专利名称：一种辛凉解表、清热解毒的中药组合物及其制备方法和应用的制作方法 传统医学认为“温病初起，则发热、微恶风寒、无汗或有汗不畅；风热上犯以致咽痛、咳嗽；温邪易伤津液，故口渴；治当辛凉透表，清热解毒。”，金银花、连翘、板蓝根均为辛凉透表，清热解毒的良药。现代研究表明板蓝根含有靛甙、B-谷甾醇、氨基酸等，有很好的抗菌、抗病毒、抗钩端螺旋体及解毒作用。金银花、黄芩、连翘以及板蓝根配伍后，既有抑毒抗菌，又有激发和增强机体细胞免疫功能及增强吞噬功能等生理效应，更具有抗病毒作用和明显的抗菌作用，尤其是对金葡菌、表皮葡萄球菌和变形杆菌的抑制作用较强。并能加强机体的防御功能，改善微循环及整体调节作用。尤其适用于病毒感染，病毒与细菌混合感染疾病，产生耐药菌株的疾病，应用抗生素过敏者及使用抗生素而疗效不显著病情迁延不愈者。还对急性上呼吸道感染、急性气管炎、支气管炎、急性扁桃体炎等疾病近期疗效显著，对支气管肺炎亦有效。
(一)要解决的技术问题本发明的目的旨在提供一种辛凉解表、清热解毒的中药组合物及其制备方法和应用。(二)技术方案本发明提供的中药组合物，其特征在于所述中药组合物的有效成分是按重量配比的下列原料制成金银花30-70份、黄芩30-70份、连翘60-120份、板蓝根30-70份。其中优选的原料配比是金银花45-55份、黄芩45-55份、连翘90-110份、板蓝根45-55份。《素问·至真要大论》“风邪于内，治以辛凉，佐以苦甘”。本方中金银花味甘性寒，入肺胃及大肠经，既能清热解毒，又能疏散风热；连翘味苦性微寒，入心肺及胆经，具有清热解毒，疏散风热，消痈散结，利尿的功效，方中的特别之处是加入了板蓝根为君药，其味苦而性寒，入心、胃经，具有清热解毒，凉血，利咽的功效，善于清解实热火毒，且不伤脾胃而更以解毒利咽散结见长，与疏散风热药相伍，是治疗外感风热、温病初起的最佳配伍，对多型变态反应均有明显的抗过敏作用，有利于感染过敏性疾病，如感冒等的治疗起到改善过敏症状的良好效果。黄芩，味苦性寒，具有清热燥湿，泻火解毒的功效，善清肺大肠之火，除中上焦湿热，能够治疗温病热入气营血分、肺热咳嗽等证，为臣药，助君药清解火毒，透热外出。本方的配伍特点是疏散风邪与清热解毒、利咽散结、芳香辟秽之品相伍，具有外散风热，透邪解表，兼清热毒，芳香辟秽之功，构成清疏兼顾之剂。适用于外感风热引起的发热、咳嗽、咽痛。本发明还提供了该中药组合物的制备方法，它包括以下步骤(1)取以上四味药材，加水煎煮1-3次，每次1-2h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至75℃时相对密度为1.10-1.30的浸膏；(2)加入乙醇，使含醇量达75％，充分搅拌，静置18-36h，滤过，合并乙醇液，回收乙醇，浓缩至无醇味，制备成或加入适当的辅料制成医药学上可以接受的剂型。
其中步骤(1)中所得浸膏在75℃时相对密度为1.15-1.25，并且本品每1g浸膏中含黄芩苷为50-200mg。
其中步骤(2)中静置时间为20-30h。
本发明的中药组合物可以是口服液、片剂、胶囊剂或颗粒剂，其中制剂中所用的载体为常规载体，常用的填充剂为蔗糖、甜菊素、淀粉、糊精、糖粉等，润湿剂为水、乙醇等，粘合剂为淀粉浆、羟丙甲纤维素(HPMC)、糊精等，崩解剂为交联羟基纤维素钠、表面活性剂、枸橼酸钠与碳酸钠等，润滑剂为滑石粉、硬脂酸镁等。
本发明的中药组合物具有辛凉解表，清热解毒的功效，适用于外感风热引起的发热、咳嗽、咽痛。
本发明药物的鉴别方法为(1)取粉碎后的药物适量，加75％乙醇，摇匀，作为供试品溶液。另取黄芩苷、绿原酸对照品，分别加75％乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各1-2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜(5cm×7cm)上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(2)取粉碎后的药物适量，加甲醇振摇使溶解，静置，取上清液，作为供试品溶液。另取连翘对照药材0.5g，加甲醇10ml，加热回流20分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明药物的含量测定方法为照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶1)为流动相；检测波长为274nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于1500。
对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加50％甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本发明药物有效成分浸膏适量(相当于含黄芩苷约0.2g)，精密称定，置50ml量瓶中，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品口服液每1ml含黄芩苷5.0-25.0mg，片剂每1片含黄芩苷2.0-20.0mg，胶囊剂每1粒含黄芩苷2.0-20.0mg，颗粒剂每1g含黄芩苷10.0-50.0mg。
(三)有益效果本发明的中药组合物用于外感风热引起的发热、咳嗽、咽痛等疾病的治疗，具有毒副作用小，疗效确切的特点。

