专利名称：苹果酸铬和蜂胶的组合物及其用途的制作方法糖尿病是一种与遗传因素有关又与多种环境因素相关的慢性全身性疾病，主要表现为高血糖和糖尿，已被世界卫生组织列为三大疑难病之一。随着经济的发展、人类生活水平的提高和环境污染的加剧，糖尿病的患病率呈上升趋势。据国际糖尿病联盟会议资料 (Shaw, J. Ε. , Sicree, R. Α., Zimmet, P. Ζ. Global estimates of the prevalence of diabetes for 2010 and 2030. Diabetes Research and Clinical Practice. 2010,87, 4-14.)，目前全世界有2. 85亿成人糖尿病患者，其中9(Γ95%为2型糖尿病，预计在 2010-2030年之间，发展中国家成年人糖尿病患病率的增长率将达69%，远高于发达国家 (20%),中国为第二大糖尿病国家，2010年糖尿病患者已达4300万人，预计到2030年将达 6300万人，且有向青少年扩大的趋势。糖尿病还可引起各种严重的并发症，如肾病、视网膜病变和下肢血管病变等致残致死性疾病。因此降血糖药物和功能食品的研究开发已成为研究热点之一。目前糖尿病的治疗主要根据糖尿病的不同阶段，采用抑制糖吸收、促进糖代谢的药物进行治疗。除注射胰岛素外，还有口服磺脲类、双胍类和α-糖苷酶抑制剂等降血糖药物，但这些治疗方法不能根治糖尿病，也无法阻止糖尿病并发症的发生，且长期使用，易产生毒副作用及耐药性，例如长期服用磺脲类药物易于导致低血糖、食欲减退、尿酮症和酸中毒等，双胍类易于造成乳酸中毒，长期服用增加肝肾负担等。因此，开发高效、安全的降血糖药物和功能食品是当务之急。铬(III)对胰岛素的结构、功能及靶组织细胞状态均有明显影响，补铬可增强胰岛素活性，调节糖代谢、脂代谢和蛋白质代谢。有研究报道糖尿病患者血清、头发和尿中的铬显著低于健康人。当体内缺铬时，胰岛素水平下降，通过糖代谢诱发脂代谢紊乱，补铬胰岛素活性强，从而调节体内血脂水平；铬还可增强脂蛋白酶和卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性，这两种酶都参与了高密度脂蛋白的合成，从而使血液中高密度脂蛋白增加。 (Yang, X. , Palanichamy, K. , Ontko, Α. C. , Rao, Μ. N. Α. , Fang, C. Χ. , Ren, J. , Sreejayan, N. A newly synthetic chromium complex- chromium(phenylalanine)3 improves insulin responsiveness and reduces whole body glucose tolerance. FEBS Letters. 2005,579, 1458-1464 ； Kro 1, Ε. , Krejpcio, Ζ. Chromium(III) propionate complex supplementation improves carbohydrate metabolism in insulin-resistance rat model. Food and Chemical Toxicology. 2010,^, 2791-2796.)。但无机铬吸收率低且毒性大，而有机铬配合物吸收率高且安全。目前市场上的补铬强化剂主要为吡啶酸铬， 与无机铬相比，吡啶酸铬更容易被吸收，可更有效地调节糖脂代谢，减少体内脂肪，吡啶酸铬在美国成为继维生素C，维生素E和钙元素之后的四大单一营养元素补充剂之一。尽管吡啶酸铬的效果已被公认，其安全性一直受到质疑，有文献报道长期服用吡啶酸铬会氧化损伤DNA。本发明人以苹果酸和CrCl3 · 6H20为原料合成了苹果酸铬配合物，研究发现该有机铬可降低四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的血糖值，且急性毒性为实际无毒级(中国专利号CN 101863755 A,苹果酸铬配合物及其制备方法和用途)。糖尿病患者由于严格饮食控制，机体对食物的吸收及服用药物等原因，造成患者对一些功能性因子的摄入量不足及机体的储备量不足，致使机体组织无法保证人体正常的代谢活动，因此单一的药物并不能全面控制和治疗糖尿病。蜂胶是蜜蜂从胶原植物生枝腋芽的树脂类物质与蜜蜂的上颚腺分泌物和蜂蜡等加工而成的一种具有芳香气味的胶状物。蜂胶中含有30多种人体必需的微量元素和丰富的萜烯类、黄酮类、酯类物质。有研究报道蜂胶具有增强免疫力和很强的调节血糖的功能。(孟晓英，王玉华，魏春琴.蜂胶药理作用研究概述.中国现代药物应用4， 245)。因此本发明人研究苹果酸铬和蜂胶的组合物的降血糖活性，以达到降血糖的协同增效作用和机体免疫力的提高，从而达到全面控制和治疗糖尿病的效果。有关苹果酸铬和蜂胶的组合物及其降血糖方面的用途至今未见国内外文献报道，也未见相应专利公开。
