专利名称：一种蛋白质组合物的制作方法绝经期促性腺素(Human Menopausal Gonadotropins，简称HMG)含有卵泡刺激素 (Follicle-stimulating hormone,简禾尔 FSH)禾口黄体生成激素(leuteinizing hormone,简 称LH)两种活性成分，是由垂体产生的糖蛋白激素，它由α链和β链两个亚基组成。FSH的 α亚基与黄体生成激素(leuteinizing hormone，简称LH)和绒毛膜促性腺素(chorionic gonadotropin，简称CG)的α亚基完全相同，具有92个氨基酸，分子量约为14500D，第52 和78位置上的天冬酰胺是发生N-糖基化的氨基酸。FSH的β亚基由111个氨基酸组成， 分子量约为18000 D，其中第7和M位置上的天冬酰胺是发生N-糖基化的氨基酸。而LH 的β亚基由121个氨基酸组成，分子量约为14800 D ；CG的β亚基则有145个氨基酸，分 子量22000-39000 DH。HMG中FSH和LH的生物效价比例为10 1至1 10之间，通常为 2 1 至 1 1。监床上HMG主要用于治疗不育症以及体外的辅助生殖。HMG可以从绝经期妇女的 尿液中提取出来，也可通过DNA重组技术分别制备FSH和LH。HMG的制剂形式通常为冻干粉针，使用方式为肌肉注射。高纯度绝经期促性腺素 (PHMG)是HMG的后继产品，它是将HMG进行进一步的纯化，去除大量杂蛋白而获得的纯度 高、杂质少的产品，因此不会造成人体的过敏反应，并且由于这些优点它可以用于皮下注 射，提高患者的顺应性，方便患者的使用、减轻痛苦，PHMG的制剂形式可以为冻干粉针，也可 以是水针。在HMG和pHMG制剂的研制方面，获得一种稳定性良好、使用方便、安全性高的剂型 是患者、医生所需要的以及各制造厂商致力于开发的方向。但目前的现有技术并不稳定，对 于制剂的运输过程、储存过程的温度控制都要求较苛刻，稍有不慎就容易导致产品失去活 性或降解，特别是在高纯度绝经期促性腺素领域，这个问题尤其突出。US5650390公开了一 种含有HMG，蔗糖和甘氨酸的制剂配方。W020041U^6A1公开了含有HMG，蔗糖和表面活性 剂吐温(Tween)以及L-蛋氨酸的制剂配方。W02004087213公开了含有HMG，蔗糖和表面活 性剂普流尼克(Pluronic)以及L-蛋氨酸的制剂配方。虽然上述三种制剂配方还算比较稳 定，但由于添加了多种表面活性剂及赋形剂给制剂的安全性带来了很大的隐患。因此本领域迫切需要开发出一种具有良好稳定性、使用方便、安全有效的绝经期 促性腺素的制剂形式。
本发明旨在提供一种含有绝经期促性腺素包括高纯度的绝经期促性腺素的药物 组合物。在本发明的第一方面，提供了一种蛋白质组合物，所述的组合物包含绝经期促性 腺素(HMG)和/或其变体，和蔗糖。在另一优选例中，所述的组合物是液体形式或固体形式。在另一优选例中，所述的固体形式是冷冻干燥粉末。在另一优选例中，以FSH生物效价计，所述固体形式的组合物中含有0. 1-200FSH 国际单位/mg组合物。在另一优选例中，以FSH生物效价计，所述固体形式的组合物中含有0. 5-50FSH国 际单位/mg组合物。在另一优选例中，以FSH生物效价计，所述固体形式的组合物中含有1-20 FSH国 际单位/mg组合物。在另一优选例中，以FSH生物效价计，所述液体形式的组合物中含有1-2000FSH国 际单位/mL组合物。在另一优选例中，以FSH生物效价计，所述液体形式的组合物中含有30-1000FSH 国际单位/mL组合物。在另一优选例中，所述组合物所含有的绝经期促性腺素中，卵泡刺激素(FSH)与 黄体生成素(LH)的生物效价比例范围为10 1至1 10之间；较佳地，为3 1至1 2 之间；更佳地为2 1至1 1之间。在另一优选例中，所述组合物所含有的绝经期促性腺素是高纯度绝经期促性腺素 (pHMG)，其比活不低于5000FSH国际单位/mg蛋白；较优选为比活不低于6000FSH国际单位 /mg蛋白；更优选为比活不低于8000FSH国际单位/mg蛋白。在另一优选例中，所述组合物所含有的绝经期促性腺素来自人尿来源的绝经期促 性腺素和/或其变体。在另一优选例中，所述组合物还可以包含药学上可接受的载体；所述的药学上可 接受的载体，可以选自以下物质中的一种或一种以上pH调节剂、非离子表面活性剂、防腐剂、盐、二糖、甘露醇。在另一优选例中，所述的pH调节剂是磷酸盐。在本发明的第二方面，提供了一种用于制备上述的本发明提供的蛋白质组合物的 方法，所述的方法包括步骤(1)制备含绝经期促性腺素和蔗糖的水溶液；(2)将水溶液分装到瓶中；和(3)压塞、密封或进行冷冻干燥后再压塞、密封，得到上述的本发明提供的组合物。在另一优选例中，所述的步骤(1)中的水溶液的PH为6. 0-8. 5 ；优选6. 5-8. 0。在本发明的第三方面，提供了一种上述的本发明提供的蛋白质组合物在制备治疗 不育综合症的药物中的用途。据此，本发明提供了一种具有良好稳定性、使用方便、安全有效的绝经期促性腺素 的制剂形式。每支含75IU FSH和75IU LH的配方1 HMG250 μ g蔗糖30mgNaH2PO4 ‘ H2O 0. 69mgNa2HPO4 · 2H20 0. 8mg制备过程按上述配方1计算出实际生产规模所需的各个原辅料的量，先在容器中加入注射 用水，然后加入NaH2PO4 · H2O, Na2HPO4 · 2H20和蔗糖，搅拌10分钟至完全溶解；测定pH是否在7.0 士 0.2，若不在此范围则用IM NaOH溶液或IM HCl溶液调pH至 7. 0 士 0.2 ；将HMG加入上述溶液，搅拌10分钟至完全溶解；测定pH是否在7.0 士0.2，若不在此范围则用IM NaOH溶液或IM HCl溶液调pH至 7. 0 士 0.2 ；用0.22μπι Durapore膜进行无菌过滤，滤过液分装至抗生素瓶中，半加塞，装盘放 入冷冻干燥机中进行冷冻干燥，冷冻干燥程序如下a、搁板温度为+4°C维持20分钟；b、搁板温度降至-40 °C以下维持3小时；C、开启冷阱，冷阱温度降至_45°C以下；d、开启真空度，真空度降至IOOmTor以下；e、搁板温度升至-10°C维持10小时；d、搁板温度在2小时内从-10°C升至+35°C，然后在+35°C维持5小时；f、干燥结束后充氮气，压塞，出箱，轧盖。对照例1每支含75IU FSH和75IU LH的对照例配方1 HMG250g甘露醇IOmgNaH2PO4 · H2O 0. 69mgNa2HPO4 ‘ 2H20 0. 8mg制备方法同实施例1。上述2个配方在40 士 2°C，RH75 士 10%下的稳定性结果如下

本发明公开了一种含有绝经期促性腺素的组合物，所述的组合物中含有作为稳定剂的蔗糖。本发明提供的组合物具有良好的稳定性。