以下实施例用于更好地理解本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1 本发明中药组合物口服液的制备取金银花500g、黄芩500g、连翘1000g、板蓝根500g，以上四味药材，加水煎煮2次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至75℃时相对密度为1.18的浸膏，放冷，加入乙醇，使含醇量达75％，充分搅拌，静置24小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇，浓缩至无醇味，加入蔗糖100g，搅拌使溶解，加水至1000ml，煮沸15分钟，待温度降至80℃以下时调节pH值至7.0，滤过，灌装，灭菌，即得。
实施例2 本发明中药组合物片剂的制备取金银花450g、黄芩550g、连翘900g、板蓝根450g，以上四味药材，加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至75℃时相对密度为1.15的浸膏，放冷，加入乙醇，使含醇量达75％，充分搅拌，静置20小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇，浓缩至无醇味，所得浸膏干燥，加入淀粉、硬脂酸镁，混匀，压片，即得。
实施例3 本发明中药组合物颗粒剂的制备取金银花550g、黄芩450g、连翘1100g、板蓝根550g，以上四味药材，加水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至75℃时相对密度为1.25的浸膏，放冷，加入乙醇，使含醇量达75％，充分搅拌，静置30小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇，浓缩至无醇味，所得浸膏加入糊精，混匀，制成颗粒，干燥，装入复合膜袋中，即得。
实施例4 本发明中药组合物胶囊剂的制备取金银花300g、黄芩700g、连翘600g、板蓝根300g，以上四味药材，加水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至75℃时相对密度为1.10的浸膏，放冷，加入乙醇，使含醇量达75％，充分搅拌，静置18小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇，浓缩至无醇味，所得浸膏干燥，粉碎，过筛，混匀，装入胶囊，即得。
实施例5 本发明中药组合物口服液的制备取金银花700g、黄芩300g、连翘1200g、板蓝根700g，以上四味药材，加水煎煮1次，煎煮2小时，滤过，滤液浓缩至75℃时相对密度为1.30的浸膏，放冷，加入乙醇，使含醇量达75％，充分搅拌，静置36小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇，浓缩至无醇味，加入蔗糖150g，搅拌使溶解，加水至1000ml，煮沸15分钟，待温度降至80℃以下时调节pH值至7.0，滤过，灌装，灭菌，即得。
以下通过试验阐述该中药组合物的功效。
实验例1 本发明中药组合物对甲型流感病毒小鼠的预防与治疗作用
1.1本发明中药组合物对甲型流感病毒感染预防作用体重17-22g昆明种小鼠120只，雌雄各半，随机分为6组，分别为空白对照组、模型对照组、双黄连口服液给药组和本发明中药组合物高、中、低给药组。本发明中药组合物高、中、低给药组灌胃给药本发明中药组合物5.0、2.5、1.25g生药/kg，双黄连口服液给药组灌胃5.0g生药/kg，空白对照组、模型对照组分别给于相同量的蒸馏水，连续给药5天，末次给药后24小时除空白对照组外，各组小鼠用选定浓度的甲型病毒稀释液(根据预试验该病毒液能导致80-90％的正常小鼠死亡)滴鼻感染，每鼠0.05ml。自感染后第一天开始观察小鼠发病率和生存状况，对各组动物的存活率和存活时间加以比较，结果见表1。
表1.本发明中药组合物对流感病毒感染小鼠的预防作用

