专利名称：包含作为稳定剂的生物可降解的表面活性的嵌段共聚物的用于微囊化的乳液的制作方法包含作为稳定剂的生物可降解的表面活性的嵌段共聚物的用于微囊化的乳液相关申请的交叉引用本申请要求2010年3月26日提交的先前美国临时申请N0.61/317，738的优先权权益，该临时申请的全部内容通过引用并入本文。背景乳液或双重乳液工艺通常用于形成包含聚合物基质和被封装在聚合物基质内的生物活性剂的微粒。这样的微粒可用 于将生物活性剂释放入周围介质中且通常用于药物递送、化妆品和农业应用。在典型的乳液工艺中，形成包含封装聚合物和生物活性剂的乳液，封装聚合物和生物活性剂通常存在于两个不同相中。时常地，使用两种或更多种不混溶的液体形成连续相中的分散相。为了稳定用于微囊化的乳液，常常使用表面活性剂(surfactant)或表面活性剂(surface-active agent)。常见的表面活性剂包括聚(乙烯醇)、TWEEN和其他表面活性齐U。诸如这些的表面活性剂可能难以完全地从最终的微粒组合物中除去。残余的不可生物降解的表面活性剂对于用于某些应用例如药物递送来说可能是不利的。概述本文公开了包含一个或多个疏水性嵌段和一个或多个亲水性嵌段的表面活性的生物可降解的嵌段共聚物。表面活性的聚合物用作微囊化工艺中使用的乳液中的稳定剂。还公开了由该乳液制备的微粒。本发明的优点将部分地在以下描述中阐明，且从该描述将部分地是明显的，或可以通过下面描述的各方面的实践来获悉。下面描述的优点将通过所附的权利要求中特别地指出的要素和组合来实现和获得。应理解，前述一般描述和以下详细描述两者仅是示例性的和说明性的，而不是限制性的。附图简述图1是戈舍瑞林从实施例1的微粒中释放的图。详细描述在公开和描述本化合物、组合物、复合材料、制品、装置和/或方法之前，应理解，下面描述的各方面不限于具体的化合物、组合物、复合材料、制品、装置、方法或用途，因为这些当然是可以改变的。还应理解，本文使用的术语仅是为了描述特定方面的目的且不意图是限制性的。在本说明书和在接着的权利要求中，将参考应被定义为具有以下意义的许多术语:在整个本说明书中，除非上下文另外要求，否则词“包括(comprise)”或变化形式例如“包括(comprises)”或“包括(comprising)”应被理解为意思是包含所述整数或步骤或整数或步骤组但不排除任何其他整数或步骤或整数或步骤组。必须指出，如在说明书和所附的权利要求中使用的，除非上下文另外清楚地规定，否则单数形式“一(a)”、“一(an)”和“该(the)”包括复数指示物。因此，例如，提及“一种生物活性剂”包括两种或更多种这样的剂的混合物和类似物。“任选的”或“任选地”意指随后所描述的事件或情况可能出现或可能不出现，且该描述包括其中事件或情况出现的情形和其中事件或情况不出现的情形。在本文中范围可以被表达为从“约”一个特定的值和/或至“约”另一个特定的值。当表达这样的范围时，另一个方面包括从一个特定的值和/或至其他特定的值。同样地，当值被表达为近似值时，通过使用先行词“约”，应理解，特定的值形成另一个方面。还将理解，范围中的每一个的端点是关于另一个端点且独立于另一个端点有意义的。术语“微粒”在本文用于通常指代具有约IOnm至2000微米(2毫米)的尺寸的各种结构且通常包括小于约2000微米(2毫米)的微胶囊、微球、纳米颗粒、纳米胶囊、纳米球以及颗粒。在一个方面，生物活性剂被封装在微粒中。本文中“生物可降解的”通常被称为将侵蚀为可溶物质或将在生理条件下降解为本身对受试者是无毒的(生物相容的)且能够被受试者代谢、排除或排泄的更小的单元或化学物质的材料。“生物活性剂”是指具有生物活性的剂。生物剂可以用于治疗、诊断、治愈、减轻、防止(即，预防地)、改善、调节疾病、病症、感染等或对疾病、病症、感染等具有其他有利效果。