专利名称：一种加味藿香软胶囊的质量控制方法 目前市场上使用的是加味藿香正气丸，临床上主要用于外感风寒、内伤湿滞、头痛昏重、脘腹胀痛、呕吐泻泄等症，但该制剂为传统剂型且质量可控性差。本发明公开了一种加味藿香软胶囊，并对软胶囊的制备工艺，质量控制方法做了研究，使该剂型具有更好的可控性和稳定性。
本发明目的在于提供一种加味藿香软胶囊的制备方法及质量控制方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的。处方广藿香 300-350重量份紫苏叶90-110重量份白芷90-110重量份 白术(炒) 180-220重量份陈皮180-220重量份半夏(制) 180-220重量份厚朴(姜制) 180-220重量份茯苓 90-110重量份桔梗180-220重量份甘草 180-220重量份大腹皮 90-110重量份。制法以上十一味，厚朴用50-80％乙醇提取2-3次，每次1-2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.15(80℃)的清膏A；广藿香、紫苏叶、陈皮、白术、白芷水蒸气蒸馏提取挥发油，蒸馏后的水溶液滤过，另器收集；药渣与半夏、茯苓、桔梗、甘草、大腹皮、生姜30-35重量份及大枣50-55重量份加水煎煮2-3次，每次1-2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至80℃下相对密度为1.12的清膏，离心，上清液浓缩至相对密度为1.15(80℃)的清膏B；合并清膏A和B，浓缩至相对密度为(80℃)1.30-1.35的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，过筛；另取食用植物油340-380重量份，加蜂蜡等适量，熔化，待温，加入上述粉末及挥发油，经胶体磨磨匀，压制成软胶囊；每粒软胶囊内容物重0.6g，相当于原药材2.157g。本发明软胶囊的制法还可以为以上十一味，厚朴用50-80％乙醇提取2-3次，每次1-2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.15(80℃)的清膏A；广藿香、紫苏叶、陈皮、白术、白芷水蒸气蒸馏提取挥发油，蒸馏后的水溶液滤过，另器收集；药渣与半夏、茯苓、桔梗、甘草、大腹皮、生姜30-35重量份及大枣50-55重量份加水煎煮2-3次，每次1-2小时，合并煎液，与上述水溶液合并，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.12(80℃)的清膏，离心，上清液浓缩至相对密度为1.15(80℃)的清膏B；将清膏A减压干燥，粉碎成细粉，过筛。将清膏B，浓缩至相对密度为1.30-1.35(80℃)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，过筛。混匀上述浸膏粉，加入挥发油及精制植物油、蜂蜡适量，经胶体磨磨匀，压制成软胶囊。软胶囊制剂成型工艺软胶囊胶皮溶液的制备取一定1～2∶0.01～0.05∶1～2的甘油、棕氧化铁与水，加热至70-80℃，混合均匀，加入1～2份明胶搅拌，熔融，保温静置1-2小时，使泡沫上浮，刮去上浮的泡沫，用洁净白布滤过，保温待用；开动软胶囊机，布展胶皮，用石蜡作为内容物进行丸重的调试，调试合格后，放尽石蜡油，将药液加入机器顶部贮液器内，开动药物进料阀，含药物的软胶囊即压制成型，将压制成型的软胶囊胶粒送入装有除湿装置的干燥室内于25-30℃温度下进行干燥，让胶皮内水分缓缓蒸发，并不时轻轻搅动胶粒，以防止粘连，干燥时间为4-6小时；用乙醇洗涤软胶囊，洗涤后的软胶囊再次送入干燥室，在30-35℃温度下干燥约12-18小时，即得软胶囊成品。
本发明软胶囊质量控制方法鉴别取本发明软胶囊内容物2g，置500ml圆底烧瓶中，加水200-300ml，混匀，连接挥发油测定器，自测定器上端加水至刻度，并溢流入烧瓶中为止，再加入石油醚1-3ml，连接回流冷凝管，加热至沸，并保持微沸1-3小时，放冷，分取石油醚层作为供试品溶液；另取广藿香油对照品加石油醚制成每1ml含0.1ml的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以8-12∶0.8-1.2石油醚—醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％香草醛硫酸试液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；取本发明软胶囊内容物2g，加乙醚振摇提取2-3次，每次20ml，弃去乙醚液，残渣挥尽乙醚，加水40ml使溶解，加水饱和的正丁醇萃取2-3次，每次30ml，合并正丁醇液，滤过，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮甙对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2ul，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以0.8-1.2∶0.8-1.2丙酮-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝试液，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；取本发明软胶囊内容物2g，加石油醚20-40ml，超声处理20-40分钟，弃去石油醚，挥干，残渣加氯仿20-30ml和盐酸1-3ml，置水浴上加热回流1-1.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1-3ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草次酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以28-32∶12-16∶0.8-1.2甲苯-醋酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法测定色谱条件与系统适应性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；72-76∶23-26甲醇—水为流动相；流速1ml/min；检测波长294nm；柱温为室温；理论塔板数按厚朴酚峰计算应不低于3800；对照品溶液的制备，精密称取厚朴酚与和厚朴酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含厚朴酚25-35ug、和厚朴酚20-30ug的混和溶液，混匀，即得；供试品溶液的制备，精密称取本发明软胶囊约2g，精密加50-70％乙醇15-25ml，称重，超声处理30-50分钟，再称重，补足溶剂减失的重量，充分振摇，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，至50ml量瓶中，用50-60％乙醇稀释至刻度，摇匀，即得；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明软胶囊含厚朴以厚朴酚(C18H1802)与和厚朴酚(C18H1802)的总量计，不得少于0.9mg。
加味藿香正气软胶囊药效试验证明，加味藿香正气软胶囊口服后，能增加正常小鼠的小肠推进功能；对阿托品所致小鼠小肠运动抑制模型，加味藿香正气软胶囊口服后有明显的兴奋作用；对新斯的明所致小鼠小肠运动兴奋模型，加味藿香正气软胶囊有明显的抑制作用。表明加味藿香正气软胶囊对小鼠小肠运动具有双向调节作用。加味藿香正气软胶囊有明显的镇痛作用，对醋酸所致小鼠扭体反应有明显的抑制作用。加味藿香正气软胶囊有明显的止泻作用，能明显延长番泻叶所致小鼠腹泻的潜伏期，减少小鼠在一定时间内的腹泻次数。对CUS04所致家鸽呕吐模型，该药可以延长呕吐潜伏期，减少呕吐次数。
实验例1 广藿香、紫苏叶、陈皮、白术、白芷提取工艺研究对广藿香、紫苏叶、陈皮、白术、白芷的挥发油提取利用率作为考察指标，选用L9(34)正交方案，考察浸泡时间、粉碎粒径、加水量、提取时间四个因素，结合生产实际，每个因素选取3个水平，见表1。
表1 试验因素水平表 实验及数据称取广藿香150g、紫苏叶50g、陈皮100g、白术100g、白芷50g五味药提取挥发油，以提取利用率为指标，见表2。
表2 正交实验设计表(L9(34))

