专利名称：生茶酵素的制备方法酵素是一种由氨基酸组成的具有特殊生物活性的物质，也称为酶。它是一种生物催化剂，存在于所有的动、植物和微生物体内，是维持机体正常功能，消化食物，修复组织等生命活动的一种必需物质。目前，人体补充酵素主要还是生食果蔬为主。新鲜的茶叶中本身含有丰富的酵素和多种有效生理活性物质，比如多酚类、皂甙类、咖啡碱等很多对人体有益的成分。然而，由于茶叶在采摘后经过5-10个小时的自然发酵就进行炒茶杀青，烘干等加工工艺，这样会使茶叶中的酵素已经失活和部分营养流失等。
本发明所要解决的技术问题是提供一种生茶酵素的制备方法，该方法用时短、污染少，能将生茶叶快速酵解从而获得易被人体吸收的小分子物质，最大程度留茶叶的有效成分，大量积累生理活性物质和产生各种纤维酵素、蛋白酵素、溶纤酵素、淀粉酵素等有益的酵素，大大提高生茶酵素的综合保健价值。为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案一种生茶酵素的制备方法，该方法包括以下步骤一次发酵步骤，对生茶进行臭氧消毒处理后，在洁净条件下将其切细、切碎，加入黑糖混合均匀后，接入灵芝菌种、枯草杆菌菌种、双歧杆菌菌种，在常温下发酵30-50天；二次发酵步骤，在经一次发酵后的半成品中接入醋酸杆菌菌种，在常温下发酵15-20天，得到生茶酵素原液；其中，上述各组分按重量计分量如下生茶100 份；黑糖1-5 份；灵芝菌种I. 5-2份；枯草杆菌菌种2-3份；双歧杆菌菌种1-2份；醋酸杆菌菌种2. 5-3. 5份。优选地，该方法还包括有装罐熟成步骤，将所述二次发酵得到的生茶酵素原品进行装罐熟成后，静置25-35天，得到生茶酵素成品。优选地，所述灵芝菌种、枯草杆菌菌种、双歧杆菌菌种、醋酸杆菌菌种均为由斜面试管菌种扩大的液体培养菌种。优选地，所述灵芝菌种通过以下方法制得以按重量计的葡萄糖2% -5%、麦芽浸膏1% -4%、酵母抽提物O. 1% -O. 2%、以及蛋白胨O. 01%-O. I %为培养基，调整PH值为4. 0-7. O、温度为120_125°C湿热灭菌15-25分钟，并冷却到常温后，接种灵芝斜面试管菌种1-2环，在22-28°C、转速90-200rpm/min的摇床中培养4-8天，得到摇瓶灵芝菌种子。优选地，所述枯草杆菌菌种通过以下方法制得以按重量计的葡萄糖1% _5%、酵母膏1% -O. 2 %、蛋白胨O. 01%-O. I %、以及大豆水解液3%为培养基，调整PH值为4. 0-7.0、温度为120-1251湿热灭菌15-25分钟，并冷却到常温后，接种枯草杆菌斜面试管菌种1- 2环，在20-32 °C、转速90-200rpm/min的摇床中培养4-8天，得到摇瓶枯草杆菌种子。优选地，所述双歧杆菌菌种通过以下方法制得以按重量计的蛋白胨1% _3%、牛肉浸膏1% _3%、酵母提取物1% -3%、葡萄糖2% -5%、吐温800. 05%、柠檬酸氢二铵O.2%,MnSO4 · H2O O. 002%,MgS04 · 7H20 O. 02% -O. 08%,K2HP040. 2%为培养基，调整 PH值为4. 0-7. O、温度为120-125°C湿热灭菌15-25分钟，并冷却到常温后，接种双歧杆菌种子1-2环，常温厌氧培养3-5天，得到双歧杆菌种子。优选地，所述醋酸菌菌种通过以下方法获得以按重量计的葡萄糖1% _5%、酵母粉1% -5%为培养基，调整pH为值5. 5，温度为120-125°C湿热灭菌15-25分钟，冷却到常温后加入食用级酒精4%，接种醋酸杆菌斜面试管菌种1-2环，在20-33°C、转速90-200rpm/min的摇床中培养4_8天，得到摇瓶醋酸杆菌种子。优选地，所述灵芝菌种、枯草杆菌菌种、双歧杆菌菌种、醋酸杆菌菌种均为由斜面试管菌种扩大为液体菌种。优选地，所述生茶为任意单个品种或多个品种混合的采摘后未经烘炒的茶叶。优选地，上述各组分按重量计分量具体如下生茶100 份；黑糖5份；灵芝菌种2份；枯草杆菌菌种2. 5份；双歧杆菌菌种I. 5份；醋酸杆菌菌种3份。相应地，本发明还公开了一种生茶酵素，所述生茶酵素采用上方法制备而成。