专利名称：一种大蒜降血压功能因子的超声辅助酶解制备方法高血压是最常见的心血管病，是全球范围内的重大公共卫生问题。我国已成为世界上高血压危害最严重的国家之一，预防和治疗高血压患者是当今社会面临的重要课题。 常规的降血压药(ACEIs类药物等)都有明显的副作用，而来源于食物中ACE抑制剂具有降压效果显著、没有毒副作用、安全性高、成本低、易吸收等特点，因此开发安全无副作用的食源性降血压因子受到人们的高度关注。近年来，国内外报道了许多来源于食物蛋白的具有降血压活性的短肽，这些活性肽具有高效、低价和低毒的特点，可以起到预防和治疗高血压的作用。大蒜在人类历史上早就是重要的食物和药物，自古就被当作天然杀菌剂，有“天然抗生素”之称。大蒜没有任何副作用，是人体循环及神经系统的天然强健剂。目前大蒜加工产品主要分为三大类(1)大蒜腌制品；(2)脱水大蒜产品，包括大蒜片、大蒜粉和大蒜粒；大蒜提取产品，包括大蒜油、大蒜素和蒜氨酸。大蒜具有清热解毒、消炎杀菌及预防和治疗高血压、动脉粥样硬化、糖尿病、提高免疫力、抗癌防癌等医疗保健作用，在我国却一直未能被真正形成产业开发。这种情况不仅造成了资源的极大浪费，而且限制了我国大蒜产业的进一步发展。流行病学调查发现，产蒜区人群高血压患病率较低。动物实验对大蒜的降压作用也予以证实。大蒜中蛋白质含量较低，1998年日本National Fisheries大学的Kunio Suetsima成功的从大蒜中分离出七种具有降血压活性的二肽。传统的酶解方法普遍存在反应效率不高，蛋白酶的利用率低等不足，因此导致反应时间长、酶的消耗量大、产物活性低等问题。近年来，超声在食品加工中的应用越来越广， 利用超声波进行预处理可以加速蛋白酶解，同时还能显著提高降血压多肽的活性。但是有关利用超声辅助酶解技术制备大蒜降压因子的文章还未见报道。
本发明的目的就是为了克服上述现有技术中传统酶解方法的不足，提供一种基于新型超声辅助酶解制备大蒜降血因子的方法。本发明的技术方案先用超声进行预处理，再进行酶解反应。具体技术方案是 一种大蒜降血压功能因子的超声辅助酶解制备方法，按照下述步骤进行(1)粉碎将经热风干燥的大蒜片粉碎，过60目筛，得大蒜粉。(2)超声预处理按料液比8:100 (g/mL)加水，加热至设定温度后进行超声处理，处理液以逆流循环的方式通过聚能式超声探头，超声处理的条件为处理液初始温度为 20^600C，超声预处理时间为2(Tl00min，处理液初始pH为疒11，脉冲超声工作时间2 8s、间歇时间2s，优选处理液初始温度为40°C、超声预处理时间为60min、处理液初始pH为8、脉冲超声工作时间为3s。(3 )酶解预处理结束后，搅拌均勻，加质量与体积比加入21 (E/S )蛋白酶进行酶解，酶解过程中保持PH9.0，温度50°C，酶解90 min后，灭酶，离心，收集上清液，即得大蒜降血压功能因子。本发明采用超声辅助酶解的方法进行大蒜降血压功能因子的制备，超声处理缩短了酶解时间，改善了酶解效果，提高了酶解产物的活性。图1是聚能式逆流超声提取设备结构图，1超声探头，2盛液器，3进料口，4超声控制器，5循环泵，6出料口，7处理液。
(1)将经热风干燥的大蒜片粉碎，过60目筛，得大蒜粉；(2)常规酶解(无超声预处理): 取大蒜粉8 g加入100 mL去离子水，放入带转子的恒温水浴锅中，加2g (E/S)碱性蛋白酶进行酶解，酶解过程中保持PH9.0，温度50°C，酶解90 min后100°C下灭酶10 min, 10000 r/min下离心10 min，收集上清液，即得大蒜降血压功能因子；(3)活性检测上清液定容至 500 mL,调节pH至8. 3测定ACE抑制活性，见表1。实施例1