本发明的目的是为解决上述背景的不足，提供一种苹果酸铬和蜂胶的组合物。本发明提供一种苹果酸铬和蜂胶的组合物，由苹果酸铬和蜂胶组成，按重量组分苹果酸铬为17 102份，蜂胶提取物为500 3000份。本发明所述的蜂胶提取物为(X)2超临界提取物或乙醇提取物，属于一级品，其中乙醇提取物含量大于95%，总黄酮含量大于20%。水分含量及铅的含量都符合国家标准(GB/ T24283-2009)。本发明的组合物中的苹果酸铬配合物是按照中国专利CN 101863755 A实施例2的方法制备的。本发明进一步提供苹果酸铬和蜂胶的组合物在制备用于抗糖尿病药物中的用途。根据本发明，苹果酸铬和蜂胶的组合物可以组合物形式使用，所述组合物主要以口服的给药形式使用，口服给药形式主要有片剂、胶囊、颗粒剂和悬浮液等。根据本发明，本发明的组合物可按制药领域常规方法制备，例如将苹果酸铬和蜂胶提取物和/或药用载体或赋形剂混合。根据本发明，苹果酸铬和蜂胶的组合物可用于治疗和预防糖尿病药物和功能食品的领域。本发明中，将苹果酸铬和蜂胶的组合物用于四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的降血糖活性试验中，结果显示，本发明的苹果酸铬和蜂胶的组合物可以显著降低糖尿病小鼠的血糖值，且比单独使用苹果酸铬或蜂胶提取物的效果显著，达到协同增效的作用。本发明中的小鼠急性毒性试验采用最大给药量试验观察14d，未见明显毒性反应， 结果表明苹果酸铬和蜂胶的组合物对脏器指数，血液学和血液生化指标均无显著影响，其对雌、雄小鼠经口半数致死量LD5tl均大于5000mg/kg。根据《食品安全性毒理性评价程序和方法》中急性毒性分级标准规定，苹果酸铬和蜂胶的组合物对小鼠急性经口毒性达到实际无毒级。本发明的优点在于本发明涉及的苹果酸铬和蜂胶的组合物具有明显的降血糖活性，并且较单独使用的苹果酸铬或者蜂胶提取物的降血糖效果更好。本发明涉及的苹果酸铬和蜂胶的组合物未出现明显的急性毒性反应，对小鼠急性经口毒性达到实际无毒级。可用于治疗和预防糖尿病的药品或功能食品。 1.1动物雄性ICR小鼠，体重20 士 2g，清洁级，购于扬州大学比较医学中心，合格证编号 SCXK (苏)2007-0001。实验前检疫5d，饲养稳定为21 士 1°C，湿度为60 士 5%。1.2药品与试剂苹果酸铬和蜂胶的组合物由苹果酸铬和蜂胶组成。实施例1中的苹果酸铬和蜂胶的组合物重量组成比17g的苹果酸铬和500g的蜂胶提取物，具体给药剂量为(1.7 mg苹果酸铬+ 50 mg蜂胶提取物)/kg小鼠体重。实施例2中的组合物重量组成比34g的苹果酸铬和IOOOg的蜂胶提取物，具体给药剂量为(3. 4 mg苹果酸铬+ 500 mg蜂胶提取物)/kg小鼠体重。实施例3中的组合物重量组成比102g的苹果酸铬和3000g的蜂胶提取物，具体给药剂量为(10. 2 mg苹果酸铬+ 300 mg蜂胶提取物)/kg小鼠体重。苹果酸铬配合物是按照中国专利CN 101863755 A实施例2的方法制得，蜂胶提取物属于一级品，其中乙醇提取物含量大于95%，总黄酮含量大于20% (芦丁为对照品，紫外可见分光光度法测定)，水分含量及铅的含量都符合国家标准(GB/TM^3-2009)。四氧嘧啶，合肥博美生物科技有限责任公司；二甲双胍，北京太平洋制药有限公司。葡萄糖、苯酚和浓硫酸等均为分析纯，购于国药集团化学试剂有限公司。1.3主要仪器和设备稳豪型血糖仪及其配套的血糖试纸


本发明苹果酸铬和蜂胶的组合物及其用途，属于医药技术领域。该组合物含有苹果酸铬和蜂胶提取物，其中苹果酸铬占重量组分为17~102份，蜂胶提取物占重量组分500~3000份。由于苹果酸铬和蜂胶提取物的协同增效作用，苹果酸铬和蜂胶的组合物的降血糖效果比单独使用苹果酸铬或蜂胶提取物的效果显著。本发明经小鼠急性毒性试验，未见明显毒性反应，本发明对小鼠急性经口毒性达到实际无毒级。本发明可广泛应用于糖尿病的治疗和预防并可制成多种剂型的药物或功能食品。