一种药物组合物的新用途【技术领域】，尤其涉及一种药物组合物在制备用于治疗卵巢储备功能下降和/或促进子宫内膜发育的药物中的应用。[0002]卵巢储备功能下降是卵巢早衰的过渡阶段，是指卵巢产生卵子的能力减弱，卵泡质量下降，导致女性生育能力下降及性激素缺乏的病症，也称其为“卵巢老化”。临床表现为月经量少，月经稀发，甚至闭经，不孕，伴有不同程度的围绝经期症状，如潮热、多汗、面部潮红、情绪不稳定、性欲低下、阴道干涩、骨质疏松等。若不能及时纠正，有可能发展为卵巢早衰，从卵巢储备功能下降到卵巢早衰是个渐变的过程，有研究报道大约需要6个月~6年。[0003]随着社会的发展、文化观念、生活环境、工作压力等的改变，使卵巢储备功能下降发病率逐年增加。较早地发生生育力丧失和低雌激素水平己严重威胁妇女的生殖健康，同时也增加了妇女患骨质疏松症和冠心病的危险。囚此，卵巢储备功能低下的早期治疗较为重要。 [0004]现有技术中，对于卵巢储备功能下降的治疗，最常用的、有效的方法是性激素替代治疗。临床研究显示，性激素替代治疗可使患者出现周期性月经，改善患者生殖器官萎缩及围绝经期症状，减少骨质疏松的发生，其近期疗效明显，但是远期疗效不理想；而且，长期性激索替代治疗可明显增加子宫内膜癌、乳腺癌等疾病的发病率。因此，寻找更安全、有效的改善卵巢储备功能的方法正为临床医生所期待。[0005]中医学根据“肾藏精”、“肾主生殖”、“肾为先天之本”等理论，认为卵巢储各功能下降病机属于中医肾精亏虚、肾阴不足，给予填精补肾、滋阴养血的治疗方法，可明显地改善卵巢储备功能，促进月经的恢复，继而增加月经量，使部分不孕者受孕，改善潮热、多汗等围绝经期症状，其远期疗效可靠，且中药治疗安全有效，故采用中医药治疗卵巢储备功能低下具有重要的临床价值。[0006]子宫内膜薄为女性常见病症，女性在有一定雌激素的作用下，做超声检查时子宫内膜不能达到8毫米的厚度就判断为子宫内膜薄。导致子宫内膜薄的原因有全身性的，常见的原因有雌激素水平低、孕激素水平不足和存在排卵障碍和缺乏生长激素等，也有局部的原因，例如内膜损伤，粘连和缺如等，有一部分患者在人工流产后，子宫内膜尚未恢复，也会导致子宫内膜薄。子宫内膜薄将会影响受精卵着床，从而导致不孕，因此，如能找到疗效好副作用小的治疗手段将为大量不孕患者带来福音。[0007]目前对于子宫内膜薄的治疗方式主要有以下几种:
[0008](I)雌激素
[0009]西医方面的首选治疗方法是补充雌激素。有研究显示超长雌激素补充(extendedestrogen supplementation)能提高IVF-ET多次种植失败的子宫内膜薄女性的妊娠率；但另一项关于子宫内膜薄女性卵胞浆内单精子注射雌激素补充疗效研究结果显示，hCG日开始雌激素补充对临床妊娠率、胚胎移植率、流产率、子宫内膜厚度均没有提高。由此可见雌激素对有些低反应性子宫内膜薄患者的疗效有待进一步观察。
[0010](2)小剂量阿司匹林
[0011]阿司匹林对子宫血流的影响:小剂量阿司匹林可通过调节TXA2/PGI2平衡增加子宫血液供应，促使内膜发育，改善氯米芬造成的子宫内膜发育不良，改善子宫内膜的容受状态。亦有实验证明，小剂量阿司匹林对子宫内膜厚度没有影响，只是其增加子宫内膜整合素β3(整合素β 3表达下降有可能是导致薄性子宫内膜血管生成障碍的一个原因)的表达强度以及MVD (微血管密度值，microvascular density)水平,继而增加子宫内膜的容受性，提高胚胎种植率，并非增加子宫内膜厚度。
[0012](3)万艾可
[0013]昔多芬(sildenam),商品名万艾可(viagra),是一氧化氮样药物,其通过抑制磷酸二脂酶的活性来提高组织中的环磷酸鸟苷，作用于子宫平滑肌和子宫动脉平滑肌，改善子宫内膜的供血，促进子宫内膜生长，改善子宫内膜容受性。有研究显示，通过口服或阴道应用万艾可，可达到改善子宫内膜厚度和增加临床妊娠率的效果；但有研究对比了万艾可口服用药和阴道用药这两种使用方式的临床效果，结果显示阴道用药组(7/20)比口服用药组(0/20)的周期妊娠率高，但两组用药前后的子宫内膜厚度无差异。因此，万艾可增加子宫内膜厚度的作用仍需进一步研究。
[0014](4)己酮可可碱
[0015]甲基黄嘌呤衍 生物己酮可可碱(PTX)，是一种磷酸二酯酶抑制剂，抑制磷酸二酯酶对cAMP的分解，使细胞内保持高浓度的cAMP并对细胞因子的产生及作用起降调节作用。有研究显示，在IVF受卵周期，使用PTX和维生素E联合治疗，可增加子宫内膜厚度。其机制是PTX改善子宫内膜局部TNF- α浓度，改变子宫内膜的纤维化状态，对于使用高剂量雌激素仍不能达到满意内膜厚度的患者是一种可提供的治疗方案。但由于该研究的病例数目较少(只有18例)，且关于这方面的研究也较少，结果还需大规模的临床试验进行证实。