“可释放的生物活性剂”是可以从所公开的微粒中释放的生物活性剂。生物活性剂还包括影响受试者的结构或功能的那些物质，或在其已经被放在预定的生理环境之后变得生物活性的或更有生物活性的前药。公开了可以用于所公开的方法和组合物、可以结合所公开的方法和组合物一起使用、可以用于制备所公开的方法和组合物或是所公开的方法和组合物的产物的化合物、组合物和组分。本文公开了这些和其他材料，且应理解，当公开这些材料的组合、子集、相互作用、组等时，尽管这些化合物的各不同单个和共同的组合和排列的具体提及可能不被明确地公开，但每一个在本文被特别地涵盖和描述。例如，如果公开和讨论许多不同的聚合物和齐U，除非特别地相反地表明，否则聚合物和剂的每一个和全部的组合和排列被特别地涵盖。因此，如果公开了一类分子A、B和C以及一类分子D、E和F，且公开了组合分子A-D的实例，则即使每一个不被单独地列举，每一个也被单独地和共同地涵盖。因此，在此例中，组合A-E、A-F、B-D、B-E、B_F、C_D、C-E和C-F中的每一个被特别地涵盖且应被认为从A、B和C ;D、E和F ;和示例性组合A-D的公开内容公开。同样地，这些的任何子集或组合还被特别地涵盖和公开。因此，例如，A-E、B-F和C-E的子组被特别地涵盖且应被认为从A、B和C ;D、E和F ;和示例性组合A-D的公开内容公开。该概念适用于本公开内容的所有方面，包括但不限于，制备和使用所公开的组合物的方法中的各步骤。因此，如果存在可以被进行的各种另外的步骤，应理解，这些另外的步骤中的每一个可以用所公开的方法的任何具体的实施方式或实施方式的组合来进行，且每一个这样的组合被特别地涵盖且应被认为是公开的。本发明提供了乳液、工艺和由该乳液和工艺制备的微粒，该微粒包括包含一个或多个亲水性嵌段和一个或多个疏水性嵌段的生物可降解的表面活性的嵌段共聚物。表面活性的嵌段共聚物可以帮助稳定乳液，且相对于主要利用不可生物降解的表面活性剂例如聚(乙烯醇)、TWEEN等的传统乳液工 艺，可以导致可比较的和甚至改进的封装效率。在乳液中使用疏水性嵌段共聚物还可以避免特别是对于药物应用来说通常与使用不可生物降解的表面活性剂相关联的缺点。此外，表面活性的嵌段共聚物的嵌段可以被选择为提供对在微粒内部内的生物活性剂有利的环境；例如亲水性多糖或聚(乙二醇)嵌段可以优先地累积入双重乳液工艺的包含生物活性剂的水相中且由此在生物活性剂周围浓缩，这在一些情形中，可以在最终的微粒产物中提供有利效果(例如亲水性、生物活性剂-聚合物相互作用、生物活性剂稳定性等)。本发明的乳液通常包含第一液体的外部连续相和第二液体的内部分散相，第二液体与第一液体至少部分不混溶；且其中乳液包含:(a)包含一个或多个亲水性嵌段和一个或多个疏水性嵌段的生物可降解的表面活性的嵌段共聚物；(b)生物可降解的封装聚合物；和(C)存在于内部分散相中的生物活性剂。在一些实例中，本发明的乳液可以基本上不含不可生物降解的聚合物或表面活性剂例如聚(乙烯醇)、TWEEN等，例如可以包含0.1%或更少，包括完全地不含不可生物降解的聚合物或表面活性剂的乳液。在其他方面，不可生物降解的聚合物或表面活性剂可以例如以最多1%，例如大于0.1%至1%的量存在。在一个方面，表面活性的嵌段共聚物是至少部分地水溶性的并与水溶液形式的其他乳液组分混合。在一些实例中，乳液是水包油0/W乳液、水包油包固体乳液或水包油包水(ff/0/ff)双重乳液。在水包油乳液中，表面活性的嵌段共聚物将主要存在于外部连续相中，外部连续相是水相。水包油包固体乳液对于封装不溶于或稍微不溶于油相中使用的有机溶剂的固体生物活性剂来说可以是有用的。固体生物活性剂可以分散在有机相中，且生物可降解的封装聚合物可以存在于在固体生物活性剂(有机相)周围的油相中。