀切开lcm长的创口，其中包括耳中央一 主静脉被切开，但耳朵并不切透，防止血液从内测流出，待血液充满创面后进行后续凝血测 试。所用的止血海绵样品为实施例6的S1#样品，阳性对照样品为可吸收明胶海绵（江西 省祥恩医疗科技发展有限公司）和可吸收止血纱布（云南德华生物药业有限公司），所用的 阴性对照样品为普通纱布。将止血材料样品剪成2cmX2cm小块，称量后备用。压迫止血， 每5s观察1次,直至完全止血，记录时间。结果如图4所示。
[0114] 图4的结果表明，本发明提供的止血海绵在止血速度上明显快于现有的止血材 料。
[0115] 实验例5止血海绵的体外降解实验
[0116] 应用实施例6中得到的止血防粘连海绵51#、52#、53#、54#、55#，分别切割止血海 绵样品为2cmX 2cm规格,称重后，放入PBS缓冲溶液（pH值为7. 4)中7天后，用水清洗，干 燥并恒重后称重。计算样品的降解速率。止血海绵样品的质量减轻比率分别为49%、46%、 30%、21 %和13%。说明其具有良好的降解性能。
[0117] 以上实验例的结果表明，本发明提供的止血防粘连材料在吸水性能、止血性能、降 解性能等多个方面都明显优于现有的止血产品，可作为一种性能更加优异的止血防粘连产 品使用。同时，本发明提供的止血防粘连材料由于其性能优异，还有望在制备组织损伤修复 膜或支架、血管封堵或栓塞剂、药物缓释载体、体内积液的吸收和封堵材料、溃烂伤口护创 敷料以及其他组织修复工程材料中得到大范围的应用。
[0118] 虽然为了说明本发明，已经公开了本发明的优选实施方案，但是本领域的技术人 员应当理解，在不脱离权利要求书所限定的本发明构思和范围的情况下，可以对本发明做 出各种修改、添加和替换。