注*与模型对照组相比，卡方精确概率法检验结果p＜0.05；感染流感病毒后1～2天开始，各组动物均先后出现程度不同的感染症状，表现为毛发蓬松，呼吸急促，精神萎靡，活动减少，倦怠无力，尾色黯淡，渐行性消瘦等。各组小鼠大部分在3天后表现明显的感染症状。感染后7天内，模型对照组大部分小鼠相继死于严重的呼吸困难，试验中模型对照组均仅存活3只。其他各给药组小鼠也相继有发病情况产生，但本发明中药组合物5.0g生药/kg组感染症状较轻，与感染对照组相比，存活率、生存时间均有明显提高，并且出现统计学差异。双黄连口服液给药组和本发明中药组合物2.5g生药/kg组与感染对照组相比，存活率、生存时间均有一定程度提高，并且出现统计学差异。本发明中药组合物1.25g生药/kg组与感染对照组相比，存活率、生存时间未见提高，且无统计学差异。以上结果表明本发明中药组合物对于甲型流感病毒感染具有一定的预防作用，本发明中药组合物5.0g生药/kg的作用强于双黄连口服液，本发明中药组合物2.5g生药/kg作用与双黄连口服液相当，而本发明中药组合物1.25g生药/kg的预防作用不明显作用。
1.2本发明中药组合物对甲型流感病毒感染治疗作用体重16-20g昆明种小鼠120只，雌雄各半，随机分为6组，分别为空白对照组、模型对照组、双黄连口服液给药组和本发明中药组合物高、中、低给药组。除空白对照组外，各组小鼠用选定浓度的甲型病毒稀释液(根据预试验该病毒液能导致80～90％的正常小鼠死亡)滴鼻感染，每鼠0.05ml。感染后24小时开始本发明中药组合物高、中、低给药组灌胃给药本发明中药组合物5.0、2.5、1.25g生药/kg，双黄连口服液给药组灌胃5.0g生药/kg，空白对照组、模型对照组分别给于相同量的蒸馏水，连续给药7天。自感染后第一天开始观察小鼠发病率和生存状况，对各组动物的存活率和存活时间加以比较，结果见表2。
表2.本发明中药组合物对流感病毒感染小鼠的治疗作用

注*与模型对照组相比，卡方精确概率法检验结果p＜0.05；感染流感病毒后1-2天开始，各组动物均先后出现程度不同的感染症状，表现为毛发蓬松，呼吸急促，精神萎靡，活动减少，倦怠无力，尾色黯淡，渐行性消瘦等。各组小鼠大部分在3天后表现明显的感染症状。感染后7天内，模型对照组大部分小鼠相继死于严重的呼吸困难，试验中模型对照组均仅存活2只。其他各给药组小鼠也相继有发病情况产生，但本发明中药组合物5.0g、2.5g生药/kg组和双黄连口服液组感染症状较轻，与感染对照组相比，存活率、生存时间均有明显提高，并且出现统计学差异。本发明中药组合物1.25g生药/kg组与感染对照组相比，存活率也有一定程度提高，且有统计学差异。以上结果表明本发明中药组合物对于甲型流感病毒感染的小鼠具有一定的治疗作用，其中本发明中药组合物5.0g、2.5g生药/kg的作用与双黄连口服液相当，而本发明中药组合物1.25g生药/kg也有一定的治疗作用，但效果不如其他组明显。
实验例2 本发明中药组合物的镇咳作用体重16-20g昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，分别为空白对照组、双黄连口服液给药组和本发明中药组合物高、中、低给药组。本发明中药组合物高、中、低给药组灌胃给药本发明中药组合物5.0、2.5、1.25g生药/kg，双黄连口服液给药组灌胃5.0g生药/kg，空白对照组给予相同量的蒸馏水，连续给药3天，于末次给药0.5小时后，将每只小鼠置于容量为500ml的玻璃钟罩内。罩内放置含25-28％NH4OH的氨水0.2ml，立即观察和记录小鼠咳嗽潜伏期和2分钟内发生咳嗽反应的次数。数据经t检验，结果见表3。
表3 本发明中药组合物的镇咳作用

