专利名称：用于黄铜矿浸出的中温浸矿复合菌系的制作方法铜是现代工业发展中不可或缺的重要金属原料。随着经济发展和社会的进步，铜工业在国民经济发展中的地位日益提高。目前，次生硫化铜矿的常温生物堆浸技术已经广泛应用于商业生产。然而，研究证明，常温生物浸出对于铜资源的主体一黄铜矿来说却难以奏效。自1999年 以来，BHP Billiton和Mintek/Bactech两个矿业大公司连续发布有关黄铜矿嗜热菌搅拌浸出的实验情况。结果表明，极端嗜热嗜酸菌搅拌浸出黄铜矿精矿切实可行，短时间内可以获得很高的铜回收率。但是，嗜热嗜酸菌对高矿浆浓度极度敏感，高温下气液传输受限，浸液中氧气和二氧化碳含量低，对浸出效率产生负面影响。
本发明的目的在于,提供一个中温浸矿菌复合系，该菌系对黄铜矿具有较高的浸出效率。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案:—种用于黄铜矿浸出的中温浸矿复合菌系，其名称为Sulfobacillusthermosulfidooxidans 6Y-1,该复合菌系已保藏在中国典型培养物保藏中心CCTCC,地址位于武汉大学内，保藏日期为2010年11月10日，保藏编号为CCTCC NO:M2010297。如上所述的复合菌系，其工作温度为55°C，该复合菌系的菌种组成为Sulfobacillus thermosulfidooxidans 77 % >Acidithiomicrobium sp 5%>Acidithiobacillus caldus 12%和 Ferroplasma sp如上所述的复合菌系，其获得方法为，所述复合菌系的样品来自某黄铜矿堆浸矿堆；采用传统方法从采集的样品中富集培养并驯化黄铜矿得到所述复合菌系；采用16S rDNA克隆文库技术对上述复合菌系中的微生物种群组成进行分析，技术路线为:总DNA提取一16S rDNA片段扩增一与载体连接一转化大肠杆菌一筛选阳性克隆一酶切分型一测定序列一Blast比较分析；采用传统方法考察该复合菌系对黄铜矿的浸出效果，方法为:向200mL普通自来水中加入5-10%黄铜矿矿粉，酸平衡至pH 1.6-1.75 ;加入0.1-0.2%的酵母粉后，以10%的接种量接入所述复合菌系培养液，55°C下140rpm培养，浸出7_15日后，检测铜和铁的浸出效率。本发明的有益效果在于:本发明提供的中温菌系，其较高温菌具有更好的环境适应性，更易于培养，工作温度更低，操作更方便，尤其是对低品位硫化铜矿如黄铜矿在堆浸工艺的应用有极强的商业应用前景。本发明涉及一个复合菌系，其名称为Sulfobacillus thermosulfidooxidans6Y-1，该复合菌系已保藏在中国典型培养物保藏中心CCTCC，地址位于武汉大学内，保藏日期为2010年11月10日，保藏编号为CCTCC NO:M2010297。0.2g, MgSO4 0.8g，蒸馏水IL ;调节pH为1.6-1.7。按下述配制方法配置培养基B:向IOOmL普通自来水中，加入IOg黄铜矿矿粉，优选地，黄铜矿矿粉的粒径为200目，用浓硫酸调节pH进行酸平衡，直至pH稳定在1.6-1.7。接种前将培养基A和B混合。接种时，先在混合培养基中加入0.1-0.15%的酵 母粉，然后加入富集培养物，第一次接种量为总体积的20 30% ；55°C 140rpm 振荡培养。3.驯化:利用相同的混合培养基加入5-10%的黄铜矿粉，在pH 1.6-1.7条件下接种10%培养物，55°C进行细菌浸矿适应性驯化培养，获得菌浓度为IO7 IO9个/mL的稳定的浸矿复合菌系。实施例2:中温浸矿复合菌系L-A中细菌种群组成的分析1、总DNA的提取将实施例1中得到的复合菌系接种至上述混合培养基中，接种量为体积百分比5 %，40-50 V培养20小时。将ImL培养液放入1.5mL Eppendorf管中，12000rpm, 4°C离心5分钟收集菌体,用I X TES洗涤菌体2-3次。将菌体重新悬浮于435 μ L TES中打散菌体，加入20mg/mL的溶菌酶125yL，10mg/mL的蛋白酶K 2.5 μ L，37°C水浴轻振保温4小时，加入50 μ L 20% SDS,于37°C水浴轻振保温30分钟，加入5mol/L的NaClO4 125 μ L，用等体积的酚-氯仿-异戊醇(三者体积比为25: 24: I)抽提3-4次至界面无蛋白膜出现。吸取上层水相置于冰浴中加入1/10体积的3mol/L的NaAc-EDTA-Na2，加入2倍体积冷无水乙醇，翻转混匀，冰浴5分钟。12000rpm离心20分钟沉淀DNA。加入体积百分比70%的乙醇脱盐，4°C过夜放置，7000rpm离心10分钟，吸出乙醇。风干，加二次蒸馏水溶解。电泳检测后调DNA浓度为25 μ g/mL02、PCR扩增16S rDNA部分序列通用引物:细菌引物27F和1492R27F(SEQ ID:N0.1):5，-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’1492R(SEQ ID:N0.2):5’ -TACGGTTACCTTGTTACGACTT-3’古菌引物25F和1492R25F(SEQ ID:N0.3):5，-TCYGGTTGATCCYGCCRG-3’1492R(SEQ ID:N0.2):5，-TACGGTTACCTTGTTACGACTT-3，

本发明提供一种用于黄铜矿浸出的中温浸矿复合菌系，其名称为Sulfobacillus thermosulfidooxidans 6Y-1，该复合菌系已保藏在中国典型培养物保藏中心CCTCC，地址位于武汉大学内，保藏日期为2010年11月10日，保藏编号为CCTCC M2010297。该复合菌系的菌种组成为Sulfobacillus thermosulfidooxidans 77％、Acidithiomicrobium sp 5％、Acidithiobacillus caldus 12％和Ferroplasma sp 6％。该菌系对黄铜矿具有较高的浸出效率。