(1)将经热风干燥的大蒜片粉碎，过60目筛，得大蒜粉；(2)超声辅助酶解取大蒜粉 64 g加入800 mL去离子水，加热至设定温度后进行超声处理。超声处理设备的功率为410 W,处理液以逆流循环的方式通过聚能式超声探头，循环泵转速为300 rpm。超声处理的条件为处理液初始温度为20°C、初始pH为9，脉冲超声工作时间4s、间歇时间2s，超声处理时间为60min。处理结束后，搅拌均勻，取100 mL提取液，加2g (E/S)碱性蛋白酶进行酶解， 酶解过程中保持PH9. 0，温度50°C，酶解90 min后100°C下灭酶10 min, 10000 r/min下离心10 min，收集上清液，即得大蒜降血压功能因子；(3)活性检测上清液定容至500 mL，调节pH至8. 3测定ACE抑制活性，见表1。实施例2试验处理过程同实施例1，其不同在于其中处理液初始温度为40°C、初始pH为9 ；脉冲超声工作时间4s、间歇时间2s，超声处理时间为60min。ACE抑制活性见表1。实施例3
试验处理过程同实施例1，其不同在于其中处理液初始温度为60°C、初始pH为9 ；脉冲超声工作时间4s、间歇时间2s，超声处理时间为60min。ACE抑制活性见表1。实施例4
试验处理过程同实施例1，其不同在于其中处理液初始温度为40°C、初始pH为9 ；脉冲超声工作时间4s、间歇时间2s，超声处理时间为20min。ACE抑制活性见表1。实施例5
试验处理过程同实施例1，其不同在于其中处理液初始温度为40°C、初始pH为9 ；脉冲超声工作时间4s、间歇时间2s，超声处理时间为60min。ACE抑制活性见表1。实施例6
试验处理过程同实施例1，其不同在于其中处理液初始温度为40°C、初始pH为9 ；脉冲超声工作时间4s、间歇时间2s，超声处理时间为lOOmin。ACE抑制活性见表1。实施例7
试验处理过程同实施例1，其不同在于其中处理液初始温度为40°C、初始pH为7 ；脉冲超声工作时间4s、间歇时间2s，超声处理时间为60min。ACE抑制活性见表1。实施例8
试验处理过程同实施例1，其不同在于其中处理液初始温度为40°C、初始pH为8 ；脉冲超声工作时间4s、间歇时间2s，超声处理时间为60min。ACE抑制活性见表1。实施例9
试验处理过程同实施例1，其不同在于其中处理液初始温度为40°C、初始pH为11 ；脉冲超声工作时间4s、间歇时间2s，超声处理时间为60min。ACE抑制活性见表1。实施例10
试验处理过程同实施例1，其不同在于其中处理液初始温度为40°C、初始pH为8 ；脉冲超声工作时间2s、间歇时间2s，超声处理时间为60min。ACE抑制活性见表1。实施例11
试验处理过程同实施例1，其不同在于其中处理液初始温度为40°C、初始pH为8 ；脉冲超声工作时间6s、间歇时间2s，超声处理时间为60min。ACE抑制活性见表1。实施例12
试验处理过程同实施例1，其不同在于其中处理液初始温度为40°C、初始pH为8 ；脉冲超声工作时间8s、间歇时间2s，超声处理时间为60min。ACE抑制活性见表1。实施例13
试验处理过程同实施例1，其不同在于其中处理液初始温度为45°C、初始pH为8. 2 ；脉冲超声工作时间3s、间歇时间2s，超声处理时间为72min。ACE抑制活性见表1。表1不同实施例ACE抑制活性的结果
样品编号ACE抑制率(％)对照例46. 82实施例155. 18实施例264. 68


本发明一种大蒜降血压功能因子的超声辅助酶解制备方法，属于农产品深加工技术领域。按照下述步骤进行(1)粉碎将经热风干燥的大蒜片粉碎，过60目筛，得大蒜粉；(2)超声预处理按料液比8:100加水，加热至设定温度后进行超声处理；处理液以逆流循环的方式通过聚能式超声探头(3)酶解预处理结束后，搅拌均匀，加质量与体积比加入2%(E/S)碱性蛋白酶进行酶解，即得大蒜降血压提取物。经过超声处理后，缩短了酶解时间，改善了酶解效果，提高了酶解产物的活性。