专利名称：一种治疗认知功能障碍的药物组合物及其制备方法和用途的制作方法认知功能障碍是轻度认知障碍(Mild Cognitive Impairment，MCI)、痴呆和健忘 症的共有核心症状，严重影响患者生活。MCI是介于正常衰老认知功能减退与极轻度阿尔 茨海默病(Alzheimer，s disease,AD)和血管性痴呆(vascular dementia,VD)的过度性、 痴呆前期的病理状态，是认知障碍的最早期阶段，首次报道见于1990年，以获得性认知功 能障碍，但不伴有显著的日常生活能力下降为特征。MCI患病率波动在3% 20%，也有认 为在20 % 30 %，平均每年有10 % 15 %的MCI发展为痴呆，其诊断主要依赖于临床评估 和神经影像学手段。目前MCI主要分为遗忘型(aMCI)、多认知域遗忘型(md-aMCI)、多认知 域非遗忘型(md-naMCI)和单一非记忆障碍型(single non-memory MCI，s-nmMCI)几种。 年龄是MCI发病的基础，高脂血症、动脉硬化、高血压、冠心病、糖尿病和心脑血管病是导致 MCI高发的基础疾病，现代认为，MCI的发病与中枢胆碱能缺陷密切相关，MCI患者左丘脑的 血流灌注显著低于健康老人，且神经纤维缠结密度显著高于非认知障碍对象。Celsis等研 究指出情景记忆障碍是记忆障碍最敏感和最早的症状，是早期诊断AD的敏感预测因子，也 是MCI最突出的神经心理学表现。可见记忆障碍是MCI和AD早期的核心症状，故改善记 忆障碍可以作为MCI研究的核心内容。目前的研究认为，遗忘型轻度认知障碍更容易发展 成为AD，其中年龄和简易精神状况检查量表(Mini-Mental State Examination, MMSE)是 早期关键性的标识，故被认为是AD的早期预警。AD已经成为所有年龄段人群的第7位致 死原因和65岁及以上人群的第5位致死原因。从国际现状看，AD是痴呆的最主要类型， 约占60% 80%，血管性痴呆(vascular dementiame, VD)具第2位，约占15 % 20 %， 亚洲多数家VD占痴呆性疾病的第一位，我国情况与国际情况相当，也有认为我国VD约占 60%, AD约占30%，其余为混合性痴呆。通常情况下，AD患者从正常脑功能到痴呆形成可 分为症状前阶段、临床前阶段、轻度痴呆、中度痴呆和重度痴呆5个阶段。由于目前对于AD 的治疗策略还只是改善症状，如能在AD的临床前阶段即能进行早期干预，则有助于减缓或 逆转痴呆的脑功能损害。在此背景下，MCI成为近年来研究AD的热点之一。就目前研究来 看，呈现出临床研究多，实验研究少，临床观察多，治疗研究少的特点。Peterson等于1999 年提出的MCI的诊断标准得到大多数研究者的认可，该诊断标准包括以下6个方面，S卩(1) 存在由患者自己、家属或知情人提供的记忆主诉；(2)记忆测验成绩低于年龄和文化程度 匹配的正常对照1.5个标准差；(3)总体认知分级量表轻度异常，即总体衰退量表(global deterioration scale，GDS) 2 3 级或临床痴呆评定量表(clinical dementia rating， ⑶R)0. 5分；(4) 一般认知功能正常(5)日常生活能力保持正常；(6)除外痴呆或任何可以 导致脑功能紊乱的躯体和精神疾患。国内以王永炎院士和田金洲教授为首的“首都医学发展基金轻度认知损害联合攻关项目组”于2008年提出了 MCI临床研究指导原则，极大的促 进了我国轻度认知障碍的临床诊疗水平和研究。但目前由于MCI动物模型的缺乏，实验研 究国内外均处于探索阶段。