专利名称：用于治疗胰腺炎和胰腺功能不全的胰酶组合物和方法用于治疗胰腺炎和胰腺功能不全的胰酶组合物和方法相关申请的交叉引用本申请要求2009年9月17日提交的美国临时申请号61/243，467的优先权，其完整内容在此为所有目的通过引用整体并入。在胰腺功能不全的情况下，胰脂肪酶和其他胰酶产物(PEP)可以被施用以至少部分弥补由影响胰腺的各种疾病引起的酶缺乏，所述疾病例如胰腺炎、胰腺切除、囊性纤维化等。在胰腺功能不全的治疗中使用胰酶是罹患囊性纤维化的患者的治疗的必要部分。如果没有这些补充，患者会变得严重营养障碍。如果不治疗，这种营养障碍可以威胁生命，特别是在婴儿的情况下。除了营养障碍(例如，脂肪吸收不良，等等)，大部分罹患慢性胰腺炎的患者还经 历与病症相关的严重且经常的衰弱性疼痛。胰腺疼痛的原因是不确定的，但已经假设是由胰腺过度刺激引起的，胰腺过度刺激是由于CCK释放肽的反馈调节的丧失。正常来说，响应于餐食摄入的胰蛋白酶释放导致上胃肠道中存在的CCK释放肽的降解，这导致在已经为消化产生足够的消化酶时胰腺收缩和酶分泌的减少。对于罹患胰腺功能不全的患者来说，CCK释放肽未充分降解，因此允许继续(过度)刺激胰腺。尽管不希望受任何特定理论束缚，根据疼痛产生的这种假设，蛋白酶(例如胰酶制剂中的蛋白酶)的施用应该降解CCK释放肽，从而缓解胰腺过度刺激和导致的胰腺疼痛。胰酶在接近中性和弱碱性条件下显示最佳活性。在胃条件下，通常在治疗性酶组合物中存在的脂肪酶预期随着逐渐降低的PH和/或逐渐增加的暴露于低pH条件的持续时间而逐渐且不可逆地变得失活，导致生物活性丧失。因此，外源施用的酶一般针对胃失活而受到保护，例如用肠溶包衣保护，以在其穿过胃并进入十二指肠期间保持完整并免受胃酸消化。然而，因为CCK释放肽在胃肠道中高度分泌，常规的肠溶包衣胰酶制剂可能不会足够快速地释放蛋白酶或者不会在胃肠道的适当部分释放蛋白酶以充分降解CCK释放肽并从而减少或消除胰腺疼痛。未包衣的酶制剂不会产生在胃肠道中缓慢或不完全释放的问题，但预期在胃的低PH环境中变得大量失活，因此不提供足够水平的活性消化酶来治疗由胰腺功能不全引起的营养障碍。用未包衣的酶制剂治疗胰腺疼痛的一种方法是共施用未包衣的酶和质子泵抑制齐U，质子泵抑制剂试图减少胃中的酶降解，使得一些活性酶，特别是脂肪酶，可以不被消化而进入十二指肠(Lieb 等.,Aliment. Pharmacol. Ther. 29, 706-719 (2009)) 可选地，已经用相对高剂量的包衣或未包衣的胰酶治疗胰腺疼痛以保证足够的活性酶被递送至十二指肠(Winstead 等·，Pancreatology 9,344-350(2009))。例如，建议剂量为 64，000 单位脂肪酶并具有240,000单位标称蛋白酶活性的未包衣的酶制剂(每餐)用于减轻胰腺疼痛(Lieb 等·)。基于其中未包衣的酶似乎比其他研究中使用的包衣的酶制剂表现更好的许多小临床研究(Lieb等)，传统意见是，包衣的酶制剂不被推荐用于治疗胰腺疼痛，而未包衣的酶制剂可能是适合的。然而迄今为止，还没有足以说明包衣或未包衣的胰酶在治疗与胰腺炎相关的疼痛中的效力的对照临床试验。然而，为了治疗胰腺疼痛(例如，用未包衣的酶制剂)和营养障碍(例如，用包衣的酶制剂)，常规治疗方法建议需要非常高剂量的酶；即，每餐约4个肠溶包衣的胰酶制剂丸和4个未包衣的胰酶制剂丸。这是基于CREON 24的推荐中间剂量(mid-dosing)的中点以及关于给予未包衣的酶的专家推荐(Winstead等.)，因为目前没有被批准用于治疗疼痛的未包衣的产品。这对患者产生非常大的负担并且意味着给予患者的酶的总剂量可能产生安全性顾虑(Smyth 等· Fibrosing colonopathy in cystic fibrosis results of acase-control study (囊性纤维化的纤维化结肠病病例对照研究的结果).Lancet. 