[0016](5)粒细胞集落刺激因子(G-CSF)
[0017]G-CSF对人类生殖成功起重要作用。它能改善种植胚胎、影响蜕膜巨噬细胞、影响排卵、卵巢功能、粒细胞功能，抑制自身免疫能够，减少不明原因的反复流产率。研究显示，G-CSF促进卵泡发育，增加胚胎移植后的存活率，降低流产率。宫腔内G-CSF灌注是目前治疗难治性子宫内膜薄的一种新型方法。但这种治疗方法提高辅助生殖技术中胚胎种植率及妊娠率的疗效有待进一步观察。
[0018]以上治疗方法从改善内膜血流或内膜相关活性因子方面提高子宫内膜薄性患者的受孕率，但对增加子宫内膜厚度的疗效并不十分明确。
[0019]中医理论认为，肾为先天之本，主生殖，肾与胞宫是一致的，女子生殖过程是以“肾”为中心。中医常采用补肾填精、益气养血活血为主的治疗，佐以温肾、养肝之剂，以达到增加子宫内膜厚度，增加子宫血流量，促进子宫内膜相关生物活性因子表达，从而改善内膜容受性的目的。并且在治疗不孕症方面积累了丰富的经验。因此，采用中医药治疗子宫内膜薄具有不可低估的广阔前景。
[0020]现有技术中，以制何首乌、地黄、制肉苁蓉、续断、桑寄生、钩藤、菟丝子、炒白术、黄
芩和白芍为主要原料的药物组合物，经动物功能试验证明:其对催产素所致大鼠流产有明显的保胎作用，对妊娠大鼠及正常大鼠离体子宫平滑肌收缩有明显抑制作用，并可明显对抗由催产素引起的子宫平滑肌强烈收缩，对宫内胎儿发育迟缓动物模型有明显保护作用；迄今还未见将其用于治疗卵巢储备功能下降及子宫内膜薄的报道。


[0021]本发明的目的在于提出以制何首乌、地黄、制肉苁蓉、续断、桑寄生、钩藤、菟丝子、炒白术、黄芩和白芍为主要原料的药物组合物在制备用于治疗卵巢储备功能下降和/或促进子宫内膜发育的药物中的新用途。
[0022]为达此目的，本发明采用以下技术方案:
[0023]在一个方面，本发明提供了一种药物组合物在制备用于治疗卵巢储备功能下降和/或促进子宫内膜发育的药物的用途，所述药物组合物包括制何首乌、地黄、制肉苁蓉、续断、桑寄生、钩藤、菟丝子、炒白术、黄芩和白芍。
[0024]作为优选,所述药物组合物包括:制何首乌50-110重量份、地黄50-110重量份、制肉苁蓉50-110重量份、续断50-110重量份、桑寄生50-110重量份、钩藤50-110重量份、菟丝子130-220重量份、炒白术50-110重量份、黄芩50-110重量份和白芍50-110重量份。
[0025]在具体实施方案中，所述药物组合物中，制何首乌的重量份数为50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105 或 110 重量份；地黄的重量份数为 50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105 或 110 重量份；制肉苁蓉的重量份数为 50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100,105 或 110 重量份；续断的重量份数为 50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105 或110重量份；桑寄生 的重量份数为50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105或110重量份；钩藤的重量份数为50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105或110重量份；菟丝子的重量份数为130、140、150、160、170、180、190、200、210或220重量份；炒白术的重量份数为 50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105 或 110 重量份；黄芩的重量份数为 50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105 或 110 重量份；白芍的重量份数为 50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105 或 110 重量份。
