专利名称：一种治疗头痛的中药组合物及其制法和检测方法偏头痛是一种间断性反复发作，以一侧头痛为特征的是多发的神经系统疾病。发 作时头痛难忍，甚则恶心，呕吐，给患者带来极大痛苦，导致工作效率降低，生活质量下降。 偏头痛患者发生心脏病、缺血性中风几率较健康人增高，另外还能引发重性抑郁症、恐怖障 碍等。目前，治疗偏头痛的药品很多，对本病起到了一定的防治作用，但多以西药为主，大多 价格高，副作用大，疗效不尽如人意。以中医药理论为指导，筛选治疗偏头痛疗效确切，毒副 作用小、价格适中的复方中药，具有重要的社会和经济意义。发明内容本发明的目的在于提供一种既有确切疗效，又能较好地改善临床症状、副作用少、 价格便宜的治疗头痛的中药组合物。本发明的又一目的在于提供该中药组合物制剂的制备方法。本发明的另外一个目的在于提供该中药组合物颗粒剂的检测方法。本发明技术方案是这样实现的按照重量份计，制成该中药组合物有效组分的原料为钩藤360-1080、川芎 240-720、全蝎 60-180、白芷 108-324、牛膝 120-360、白芍 120-360、甘草 36-108。优选为钩藤540-900、川芎 360-600、全蝎 90-150、白芷 162-270、牛膝 180-300、 白芍 180-300、甘草 54-90。最优选为钩藤720、川芎480、全蝎120、白芷216、牛膝240、白芍240、甘草72。
本发明中药组合物具有平肝熄风，活血止痛的作用。用于肝阳上亢，肝风上扰，瘀 血阻络所致头痛的治疗。
本发明中药组合物可以是药剂学上可接受的剂型，包括丸剂、颗粒剂、硬胶囊剂、 软胶囊剂、片剂、滴丸剂、口服液体制剂等，优选颗粒剂。
川芎、白芷可提取挥发油，挥发油包合，残留液备用；钩藤、全蝎两味醇提；白芍、 牛膝、甘草水煎液与前述残留液混合，加壳聚糖除杂；加适宜辅料，制成制剂。
本发明中的辅料可以是药剂学上可接受的任意赋形剂或载体。
制备方法优选川芎、白芷可加8-12倍量水蒸馏4_8h，收集挥发油，残留液备用； 挥发油用4-8倍量β环状糊精在25-40°C包合0.5-2小时制成包合物，干燥；钩藤、全蝎加 4-8倍量40-70%乙醇提取2-4次，每次20-40min，合并提取液，回收乙醇至无醇味，60°C浓 缩至相对密度1. 20-1. 30，备用；白芍、牛膝、甘草等分别加6-12倍量水提取2-3次，每次提 取0.5-池，合并提取液及提油后残留液，滤过，缩至料液比为1 1-1 3，加入1.0-1. 4倍壳聚糖絮凝液，静置，过滤，上清液60°C浓缩至相对密度1. 10-1. 30，合并醇提稠浸膏，与挥发油的β环状糊精包合物加适宜辅料，制成制剂。
其中颗粒剂又优选川弯、白芷加10倍量水蒸馏他，收集挥发油，残留液备用；挥 发油用6倍量β环状糊精在30°C包合1小时制成包合物，减压干燥；钩藤、全蝎加6倍 量50%乙醇提取3次，每次30min，合并提取液，回收乙醇至无醇味，60°C浓缩至相对密度 1. 25，备用；白芍、牛膝、甘草等分别加10、8、8倍量水提取3次，第一次提取1. 5h，第二、三 次各提取lh，合并提取液及提油后残留液，滤过，缩至料液比为1 1，加入1.2倍壳聚 糖絮凝液，静置Mh，过滤，上清液60°C浓缩至相对密度1. 25，合并醇提稠浸膏，减压干燥； 将干浸膏、挥发油的β环状糊精包合物加适宜辅料，制成颗粒剂。
特别是钩藤720g、川芎480g、全蝎120g、白芷216g、牛膝240g、白芍240g、甘草 72g;川芎、白芷加10倍量水蒸馏他，收集挥发油，残留液备用；挥发油用6倍量β环状糊 精在30°C包合1小时制成包合物，减压干燥；钩藤、全蝎加6倍量50%乙醇提取3次，每次 30min，合并提取液，回收乙醇至无醇味，60°C浓缩至相对密度1. 25，备用；白芍、牛膝、甘草 等分别加10、8、8倍量水提取3次，第一次提取1.5h，第二、三次各提取lh，合并提取液及 提油后残留液，滤过，缩至料液比为1 1，加入1.2倍壳聚糖絮凝液，静置Mh，过滤， 上清液60°C浓缩至相对密度1. 25，合并醇提稠浸膏，减压干燥；将干浸膏、甘露醇和糊精按 11 6 6的比例混勻，制粒，干燥，与挥发油的β环状糊精包合物混勻，共制lOOOg，即得。
对于最后方法制得的颗粒剂的检测方法包括钩藤、全蝎、川芎、白芷、牛膝的薄层 鉴别，白芍的含量测定等。
一、性状本发明为棕色颗粒，气微香，味甜。
二、鉴别