1995 ；346 :1247-1251 ;FitzSimmons 等.High-dose pancreatic-enzyme supplements andfibrosing colonopathy in children with cystic fibrosis (具有囊性纤维化的儿童中高剂量膜酶补充物和纤维化结肠病)· New England Journal of Medicine. 1997 ;336 :1283-1289)。 本发明人出乎意料地发现，包含相对较低量的肠溶包衣消化酶与未包衣消化酶的组合的单一剂型提供了胰腺疼痛的有效治疗和营养障碍例如脂肪吸收不良的有效控制。此夕卜，本发明人出乎意料地发现，非常低剂量的肠溶包衣的酶在例如罹患慢性胰腺炎的患者中有效治疗胰腺功能不全导致的吸收不良。发明概述在一个实施方案中，本发明涉及包括肠溶包衣的含消化酶的珠和未包衣的含消化酶的珠的多微粒消化酶组合物，其中所述肠溶包衣的含消化酶的珠包括核心和置于所述核心上的肠溶包衣，其中所述核心包含治疗有效量的消化酶，并且所述肠溶包衣包含肠溶聚合物；并且所述未包衣的含消化酶的珠包含治疗有效量的消化酶，并且实质上不含肠溶聚合物包衣。在另一个实施方案中，本发明涉及治疗胰腺炎疼痛的方法，所述方法包括给有相应需要的患者施用本发明的组合物。而在另一实施方案中，本发明涉及治疗胰腺外分泌功能不全的方法，所述方法包括给有相应需要的患者施用治疗有效剂量的肠溶包衣的消化酶，其中所述剂量范围在约100至约300USP脂肪酶单位/kg/餐。发明详述本发明一方面涉及包括肠溶包衣的含消化酶的珠和未包衣的含消化酶的珠的组合的稳定的消化酶组合物。术语“稳定的消化酶”表示在长期贮存之后维持实质的酶活性的消化酶。术语“消化酶”指消化道中分解食物成分而使得它们能够被生物体摄取或吸收的酶。适用于本发明的消化酶的非限制性类别包括脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶。消化酶的非限制性实例包括胰脂肪酶(还称为胰酶制剂(pancreatin))、脂肪酶、共脂肪酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰凝乳蛋白酶B、胰肽酶(pancreatopeptidase)、羧肽酶A、羧肽酶B、甘油酯水解酶、磷脂酶、留醇酯水解酶、弹性蛋白酶、激肽原酶、核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶、α -淀粉酶、木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶、葡聚糖酶(glutenase)、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、半乳糖苷酶、乳糖酶、蔗糖酶、异麦芽糖酶及其混合物。在本发明的一个实施方案中，稳定的消化酶是胰酶。本文使用的术语“胰酶”指胰腺分泌中存在的酶类型的任何一种，例如淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶或其混合物，或指任何具有酶活性的胰腺起源的提取物，例如胰酶制剂。胰酶可以通过从胰腺提取来获得，人工生产，或获自非胰腺的来源，例如获自微生物、植物或其他动物组织。在本发明的另一实施方案中，稳定的消化酶是胰脂肪酶。术语“胰脂肪酶”或“胰酶制剂”指几种酶类型的混合物，包括淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶。胰脂肪酶可经商业途径获自例如 Nordmark Arzneimittel GmbH 或 Scientific Protein Laboratories LLC0在本发明组合物的一个实施方案中，稳定的消化酶包括脂肪酶。术语“脂肪酶”指催化脂质水解成甘油和简单脂肪酸的酶。