[0026]进一步优选地,所述药物组合物包括:制何首乌60-105重量份、地黄60-105重量份、制肉苁蓉60-105重量份、续断60-105重量份、桑寄生60-105重量份、钩藤60-105重量份、菟丝子120-210重量份、炒白术60-105重量份、黄芩60-105重量份和白芍60-105重量份。
[0027]更进一步优选地,所述药物组合物包括:制何首乌75重量份、地黄75重量份、制肉苁蓉75重量份、续断75重量份、桑寄生75重量份、钩藤75重量份、菟丝子150重量份、炒白术75重量份、黄芩75重量份和白芍75重量份。
[0028]更进一步优选地，所述药物组合物还包括一种或多种用于改善或治疗兼证的药物。如在不影响药物组合物效果的情况下，可加入一种或多种用于改善或治疗兼证的中药，例如:经前乳胀可加柴胡、桅子、黄芩等；心烦失眠可加合欢皮、夜交藤、龙牡等。
[0029]更进一步优选地,所述药物组合物还包括药学上能够接受的药物载体。比如,通过药物载体制成颗粒剂、口服液、片剂、胶囊、丸剂等形式，采用现有的工业化生产过程均能实现。
[0030]本发明还公开了所述药物组合物可采取任何现有技术的方法，并添加任何其它成分，用于制备治疗卵巢功能下降和/或促进子宫内膜发育的药物。[0031]上述应用中，作为优选，所述促进子宫内膜发育通过改善妇科内分泌功能及增加子宫内膜厚度来实现。
[0032]本发明的有益效果:
[0033]以制何首乌、地黄、制肉苁蓉、续断、桑寄生、钩藤、菟丝子、炒白术、黄芩和白芍为主要原料的药物组合物，应用于治疗卵巢功能下降时，可改善卵巢储备功能，促进生殖功能，具有填精补肾、养血调经的作用，改善患者生殖器官萎缩及围绝经期症状；应用于促进子宫内膜发育时，可改善妇科内分泌功能及增加子宫内膜厚度；为安全有效的中药制剂。

[0034]下面通过来进一步说明本发明的技术方案。
[0035]实施例1药物组合物的丸剂制备
[0036]配方:制何首乌75g、地黄75g、制肉苁蓉75g、续断75g、桑寄生75g、钩藤75g、菟丝子150g、炒白术75g、黄芩75g和白芍75g;
[0037]按上述配方的制备:将各原料粉碎成细粉、过筛、混匀，每IO O g粉末用炼蜜100-130g制成小蜜丸，6°Co辐射灭菌即得。
[0038]实施例2药物组合物的胶囊剂制备
[0039]配方:制何首乌80 g、地黄85g、制肉苁蓉80g、续断75g、桑寄生85g、钩藤65g、菟丝子170g、炒白术75g、黄芩75g和白芍80g;
[0040]按上述配方的制备:取菟丝子破碎，加70%乙醇加热回流提取二次，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩至相对密度1.05~1.10备用；其余九味药材加水煎煮两次，滤过，合并滤液并浓缩至相对密度1.05~1.15，加95%乙醇，使含醇量达50%，静置16小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05~1.20，与上述菟丝子提取液合并，加麦芽糖糊精，喷雾干燥，得干浸膏粉，加硬脂酸镁，制粒，装入胶囊即得。
[0041]实施例3药物组合物的片剂制备
[0042]配方:制何首乌95g、地黄95g、制肉苁蓉90g、续断95g、桑寄生96g、钩藤95g、菟丝子200g、炒白术100g、黄芩100g和白芍95g ；
[0043]按上述配方的制备:取菟丝子破碎，加70%乙醇加热回流提取二次，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩至相对密度1.05~1.10备用；其余九味药材加水煎煮两次，滤过，合并滤液并浓缩至相对密度1.05~1.15，加95%乙醇，使含醇量达50%，静置16小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05~1.20，与上述菟丝子提取液合并，加麦芽糖糊精，混合、干燥、制粒、压片即得。
[0044]实施例4药物组合物的口服液制备
[0045]配方:制何首乌70g、地黄75g、制肉苁蓉80g、续断75g、桑寄生70g、钩藤75g、菟丝子135g、炒白术70g、黄芩75g和白芍75g;
[0046]按上述配方的制备:取菟丝子破碎，加70%乙醇加热回流提取二次，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩至相对密度1.05~1.10备用；其余九味药材加水煎煮两次，滤过，合并滤液并浓缩至相对密度1.05~1.15，加95%乙醇，使含醇量达50%，静置16小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05~1.20，与上述菟丝子提取液合并，喷雾干燥，得干浸膏，然后向浸膏中加入蔗糖、苯甲酸钠，加热使溶解，再加蒸馏水至所需体积，冷藏24小时，过滤，灌装，灭菌，包装即得。