中医没有“轻度认知障碍”的提法，但根据临床表现，可归属于“健忘”、“呆病”、“善 忘”、“神病”、“文痴”等病范畴。早在上世纪80年代，王永炎院士就指出，“毒邪”和“络病” 可以作为痴呆深入研究的切入点，并于2005年明确提出了 AD “毒损脑络”病机新认识，认 为“毒损脑络”是AD发生发展的核心，贯穿病理演变的全过程，为Alzheimer病的研究和治 疗提供了全新的视觉。从痴呆和MCI发病来看，年龄因素是二者发病一个十分关键的因素， MCI介于正常老化和痴呆之间，“髓消脑减”是老年的一个基本生理变化过程，也是AD和MCI 的病机基础。随着年龄增长，脑血管硬化，脑络的运载功能受损，脑微血管通透性降低，气血 等营养物质输送功能减弱，导致脑神经细胞能量供应不足，不养则功能减退；脑神经细胞缺 血缺氧，产生大量的自由基和代谢物质，这些物质一则损伤血管内皮细胞，导致相关脑区微 血管灌流障碍，加重微循环瘀滞，造成神经元等功能单位的生理机能损伤，一则作用神经胶 质细胞，导致胶质细胞水肿变性，一则导致神经胶质细胞和神经元的严重损害，最终使脑神 经细胞凋亡和突触功能减退或缺失，胆碱能神经受损，Ach合成/释放障碍，各种因素互为 因果，形成恶性循环，最终导致MCI。由此可见，“髓消脑减”是MCI的病机基础，脑络瘀滞痹 阻是MCI的核心环节，氧化因子等是MCI发病和进展的重要条件。中药复方是根据中医药理论的作用机理，选用不同的组方，采用多种分析手段，从 多方位、多角度，全面而客观地阐述了中药复方制剂的促智作用。根据临床经验及实验研 究，选项出的有效中药复方有补肾益智方是老年性痴呆的主要生化指标、中药补肾益智方 具有补肾、益气、生髓、养脑作用，其含药血清能有效地保护由淀粉样蛋白引起的这些改变； 丹桅逍遥散使模型大鼠脑能量负荷、蛋白质、糖醛还原酶信使含量降低；使模型的脑蛋白 质、糖醛还原酶信使含量回升，减轻物质代谢障碍。中医药治疗老年性痴呆已经积累了丰富 的经验，具有整体调理、综合施治的优点，且毒副作用少，适宜长期服用，同时在保健预防及 调畅情志等方面有许多独到之处，形成了较为系统的理论。但目前还存在一些不足，主要表 现在许多临床研究中没有采用统一的诊断、分型、疗效评定标准，在组方、选药、剂量上因人 而异，无法规范。治疗老年性痴呆应以早期诊断预防为主，并早日开发出疗效确切的系列药 物，促使中医药治疗老年性痴呆的研究深入化和科学化，提高中医药治疗老年性痴呆的临 床疗效，以造福人类。随着人口的老龄化以及疾病谱的改变中医中药在防治老年性痴呆的 前景会越来越广阔。三七桅子配伍方是王永炎院士根据自己多年脑科临床经验总结提炼的治疗认知 障碍的经验组方，临床适用于神经退行性病变而导致的认知功能障碍诸症，可用于早期老 年痴呆、血管性痴呆和轻度认知障碍等病的治疗。方中三七活血补血充络、活血通络、养血 益智为君，桅子解毒益智为臣，两药合用，共奏通络益智的效用。三七为五加科植物三七 Panax notoginseng (Burk.) F. H. Chen的根，具有散瘀止血、消肿定痛的功效。《本草纲目拾 遗》中记载“人参补气第一，三七补血第一，味同而功亦等，故称人参三七，为中药中之最珍 贵者”；《玉揪药解》记载三七能“和营止血，通脉行瘀，行瘀血而剑新血”；《医学衷中西录》记载三七“善化瘀血......病愈后不至瘀血留于经络，证变虚劳”；1912年版《中国医药大辞典》记载“三七功用补血，去瘀损，止血紐，能通能补，功效最良，是方药中之最珍贵者。三七生吃，去瘀生新，消肿定痛，并有止血不留瘀血，行血不伤新的优点；熟服可补益健体”。 