表面活性的嵌段共聚物将优选地存在于这样的乳液的外部连续相，即外部水相中。在水包油包水(W/0/W)双重乳液中，生物活性剂将通常存在于内部水相中并被油相围绕，油相包含有机溶剂和溶解在有机溶剂中的生物可降解的封装聚合物。在此实例中，内部分散相包含分散在外部连续水相中的内部W/0相。在此双重乳液中，表面活性的嵌段共聚物可以存在于水相，即，内 部分散体的水相(还称为初乳液)或外部连续水相中。在一个优选的方面，表面活性的嵌段共聚物存在于内部分散体的水相(初乳液)中，由此起到内部W/0乳液的乳液稳定剂的作用。在一些实例中，表面活性的嵌段共聚物可以存在于多于一个相中，这是由于其疏水性/亲水性特征。通常，嵌段共聚物的亲水区将朝向水相定向或存在于水相内，而嵌段共聚物的疏水区将朝向有机相定向或存在于有机相内。嵌段共聚物的此疏水性/亲水性特征产生表面活性剂样性质且可以由此使得本发明的乳液被稳定。表面活性的嵌段共聚物在乳液中的量将改变。表面活性的嵌段共聚物在乳液中的量将取决于嵌段共聚物在用于制备乳液的起始溶液或分散体中的量。例如，在上面讨论的水包油、水包油包固体或水包油包水乳液中，生物可降解的表面活性的嵌段共聚物与水溶液形式的一种或多种不混溶相混合。这样的水溶液还可以包含生物活性剂，例如当制备双重乳液的油包水初乳液时。通常，取决于表面活性的嵌段共聚物的溶解度，表面活性的嵌段共聚物在水溶液中的量可以在0.001mg/L至10g/L，优选地0.001mg/L至200mg/L且更优选地0.001mg/L至100mg/L的范围内。优选地，表面活性的嵌段共聚物在水中具有至少0.lmg/L的溶解度。在另外的实例中，表面活性的嵌段共聚物在水溶液中的量在0.lmg/L至100mg/L、lmg/L至lOOmg/L 或 lOmg/L 至 lOOmg/L 的范围内。在混合不混溶相和形成乳液之后，存在于乳液的特定相中的表面活性的嵌段共聚物的量可以从上面讨论的量改变。然而，通常预期在水包油乳液、水包油包固体乳液或水包油包水乳液中，表面活性的嵌段共聚物可以在0.001mg/L水相至10g/L水相的范围的量存在，包括上面列出的具体浓度中的任何。在水包油包水乳液中，表面活性的嵌段共聚物可以所讨论的量中的任何存在于内部分散相的内部水相或外部连续水相中。优选的是，将被生物可降解的封装聚合物封装的生物活性剂中的大部分(如果不是全部)存在于内部相中。在双重乳液的实例中，生物活性剂将存在于内部分散相(初乳液)的内部水相中。如上面所讨论的，“内部分散相”本身可以包括多于一个相，例如在上面所讨论的包括包含内部水相的内部相和围绕内部水相的有机相的双重乳液中。合起来，此油包水初乳液构成内部分散相，内部分散相是初乳液。在可以是水包油或油包水乳液的单一乳液中，生物活性剂可以内部分散油相或内部分散水相重量的1%至75%的量存在，包括但不限于，按重量计约5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、60%或70%的生物活性剂的量。在双重乳液中，生物活性剂将通常以内部初乳液的内部有机相或水相重量的1%至70%的量存在于内部初乳液的内部有机相或水相中,包括但不限于，按重量计约5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、60%或70%的生物活性剂的量。在其中生物活性剂是不溶性的或部分可溶的乳液(即，包含液体包固体组分的乳液)中，生物活性剂可以上面所讨论的通常在相对于生物活性剂以及生物活性剂被分散在其中的相的总重量的按重量计1%至70%的生物活性剂的范围的量中的任何存在。生物活性剂的“理论装载量”由相对于用于形成微粒的固体的总组合重量(这常常是生物活性剂和生物可降解的聚合物的组合重量)的生物活性剂的重量计算。