(1)取本发明3g，加热水50ml溶解，浓氨调pH9 10，氯仿萃取2次，每次20ml， 合并萃取液至蒸发皿中，蒸干，残渣加氯仿Iml溶解，作为供试品溶液。取钩藤药材3g，浓 氨湿润，加氯仿50ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿Iml溶解，作为对照药材溶 液。另取钩藤碱对照品适量，加甲醇制成每ml含0.6mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层 色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取对照品lul，对照药材5ul，供试 品10ul，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF2M薄层板上，以氯仿甲醇-氨水 (11.5 1 0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视。供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上，显相同蓝紫色的荧光斑点。
(2)取本发明3g，加95%乙醇提取2h，滤过，滤液蒸于，残渣加乙醇IOml溶解，作 为供试品溶液。取全蝎药材4g，依供试品提取方法，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中 国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5ul，点于同一以羧甲基纤维素 钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯(15 4)为展开剂，展开，取出，晾干， 置碘蒸气下显色。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同黄色的斑点。
(3)取本发明3g，加乙醚20ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解， 定容至1ml，作为供试品溶液。取川芎药材lg，加乙醚20ml，加热回流lh，滤过，滤液蒸干， 残渣加乙酸乙酯溶解，定容至lml，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005 年版一部附录VIB)试验，吸取供试液15ul，对照药材2ul，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏 合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9 1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外 365nm下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。5
(4)取本发明3g，加乙醚20ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解， 定容至lml，作为供试品溶液。取白芷药材0. 5g，加乙醚10ml，加热回流lh，滤过，滤液蒸干， 残渣加乙酸乙酯溶解，定容至lml，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年 版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各15ul，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的 硅胶G薄层板上，以石油醚(30 60°C)_乙醚(3 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外 365nm下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(5)取本发明3g，加石油醚20ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇溶解，定 容至1ml，作为供试品溶液。取牛膝药材2g，加乙醇20ml，加热回流40min，静置，取上清液 10ml，加盐酸1ml，加热回流lh，浓缩至5ml，加水10ml，用石油醚(60 90°C ) 20ml提取， 提取液蒸干，残渣加乙醇溶解，定容至ani，作为对照药材溶液。另取齐墩果酸对照品制成 每Iml含Img对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸 取上述溶液各20ul，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷 甲醇GO 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷磷钼酸试液显色，置110°C加热至斑点显色清 晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同蓝色的斑点。
