专利名称：改善脂肪肝的组合物的制作方法脂肪肝是指不能进行正常的脂肪代谢，而脂质，尤其是中性脂肪(三酸甘油酷)在肝脏内存积过多，在半数以上的肝細胞中观察到脂肪空胞的疾病。在临床上，5%以上的肝細胞中观察到脂肪或者每IOOmg肝中脂肪超过5mg时分类为脂肪肝。近年来，随着生活水平的提高，高脂肪、高热量的饮食生活以及基于文明发达的运动不足等使脂肪肝患者呈上升趋势，且发病年龄也渐趋低龄化。若脂肪肝不及时治疗，会进ー步发展成肝炎、肝硬化、肝癌等。形成脂肪肝的原因据报道有酒精、糖尿病、肥胖、营养不良(长时间摄取低蛋白食品、高脂肪食品、饥饿、维生素不足、摄取过多糖质)，药物滥用(金成勋等，“腹部超声波诊断脂肪肝的原因”家庭医学会期刊175(1995. 12)pp. 785-794)等。脂肪肝分为胆固醇脂肪肝、磷脂质脂肪肝、中性脂肪脂肪肝，其中最普遍的脂肪肝是中性脂肪在肝脏内非正常存积的脂肪肝。目前市场上销售的脂肪肝治疗剂包括LegalonTM(BUKffAN GPHARM. CO.，LTD.)、 RecoverTM(YUHAN Corporation)、HeparegenTM(BORYUNG CO.，LTD.)、Hepa-MerzTM(HANWHA PHARM. CO.，LTD.)等，现有技术可包括韩国公开专利第2006-0028561号掲示的利用金雀异黄素(genistein)等的脂肪肝治疗剂。
本发明的目的是提供利用番茄全草提取物等改善脂肪肝的組合物。本发明的其他目的将在下文掲示。本发明的改善脂肪肝的組合物包含番茄全草提取物等有效成分。本发明的发明人制造番茄全草、窃衣、紫草的50%乙醇提取物，把所述提取物和高脂肪食品或酒精一起给药给实验动物吋，可观察到因摄取高脂肪食品或酒精使血液中増加的谷丙转氨酶(以下简称“GPT”)及谷草转氨酶(以下简称“GOT”)活性降低，且降低肝脏的总胆固醇和中性脂肪浓度。所述GPT和GOT是肝因酒精、肥胖等原因受到损伤时在血液中分泌的酶，所以用来表示肝功能障碍的肝功能指数，因此能降低血液中GPT和GOT 活性，就确认为可改善肝脂肪等肝功能的物质(M.Hayashi，et al. , Nippon Yakuri gaku Zasshi, 100，391-399(1992))。基于这些实验结果完成本发明。本发明的改善脂肪肝的組合物的特点是含有蕃茄全草提取物、窃衣提取物及紫草提取物(以下简称“番茄全草提取物等”)中的至少ー种提取物。本说明书中的“脂肪肝”是指依所述三个类型包含胆固醇脂肪肝、磷脂质脂肪肝、中性脂肪脂肪肝，依原因分类包含酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝。不论是酒精性脂肪肝或非酒精性脂肪肝，脂肪肝是以肝内存积的胆固醇或中性脂肪来表示，以下实验例显示番茄全草提取物等具有降低实验动物肝内的总胆固醇含量及中性脂肪含量的活性。另外，本说明书中的所述“改善”是指包含症状的预防、改善、治疗或这些症状的迟 MmS-o另外，本说明书中，“番茄全草提取物”表示不论提取方法包含以甲醇、乙醇、丙酮、 乙酸乙酷、饱和正丁醇、氯仿、ニ氯甲烷、水或其混合溶剂从番茄叶、茎、花、根或其混合物等提取对象提取而获得的提取物和其提取物中由所述列举的溶剂分离获得的提取物。因此不论提取方法，只要是番茄叶、茎、花、根或其混合物等提取对象经浸泡于提取溶剂的步骤而提取即可，可选择冷浸、回流、加热、超声波等任一方式适用于提取方法。然而，优选的所述 “番茄全草提取物”表示包含以水、乙醇或其混合溶剂提取番茄叶、茎、花、根或其混合物等提取对象而获得的提取物，并去除提取溶剂成液相提取物或固相提取物。