专利名称：一种具有抗解脲支原体和人型支原体感染作用的花椒提取物的制作方法解脲支原体及人型支原体引起的泌尿生殖道感染，在性传播疾病中发病率最高， 不仅可以引起广泛的非淋菌性生殖道感染，如前庭大腺炎、腔道炎、宫颈炎等下生殖道感 染，也可引起子宫内膜炎、输卵管炎、卵巢炎、盆腔炎等上生殖道感染，导致不孕、不育及胎 儿宫内感染、流产等不良后果。男性可并发前列腺炎、附睾炎、女性宫颈与输卵管炎等。由于 支原体缺乏细胞壁，所以青霉素、β -内酰胺类药物等干扰细胞壁合成的抗生素治疗基本无 效；支原体对影响细胞蛋白合成的抗生素敏感，如四环素、喹诺酮类以及大环内酯类药物， 所以临床上一般将这3类药物作为治疗支原体感染的首选药。而近年越来越多的报道显示解脲支原体(UU)对此3类药物的耐药性有逐年增 加的趋势，由于耐药性的出现，抗生素的疗效显著下降，例如解脲支原体对四环素耐药率 1996年仅为8. 6%，2000年则上升为46. 4%，2006年12月上升为68. 3 %。环丙沙星的耐 药率为80%，对左氧氟沙星耐药率在26. 8% 48. 3%之间。对大环内酯类药物如红霉素维 持在30% 50%的水平。同类药物罗红霉素和阿奇霉素的疗效如今也不容乐观。对罗红 霉索耐药水平最高达到77. 8%，而阿奇霉素为66. 7%。临床上持续性、复发性泌尿生殖道 感染及耐药问题已经成为日益常见和棘手的问题，按目前的发展趋势，抗生素在对耐药解 脲支原体感染疾病的治疗上，将面临无药可医的局面。同样的人型支原体也存在着对抗生 素类药物的耐药性逐年增加的问题。传统中医药在此类疾病的治疗上有独特的优势和很好的疗效，其特色在于强调整 体，辨证论治。中医药治疗支原体感染虽有很多优势，但大多停留在临床大处方用药上，且 在治疗上存在着病程长、疗程长、服用不便之弊，因此目前尚无无此类药物开发。
本发明是要解决目前解脲支原体和人型支原体对抗生素的耐药性增加，而导致治 疗效果差的问题，提供一种具有抗解脲支原体和人型支原体感染作用的花椒提取物。本发明具有抗解脲支原体和人型支原体感染作用的花椒提取物是由以下方法提 取得到的将花椒粉碎至粉末状，装入超临界CO2萃取釜中，萃取温度为30 55°C，分离温 度为25 45°C，萃取压力为15 35MPa，分离压力为4 6MPa，CO2流量为4 12L/h，萃 取时间为1 2小时，即得到花椒提取物。本发明的具有抗解脲支原体和人型支原体感染作用的花椒提取物的优点如下1、本发明的花椒提取物通过安全性毒理学实验可知该产品安全无毒副作用；2、使用以本发明的花椒提取物为原料的花椒提取物中药制剂对感染解脲支原体 和人型支原体标准株的小鼠进行治疗，治疗10天后，感染率由原来的100%降低到20%，由此可知，本发明的花椒提取物具有抗解脲支原体和人型支原体感染作用；3、使用以本发明的花椒提取物为原料的花椒提取物中药制剂对感染解脲支原体 耐药株的小鼠进行治疗，治疗10天后，感染率由原来的100%降低到20%，而阳性对照组 (环丙沙星栓)的感染率仅降低到80% ；使用以本发明的花椒提取物为原料的花椒提取物 中药制剂对感染人型支原体耐药株的小鼠进行治疗，治疗10天后，感染率由原来的100% 降低到20%，而阳性对照组(环丙沙星栓)的感染率仅降低到90%;由此可知，本发明的花 椒提取物具有抗耐药解脲支原体和耐药人型支原体感染作用；4、使用以本发明的花椒提取物为原料的花椒提取物中药制剂进行止痒和抗炎作 用研究，与空白对照相比有显著性差异，说明花椒提取物具有止痒和抗炎作用。，还包括各间的 任意组合。一本实施方式的具有抗解脲支原体和人型支原体感染作用的花椒 提取物是由以下方法提取得到的将花椒粉碎至粉末状，装入超临界CO2萃取釜中，萃取温 度为30 55°C，分离温度为25 45°C，萃取压力为15 !35MPa，分离压力为4 6MPa，CO2 流量为4 12L/h，萃取时间为1 2小时，即得到花椒提取物。本实施方式所述的花椒提取物可以与药学上可接受的载体或赋形剂制成口服 (丸剂、颗粒剂、口服液、片剂、胶囊或软胶囊)、外用(灌洗剂、凝胶剂、栓剂、喷雾剂或泡腾 剂)或无菌注射液的剂型。其中可接受的载体为可可豆油、半合成甘油脂肪酸酯类、甘油、 明胶、泊洛沙姆、羊毛脂、硬脂酸聚烃氧GO)酯、蜂蜡、半合成甘油脂肪酸酯类、可可豆脂、 香果脂类、氢化油类、聚乙二醇类、泊洛沙姆、壳聚糖、吐温、卡波姆类、微晶纤维素、糊精、淀 粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、藻酸盐、环糊精、β -环糊精等。本实施方式的花椒提取物通过安全性毒理学实验可知该产品安全无毒副作用；使 用以本实施方式的花椒提取物为原料的花椒提取物中药制剂对感染解脲支原体和人型支 原体标准株的小鼠进行治疗，治疗10天后，感染率由原来的100%降低到20%，由此可知， 本实施方式的花椒提取物具有抗解脲支原体和人型支原体感染作用；使用以本实施方式的 花椒提取物为原料的花椒提取物中药制剂对感染解脲支原体耐药株的小鼠进行治疗，治疗 10天后，感染率由原来的100%降低到20%，而阳性对照组(环丙沙星栓)的感染率仅降 低到80% ；使用以本实施方式的花椒提取物为原料的花椒提取物中药制剂对感染人型支原 体耐药株的小鼠进行治疗，治疗10天后，感染率由原来的100%降低到20%，而阳性对照组 (环丙沙星栓)的感染率仅降低到90 % ；由此可知，本实施方式的花椒提取物具有抗耐药解 脲支原体和耐药人型支原体感染作用；使用以本实施方式的花椒提取物为原料的花椒提取 物中药制剂进行止痒和抗炎作用研究，与空白对照相比有显著性差异，说明花椒提取物具 有止痒和抗炎作用。