注*与对照组相比，t检验结果p＜0.05试验结果表明，本发明中药组合物能明显延长小鼠咳嗽潜伏期和2分钟内发生咳嗽反应的次数，其中本发明中药组合物5.0g生药/kg的作用与双黄连口服液相当，而本发明中药组合物、2.5g和1.25g生药/kg也有一定的镇咳作用。
实验例3 本发明中药组合物的解热作用选体温37-38.5℃的合格大鼠，分别皮下注射10％酵母混悬液10ml/kg。5小时后大鼠体温明显升高。将升温大雨0.8℃的大鼠50只，按照体温随机分为5组，分别为空白对照组、双黄连口服液给药组和本发明中药组合物高、中、低给药组。本发明中药组合物高、中、低给药组灌胃给药本发明中药组合物5.0、2.5、1.25g生药/kg，双黄连口服液给药组灌胃5.0g生药/kg，空白对照组给予相同量的蒸馏水，给药后1、2、3、4、6小时，用肛表插入肛门内2cm左右，3分钟后记录肛温(℃)。将给药组与对照组各时相的肛温进行t检验，结果见表3。
表3.本发明中药组合物解热作用

注*与对照组相比，t检验结果p＜0.05以上结果表明本发明中药组合物对于皮下注射酵母混悬液引起的大鼠体温上升具有一定的解热作用，本发明中药组合物5.0g生药/kg的作用强于双黄连口服液，本发明中药组合物2.5g生药/kg作用与双黄连口服液相当，而本发明中药组合物1.25g生药/kg也具有一定的解热作用，但效果不如其他组明显。
实验例4 本发明中药组合物的体外抑菌试验4.1普通培养基的制备将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌分别用取菌环致密接种到普通营养琼脂培养基表面，以无菌操作分别将浸有灭菌后的双黄连口服液原液和本发明中药组合物原液的直径为0.4cm的滤纸片贴到培养基上，37℃培养24小时，观察抑菌圈直径。结果见表34.2血平板营养培养基的制备在普通培养基的基础上高压灭菌后冷却至56℃，加上5～10％无菌脱纤维绵羊血混匀，将甲型链球菌、乙型链球菌分别用取菌环致密接种到培养基表面，以无菌操作分别将浸有灭菌后的双黄连口服液原液、本发明中药组合物原液的直径为0.4cm的滤纸片贴到培养基上，37℃培养24小时，观察抑菌圈直径。结果见表3表4.本发明中药组合物体外抑菌作用

以上结果表明本发明中药组合物与双黄连口服液对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌都有抑菌作用，且作用相当。


本发明提供了一种辛凉解表、清热解毒的中药组合物及其制备方法和应用。该中药组合物所含的有效成分是选用金银花30－70份、黄芩30－70份、连翘60－120份、板蓝根30－70份制备而成的。本发明的中药组合物可以是口服液、片剂、胶囊剂或颗粒剂。本发明还提供了该中药组合物在制备治疗外感风热引起的发热、咳嗽、咽痛药物中的应用。