附经检验，广藿香挥发油含量2.11％，紫苏叶挥发油含量0.73％，陈皮挥发油含量为1.94％，白术挥发油含量为0.52％，白芷挥发油含量为0.4％。由R值可知，因素A对实验结果影响甚微，所以以因素A的离均差平方和作为误差估计。用以对其他因素进行显著性检验，见表3。
表3 方差分析表

结论由表3可知，因素B、D对实验结果影响显著，由表2可推知，B1D2为最佳工艺，所以五味药材挥发油的提取工艺选择将药材粉碎成粒径为0.5cm左右的粗粉，加水适量，水蒸气蒸馏8小时。
实验例2 厚朴(姜制)提取工艺研究用高效液相色谱法测定厚朴(姜制)中厚朴酚、和厚朴酚的含量，选用L9(34)为正交方案，考察乙醇浓度，浸泡时间，提取次数、乙醇用量、提取时间各个因素，结合生产实际，每个因素选取3个水平，并将提取次数、乙醇用量、提取时间合并为一个因素，试验方案见表4。
表4 试验因素水平表

实验及数据按实验设计方案要求称取厚朴(姜制)200g进行提取，用高效液相色谱法测定厚朴(姜制)中厚朴酚和厚朴酚的含量，以提取利用率为考察指标，见表5。
表5 正交试验设计表

