一种含猪血抑菌剂的复合免洗洗手液及其制备方法[0001]【技术领域】，尤其是提供一种含有猪血抑菌剂的复合免洗洗手液及其制备方法和应用。[0002] 传统的固体香皂在使用过程中容易沾染手上的细菌和污垢，成为二次污染源。而洗手液作为传统洗手用品香皂与洗手液的替代产品，有着杀菌、低刺激、避免二次污染的特点。一般来讲，洗手液在清洁手时与手的接触面仅限于洗手液瓶子的泵头处，可有效的避免二次污染。同时,洗手液的配方相对香皂讲比较柔和,对手的刺激较小,对一般手上沾染的病原菌如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的杀灭作用有着良好的杀灭作用。[0003]免洗洗手液作为新型的洗手液，具有不需要水源即可清洁手部的作用，不受水源的限制，使用极其方便。现有的免洗洗手液的品种较多，但是大多数都具有一定的缺陷，有些免洗洗手液的杀菌部分为化学成分，对手部皮肤刺激性较大、可引起皮肤刺激过敏等副作用反应；另一些的成分不易生物降解、抗硬水性能较差；还有一些含有易燃成分、长期存放不稳定已发生分离或变质。如何减少洗手液中消毒剂对手部皮肤的副作用，及生产更稳定经济的洗手液，成为生产免洗洗手液研究的难题。[0004]我国每年屠宰生猪近6亿头，占世界生猪屠宰量得45%，猪血资源十分丰富，但目前除少量用于制作食用食品外，基本未得到开发利用，不仅浪费资源，而且污染环境。新鲜猪血中含有丰富的蛋白资源，从猪血中提取的抑菌多肽具有良好的生物抑菌活性，能杀灭如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等多种病原菌。同时，从猪血中所提取的多肽性质稳定，是不可多得的稳定的生物抑菌剂。[0005]
本发明提供一种含猪血抑菌剂的免洗洗手液，由猪血抑菌剂与丹皮乙醇提取浸膏复合配比制成，具有天然强效的生物杀菌消毒型免洗洗手液的制备方法。[0006]本发明还公开了含有猪血抑菌剂的复合免洗洗手液的制备方法，解决现有的免洗洗手液制备过程繁琐、工艺复杂、稳定性差以及杀菌剂成分刺激皮肤产生副作用的问题。
[0007]本发明提供的一种含猪血抑菌剂的免洗洗手液，主要由以下活性物质以重量份计制成的:
猪血抑菌剂为40~50%(w/w);牡丹皮乙醇提取浸膏10~30%(w/w)；
辅料:
丙二醇5~10%(w/w);丙三醇5~10%(w/w);卡波姆0.1~0.3%(w/w);苯甲二丽-4I~3%(w/w);肉豆蘧酸异丙酯I~5%(w/w);维生素E乙酸酯I~3%(w/w);梓檬酸0.1~0.5%(w/w);剩余的份额用水补齐。
[0008]本发明提供的含有猪血抑菌剂的复合免洗洗手液的制备方法，包括以下步骤:
1、猪血抑菌剂的制备:
I)将新鲜猪血与3~4倍体积量水充分混合，100~150转每分钟条件下搅拌30~60分钟，静置30到60分钟，上清液利用膜分离技术经过中空纤维滤膜滤器超滤，超滤截留分子量30KDa以下的部分；
2) 步骤I)中所得的组份用氢氧化钠调节pH至8.0~8.5，按照质量体积比为1:1000~10000的比例加入胰蛋白酶，在37°C条件下酶解8~12小时；
3)用醋酸将酶解液调节pH至3.5~4.0，使酶失活终止酶解反应，加热煮沸5分钟，静置至室温，过滤，留上清液；
4)上清液利用膜分离技术经中空纤维滤膜滤器超滤，截留分子量3KDa以下部分，再通过纳滤装置截留分子量0.5KDa以上部分，既得；
2、牡丹皮乙醇提取浸膏制备:
研磨成粉末的中药牡丹皮过100目筛子，用5到10倍体积95%乙醇室温浸泡12到48小时，利用闪氏提取器进行超声提取，提取液过滤，旋转蒸发制得乙醇浸膏，称取乙醇浸膏用乙醇溶解，配制成浓度为4~30mg/ml的悬浊液，在最终的产品中使得牡丹皮提取浸膏的浓度为I~3mg/ml。
[0009]3、按比例称取步骤1、步骤2制备的猪血抑菌剂、牡丹皮乙醇提取浸膏，按免洗洗手液的常规制备方法添加辅料制成。
[0010]本发明所述的一种含猪血抑菌剂的免洗洗手液，具体操作步骤如下:
按用量比例称取原料、辅料，再按如下步骤进行配制:
(1)将卡波姆凝胶加适量水，40~50°C条件下搅拌机剪切搅拌，使其充分溶胀，待溶胀完全制得凝胶基质；
(2)丙二醇与丙三醇混合，加入到凝胶基质中，搅拌均匀；
(3)苯甲二酮-4、肉豆蘧酸乙酸酯、维生素E异丙酯加入适量乙醇搅拌混合，加入到凝胶基质中，搅拌均匀；
(4)将柠檬酸加适量水混合到凝胶基质中，再加入猪血抑菌剂，搅拌均匀，既得免洗洗手液。
[0011]牡丹皮乙醇提取浸膏对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿色假单胞菌、白色念珠菌有较强的杀灭和抑制作用。具有清热凉血、活血化淤、退虚热的功效。
