用于治疗银屑病的组合物制作方法

C·M·米雅里斯曹

2002年5月1日

2000年2月22日

1999年2月22日

胎盘组织治疗中心

A61P17/06GK1347324SQ00805436

银屑病 组合 治疗 用于

1.用于治疗银屑病的组合物，为了应用，其含有来自人类胎盘的乙醇提取物作为有效成分，并含有适当的赋形剂2.根据权利要求1和2的组合物，其中该来自人类胎盘的乙醇提取物基本上由不饱和脂肪酸例如棕榈油酸和油酸，以及多不饱和脂肪酸例如亚油酸、花生四烯酸和二十碳二烯酸组成3.根据权利要求1至3的组合物，其中对于每100g组合物，在水溶性赋形剂中含有大约59m1该乙醇提取物4.根据权利要求1至4的组合物，其中它是水溶性凝胶

本发明涉及人类医学的分支和皮肤病学，具体地涉及从人类胎盘起始获得的具有调节皮肤再生速度活性并由此可以用于银屑病治疗的组合物，以及获得所述组合物的方法现有技术银屑病并不是一种最近才发现的疾病它曾经被分类为希腊麻疯病，而且似乎曾经存在于征服前的墨西哥(Daune，M.；FSCHS，P.P.LaRecherche(1980)，11116-1066；国际皮肤病学杂志(International Journal of Dermatology)，第36卷，第4期，1977年4月)所有地域和所有种族均受到该疾病的侵袭，并且该疾病可以连续几代在家族中出现(国际皮肤病学杂志，第36卷，第4期，1977年4月；Lerner，A.B.等，Invest.Dermatol.1975，20(2)299-314，1953)该疾病的开始常与皮肤的表面损伤例如烧伤和抓伤有关其它因素例如低温度、感染、压力或药物会加速或恶化银屑病物理外伤可能引起血管中的血管生成因子改变、皮肤真菌病(epidermatopoyesis)、嗜中性细胞chimiotasis和所谓的组织银屑病反应(Moroni，P.等，Derm.Beruf.Umwelt，36(5)，第163-164页，1988)已经报道气候因素例如寒冷会对银屑病产生不利影响在进行的一些研究中发现，在气候干燥而且湿度低的非洲，银屑病的频率更大(Faber，E.N.等，自然流行病学，历史和遗传银屑病(NaturalEpidemiology.History and genetic psoriasis)，第二版，第231页，Marcel Depper编，纽约，1991)已非常清楚地知道压力能引发或恶化银屑病，但是其机制仍不清楚，然而基于精神神经免疫学(psiconeuroimmunology)的研究可以对此进行解释(Moroni P.等，Derm.Beruf.Umwelt，36(5)，第163-164页，1988)专门的治疗会导致病变消失，但几乎一定会再次复发，而且在每次治疗中存在逐渐丧失治疗效果的趋势(Lerner，A.B.等，Invest.Dermatol.1953，20(2)299-314，1953；Roenigk，H.H.Jr.等，Arch.Dermatol.113(12)1667-1670，1977；Frappazz，A.，等，Env.J.Dermatol.1993，3第351-354页；Mozzanica，N.，等，Acta Dermatol.Venereol.1994，186第171-172页；Ortonne，J.P.New Dermaytol.1994，13第746-751页；Panizonni R.Schweizerische Rundschav fur Medizin Praxis 1995，84第649-653页；Kirsner，R.S.Am.Fam.Phys.1995，52第237-240页)已知目前本领域中有多种制剂例如石蜡或乙醇溶液中的松脂被用于银屑病的治疗从上个世纪起antialine就被用于该疾病的治疗，而且在其中一直占据着重要位置，但antialine的缺点是会对皮肤产生刺激1925年引入了紫外辐射，并一直被单独地或联合其它药物治疗一起使用，但这种治疗也有其不利的副作用尽管补骨脂素已被证实有毒性，但在过去也曾被用于该疾病的治疗一般地，局部施用皮质类固醇在某些特定病例中是有用的，但反弹趋势限制了它的使用近来，已开始使用视黄醛衍生物、一些抗代谢物如氨甲蝶呤(metotrexate)、硫代鸟嘌呤(thioguamne)和其它物质，但收效甚微从第3世纪起，有报道在中国采用胎盘作为生物学刺激剂1945年起，苏联研究人员Filatov开发并加强了一种从冷冻保存的动物组织和植物中分离具有治疗性质的物质的方法，他将该方法命名为组织疗法在该方法中，胎盘占据了一个重要位置(Filatov，V.编，Medicina Medguis.URSS，1945)1963年，Orechkin基于在300个皮肤感染患者上进行的研究，得出结论在组织治疗的作用下，38.5％的病例有或多或少的明显改善而其中25％可以获得治愈(Orechkin，献给V.Filatov的组织治疗方法第30周年纪念日的科学大会Material E.