附经检验，厚朴(姜制)中厚朴酚与和厚朴酚总量为2.1％。
D列为空白列，所以以D列作为试验误差进行显著性检验，见表6。
表6 方差分析表

结论由表6可以看出，对实验结果显著性影响的是A，其次是因素C，因素B对实验影响不显著，据表5显示，厚朴(姜制)提取的最佳工艺是A3C3，即用60％乙醇提取三次，第一次6倍量60％乙醇，第二次4倍量60％乙醇，第三次用4倍量60％乙醇，每次1小时。
实验例3 其余药味的提取工艺研究对半夏、茯苓、桔梗、甘草、大腹皮、大枣、生姜及提取挥发油后的广藿香、紫苏叶、陈皮、白芷、白术共十二味药，选用L9(34)正交方案，考察水煎次数、加水量、水煎时间，浸膏密度，离心速率，离心时间各因素，结合生产实际，每个因素设计三个水平，并将水煎次数、加水量和水煎时间合并为一个因素，试验方案见表7。
表7 试验因素水平表 实验及数据按实验方案要求称取按处方比例的半夏、茯苓、桔梗、甘草、大腹皮、大枣、生姜及提取挥发油后的广藿香、紫苏叶、陈皮、白芷、白术十二味药共890g进行煎煮，选取甘草次酸的含量及干膏率为考察指标，进行综合评分。甘草次酸的含量用薄层扫描法测定。见表8。实验所用甘草中甘草次酸的含量为3.1％，规定甘草次酸Y满分为70分，因煎煮的药材共有890g，其中甘草有100g，所以其中所含甘草次酸应为100×3.1％/890＝0.35％。故以甘草次酸的得率0.35％为满分70分，每1％为200分，计分Y×200，干膏率满分为30分，据预测实验出干膏率的变动范围，规定干膏率20％为0，10％为30分，每增加1％减去30/(20-10)＝3分，总评分计为Y×200+[30-3(X-10)]。
表8 正交实验设计表

由R值可知，因素D的R值极小，表明其对实验结果影响甚微或没有影响，故以D例作为试验误差，进行显著性检验，见表9。
表9 方差分析表

结论由表9可知，影响出膏率和甘草次酸得率的主要因素为A、C，其次为B，根据表8，最佳工艺为A2B1C1，即水煎二次，第一次8倍量水煎2小时，第二次加6倍量水煎1小时，将水煎液浓缩至清膏密度为1.12(80℃)，进行离心，离心速率为7000转/分钟。
实验例4 浓缩、干燥工艺的研究取厚朴536g，按最佳工艺提取，收集提取液，从中取3000ml，平均分成两份，回收乙醇后，在不同温度条件下浓缩成清膏，再测定厚朴酚与和厚朴酚的含量。由表15可见温度对厚朴酚与和厚朴酚的含量有一定的影响，所以，在中试时，我们可以将提取物减压浓缩至相对密度1.15(80℃测)。
见表10；表10 浓缩条件考察

浸膏干燥的方法和温度由于本品中含有挥发性的物质，因此我们采用减压干燥的干燥方法，并且减压干燥可缩短干燥时间，因此考虑到生产实际，在工艺中我们减压干燥。
实验例5 稳定性试验方法根据卫生部1999年5月1日颁发施行的《新药审批办法》有关中药部分的修订和补充规定中附件“中药新药质量稳定性研究的技术要求”，按工艺制备加味藿香正气软胶囊，铝塑板包装，10粒/板常温下按申报临床试验用药品质量标准草案(资料编号11)要求观察(见下表)。
样品名称加味藿香正气软胶囊(0.6克/粒)批号990227生产日期1999年2月27日