现代药理研究证三七具有延缓衰老、扩张血管，改善微循环，促进蛋白质、核糖核酸(RNA)、 脱氧核糖核酸(DNA)合成，双向调节中枢神经，提高脑力，增强学习和记忆能力等作用；PNS 及Rgl、Rbl和Rl等具有增强学习记忆、抗痴呆、改善脑部供血等作用。桅子为茜草科常绿 灌木植物桅子Gardenia jasminoides Ellis的成熟果实，具有泻火除烦、清热利湿、凉血解 毒、消肿止痛的功效，现代研究证实桅子具有降血脂、降压、防治动脉粥样硬化、抗痴呆、益 智等作用，GD是其主要的药效物质基础。目前尚无文献报道仅仅由三七和桅子两味原料药制备成制剂，尤其是将这三种药 合用用于治疗中枢神经系统退行性病变，未见相关研究。
本发明的目的在于提供一种药物组合物，该药物组合物主要由三七和桅子组成， 具有治疗和缓解认知功能障碍或低下的作用，尤其是治疗和缓解老年痴呆、血管性痴呆、轻 度认知障碍症或健忘症的作用。优选地，本发明药物组合物中，所述的主要原料药三七和桅子的重量配比为三七 1-15份，桅子1-15份；更为优选地，所述主要原料药的重量配比为三七1-12份，桅子1-12 份，更优选为三七8-12份，桅子8-12份，更优选为三七6-10份，桅子6_10份。本发明的目的还在于提供一种制备本发明药物组合物的活性成分的制备方法，制 备本发明药物组合物的活性成分时，先从原料药中制备获取三七总皂苷和桅子苷，按照特 定比例混合均勻，即得药物组合物活性成分，混合后的活性成分加入制药上可接受的辅料， 以制剂常规技术制备所需的药物单元剂型，如可以是颗粒、片剂、胶囊、滴丸、口服液、混悬 液、乳浊液、注射液等临床所需的剂型。或者，本发明主要原料药组合物的活性成分的提取制备方法可以是取处方量的 原料药，粉碎合并后，以水或与水相互溶的有机溶剂提取1-4次，过滤，合并各次提取滤液， 滤液减压浓缩后的活性成分提取物清膏，备用；提取物清膏加入制药上可接受的赋形剂，混 合均勻，以制剂常规技术制备所需的药物单元剂型。本发明中，所用的能够与水相互溶的有机溶剂，可以是选自与水相互溶的甲醇、乙 醇、丙酮中的任意一种，优选为与水相互溶的乙醇，更优选为浓度为30% -80%的乙醇。本发明中，所用的提取方法可以是煎煮提取、回流提取、浸泡提取、超声提取或渗 漉提取中的任意一种方式，或者采用不同提取方法的组合。本发明中，制药上可接受的赋形剂，是本领域技术人员所熟知的常用赋形剂，根据 制成不同制剂的需要，本领域技术人员可以从这些常规的赋形剂中做出选择，以制备成所 需的单元剂型，所选用的赋形剂包括但不局限于填充剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂寸。在本发明一实施例中，给出了不同比例的本发明药物组合物用于抗认知功能障碍 小鼠模型的实验研究，从而得出本发明原料药组合物较为优选的原料药的配比范围。在本发明其它实施例中，给出了本发明主要原料药较优配比的提取物成分用于抗 东莨菪碱致认知功能障碍模型小鼠、抗慢性脑缺血致认知功能障碍模型大鼠、“寒凝血瘀” 证模型大鼠和对小鼠软脑组织循环的药理实验，证明本发明药物组合物可用于认知功能障碍相关病变的治疗。本发明中，药物组合物的形式还可以是从三七和桅子中提取出有效部位群进行部 位群的组合配比以用于治疗认知功能障碍，尤其是老年痴呆、血管性痴呆、轻度认知障碍和 健忘症的治疗和缓解改善。本发明中，从主要原料药三七和桅子中提取的有效部位群分别 为三七总皂苷和桅子苷，其中各有效部位群间的重量配比为三七总皂苷1-15份，桅子苷 1-15份，优选为三七总皂苷2-8份，桅子苷1-6份，更优选为三七总皂苷3-6份，桅子苷1_3 份，最优选为三七总皂苷5份、桅子苷2份。