专利名称：宣肺平喘的中药组合物的检测方法慢性阻塞性肺疾病是一种内科常见病、多发病，是一种重要的慢性呼吸系统疾病， 患病患者数多，死率高，由于其病情迁延，严重影响患者的劳动能力和生活质量，而受到世界各国的普遍重视。目前，医学界尚无办法有效地控制慢性阻塞性肺疾病病情的发展，寻求防止慢性阻塞性肺疾病的有效方法是国内外医学界急待解决的课题。慢性阻塞性肺疾病发病机制尚未完全明了，目前普遍认为慢性阻塞性肺疾病是以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征，在肺的不同部位有肺泡巨噬细胞、T淋巴细胞和中性粒细胞增加。激活的炎症细胞释放多种介质，破坏肺的结构和(或)促进中性粒细胞炎症反应。吸入有害颗粒或气体可导致肺部炎症；吸烟可诱导炎症并直接损害肺脏。除炎症外，肺部的蛋白酶和抗蛋白酶系统失衡， 以及氧化抗氧化失衡也起了重要的作用。目前现代医学对于慢性阻塞性肺疾病是通过药物治疗，预防和治疗并发症，改善症状，主要是呼吸困难，提高生活质量，去除慢性阻塞性肺疾病急性加重的诱因，嘱咐患者戒烟。由于该病患者机体免疫力降低和呼吸防御机制受损，容易出现呼吸道感染，反复感染引起支气管黏膜充血水肿，腺体增生肥大，分泌功能亢进，管壁增厚、狭窄，加重气流阻塞。感染的病原体常见为细菌、病毒、支原体等。西医药针对菌主要采用抗菌药物、激素，而对于病毒所致感染尚无有效药物，何况抗菌药物、激素又具有一定的毒副作用，另外，即使急性期经治疗得到缓解，仍不能有效的控制其复发。因此，为了更好的缓解慢性阻塞性肺疾病发展，控制其复发，提高生存质量，使慢性阻塞性肺疾病治疗更加规范化，寻找安全、有效的治疗慢性阻塞性肺疾病患者的中药方药十分必要。
本发明目的在于提供一种具有宣肺，平喘作用的中药组合物；本发明目的还在于提供一种具有宣肺，平喘作用的中药组合物制备方法；本发明目的还在于提供一种具有宣肺，平喘作用的中药组合物的质量控制方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的本发明所述的具有宣肺，平喘作用的中药组合物是由如下重量比的原料药制成的麻黄3000-4000重量份、生姜2000-3000重量份、桂枝2000-3000重量份、苦杏仁 1000-1500重量份、五味子(制)250-500重量份、炙甘草80-160重量份上述原料优选配比为麻黄3000-3200重量份、生姜观00-3000重量份、桂枝观00-3000重量份、苦杏仁 1400-1500重量份、五味子(制)300-400重量份、炙甘草100-120重量份上述原料优选配比为麻黄3000g、生姜3000g、桂枝3000g、苦杏仁1500g、五味子(制)375g、炙甘草 112. 5g本发明所述中药组合物的制备方法包括以下步骤以上药材除苦杏仁外，其他五味药材，采用逆流循环提取工艺加水煎煮1-3次，每次2-4小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(6(TC )的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅勻，静置12-36小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1. 34 1.40(60 70°C)的稠膏；苦杏仁漂洗去灰土，浙干水分置盘上，放入热压灭菌锅内，控制蒸汽压力为0. 01 0. 03kpa/cm2 (103°C )，热压蒸煮20-40分钟，取出即放入少量冷水中浸泡， 除去种皮，晒干，即得杏仁炮制品。将上述稠膏与杏仁炮制品真空干燥，粉碎，依照本领域常规技术制成临床接受的制剂，如胶囊剂、片剂、颗粒剂、软胶囊、丸剂。本发明所述中药组合物胶囊剂的制备方法为取原料药麻黄3000g、生姜3000g、 桂枝3000g、苦杏仁1500g、五味子(制)375g、炙甘草112. 5g其特征是该方法包括以下步骤以上药材除苦杏仁外，其他五味药材，采用逆流循环提取工艺加水煎煮2次，每次 2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60°C)的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅勻，静置M小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1. 34 1. 40 (60 700C )的稠膏；苦杏仁漂洗去灰土，浙干水分置盘上，放入热压灭菌锅内，控制蒸汽压力为 0.01 0. 03kpa/cm2(103°C)，热压蒸煮30分钟，取出即放入少量冷水中浸泡，除去种皮，晒干，即得杏仁炮制品。将上述稠膏与杏仁炮制品真空干燥，粉碎，加糊精适量，混勻，装入胶囊，制成1000粒，即得。本发明药物组合物质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种(1)取本发明药物相当于原药材9-llg，加浓氨试液Uml，再加三氯甲烷 30-50ml,加热回流0. 5-2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各3 5μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨试液 (15-25 3-10 0.5-2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%茚三酮乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。(2)取本发明药物相当于原药材200_220g，加乙醚20_40ml，超声20_40分钟(功率300W，频率50kHz)，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取干姜对照药材lg，加水80-100ml煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20_30ml，加等体积石油醚(60 900C )萃取，取上层液，蒸干，残渣加Iml甲醇使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法 (中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液5 μ 1、供试品溶液15 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60 90°C)_乙酸乙酯(3-7 0.5-2)为展开剂，二次展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(3)取本发明药物相当于原药材200_220g，加石油醚(60 90°C )40_60ml，加热回流0. 5-2小时，滤过，残渣加甲醇40-60ml，加热回流0. 5-2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30-50ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2-4次，每次10_30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2-4次，每次20-40ml，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典 2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各3 5μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(10-15 5-10 1-3)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。