样品名称加味藿香正气软胶囊(0.6克/粒)批号990306生产日期1999年3月6日

样品名称加味藿香正气软胶囊(0.6克/粒)批号990313生产日期1999年3月13日

结果经18个月观察，各项指标(性状、鉴别、检查、含量测定)均符合质量标准要求，卫生学检查符合卫生学检查标准。
结论加味藿香正气软胶囊分别用铝塑板室温放置18个月，质量稳定。
实施例1本发明软胶囊的制备方法一广藿香 326.8g 紫苏叶 108.9g 白芷 108.9g白木(炒) 217.9g 陈皮 217.9g 半夏(制) 217.9g厚朴(姜制) 217.9g 茯苓 108.9g 桔梗 217.9g甘草 217.9g 大腹皮 108.9g以上十一味，厚朴用60％乙醇提取三次，每次1小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.15的清膏A；广藿香、紫苏叶、陈皮、白术、白芷水蒸气蒸馏提取挥发油，蒸馏后的水溶液滤过另器收集；药渣与半夏、茯苓、桔梗、甘草、大腹皮、生姜32.7g及大枣54.5g加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至相对密度为1.12的清膏，离心，上清液浓缩至相对密度为1.15的清膏B；合并清膏A和B，浓缩至相对密度为1.30的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，过筛。另取食用植物油360g，加蜂蜡等适量，熔化，待温，加入上述粉末及挥发油，经胶体磨磨匀，压制成软胶囊1000粒，即得。
实施例2本发明软胶囊的制备方法二广藿香 326.8g 紫苏叶 108.9g 白芷 108.9g白术(炒) 217.9g 陈皮 217.9g 半夏(制) 217.9g厚朴(姜制) 217.9g 茯苓 108.9g 桔梗 217.9g甘草 217.9g 大腹皮 108.9g以上十一味，厚朴用60％乙醇提取三次，每次1小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.15(80℃)的清膏A；广藿香、紫苏叶、陈皮、白术、白芷水蒸气蒸馏提取挥发油，蒸馏后的水溶液滤过，另器收集；药渣与半夏、茯苓、桔梗、甘草、大腹皮、生姜32.7g及大枣54.5g加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，与上述水溶液合并，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.12(80℃)的清膏，离心，上清液浓缩至相对密度为1.15(80℃)的清膏B；将清膏A减压干燥，粉碎成细粉，过筛。将清膏B，浓缩至相对密度为1.30-1.35(80℃)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，过筛。混匀上述浸膏粉，加入挥发油及精制植物油、蜂蜡适量，经胶体磨磨匀，压制成软胶囊1000粒，即得。
实施例3本发明软胶囊胶皮溶液的制备取1.5∶0.03∶1.5的甘油、棕氧化铁与水，加热至75℃，混合均匀，加入预先加水浸胀1.5份明胶搅拌，熔融，保温静置1.5小时，使泡沫上浮，刮去上浮的泡沫，用洁净白布滤过，保温待用；开动软胶囊机，布展胶皮，用石蜡作为内容物进行丸重的调试，调试合格后，放尽石蜡油，将药液加入机器顶部贮液器内，开动药物进料阀，含药物的软胶囊即压制成型；将压制成型的软胶囊胶粒送入装有除湿装置的干燥室内于27℃温度下进行干燥4小时，用乙醇洗涤软胶囊，洗涤后的软胶囊再次送入干燥室，在35℃温度下干燥15小时，即得软胶囊成品。
实施例4本发明软胶囊的质量控制方法鉴别取本发明软胶囊内容物2g，置500ml圆底烧瓶中，加水250ml，混匀，连接挥发油测定器，自测定器上端加水至刻度，并溢流入烧瓶中为止，再加入石油醚(60-90℃)1.5ml，连接回流冷凝管，加热至沸，并保持微沸2小时，放冷，分取石油醚层作为供试品溶液；另取广藿香油对照品加石油醚制成每1ml含0.1ml的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以10∶1石油醚(60-90℃)—醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％香草醛硫酸试液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；取本发明软胶囊内容物2g，加乙醚振摇提取二次，每次20ml，弃去乙醚液，残渣挥尽乙醚厂加水40ml使溶解，加水饱和的正丁醇萃取二次，每次30ml，合并正丁醇液，滤过，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮甙对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2ul，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以1∶1丙酮-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝试液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；取本发明软胶囊内容物2g，加石油醚(60℃-90℃)30ml，超声处理30分钟，弃去石油醚，挥干，残渣加氯仿25ml和盐酸2ml，置水浴上加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草次酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以30∶15∶1甲苯-醋酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的斑点；
含量测定照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适应性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；75∶25甲醇—水为流动相；流速1ml/min；检测波长294nm；柱温为室温；理论塔板数按厚朴酚峰计算应不低于3800；对照品溶液的制备，精密称取厚朴酚与和厚朴酚对照品适量，加甲醇制成成每1ml含厚朴酚30ug、和厚朴酚25ug的混和溶液，混匀，即得；供试品溶液的制各，精密称取本发明软胶囊约2g，精密加60％乙醇20ml，称重，超声处理45分钟，再称重，补足溶剂减失的重量，充分振摇，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，至50ml量瓶中，用60％乙醇稀释至刻度，摇匀，即得；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，测定，即得。


本发明公开了一种加味藿香软胶囊的制备方法及质量控制方法，该制备方法为以广藿香、紫苏叶、白芷、白术(炒)、陈皮、半夏(制)、厚朴(姜制)、茯苓、桔梗、甘草、大腹皮为原料药，厚朴用乙醇提取，广藿香、紫苏叶、陈皮、白术、白芷水蒸气蒸馏提取挥发油，药渣与半夏、茯苓、桔梗、甘草、大腹皮、生姜及大枣加水煎煮，然后减压干燥，粉碎成细粉，过筛，加入挥发油及精制植物油、蜂蜡适量，经胶体磨磨匀，压制成软胶囊。本发明方法制备的软胶囊的质量控制方法包括鉴别方法及含量测定方法。