液体或溶剂(或内部水相)的重量不包括在理论装载量计算中。作为一个实例，使用5克生物活性剂和15克生物可降解的聚合物的比例的工艺将具有25%的理论装载量，不管多少溶剂用于制备分散相溶液或分散体。“实际装载量”除`以“理论装载量”在本文被称为“封装效率”(以％表达)。实际装载量可以通过被封装在给定量的微粒产物中的生物活性剂的总量的HPLC测定来确定，HPLC测定是通过从微粒产物中提取生物活性剂和使用HPLC来定量该量(实际装载量以重量％生物活性剂表达)。生物可降解的封装聚合物优选地是至少部分地可溶于有机溶剂和稍微可溶至不溶于水的聚合物。通常，生物可降解的封装聚合物以在乳液的有机相中按重量计0.01%至90%，优选地按重量计0.1%至80%的浓度溶解于有机溶剂中，包括但不限于，按重量计约5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、60%、70% 或 80%。单一 0/W或W/0类型乳液通过混合在外部连续相溶剂(水或有机)中的生物可降解的封装聚合物的溶液与包含生物活性剂的内部相溶剂并然后乳化该混合物来制备。如上面所讨论的，表面活性的嵌段共聚物可以存在于内部相或外部相中。双重0/W/0或W/0/W乳液通过用外部连续相溶剂乳化单一初乳液来制备，与初乳液的制备相似。乳化程序可以通过常规方法，例如，通过使用已知的乳化设备例如螺旋桨搅拌器、涡轮桨式混合器、高压乳化器、超声分散混合器、静态混合器、填充床塔(例如，FormEZE塔)和类似物在搅拌下混合两种或更多种不混溶相来进行。乳化还可以通过其他方法例如膜乳化方法、喷雾方法以及其他方法来进行。通过膜乳化方法的乳化可以通过以下来进行:在两个不混溶相之间提供多孔膜(例如，表面被任选地化学改性的多孔陶瓷、多孔玻璃等)和在压力下将相中的一种通过多孔膜的细孔挤入到另一相中，且如果期望的话，搅拌一个或多个相。这样的方法在Journalof Microencapsulation,卷 11 (2)，第 171-178 页，1994 中更详细地讨论。通过喷雾方法的乳化可以通过使用常规喷雾设备将一个相喷雾到另一个相来进行。喷雾设备包括，例如空气喷嘴、压力喷嘴、超声喷嘴、旋转雾化器等。本发明的乳液因此将通常包含内部分散相和外部连续相，其中外部连续相的比例是I至10，000体积份，优选地2至1，000体积份对每I体积份的内部分散相。任何所公开的乳液的水相可以包含任何合适的水溶剂。水溶剂的一个非限制性实例是水。在一个方面,水可以与另一种可混溶溶剂混合,例如，乙醇、甲醇、DMS0、DMF、异丙醇以及许多其他水混溶性极性溶剂。在各个方面，第一相可以包含其他化合物，例如缓冲剂、盐、糖和/或粘度调节剂或其组合。乳液的有机相通常包含比水的沸点低的有机溶剂，包括卤代脂族烃溶剂(例如，二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、氯乙烷、二氯乙烷、三氯乙烷等)、烷基酯溶剂(例如，乙酸甲酯、乙酸乙酯等)、芳族烃溶剂(例如，苯)、脂族烃溶剂(例如，正己烷、正戊烷、环己烷等)、酮溶剂(例如，甲基乙基酮等)和醚溶剂(例如，乙醚、二异丙醚、甲基异丁基醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃等)。在一些方面，有机溶剂是可以溶解生物可降解的封装聚合物的聚合物。在除去有机溶剂的条件下，有机溶剂优选地具有比水的沸点低15_60°C的沸点。特别优选的有机溶剂是二氯甲烷、氯仿和乙酸乙酯。一旦形成乳液，微粒就可以由该乳液形成。微粒通常通过除去生物可降解的封装聚合物的溶剂(例如，有 机溶剂)来形成。