[0012]卡波姆作为免洗洗手液的基质，具有良好的增稠作用、流变性及稳定性，是良好的表面活性剂，易于洗涂，对皮肤无刺激作用。丙二醇丙三醇为保湿剂与助溶剂；苯甲二酮-4具有阻挡紫外线的作用，是化妆品中常用的防紫外线成分；肉豆蘧酸异丙酯具有保湿皮肤的作用；维生素E乙酸酯具有美白皮肤的作用；少量的柠檬酸用于调节洗手液的pH。
[0013]本发明的一种含猪血抑菌剂及牡丹皮乙醇提取浸膏的复合免洗洗手液，具有如下特征。
[0014](I)外观为淡白色半透明液体，略微有粘度；(2)pH值:3.5~5 ; (3)稳定性:常温条件下I年内性质稳定，杀菌清污彻底；(4)抑菌活性:采用牛津杯法测定抑菌活性，对常见的病原菌如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿色假单胞菌及白色念珠菌均有杀灭和抑制作用。
[0015]本发明的积极效果在于:复合免洗洗手液以牡丹皮提取浸膏和猪血抑菌剂述两种天然抗菌活性组份为主料制成，猪血抑菌剂为生物制剂，对皮肤无刺激作用；两种天然抗菌活性成分的复合使用可以提高复合组份对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿色假单胞菌、白色念珠菌的抑菌能力，清洗手部时能够在短时间内杀灭99%以上的常见病原菌；无需水冲洗，便于在各种条件下使用。洗手液制作工艺相对简单，原料价格低廉，便于大规模生产。
[0016]本发明以分子量为0.5~3KDa的猪血抑菌剂和牡丹皮乙醇提取浸膏为原料，具体的实施步骤如下，但并不意味着对本发明范围的限制。
[0017]实施例1
猪血抑菌剂的制备:
O取新鲜猪血I升与3升蒸馏水充分混合30分钟，100~150转每分钟条件下搅拌30~60分钟，静置30到60分钟，上清液利用膜分离技术经过中空纤维素滤膜滤器超滤，超滤截留分子量30KDa以下的部分；
2)将步骤I)中所得 组份用氢氧化钠调节pH至8.0，加入质量体积比为1:1000的胰蛋白酶在37°C条件下酶解8小时；
3)用醋酸将酶解液调节pH至4.0，使酶失活终止酶解反应，加热煮沸5分钟，静置至室温，留上清液；
4)上清液利用膜分离技术经超滤器超滤，截留分子量3KDa以下部分，再通过纳滤装置截留分子量0.5KDa以上部分，既得。
[0018]实施例2
研磨成粉末的中药牡丹皮过100目筛子，用5到10倍体积95%乙醇室温浸泡12到48小时，利用闪氏提取器进行超声提取，提取液过滤，旋转蒸发制得乙醇浸膏，称取乙醇浸膏用乙醇溶解，配制成浓度为4~30mg/ml的悬浊液，在最终的产品中使得牡丹皮提取浸膏的浓度为I~3mg/ml。
[0019]实施例3 主料:
猪血抑菌剂40%(w/w);含牡丹皮乙醇浸膏的乙醇溶液10~30%(w/w)，终产品中牡丹皮乙醇浸膏的含量为lmg/ml ；
辅料:
卡波姆0.3~0.5%(w/w);丙二醇3~5%(w/w);丙三醇5~7%(w/w);维生素E乙酸酯2~5%(w/w);肉豆蘧酸异丙酯2~4%(w/w);苯甲二酮-4 I~3%(w/w);梓檬酸0.3~0.5%(w/w);用水补齐剩余体积。
[0020]1、配制方法:
1)将卡波姆凝胶加适量水，40~50°C条件下搅拌机剪切搅拌，使其充分溶胀，待溶胀完全制得凝胶基质；
2)丙二醇与丙三醇混合，加入到凝胶基质中，搅拌均匀；
3)苯甲二酮_4、肉豆蘧酸乙酸酯、维生素E异丙酯加入适量乙醇搅拌混合，加入到凝胶基质中，搅拌均匀；
4)将柠檬酸加适量水混合到凝胶基质中，再加入猪血抑菌剂，搅拌均匀，既得免洗洗手液。
[0021]2、抑菌效价试验
I)菌种大肠杆菌 Escherichia coli ATCC 25922
金黄色葡萄球菌 Staphylocouus aureus ATCC 25923
铜绿色假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
白色念珠菌albican ATCC 10231
临床多重耐药性金黄色葡萄球菌(主要耐药名称哌拉西林、氧氟沙星、头孢噻肟、新诺明。三代头孢、哌酮)
临床多重耐药性铜绿假单胞菌(主要耐药名称青霉素、红霉素、氧氟沙星、甲氧西林)
2)方法
将上述各菌种进行菌种复苏，培养至对数生长期，用培养基稀释到IO5~106CFU/ml，采用涂布器将稀释的菌液均匀涂在固体培养基上。将牛津杯置于固体培养基上，每份洗手液样品设3个对照，并设阴性对照(阴性对照组为用水代替猪血抑菌剂，用乙醇代替牡丹皮乙醇提取浸膏的洗手液)，将固体培养基置于37°C培养16~24小时。后采用游标卡尺测量抑菌圈直径。试验重复3~5次。
[0022]3)结果