二 本实施方式与
一不同的是萃取温度为35 50°C。其它与
一相同。

三本实施方式与
一不同的是萃取温度为40 45°C。其它与
一相同。

四本实施方式与
一不同的是萃取温度为40°C。其 它与
一相同。

五本实施方式与
一至四之一不同的是分离温度为 30°C。其它与
一至四之一相同。

六本实施方式与
一至四之一不同的是分离温度为 35 40°C。其它与
一至四之一相同。

七本实施方式与
一至六之一不同的是萃取压力为 20 30MPa。其它与
一至六之一相同。

八本实施方式与
一至六之一不同的是萃取压力为 22 ^MPa。其它与
一至六之一相同。

九本实施方式与
一至六之一不同的是萃取压力为 25MPa。其它与
一至六之一相同。

十本实施方式与
一至六之一不同的是萃取压力为 33MPa。其它与
一至六之一相同。

十一本实施方式与
一至十之一不同的是分离压力 为5MPa。其它与
一至十之一相同。

十二 本实施方式与
一至十一之一不同的是C02流量 为6 10L/h。其它与
一至十一之一相同。

十三本实施方式与
一至十一之一不同的是C02流量 为8L/h。其它与
一至十一之一相同。

十四本实施方式与
一至十三之一不同的是萃取时 间为1.5小时。其它与
一至十三之一相同。

十五本实施方式的具有抗解脲支原体和人型支原体感染作用的花 椒提取物是由以下方法提取得到的将花椒粉碎至粉末状，装入超临界(X)2萃取釜中，萃取 温度为40V,分离温度为30°C，萃取压力为33MPa，分离压力为5MPa，0)2流量为8L/h，萃取 时间为1. 5小时，即得到花椒提取物。按照重量份数比称取20份本实施方式提取的花椒提取物与等量吐温80混勻，得 混合物，另取80份聚氧乙烯单硬脂酸酯(S40)，置水浴上加热使其溶化，加入到上述混合物 中，搅勻，灌入栓剂模中，冷却后取出，即得到花椒提取物中药制剂。将制得的花椒提取物中 药制剂用50°C水浴溶化，然后再稀释至相应浓度，进行试验。为说明本实施方式制备的花椒提取物的有效性和安全性，进行以下试验l、Balb/c小鼠生殖道解脲支原体标准株的感染及花椒提取物中药制剂干预试验， 具体试验方法如下a、取Balb/c小鼠的阴道分泌物进行培养，选取解脲支原体阴性者，正 常喂养，适应环境3天；b、小鼠颈部皮下注射苯甲酸雌二醇0. 2mg/次/只，每周一次，连续 四次；c、在第二周注射雌性激素的同时，用微量移液器吸取解脲支原体标准株20yL，置入 小鼠阴道约0. 5cm处，将解脲支原体标准株菌液注入小鼠阴道，每天接种一次，连续3天，每 次接种菌浓度为5Xl(f(XU/mL ；感染一周后，取阴道分泌物培养，解脲支原体阳性者，视为 造模成功；解脲支原体阴性者，继续接种菌株，量同前，1周后进行UU(解脲支原体)培养， 所有培养基均变为粉红色，显示造模成功；d、将造模成功小鼠随机分为模型组、治疗组、阳性对照组，每组10只，另设10只不感染解脲支原体的正常对照组，每天给予相应的药物治 疗，连续10天，给药M小时后，取阴道分泌物进行解脲支原体培养，观察药物对解脲支原体 感染的治疗作用。实验结果见表1。正常对照组给予相应的空白基质；模型对照组给予相应的空白基质；阳性对照组给予环丙沙星栓；治疗组阴道给予上述花椒提取物中药制剂40mg (其中含相当于花椒0. 2g的花椒 提取物)。表1小鼠生殖道解脲支原体的感染及花椒提取物中药制剂干预试验结果


一种具有抗解脲支原体和人型支原体感染作用的花椒提取物，涉及一种花椒提取物。本发明是要解决目前解脲支原体和人型支原体对抗生素的耐药性增加，而导致治疗效果差的问题。本发明的花椒提取物是由以下方法提取得到的将花椒粉碎至粉末状，装入超临界CO2萃取釜中，萃取温度为30～55℃，分离温度为25～45℃，萃取压力为15～35MPa，分离压力为4～6MPa，CO2流量为4～12L/h，萃取时间为1～2小时，即得到花椒提取物。本发明的花椒提取物无毒，具有抗解脲支原体和人型支原体感染作用及抗耐药解脲支原体和耐药人型支原体感染作用。应用于抗支原体感染领域。