生物可降解的封装聚合物的溶剂可以通过任何合适的方法来除去。在一个方面，溶剂可以通过用萃取液体例如水萃取溶剂来除去。在其他方面，溶剂可以通过干燥例如通过喷雾干燥、在减压下干燥、溶剂蒸发、冻干或其组合来除去。用于制备微粒的乳液方法还在Jeffery等人，“The preparationand characterisat ion of poly(lactide-co-glycolide)microparticles.1: Oi 1-1n-water emulsion solvent e vaporat ion，，Int.J.Pharm.77 (2-3):169-175(1991) ;Jeffery 等人,“The Preparation and Characterization ofPoly (lactide-co-glycolide)Microparticles.11.The Entrapment of a Model Proteinusing a(ffater-1n-0iI)-1n-ffater Emulsion Solvent Evaporation Technique，，Pharm.Res.10(3):362-368(1993)中讨论。溶剂蒸发方法在 Wichert, B.和 Rohdewald, P.(1993)J.Microencapsul.10:195 中讨论。表面活性生物可降解的聚合物可以包含各种疏水性嵌段和亲水性嵌段，且通常可以是AB共聚物、ABA三嵌段共聚物、BAB三嵌段共聚物、(AB) η多嵌段共聚物、接枝共聚物、星形嵌段共聚物或树状聚合物。单个疏水性嵌段和亲水性嵌段的分子量以及作为一个整体的聚合物的分子量可以改变。表面活性的嵌段共聚物的一个或多个亲水性嵌段的分子量可以是250至20，000道尔顿(Da)、500至8，000道尔顿(Da)或I, 000至6，000道尔顿(Da)。表面活性的嵌段共聚物的一个或多个疏水性嵌段的分子量可以是250至20，000道尔顿(Da)、500至8，000道尔顿(Da)或1，OOO至6，000道尔顿(Da)。表面活性的嵌段共聚物可以具有500至75，000道尔顿(Da) ,500至75，OOODa,或500至25，OOODa例如I, 000至15，000道尔顿(Da)或2，000至10，000道尔顿(Da)的分子量。线型嵌段共聚物(AB、ABA等)可以具有这些分子量中的任何。这样的线型聚合物的分子量可以通过凝胶-渗透色谱法(GPC)来确定。对于支化聚合物例如树状聚合物或接枝共聚物，分子量可以更高，例如500至100，0000&、500至25，000例如1，000至15，000道尔顿(Da)或2，000至10，000道尔顿(Da)。对于支化聚合物例如树状聚合物、接枝共聚物等，分子量优选地使用确定绝对分子量的方法例如光散射来测量。在一个方面，生物可降解的表面活性的嵌段共聚物是非离子的，S卩，聚合物不包含带电的残基。表面活性的嵌段共聚物的实例包括包含选自聚(乙二醇)(PEG)和聚(乙烯基吡咯烷酮)(PVP)以及多糖例如糊精、淀粉、葡聚糖、透明质酸、包括改性形式的纤维素的纤维素例如甲基纤维素的一个或多个亲水性嵌段；和选自聚(丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(己内酯)、聚(戊内酯)、聚(羟基丁酸酯)和其共聚物的一个或多个疏水性嵌段的聚合物。可以由乳液形成的本发明的微粒将通常包含作为聚合物基质的生物可降解的封装聚合物和被封装在聚合物基质中的生物活性剂。微粒还可以具有被封装在基质中的残余的表面活性的嵌段共聚物。通常，微粒可以具有各种平均粒度，例如5微米至150微米、或10微米至80微米、或30微米至80微米。