制备本发明所述三七总皂苷和桅子苷的方法，对于本领域的技术人员来说，通过 现有文献中公开的技术，是容易实现的，通过现有技术的任何方法，只要能提取制备得到本 发明所述的三七总皂苷和桅子皂苷，都可以用于本发明。当然，本发明所用的三七总皂苷和 桅子苷，也可以是市售的成品。本发明中，药物组合物的形式还可以是从三七和桅子中提取出单一活性成分进行 单一活性成分组合配比以用于治疗认知功能障碍，尤其是老年痴呆、血管性痴呆、轻度认知 障碍和健忘症的治疗和缓解改善。本发明中，从主要原料药三七和桅子中提取的单一活性 成分分别为三七皂苷Rgl和桅子苷，其中单一活性成分间的重量配比为三七皂苷Rgll-IO 份，桅子苷1-10份，优选为三七皂苷Rgl2-5份、桅子苷2-5。在本发明实施例中，还给出了优选的三七皂苷Rgl、桅子苷对认知障碍模型的药理 研究。图1为PNS与⑶配伍对小鼠学习记忆功能的影响图。图2为SZ对小鼠避暗和跳台潜伏期和错误次数的影响图。图3为SZ对各组大鼠典型有用轨迹图，其中A为假手术组，B为模型对照组，C为 尼莫地平对照组，D为SZ高剂量组，E为SZ中剂量组，F为低剂量组，G为PNS组，I为⑶组。图4为SZ对慢性脑缺血学习记忆障碍模型脑及海马组织病例形态切片图，其中A 为假手术组，B为模型对照组，C为尼莫地平对照组，D为SZ高剂量组，E为SZ中剂量组，F 为低剂量组，G为PNS组，I为⑶组。图5为SZ对急性血瘀模型大鼠学业流变学影响图。图6为SZ对慢性脑缺血学习记忆障碍模型大鼠学业流变学影响图。图7为SZ对学习记忆障碍小鼠脑组织AchE活性影响图。图8为SZ对学习记忆障碍小鼠脑组织Ml受体和CHAT基因的相对表达量影响图。

实施例1本发明活性成分的制备三七总皂苷的制备取三七粉碎成粗粉，用20% -85%的乙醇浸泡三七粉末8-lOh 提取，滤过，滤液减压浓缩，滤过，过苯乙烯型非极性或弱极性共聚体大孔吸附树脂柱，用水 洗涤，水洗液弃去，以50 % -85 %的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩，脱色，精制，减压浓缩至浸
膏，干燥，即得。桅子苷的制备取桅子粉碎成粗粉，每次以10倍量水，提取池，提取3次，合并提 取液，减压浓缩至相对密度为1. 12(60°c )，加入60% -95%，使含醇量达50% -80%，静置 Mh，抽滤，以适量相同浓度的乙醇溶液洗涤沉淀，滤液回收乙醇，合并滤液，用活性炭纯化1 次后，再大孔树脂纯化1次，精制，减压浓缩至浸膏，干燥，即得。将制备所得的三七总皂苷与桅子苷混合均勻，加入只要上可接受的辅料、赋形剂 及其它辅助成分，按照本领域制剂的常规技术，根据需要制成片剂、胶囊剂、丸剂、混悬液或 乳剂。或者，将制备所得到的三七皂苷Rgl和桅子苷混合均勻，加入只要上可接受的辅 料、赋形剂及其它辅助成分，按照本领域制剂的常规技术，根据需要制成片剂、胶囊剂、丸 剂、混悬液或乳剂。以下实验实施例中，所用的实验动物未明确注明，均为KM小鼠，雌雄各半， 体重20士2g，由四川省医学科学院实验动物研究所提供，动物合格证号川实动管质 SCXK(川)2004-16。实验场地为国家中医药管理局成都中医药大学中药药理三级实验室， 编号TCM2032043。小鼠均在室温22-24°C，明暗周期1池/1池条件下饲养，自由饮水摄食。所用的实验药物，均包括实验用药三七总皂苷(PNS)，每g相当于原生药10g，由 北京中医药大学提供，批号090104 ；桅子苷(⑶)，每g相当于原生药25g，由北京中医药大 学提供，批号090202实施例2本发明药物颗粒抗东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍模型的试验1实验材料1. 