，Kiev12，1963)过去这些生物来源的刺激物对银屑病的治疗作用的机制被忽视了Makarov和Romani指出在这些生物学刺激剂的作用下肾上腺皮质激素类的形成获得加强，而且依据使用大鼠爪获得的实验理论他们阐明了这些刺激剂还具有抗炎性作用，由此能够表现出与这些激素相似的作用(Makarov和Romani，Comp.Rend.Soc.Biol.1951，19664-626)用于该疾病治疗的疗法根据疾病的定位、严重性、持续时间、以前的治疗情况和患者的年龄而有不同在用于对抗银屑病的许多药物来源中，胎盘的组织治疗是最有效的之一，然而也是了解较少的一种发明公开本发明涉及从人类胎盘获得的提取物，该提取物被掺入水溶性凝胶中，构成已证明对银屑病的治疗有效的药物尽管这些刺激物优选采用肠胃外途径施用，但在本发明中含有所述有效成分的该水溶性凝胶可以采用局部施用因此，本发明涉及含有从人胎盘获得的不饱和脂肪酸与多不饱和脂肪酸的混合物作为有效成分的水溶性凝胶，其中当该有效成分在施用部位被皮肤吸收后，它会参与调节表皮再生速度并产生抗银屑病作用为了获得对于银屑病治疗有用的该有效成分，进行以下操作-从冷冻胎盘开始，首先通过洗涤将羊膜和脐带分离开，用大量水再次洗涤，分离出胎盘的绒毛叶；-将绒毛叶团块粉碎成直径大约12mm的颗粒； -通过在水中搅动和之后以纱布过滤对该固体进行再次洗涤该固体，然后再次粉碎直到颗粒大小达到直径2-6mm；-获得的团块在每个绒毛叶团块1-4倍体积的乙醇中搅拌1-3小时，之后通过纱布过滤；-将得到的液体旋转蒸发，并重新溶解在42比例的氯仿∶甲醇混合物中，再浸泡24小时；-2000rpm离心获得的产物，将上清液旋转蒸发干，最后重新溶解在1∶1比例的乙醇中为了将该有效成分制备成水溶性凝胶制剂，将获得的25.5-55.8g人类胎盘提取物溶解在由35-50g纯净水、0.10-0.30g羟苯甲酸甲酯和0.01-0.05羟苯甲酸丙酯组成的水溶性赋形剂中，其中在加入该有效成分之前，先向该赋形剂中搅拌加入2-5g羧甲基纤维素和5-20g甘油通过确定人类胎盘提取物PE-100的组成，发现它基本上是由不饱和脂肪酸如棕榈油酸和油酸，以及多不饱和脂肪酸如亚油酸、花生四烯酸(arachidonic acid)和二十碳二烯酸(eicosadienoic acid)组成的这些多不饱和脂肪酸与该疾病的治疗密切相关，它们可以抑制表皮细胞的过度繁殖它们被治疗的患者接受证实，可以将该组合物广泛地用于所提出的应用中，因为迄今为止还没有报道过其它可以治愈银屑病而又与本发明的组合物一样无害的产品根据从患者获得的临床报告，该药物不仅没有局部毒副作用而且也没有毒副作用的征兆为了确定该药物的有效性，进行开放非随机研究，用从该胎盘提取物获得的该水溶性凝胶治疗大量银屑病患者组织治疗胎盘中心(Histotherapy Placental Center)控制了其中一组实验，其中评价了总共400名患者用该药物进行2年的治疗，观察到在该阶段期间有78％的治疗患者出现令人满意的改善另一临床研究是采用医院内的26名确诊银屑病患者进行的在治疗评估中有84.6％的患者表现出完全清除了损伤，该实验获得了满意的结果1990年，研究者开始接触受到前苏联(USSR)切尔诺贝利发生的核事故影响的古巴儿童，这些儿童几乎全部患有银屑病对其中56名患者进行了研究，这些患者对于其它药物治疗不起反应，而且正如文献中所描述的，家族病例一般是难于治疗的给这些患者进行3个月的治疗，治疗结束时这些治疗患者的90％以上有临床改善同样地，给在其它医院治疗的100名银屑病患者施用本发明的产品总结为期6年的试验结果，78％的病例该疾病减轻并且没有出现继发反应或症状，而其中50％没有发生疾病复发实施例实施例1提取物PE-100的加工过程的描述用大量的水清洗化冻的胎盘，除去脐带和羊膜，仅保留绒毛叶在粉碎机中粉碎绒毛叶团块直到获得直径8-12mm的颗粒利用滚动槽将该固体物移动到反应器区域，然后加至1600L反应器，向该固体中加入2-4体积的未净化水；搅拌2-8分钟，采用纱布过滤，之后粉碎直到获得直径2-6mm大小的颗粒然后，称重该固体物，并在该1600L反应器中装入乙醇(每kg绒毛叶1-4倍体积的乙醇)搅拌该混合物1-3小时，然后将其通过纱布旋转蒸发产生的液体，并将固体物重新溶解在4∶2比例的氯仿∶甲醇混合物中，浸泡24个小时之后2000rpm离心，将上清液旋转蒸发干，然后重新溶解在1∶1比例的乙醇中，以此方法获得的有效成分命名为胎盘提取物-100(PE-100)当该PE-100获得化学、生物学和微生物学控制实验室的批准后，将其用于制备所述水溶性凝胶实施例2制备含有人类胎盘提取物的水溶性凝胶利用1巴真空将用于该制备的纯净水装入反应器Olsa中温热并搅拌羟苯甲酸甲酯和羟苯甲酸丙酯直到它们溶解在该程序开始之前，将羧甲基纤维素和甘油一起混合1-3小时，以获得恰当的澄清当所述溶液冷却至30-60℃后，加入该羧甲基纤维素与甘油，保持持续的搅拌，之后在轻柔搅拌下加入PE-100直到形成均一凝胶，取样以控制该过程一旦在技术领域进行过了检查，取一些样品进行化学、生物学和微生物学控制检查，以便确定该批产品的质量实施例3通过局部使用将含有人类胎盘提取物的凝胶用于银屑病治疗实施例2中获得的水溶性凝胶作为局部施用药物用于100名银屑病患者，这些患者均来自Havana市综合医院“Calixto Garcia”的皮肤病科用手指将该凝胶局部施用在银屑病伤口上并抹开形成一薄层，但不要搓揉每隔8小时施用一次，其中一次施用应伴随有之前和之后的30分钟红外线照射在2年的试验结束时，结果有78％的病例表现出该疾病的减轻，并且没有出现局部或全身副反应，而50％未发生疾病复发从本发明组合物治疗的患者获得的结果的一个例子显示在