封装聚合物通常被制备为聚合物在有机溶剂中的溶液或分散体且然后与生物活性剂的水溶液或分散体混合以·形成乳液，如上所讨论的。与本发明一起使用的合适的生物可降解的聚合物包括但不限于，聚(丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚(己内酯)、聚(原酸酯)、聚(磷腈)、聚(羟基丁酸酯)、包含聚(羟基丁酸酯)的共聚物、聚(丙交酯-共-己内酯)、聚碳酸酯、聚酰胺酯、聚酸酐、聚(二氧环己酮)、聚(亚烷基烷基化物)、聚乙二醇和聚原酸酯的共聚物、生物可降解的聚氨酯、聚(氨基酸)、聚酰胺、聚酰胺酯、聚醚酯、聚缩醛、聚氰基丙烯酸酯、聚(氧化乙烯)/聚(氧化丙烯)共聚物、聚缩醛类、聚缩酮类、聚磷酸酯类、聚羟基戊酸酯类或包含聚羟基戊酸酯的共聚物、聚亚烷基草酸酯类、聚亚烷基琥珀酸酯类、聚(马来酸)和其共聚物、三元共聚物、组合。生物可降解的聚合物可以包含乳酸、羟基乙酸、丙交酯、乙交酯、己内酯、羟基丁酸酯、羟基戊酸酯、二氧环己酮、聚乙二醇(PEG)、聚环氧乙烷氧化乙烯或其组合的一个或多个残基。更优选地，疏水性多糖衍生物与包含丙交酯、乙交酯、己内酯或其组合的一个或多个残基的一种或多种聚合物共混。在一些方面，生物可降解的聚合物包含一个或多个丙交酯残基。聚合物可以包含任何丙交酯残基，包括丙交酯的所有外消旋形式和立体专一形式，包括但不限于，L-丙交酯、D-丙交酯和D, L-丙交酯或其混合物。包含丙交酯的有用聚合物包括但不限于，聚(L-丙交酯)、聚(D-丙交酯)和聚(DL-丙交酯)；和聚(丙交酯-共-乙交酯)，包括聚(L-丙交酯-共-乙交酯)、聚(D-丙交酯-共-乙交酯)和聚(DL-丙交酯-共-乙交酯)；或其共聚物、三元共聚物、组合或共混物。丙交酯/乙交酯聚合物可以便利地通过熔体聚合经由丙交酯和乙交酯单体的开环来制备。另外，外消旋的DL-丙交酯、L-丙交酯和D-丙交酯聚合物是商业上可得到的。相比于DL-聚合物，L-聚合物的结晶度更大且更慢再吸收。除了包括乙交酯和DL-丙交酯或L-丙交酯的共聚物之外，L-丙交酯和DL-丙交酯的共聚物是商业上可得到的。丙交酯或乙交酯的均聚物也是商业上可得到的。当使用聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚(丙交酯)或聚(乙交酯)时，聚合物中的丙交酯和乙交酯的量可以改变。例如，生物可降解的聚合物可以包含O至100摩尔％、40至100摩尔％、50至100摩尔％、60至100摩尔％、70至100摩尔％或80至100摩尔％丙交酯和O至100摩尔％、0至60摩尔％、10至40摩尔％、20至40摩尔％或30至40摩尔％乙交酯，其中丙交酯和乙交酯的量是100摩尔％。在另外的方面，生物可降解的聚合物可以是聚(丙交酯)、95:5聚(丙交酯-共-乙交酯)、85:15聚(丙交酯-共-乙交酯)、75:25聚(丙交酯-共-乙交酯)、65:35聚(丙交酯-共-乙交酯)或50:50聚(丙交酯-共-乙交酯)，其中比例是摩尔比。在另外的方面，生物可降解的聚合物可以包括聚(己内酯)或聚(丙交酯-共-己内酯)。例如，聚合物可以是聚(丙交酯-己内酯)，其在各个方面中可以是95:5聚(丙交酯-共-己内酯)、85:15聚(丙交酯-共-己内酯)、75:25聚(丙交酯-共-己内酯)、65:35聚(丙交酯-共-己内酯)或50:50聚(丙交酯-共-己内酯)，其中比例是摩尔比。在一些方面，表面活性的嵌段共聚物和封装聚合物两者包括相同的或相似的生物可降解的残基。然而，应理解，表面活性的嵌段共聚物和封装聚合物是单独的聚合物，即，它们不是结合在一起的。各种生物活性剂可以与所公开的工艺一起使用，且可以存在于乳液中并被封装在本发明的微粒内。生物活性剂可以包括化妆品和农业产品以及生物活性剂。