另外，本说明书中，“窃衣(Torilis japonica)提取物”除了窃衣叶、茎、花、根或其混合物等提取对象之外其定义可与所述“番茄全草提取物” 一祥。另外，本说明书中，“紫草(Lithospermum erythrorhizon)提取物”也同样的除了紫草叶、茎、花、根或其混合物等提取对象之外其定义可与所述“番茄全草提取物” 一祥。本说明书中没有特別定义的其它术语具有国语辞典上的意义或本领域普通技术人员通常理解的含义。此外，本发明的改善脂肪肝的組合物只要其番茄全草提取物等有效成分显出改善脂肪肝的活性，依据用途、剂形、配方目的等可包含任意量(有效量)，但通常的有效量以组合物整体的总重量为基准吋，其含量在0. 0019Γ99. 900%重量范围内。在此“有效量”是指可导致改善脂肪肝效果的有效成分的量。像这样的有效量是通常本领域的普通技术人员做实验可決定的。另外，脂肪肝若不及时治疗，会进ー步发展成肝炎、肝硬化、肝癌等。因此上述番茄全草提取物等可用于预防由脂肪肝引起的肝炎、肝硬化、肝癌的目的。因此在另一方面，本发明可理解成包含上述番茄全草提取物等有效成分以预防脂肪肝引起的疾病的組合物。依据预防脂肪肝引起的疾病的組合物，对其有效成分的优选实施方式及其含量， 可适用本发明所述改善脂肪肝的組合物的相关说明。在另一方面，本发明是包含番茄全草提取物等有效成分的解宿醉的组合物。饮酒过量所经历的恶心、头痛的宿酔(hangover)现象是酒精代谢过程中产生的乙醛所引起的症状。通常肝脏内存在酒精分解酶(ADH)和乙醛分解酶(ALDH)，当酒精进入人体，酒精由ADH转换成乙醛，乙醛再由ALDH转换成对人体无害的醋酸。以下实验例确认所述番茄全草提取物等促进ADH活性和ALDH活性，故其可利用在解宿醉方面。如以下实验例所示当番茄全草提取物与赤杨提取物和花楸树提取物混合时明显的提高ADH活性和ALDH活性。故本发明的解宿醉的组合物其有效成分优选含有番茄全草提取物、赤杨提取物及花楸树提取物。在此赤杨提取物和花楸树提取物分別除了赤杨叶、茎、花、根或其混合物及花楸树叶、茎、花、根或其混合物等提取对象之外其定义可与所述“番茄全草提取物” 一祥。依据本发明的解宿醉的组合物，对其有效成分的优选实施方式及其含量，可适用本发明所述改善脂肪肝的組合物的相关说明。在另一方面，本发明是包含所述番茄全草提取物等有效成分的改善肥胖的组合物。肥胖是对热量的摄取和消耗的不平衡造成的代谢性疾病，其指因过多的热量而月旨肪组织非正常的增カロ的状态[Kopelman PG. Neuroendocrine function in obesity. Clinical Endocrinology 28:675—689，1998;Clinical Obesity、eds. Kopelman PG, Stock MJ) 248-89 (Blackwell Science, Oxford 1998]。男人的体脂肪超过体重的25%、女人的体脂肪超过体重的30%时都看成肥胖，在临床上BMI (Body Mass hdex:身体质量指数)在25. 0 到30. 0之间定义为超重，30. 0以上时定义为肥胖。肥胖的原因包括高热量、高脂肪的饮食生活，基于忙碌社会环境的运动不足，内分泌异常等环境因素和遗传因素，其中50%到70%的肥胖基于环境因素，剩下的基于遗传因素 ο本说明书上的“肥胖”表示不论基于环境因素的肥胖或基于遗传因素的肥胖，其包含脂肪组织非正常的増加的状态，身体质量指数包含肥胖(BMI在30以上)和超重(BMI在 25到30之间)。