本发明的有益效果是本发明的实施例通过利用灵芝菌、枯草杆菌、双歧杆菌、醋酸菌等酵解生茶，刚采摘的新鲜茶叶通过自身酵解和多菌联合发酵，使生茶叶迅速酵解为易被人体吸收的小分子物质，有效保留了生茶中原有的多酚类、皂甙类、咖啡碱和生茶叶中本身的各种酵素，同时有效累积了多种有生理活性功能的物质和生产各种酵素，发酵过程中杂菌污染少。灵芝菌生长迅速并能积累三萜类和灵芝多糖等多种生理活性成分。灵芝生茶酵素中含茶叶多酚类、茶皂甙、咖啡碱等有效物质和各种益生菌所产生的纤维酵素、蛋白酵素、溶纤酵素、淀粉酵素，枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽，三萜类和多糖类等有多种生理功能的活性性物质，并且含量达到较高的水平，多菌联合发酵会产生大量有益因子等，从而大大提高了生茶酵素的综合保健价值。O.02% -O. 08%, K2HPO4O. 2%为培养基，调整PH值为4. 0-7. O、温度为120_125°C湿热灭菌15-25分钟，并冷却到常温后，接种双歧杆菌种子1-2环，常温厌氧培养3-5天，得到双歧杆菌种子。所述醋酸菌菌种通过以下方法获得以按重量计的葡萄糖1% -5%、酵母粉1% -5%为培养基，调整pH值为5. 5，温度为120-125°C湿热灭菌15-25分钟，并冷却到常温后加入食用级酒精4%，接种醋酸杆菌斜面试管菌种1-2环，在20-33°C、转速90-200rpm/min的摇床中培养4_8天，得到摇瓶醋酸杆菌种子。具体实现时，上述各组分按重量计分量具体如下生茶100 份； 黑糖5份；灵芝菌种2份；枯草杆菌菌种2. 5份；双歧杆菌菌种I. 5份；醋酸杆菌菌种3份。或者，所述灵芝菌种、枯草杆菌菌种、双歧杆菌菌种、醋酸杆菌菌种也可均采用固体菌种。具体实现时，常温可以是指25_33°C，上述各培养基灭菌公式均为120_125°C下湿热灭菌15-25分钟。实施例取生茶(包括各种类的茶叶)20公斤，进行臭氧消毒处理后，在洁净条件下，切细，切碎，加入黑糖I公斤，混合均匀，分别加入2%灵芝菌种、2. 5%枯草杆菌菌种、I. 5%双歧杆菌菌种，在常温下发酵40天后，接入3%的醋酸杆菌进行15天的发酵，得生茶酵素原液。将生茶酵素原液进行装罐熟成，2个月后得品质优良，浓黑粘稠的生茶酵素。本发明中的生茶可以是任意单个品种或多个品种混合的采摘后未经烘炒的茶叶，最好用新鲜生茶叶，茶叶越新鲜，效果越好；灵芝菌种包括灵芝属的所有菌种。本发明具有以下优点I、灵芝菌参与生茶酵素的发酵，分解茶叶，累积三萜类，灵芝多糖等有多种有保健功效的生理活性物质。2、灵芝菌与枯草杆菌，双歧杆菌，醋酸杆菌联合发酵起到互补共生作用，使生茶迅速分解成小分子物质，杂菌污染少。枯草杆菌能穿过胃的恶劣环境，并定植在肠道中，保护肠道的健康，枯草杆菌能产生蛋白酵素，淀粉酵素，纤维酵素，纳豆酵素，枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等多种酵素和抑菌活性物质，在消化道中与人体内的消化酵素一同发挥作用，抑制有害菌的生长，有利于机体对食物的消化和吸收。3、醋酸杆菌的最后发酵，有效把酒精转化成醋酸或乳酸类物质和一些对人体有益的代谢产物。本发明可应用于灵芝多糖的制备、茶叶的高附加值深加工、枯草杆菌肠道保护剂和溶血栓性纳豆酵素的生产领域等。以上所述，仅为本发明较好的，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。


本发明公开一种生茶酵素的制备方法，包括一次发酵步骤，对生茶进行臭氧消毒处理后，在洁净条件下将其切细、切碎，并加入黑糖混合均匀后，加入灵芝菌种、枯草杆菌菌种、双歧杆菌菌种，在常温下发酵30-50天；二次发酵步骤，在经一次发酵后的半成品中接入醋酸杆菌，在常温下发酵15-20天，得到生茶酵素原液。本发明还公开了相应的生茶酵素。采用本发明制备生茶酵素用时短、污染少，能将生茶叶快速酵解获得易被人体吸收的小分子物质，最大程度留茶叶的有效成分，并大量积累生理活性产物和各种纤维酵素、蛋白酵素、溶纤酵素、淀粉酵素等，大大提高生茶酵素的综合保健价值。