三、检查应符合颗粒剂项下有关的各项规定
四、含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI D)测 定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0. 磷酸 (14 86)为流动相；检测波长为230nm。理论塔板数按芍药苷计算应不低于2000对照品 溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称称定，用甲醇配制成每ImL含0. 040mg的对照品 溶液。
供试品溶液的制备取本发明约2g，精密称定，加入50%甲醇25mL，称定重量，超 声提取20min，放冷，再次称定重量，用50 %甲醇补足减失的重量，摇勻，用微孔滤膜滤过 (孔径0. 4um)，取续滤液，即得。
测定法精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，分别注入液相色谱仪，测定， 即得。
本发明每袋含白芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于12. Omg0
五、用法用量口服，每次1袋，一日3次。
六、规格15g/袋。
偏头痛属中医“头痛”、“头风”、“偏头痛”范畴，是临床常见病。因其病程长，多反复 发作，多以内伤头痛辩证治之，其发生是肝脏本虚，风、痰、瘀凝滞经络，脉络失和所致。病理 特征为上虚下实，实中夹虚，病邪特征风多动变，在外挟寒；在内挟火，痰瘀恒存，互结致络， 证型复杂。本发明由钩藤、川芎、炙全蝎、怀牛膝、白芷、白芍、生甘草组成，具有活血息风，通 络止痛功效，主要用于肝阳上亢，肝风上扰，瘀血阻络所致的头胀痛，或钝痛、刺痛、跳痛，眩 晕、心烦失眠，情志不舒，舌质红，或紫黯有瘀点，苔薄黄，脉弦等症的治疗。
本发明所治偏头痛系情志抑郁，木郁化火生风；或精神紧张，肝阳激变，化为风火； 肝肾阴虚，水不涵木，阳无以制，化为风火。肝经风火上扰，盘旋于脑，风卷痰，痰可凝血，使 络脉阻滞所致。治宜平肝熄风，活血止痛。方中钩藤味甘性寒，归肝、心包经，可清热平肝， 熄风定惊，既能清肝泻热肝阳，又能熄风止痉清头目，用于肝经有热，肝阳上亢之头胀头痛， 为君药；全蝎味辛、咸，入肝经，既散肝经风热，而平肝熄风止痉，又能祛风以治疼痛，配伍君药，一长于平肝，一偏于息风，相辅相助，具有较强的平肝熄风，通络止痛之功，也为施今墨 老先生治偏头痛之常用药对，川芎升清开郁，活血止痛，被誉为六经头痛必用之药，行血中 之气、祛血中之风，和君药相须为用，既可平抑肝阳，熄风止痛，又可活血通络止痛，治头痛、 眩晕有良效，亦有“治风先治血，血行风自灭”之意，与全蝎共为臣药；白芍养血敛阴，柔肝以 息风，白芷长于止痛，助祛风止痛，牛膝活血祛瘀，引热下行，制约风药过于升散，三药为佐， 助君臣药以熄风活血止痛；高巅之上，唯风药可到，川芎引诸药上行头目，直达病所，兼为 使，辅助君臣环周脑户，充分发挥中医方药配伍之优越性，甘草调和诸药。全方凉温并用，风 血并调，则清窍空灵，风熄络通痛止，验之临床，确有疗效。
本发明中药制剂主要药效学实验结果如下
一、受试药物
川芎、白芷加8倍量水蒸馏他，收集挥发油，残留液备用；挥发油用6倍量β环状 糊精在30°C包合1小时制成包合物，减压干燥；钩藤、全蝎加6倍量50%乙醇提取3次，每 次30min，合并提取液，回收乙醇至无醇味，60°C浓缩至相对密度1.25，备用；白芍、牛膝、甘 草等分别加10、8、8倍量水提取3次，第一次提取1.证，第二、三次各提取lh，合并提取液及 提油后残留液，滤过，缩至料液比为1 1，加入1.2倍壳聚糖絮凝液，静置Mh，过滤，上 清液60°C浓缩至相对密度1.25，合并醇提稠浸膏，与挥发油的β环状糊精包合物混勻，即 得。
二、药效试验
(一 )对偏头痛模型大鼠5-ΗΤ、β -EP及脑干中NO的影响