依据本发明的改善肥胖的组合物，对其有效成分的优选实施方式及其含量，可适用本发明所述改善脂肪肝的組合物的相关说明。发生肥胖而维持其状态则成为疾病的原因，代表性的此类疾病可包括高血压、糖尿病等代谢性疾病(金赞宗，肥胖和健康，2002，中央大学出版社)。所以在另一方面，本发明是包含所述番茄全草提取物等有效成分的预防肥胖引起的疾病的組合物。此外，本发明是包含所述番茄全草提取物等有效成分的减肥用的組合物。本说明书上的“减肥”定义为体重不是肥胖或超重，但为了美容或健康的目的较需要减少体重的状态。通常本发明的减肥用的組合物可制造成正常人为美容或健康而使用的組合物。依据本发明的减肥用的組合物，对其有效成分的优选实施方式及其含量，可适用本发明所述改善脂肪肝的組合物的相关说明。另外，根据另ー个实施方式，本发明的改善脂肪肝的組合物、预防脂肪肝引起的疾病的組合物、解宿醉的组合物、改善肥胖的组合物、预防肥胖引起的疾病的組合物及减肥用的組合物(以下均称为“本发明的組合物”)可理解成饮料等食品組合物。本发明的食品組合物除了其有效成分外可含有甜味剂、调味剂、生理活性物质、矿物质成分等。适量甜味剂可使食品产生甜味，有天然的和合成的。优选使用天然甜味剂，所述天然甜味剂可包括玉米糖浆固形物、蜂蜜、蔗糖、果糖、乳糖、麦芽糖等的糖甜味剂。使用调味剂可増加食品的香味，有天然的和合成的。优选使用天然调味剂。使用天然调味剂时除了调味以外可以达到加强营养的目的。天然调味剂可从苹果、柠檬、橘子、葡萄、草莓、桃子等获得或从绿茶叶、玉竹、竹叶、桂皮、菊花叶、茉莉花等获得。还可使用从人參(红參)、竹笋、芦荟叶汁、杏仁获得的天然调味剂。天然调味剂可以是液相浓缩液或是固相提取物。根据需要可以使用合成调味剂，合成调味剂可利用酷、酒精、乙醛、烯等。作为生理活性物质可使用儿茶素、表儿茶素、没食子儿茶素、表没食子儿茶素等儿茶素类或视黄醇、抗坏血酸、维生素E、维生素D2、硫胺素、核黄素等维生素类。作为矿物质成分可使用钙、镁、铬、钴、铜、氟化物、锗、碘、铁、锂、锰、钼、磷、钾、硒、 矽、钠、硫、钒、锌等。另外本发明的食品組合物除了所述甜味剂等以外根据需要还可以含有防腐剤、乳化剂、酸味剂、粘稠剂等。所述防腐剤、乳化剂等只要能达到添加的用途，最好添加极微量使用。极微量是指以食品組合物整体总重量为基准吋，其含量在0. 0005%至0. 5%的重量范围内。能使用的防腐剂可包括己ニ烯酸钙、己ニ烯酸钠、己ニ烯酸钾、苯甲酸钙、苯甲酸钠、苯甲酸钾、EDTA(乙烯ニ胺四乙酸)等。能使用的乳化剂可包括阿拉伯胶、羧甲基纤维素、黄原胶、果胶等。能使用的酸味剂可包括柠檬酸、苹果酸、反丁烯ニ酸、己ニ酸、磷酸、葡萄糖酸、酒石酸、维生素C、乙酸等。所述酸味剂除了增进口味以外，还抑制微生物的繁殖。为了食品组合物具有适当的酸度，食品組合物中可添加所述酸味剂。能使用的粘稠剂可包括悬浮剂、絮凝剂(flocculant)、成胶剂、膨胀剂等。根据另一个实施方式，本发明的組合物可以用作药物组合物。本发明的药物组合物除了其有效成分外还含有药学上允许的载体，赋形剂等，可制造成ロ服剂型(片剂、悬脬液、颗粒、乳剂、胶囊、糖浆等)、非ロ服剂型(灭菌注射用水性或油性悬浮液)、局部用剂型(溶液、霜剂、膏剂、胶、洗剤、贴片)等。所述“药学上允许的”是指不抑制有效成分的活性下，对适用(处方)对象不具有适应范围以上的毒性(足够低的毒素)。