含量测定(1)照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0. 磷酸 (含0. 三乙胺)-乙腈(90-100 0-10)为流动相；检测波长为210nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，用甲醇溶解制成每Iml 含50μ g的溶液，作为对照品溶液，即得。供试品溶液的制备取本发明药物相当于原药材3_5g，精密称定，至50ml容量瓶中，精密加入0. 5mol/L的盐酸溶液1ml，再加甲醇至刻度，塞紧，超声处理20-40分钟，放冷， 微孔滤膜(0. 45 μ m)过滤，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各5μ 1 10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明药物日用计量含麻黄以盐酸麻黄碱(CltlH15NO -HCl)量计，不得少于8. Omgo(2)照高效液相色谱法(附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-0. 磷酸(35-40 15-20 40-50)为流动相；检测波长为250nm。理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品1. 5mg,精密称定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇勻，即得(每Iml含五味子醇甲0. 03mg)。供试品溶液的制备取本发明药物相当于原药材lOO-llOg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率20kHz) 10_30min，取出，放冷，再称定重量，加甲醇补足减少的重量，滤过，精密吸取续滤液20ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并定溶至5ml，用微孔滤膜(0.45μπι)滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明药物含五味子醇甲(C24H32O7)不得少于0. 40%。本发明药物组合物质量控制方法优选如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种(1)取本发明药物相当于原药材10. 8g，加浓氨试液anl，再加三氯甲烷40ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱， 加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各3 5μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨试液QO 5 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%茚三酮乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。(2)取本发明药物相当于原药材216. 25g，加乙醚30ml，超声30分钟(功率300W， 频率50kHz)，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取干姜对照药材 lg，加水80ml煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20ml，加等体积石油醚(60 90°C )萃取，取上层液，蒸干，残渣加Iml甲醇使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005 年版一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液5μ1、供试品溶液15μ1，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以石油醚(60 90°C)_乙酸乙酯(5 1)为展开剂，二次展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(3)取本发明药物相当于原药材216. 25g，加石油醚(60 90°C ) 50ml，加热回流 1小时，滤过，残渣加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材 0. 5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验， 吸取上述两种溶液各3 5μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13 7 2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10% 硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。含量测定(1)照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0. 磷酸 (含0.1%三乙胺)-乙腈(97 3)为流动相；检测波长为210nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，用甲醇溶解制成每Iml 含50μ g的溶液，作为对照品溶液，即得。供试品溶液的制备取本发明药物相当于原药材4. 3g，精密称定，至50ml容量瓶中，精密加入0. 5mol/L的盐酸溶液1ml，再加甲醇至刻度，塞紧，超声处理30分钟，放冷，微孔滤膜(0. 45 μ m)过滤，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各5μ 1 10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明药物日用计量含麻黄以盐酸麻黄碱(CltlH15NO -HCl)量计，不得少于8. Omgo(2)照高效液相色谱法(附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-0.1%磷酸(39 16.7 44.3)为流动相；检测波长为250nm。理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品1. 5mg,精密称定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇勻，即得(每Iml含五味子醇甲0. 03mg)。供试品溶液的制备取本发明药物相当于原药材108. lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率20kHz) 20min，取出，放冷，再称定重量，加甲醇补足减少的重量，滤过，精密吸取续滤液20ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解， 并定溶至5ml，用微孔滤膜(0.45μπι)滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明药物含五味子醇甲(C24H32O7)不得少于0. 40%。
本发明公开了一种用于宣肺，平喘的药物组合物的检测方法。本发明的药物组合物原料药组成为麻黄、生姜、桂枝、苦杏仁、五味子(制)、炙甘草组成，其检测方法为对麻黄、生姜、甘草进行薄层鉴别。