在一个方面，生物活性剂包括水溶性的V。示例性的合适的水溶性生物活性剂或药物包括但不限于，肽、蛋白质、适配体、核酸、RNA、DNA和RNAi复合物例如RNA-转染复合物，包括siRNA转染复合物。 生物活性剂将通常存在于乳液的内部分散相中且可以任何合适的量存在。在一些实例中，生物活性剂以分散相的按重量计或用于制备分散相的初始制剂例如将被分散在连续相中或用于制备双重乳液的初乳液的生物活性剂的水溶液或水分散体的按重量计1%至75% (例如，1%至50%、1%至30%、1%至20%或1%至10%)的量存在于内部分散相。可以使用能够从微粒释放到受试者的生物活性剂的各种形式。液体或固体生物活性剂可以并入到本文描述的微粒中。生物活性剂可以是水溶性的或水不溶性的。在一些方面，生物活性剂是至少非常轻微水溶性的，且优选地是适度水溶性的。生物活性剂可以包括活性成分的盐。因而，生物活性剂可以是酸性的、碱性的或两性的盐。它们可以是能够氢键合的非离子分子、极性分子或分子络合物。生物活性剂可以例如不带电荷的分子、分子络合物、盐、醚、酯、酰胺、聚合物药物共轭物的形式或提供有效的生物活性或生理活性的其他形式包括在装置中。实施例提出以下实施例以便为本领域普通技术人员提供如何制备和评估本文要求的化合物、组合物、制品、装置和/或方法的完全的公开内容和描述，且意图纯粹示例本发明且不意图限制本发明人认为是它们的发明的内容的范围。已经努力确保关于数字(例如，量、温度等)的准确度，但应考虑到一些误差和偏差。除非另外表明，否则份是重量份，温度是以。C计或处于环境温度，且压力处于大气压或接近大气压。实施例1包含醋酸戈舍瑞林的微粒制剂使用如下面描述的双重乳液、溶剂-萃取微囊化工艺来制备。制剂使用分散在分散相(DP)溶液中，由此形成双重乳液工艺的初乳液的溶解的戈舍瑞林水溶液来制备。对于所有的微粒制剂，生物可降解的聚合物 50:50 聚(DL-丙交酯-共-乙交酯)(Lakeshore Biomaterials 商标，SurModicsPharmaceuticals, Birmingham, AL)用于制备 DP 溶液。首先，使用二氯甲烷作为DP的聚合物溶液的有机溶剂来制备四个批次(表I)。对于批次00277-058，PEG-聚(DL-丙交酯)(PEG-PL)的嵌段共聚物用作初乳液的水相中的聚合物表面活性剂。在此实施例中，聚合物表面活性剂溶液通过将20mg的100DLmPEG5K2CE聚合物(SurModics Pharmaceuticals, Birmingham, AL)溶解在IL去离子水中来制备。药物溶液通过将200mg的醋酸戈舍瑞林(Genzyme Pharmaceuticals)溶解在ImL的聚合物表面活性剂溶液中来制备。分散相(DP)溶液通过将药物溶液分散在12g的由二氯甲烷中的15重量％50:50聚(DL-丙交酯-共-乙交酯)(0.45dL/g)组成的聚合物溶液中来制备。IKA ultra-turrax探针混合器用于将药物溶液分散在聚合物溶液中，由此形成初乳液形式的DP溶液。将所得到的DP溶液乳化入200g的由2重量％含水聚乙烯醇(PVA)组成且包含1.6重量％ 二氯甲烷的连续相(CP)溶液中。DP和CP的乳化以不连续方式通过将DP引入到CP溶液中来进行，CP溶液使用Silverson L4R-T探针混合器和高剪切筛(速度设定900rpm)来搅拌。微粒通过混合乳液30秒,然后直接倾倒入2600g被搅拌的去离子水中来制备。将所得到的悬浮液搅拌30min，在该时间之后，通过筛分经过125和20微米测试筛来分离微粒产物。收集在20微米筛上的微粒用2L去电离水洗涤。在洗涤之后，允许微粒在层流罩中在20微米筛上干燥。