将SD大鼠60只，雌雄各半，体重18_22g，按体重和性别随机分为6组，每组10 只，即本发明高剂量组(31.32g生药/kg)、中剂量组(15. 66g生药/kg)、低剂量组(7. 83g 生药/kg)，阳性组(正天丸)(9g/kg)、对照组(蒸馏水)、模型组(蒸馏水)。给药体积为 lml/100g体重，每日一次，连续10天。次日除空白对照组外其余各组皮下注射硝酸甘油注 射剂(10mg/kg)，复制实验性偏头痛动物模型。造模30min后按相应分组给药，造模成功后 4h，颈动脉取血，采用放免法测定内啡肽含量、酶联免疫吸附法测定5-羟色胺含量。
将动物迅速断头处死，取脑，用滤纸吸尽脑组织表面血迹，放入预先冰冷的生理盐 水中，去除脑膜和血管，从脑组织中分离出下丘脑和脑干，将脑干部分置于称量杯中用电子 分析天平称取约0. 3g，放入预冷的玻璃勻浆器中，加入适量冰冷生理盐水作组织勻浆(重 量体积比约1:9)，充分勻浆后低温离心IOmin (4°C，2000r/min)，取上清液测定脑干中NO 的含量。将结果以表示，采用t检验比较组间差异性。
一般状态除空白对照组外，其余动物造模后30min左右，均出现双耳发红、前肢 频繁搔头，爬笼次数增多，烦躁不安现象。治疗组动物在给药后，上述现象逐渐消失，归于正 常。模型组动物上述现象持续约3小时，继而出现蜷卧，活动减少状态。
表1对偏头痛模型大鼠5-ΗΤ、β -ΕΡ、NO的影响(I 土S)
7
注与模型组比较，*P < 0. 05
本发明高剂量组能升高偏头痛模型大鼠血清中β -ΕΡ、降低下丘脑及脑干中NO含 量，高、中、低剂量组能升高血清中5-ΗΤ含量，与对照组比较有显著性差异(Ρ<0.05)。表 明本发明具有镇痛作用，达到治疗偏头痛的作用。
( 二 )对醋酸致小鼠疼痛的影响
将KM小鼠60只，雌雄各半，体重18-22g，按体重和性别随机分为5组，每组12只， 分别为本发明高剂量组(45. 24g生药/kg)、中剂量组(22. 62g生药/kg)、低剂量组(11. 31g 生药/kg)、对照组(蒸馏水)、阿司匹林组(0. 28g/kg)。给药体积为0. lml/10g体重，连续 给药7天。末次给药后lh，除空白组外其余各组腹腔注射0. 7%冰醋酸0. lmL/10g体重。记 录小鼠20min内扭体次数，并计算抑制率，将结果以 士S表示，并比较组间差异性。
抑制率=(空白组平均扭体次数-实验组平均扭体次数)/空白组平均扭体次 数 Χ100%ο
表2对醋酸致小鼠疼痛的影响( ±S) χ. ............ .................,..,丨… .....丨..组别(g/kg)劇组...........................—
本发明低剂量组 11.31 本发明中剂量组 22.62 本发明高剂量组 45.24阿司匹林组0.28
注与对照组比较< 0. 05
由表可见，本发明高、中、低剂量组能明显减少小鼠扭体次数，与对照组比较有显 著性差异(P < 0. 05)。表明本发明具有镇痛作用。
(三)对热板法致小鼠疼痛的影响
调节智能热板仪使温度设定在55. O士0. 5°C，将雌性小鼠置于热板上，开始记时， 直至小鼠舔后足(跳跃者弃去)停止记时，这段时间为该只小鼠的基础痛阈。取基础痛阈 值在5-30s之间的小鼠60只，按体重和性别随机分为5组，每组12只，分别为本发明高剂8η 扭体次数抑制率(%) (只) /20min1243.67±13.43—1237.58士 14.1713.951230.67±9.62*29.771222.75±9.63*47.901214.17±9.36*67.55量组(45. 24g生药/kg)、中剂量组(22. 62g生药/kg)、低剂量组(11. 31g生药/kg)、对照组 (蒸馏水)、阿司匹林组(0. 28g/kg)。给药体积为0. lml/10g体重，连续给药7天。末次给 药后45min、90min、120min分别测定小鼠痛阈值。如60s仍无反应，其痛阈以60s计算，将 结果以[士 S表示，并比较组间差异性。
表3对热板法致小鼠疼痛的影响(χ ±S, n=10)


本发明涉及一种用于治疗头痛的中药组合物及其制法和检测方法，由钩藤、川芎、全蝎、白芷、牛膝、白芍、甘草制成，剂型包括丸剂、颗粒剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、片剂、滴丸或口服液体制剂等，具有确切疗效，较好地改善临床症状，副作用少、价格便宜的特点；颗粒剂的检测方法包括钩藤、全蝎、川芎、白芷、牛膝的薄层鉴别，白芍的含量测定。