药学上允许的载体可包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、淀粉(例如玉米淀粉、马铃薯淀粉等)、纤维素、纤维素衍生物(例如纳羧甲基纤维素、羟乙基纤维素等)、麦芽、明胶、滑石粉、 固体润滑剂(例如硬脂酸、硬脂酸镁等)、硫酸钙、植物性油(例如花生油、棉籽油、芝麻油、 橄榄油等)、多元醇(例如丙ニ醇、甘油等)、藻胶酸、乳化剂(例如TWEENS)、润湿剂(例如硫酸月桂酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、保存剂、水、食盐水、磷酸缓冲溶液等。 根据本发明的药物组合物的剂型从所述载体中可选择使用ー种以上合适的载体。根据药物組合物的剂型，亦可选择使用合适的赋形剂，例如本发明的药物组合物制成水性悬浮剂吋，合适的赋形剂可包括纳羧甲基纤维素、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻胶酸钠、聚乙烯比咯烷酮等悬浮剂或分散剂；制成注射液吋，合适的赋形剂可包括林格液、生理食盐水等。本发明的药物组合物可ロ服给药或非ロ服给药，依需要亦可局部给药。本发明的药物组合物的1日给药量通常在0. 00ri50mg/kg体重范围之内，其可1 次或分成多次给药。然而，本发明的药物组合物的给药量是经考虑给药方式、患者的年齢、 性別、体重、患者的症状程度等多种相关因素決定，所以所述给药量任何情况下不得理解为限制本发明的范围。如前所述，本发明可提供利用番茄全草提取物等改善脂肪肝的組合物。另外，本发明亦可提供利用番茄全草提取物等预防脂肪肝引起的肝炎、肝硬化或肝癌的組合物、解宿醉的组合物、改善肥胖的组合物、预防肥胖引起的高血压或糖尿病的組合物、减肥用的組合物。本发明的組合物可用作如饮料等的食品組合物或药物组合物。 实施例1 蕃茄全草提取物的制备将1kg切细的蕃茄全草的叶、茎及根浸泡于5公升50%的乙醇中，在50°C提取10 小时后去除提取残渣，再经减压浓缩去除提取溶剂而获得固相的提取物。实施例2 窃衣提取物的制备将Ikg切细的窃衣的叶、茎及根浸泡于5公升50%的乙醇中，在50°C提取10小时后去除提取残渣，再经减压浓缩去除提取溶剂而获得固相的提取物。实施例3 紫草提取物的制备将Ikg切细的紫草的叶、茎及根浸泡于5公升50%的乙醇中，在50°C提取10小时后去除提取残渣，再经减压浓缩去除提取溶剂而获得固相的提取物。实验例改善肝功能、解宿酔、及抑制肥胖的活性实验实验例1 改善肝功能的活性实验实验列1-1 改善肥胖引起的脂肪肝的活性实验实验列1-1-1 =GPT及GOT活性的测定购买体重220士8. 9g，6周龄，Sprague-Dawley系无病菌的实验用小鼠(中央实验室，动物公司，韩国)，实验开始前提供充分的水和饲料，五只为ー组分离饲养2周以适应实验环境。五只为一組，阴性对照组(正常组)用正常食饵[AIN-76饲料，FEEDLAB]，阳性对照组用高脂肪食饵[正常食饵+30%脂肪(重量份，以正常食饵100重量份为基准混合30 重量份脂肪)]，实验组(三个组)用以20mg/kg添加上述各实施例提取物的高脂肪食饵，这样实施6周。动物实验室的温度(21 士2°C)，湿度(60士5%)及照明时间(12L/12D)自动调控，自由摄取水和食饵。这样饲养的实验小鼠来完成測定其肝损伤指数酶活性度。
从实验动物的腹部大静脉采取血液(aiil)，以4500xg圆心分离血液20分钟只分离出血清后用GPT及GOT测定套件(牙山制药)測定GPT及GOT活性列于表1。表1 GPT及GOT的活性


本发明涉及改善脂肪肝的组合物。更确切地说，涉及利用番茄全草提取物、窃衣提取物和/或紫草提取物改善脂肪肝的组合物。