对于批次00277-067，PEG-PL的嵌段共聚物也用作初乳液的水相中的聚合物表面活性剂；然而在此实施 例中，聚合物表面活性剂以比用于批次00277-058高100倍的浓度被使用。在此实施例中，聚合物表面活性剂溶液通过将20mg的100DLmPEG5K2CE聚合物(Lakeshore Biomaterials)溶解在IOmL去离子水来制备。药物溶液通过将200mg的醋酸戈舍瑞林(Genzyme Pharmaceuticals)溶解在ImL聚合物表面活性剂溶液中来制备。微粒如对于批次00277-058所描述的来制备。对于批次00277-064，1%PVA代替稀释的PEG-PL嵌段共聚物，用作聚合物表面活性剂溶液。所有的其他条件与批次00277-058的条件相同。对于批次00277-061，使用去离子水代替表面活性剂溶液。所有的其他条件与批次00277-058的条件相同。接着，使用乙酸乙酯作为有机溶剂以制备DP的聚合物溶液和用于饱和CP溶液来制备两个批次(表2)。对于批次00277-113，使用与用于批次00277-058 (20mg/L)的浓度相同的浓度的PEG-PL聚合物表面活性剂来制备。如所述的，乙酸乙酯用于制备15重量％聚合物溶液，且然后将乙酸乙酯以约7.5重量％的饱和水平加入到CP溶液(代替二氯甲烷)中。所有的其他条件与用于制备批次00277-058的条件相同。作为对照，仅使用水来溶解醋酸戈舍瑞林和制备初乳液来制备批次00277-109 (不使用聚合物表面活性剂溶液)。再次，使用乙酸乙酯代替如在批次00277-113中描述的二氯甲烷。所有的其他处理条件与用于制备批次00277-058的条件相同。接着，使用二氯甲烷作为有机溶剂以制备DP的聚合物溶液和用于饱和CP溶液来制备四个批次(表3)。如表3所表明的，使用PEG-PL聚合物表面活性剂溶液(以20mg/L或20mg/10mL水平，如所表明的)或纯水来溶解药物和用于制备初乳液来制备各批次。然后，这两组样品中的每一个使用两个不同比例的水相:有机相制备初乳液来制备。在前两个样品(批次00277-117和00277-105)中，将IOOmg醋酸戈舍瑞林溶解在ImL水溶液(PEG-PL聚合物表面活性剂溶液或去离子水)中。相反，剩余的两个样品(批次00277-129和00277-132通过将IOOmg醋酸戈舍瑞林溶解在仅0.5mL的水溶液(PEG-PL聚合物表面活性剂溶液或去离子水)中来制备。用于制备这些制剂的所有其他处理条件与用于制备批次00277-058的条件相同。分析微球制剂的戈舍瑞林含量。将每一种制剂的20至30mg部分称入25mL容量瓶中，并加入5mL冰醋酸。使样品溶解。在全部样品已经溶解之后，使用PBS将烧瓶稀释至指定体积。使用0.45 μ m注射过滤器过滤混合物。经过滤的溶液被转移至HPLC小瓶并通过HPLC (以220nm的UV)分析样品。进行三份分析。对照通过称重药物和聚合物并进行如上相同的步骤来制备。确定戈舍瑞林制剂的体外释放曲线。将每一种制剂的20-30mg样品称入20mL玻璃小瓶中并加入IOmL的PBS。将小瓶放在其温度被维持在37°C的摇动培养箱中。在适当的时间点，从小瓶除去9mL缓冲液，并将9mL新鲜缓冲液加回至小瓶。小心不除去任何微球。将小瓶放回至培养箱，直到下一个时间点。使用HPLC方法(以220nm的UV)测定包含释放的戈舍瑞林的缓冲液的戈舍瑞林。进行三份分析。报告累积释放的戈舍瑞林。在表1-3示出结果。表1.使用不同的初乳液表面活性剂的醋酸戈舍瑞林的微囊化(聚合物溶液:以15重量％溶解在二氯甲烷中的50:50DL-PLG) 本发明公开了包含一个或多个疏水性嵌段和一个或多个亲水性嵌段的表面活性的生物可降解的嵌段共聚物。表面活性的聚合物用作微囊化工艺中使用的乳液中的稳定剂。还公开了由该乳液制备的微粒。