适合本发明的脂肪酶的实例包括但不限于动物脂肪酶(例如，猪脂肪酶)、细菌脂肪酶(例如，假单胞菌脂肪酶和/或伯克霍尔德菌脂肪酶)、真菌脂肪酶、植物脂肪酶、重组脂肪酶(例如，通过重组DNA技术由适合宿主细胞产生的重组脂肪酶，所述宿主细胞选自培养的细菌、酵母、真菌、植物、昆虫或哺乳动物宿主细胞的任何一种，或者包括与天然存在的 序列同源或基本相同的氨基酸序列的重组脂肪酶，由与天然存在的脂肪酶编码核酸同源或基本相同的核酸编码的脂肪酶，等等)、化学修饰的脂肪酶或其混合物。在本发明组合物的另一实施方案中，稳定的消化酶包括淀粉酶。术语“淀粉酶”指分解淀粉的糖苷水解酶，例如α -淀粉酶、β -淀粉酶、Y -淀粉酶、酸性α -葡糖苷酶、唾液淀粉酶例如唾液素等。适用于本发明组合物的淀粉酶包括但不限于动物淀粉酶、细菌淀粉酶、真菌淀粉酶(例如，Aspergillus 淀粉酶，并且优选是米曲霉淀粉酶)、植物淀粉酶、重组淀粉酶(例如,通过重组DNA技术由适合宿主细胞产生的重组淀粉酶，所述宿主细胞选自培养的细菌、酵母、真菌、植物、昆虫或哺乳动物宿主细胞的任何一种，或者包括与天然存在的序列同源或基本相同的氨基酸序列的重组淀粉酶，由与天然存在的淀粉酶编码核酸同源或基本相同的核酸编码的淀粉酶，等等)、化学修饰的淀粉酶或其混合物。在本发明组合物的另一实施方案中，稳定的消化酶包括蛋白酶。术语“蛋白酶”一般指断裂蛋白的氨基酸之间的肽键的酶(例如，蛋白酶、肽酶或蛋白水解酶)。蛋白酶一般通过其催化类型来鉴定，例如天冬氨酸肽酶、半胱氨酸(硫醇)肽酶、金属肽酶、丝氨酸肽酶、苏氨酸肽酶、碱性或半碱性蛋白酶、中性和催化机制未知的肽酶。适用于本发明组合物或口服剂型的蛋白酶的非限制性实例包括丝氨酸蛋白酶、苏氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶(例如，疟原虫天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin))、金属蛋白酶、谷氨酸蛋白酶等等，此外，适用于本发明组合物或口服剂型的蛋白酶包括但不限于动物蛋白酶、细菌蛋白酶、真菌蛋白酶(例如，蜂蜜曲霉蛋白酶)、植物蛋白酶、重组蛋白酶(例如，通过重组DNA技术由适合宿主细胞产生的重组蛋白酶，所述宿主细胞选自培养的细菌、酵母、真菌、植物、昆虫或哺乳动物宿主细胞的任何一种，或者包括与天然存在的序列同源或基本相同的氨基酸序列的重组蛋白酶，由与天然存在的蛋白酶编码核酸同源或基本相同的核酸编码的蛋白酶，等等)、化学修饰的蛋白酶或其混合物。本发明组合物或口服剂型可以包括一种或多种脂肪酶(即，一种脂肪酶，或两种或更多种脂肪酶)、一种或多种淀粉酶(即，一种淀粉酶，或两种或更多种淀粉酶)、一种或多种蛋白酶(即，一种蛋白酶，或两种或更多种蛋白酶)、一种或多种脂肪酶与一种或多种淀粉酶的混合物、一种或多种脂肪酶与一种或多种蛋白酶的混合物、一种或多种淀粉酶与一种或多种蛋白酶的混合物、或一种或多种脂肪酶与一种或多种淀粉酶和一种或多种蛋白酶的混合物。在一个实施方案中，消化酶是猪的胰腺提取物，包括各种脂肪酶(例如，脂肪酶、共脂肪酶、磷脂酶A2、胆固醇酯酶)、蛋白酶(例如，胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶A和B、弹性蛋白酶、激肽原酶、胰蛋白酶抑制剂)、淀粉酶和任选核酸酶(核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶)。在另一个实施方案中，消化酶与人的胰液基本类似。而在另一实施方案中，消化酶是胰脂肪酶USP。而在另一实施方案中，消化酶是具有69-120UUSP/mg的脂肪酶活性、大于或等于216U USP/mg的淀粉酶活性、大于或等于264U USP/mg的蛋白酶活性以及大于或等于264U USP/mg的总蛋白酶活性的胰脂肪酶USP。在一个实施方案中，本发明组合物具有下表I所述的总脂肪酶、蛋白酶和淀粉酶活性(其中“总”活性指肠溶包衣衣的含酶珠和未包衣的含酶珠的组合活性)表I包含肠溶包衣和未包衣的含胰酶的珠的本发明的组合物用于治疗或预防胰腺炎疼痛和任选与消化酶缺乏相关的疾患。