[0047]实施例5药物组合物在卵巢储备功能下降中的治疗作用
[0048]试验方法:
[0049]一般情况:
[0050]临床上选择符合卵巢储备功能下降的患者50例，年龄19-39岁，最小19岁，最大39岁，病程最短6月，最长5年。随机分为2组，治疗组25例，年龄33.27 士 5.12岁，病程3.12 士 0.48年；对照组25例，年龄33.34 士 4.73岁，病程2.97 士 0.38年；两组年龄病程无差异(p>0.05)，具有可比性。
[0051]诊断标准:
[0052](1)症状:月经后期，或经量过少，或闭经，或不孕。
[0053](2)生化检测:月经周期第3天取静脉血，测定血清激素，10mIU/ml〈FSH(卵泡刺激素)<40mIU/ml，FSH/LH (黄体生成素)比值>3.6，雌二醇(E2) >80pg/ml，三者具备其一，可提示卵巢储备功能下降。
[0054]纳入标准:
[0055](I)符合上述诊断标准。
[0056](2)治疗前I个月未使用药物者。
[0057]排除标准:
[0058](I)月经过少，或月经后期，或闭经，或不孕是由于先天性生殖器官发育异常，或后天器质性疾病及损伤而导致者。
[0059](2)高泌乳素血症、多囊卵巢综合征。
[0060](3)己知或可疑有乳癌或有乳癌病史者、已知或可疑有雌激素依赖性的肿瘤、血栓性疾病、肝功能不正常者以及精神病患者。
[0061 ] (4)近3个月接受性激素类药物治疗者。
[0062]治疗方案:
[0063]治疗组:采用上述四个实施例所制的制剂，其中实施例1为7例，实施例2-4各为6例。
[0064]对照组:采用激素治疗，口服戊酸雌二醇Img qd连服21d，后5天加安宫黄体酮IOmg qd，停药3-7天月经来潮，再同上服药治疗，连续3个月经周期。
[0065]观察指标:
[0066](1)临床疗效观察
[0067]疗效标准:参照中华人民共和国中医药行业标准一中医妇科病证诊断疗效标准。
[0068]1)停药3月疗效标准:
[0069]痊愈:经量、经期、周期恢复正常，能维持3个月经周期以上；
[0070]好转:经量、经期、周期虽恢复正常，但不能维持3个月经周期以上；
[0071]无效:症状无改善。
[0072]2)停药6月疗效标准:
[0073]痊愈:经量、经期、周期恢复正常，能维持6个月经周期以上；
[0074]好转:经量、经期、周期虽恢复正常，能维持3-5个月经周期；[0075]无效:症状无改善。
[0076](2)性激素
[0077]月经周期第3天取静脉血，测定血清激索，观察治疗前及治疗后3个月、6个月血清FSH, FSH/LH比值以及E2的变化。
[0078](3)临床症状
[0079]观察治疗前及停药后6个月时潮热、多汗、面部潮红、情绪不稳定、失眠、性欲低下等症状的改善情况。
[0080]研究结果:
[0081 ] 停药3个月:对照组痊愈18例，好转5例，无效2例，总有效率92 % ；治疗组痊愈19例，好转3例，无效3例，总有效率88%。两组总有效率无显著性差异(P>0.05)。
[0082]停药6个月:对照组痊愈6例，好转7例，无效12例，总有效率52% ;治疗组痊愈10例，好转10例，无效5例，总有效率80%，对照组和治疗组总有效率有显著性差异(P〈0.05);四种制剂的平均有效率为79.75%，其中实施例1组7例中痊愈3例，好转3例，无效I例，有效率86% ;实施例2组6例中痊愈3例，好转2例，无效I例，有效率83% ;实施例3组6例中痊愈2例，好转3例，无效I例，有效率83 % ；实施例4组6例中痊愈2例，好转2例，无效2例，有效率67 %。因此，本发明的中药组合物按重量份配比的实施例中，以实施例1的配比为最佳。
[0083]停药3个月:FSH、LH、E2两组之间比较，组间无差异；与治疗前比较均有统计意义。停药6个月:治疗组FSH明显低于对照组(P〈0.01)，而E2明显高于对照组(P〈0.01);表明:本发明药物组合物制剂的近期疗效与性激索替代疗效相当，远期疗效优于对照组，结果见表1 (治疗组和对照组均为均数士标准差)。此外本发明治疗过程中未见明显副作用，随访6月未增加子宫内膜癌、乳腺癌等疾病的发病率。
[0084]表1、两组内分泌激素比较
[0085]