1 药物哈伯因(石杉碱甲片)，河南太龙药业股份有限公司豫中制药厂生产，批号 080402 ；氢溴酸东莨菪碱液(SCOP)，上海禾丰制药有限公司生产，批号6A18007。1. 2试剂和仪器DT-200小鼠跳台测试仪(及测试箱)，成都泰盟科技有限公司BA-200自动避暗测试仪(及测试箱)(小鼠)，成都泰盟科技有限公司2实验方法2. 1模型制备造模小鼠于第14日给药后50min，各组小鼠在避暗训练、跳台训练前lOmin，ip给 予氢溴酸东莨菪碱注射液(SCOP) 2mg/kg体重(0. lml/10g体重)，造成小鼠记忆获得障碍模型。2. 2分组与给药KM小鼠，雌雄各半，按体重及性别随机分为正常对照组、模型对照组、哈伯因对照 组、三七原药材与桅子原药材重量配比分别为10 OUO 3,10 6,10 10,6 10、 3 10六个配伍组，各组原料药配比有效成分制备按实施例1给出的方法进行制备(给药剂量根据成人日用剂量原药材换算，以临床等效剂量即10倍量计)，小鼠每天所需给药量 以给药体积按0. aiii/lOg比例溶解到相应蒸馏水中，灌胃(ig)给药，正常对照组和模型组 给予等体积生理盐水，哈伯因组给药剂量为0. 5mg/kg体重。小鼠连续给药15日，于第14、 15日给药后开始进行学习记忆行为学实验，即跳台与避暗实验。三七和桅子配伍在二者原 生药总量恒定的前提下(即人临床三七和桅子日用量各9g，总量为18g)，分别按照相应的 配伍配比剂量组合，采用蒸馏水超声配制，于4°C冰箱中保存备用，给药前恢复至室温。2. 3小鼠学习记忆能力测定2. 3. 1 避暗法(1)避暗训练避暗试验组小鼠于实验第14日ig给药或蒸馏水50min后，除空白 对照组外，其余各组小鼠ip. SCOP造模，造模后IOmin后将动物背对洞口放入避暗箱明室， 适应3min，通36V交流电，即刻计时，记录5min内各动物的潜伏期和错误次数。(2)避暗测试避暗组小鼠于实验第15日(避暗训练M小时后)ig给药或 N. S60min后，同上法将小鼠放入避暗箱明室，同时通36V交流电、计时，记录5min内各动物 的潜伏期和错误次数，比较各组差异，结果见表1和图1。2. 3. 2 跳台法(1)跳台训练跳台试验组小鼠于实验第14日ig给药或N. S 50min后，采用与避 暗实验相同的方法造小鼠记忆获得障碍模型，IOmin后将各组小鼠放跳台上，适应3min，然 后给予32V交流电，即刻计时，记录动物5min内的潜伏期和错误次数。(2)跳台测试跳台组小鼠于实验第15日(跳台训练24小时后)，ig给药或N. S 60min后，同上法将小鼠放于跳台上，同时给予32V交流电、并计时，记录动物5min内的潜伏 期和错误次数，比较各组差异，结果见表1和图1。表IPNS与⑶配伍对小鼠学习记忆功能的影响(7±SD)


本发明属于制药技术领域，具体提供了一种药物组合物，主要由原料药三七和栀子组成。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途，经实验证明本发明药物组合，具有活血通络，解毒益智，即能够有效改善痴呆或认知障碍的认知功能，改善行为学异常，提高患者生命质量，也能有效针对脑细胞氧化应激损伤、微炎症损伤，还能增加脑细胞能量供应，抗神经细胞凋亡，促进突触再塑，具有治疗认知功能障碍的作用，尤其是用于治疗老年痴呆或血管性痴呆或轻度认知障碍或健忘症的作用。