一种用于治疗前列腺癌的中药组合物及其制备方法和应用的制作方法【技术领域】，具体涉及一种用于治疗前列腺癌的中药组合物及其制备方法和应用。[0002]前列腺癌是指发生在前列腺的上皮性恶性肿瘤。2004年WHO《泌尿系统及男性生殖器官肿瘤病理学和遗传学》中前列腺癌病理类型上包括腺癌(腺泡腺癌)、导管腺癌、尿路上皮癌、鳞状细胞癌、腺鳞癌。其中前列腺腺癌占95%以上，因此,通常我们所说的前列腺癌就是指前列腺腺癌。2012年我国肿瘤登记地区前列腺癌发病率为9.92/10万，列男性恶性肿瘤发病率的第6位。发病年龄在55岁前处于较低水平，55岁后逐渐升高，发病率随着年龄的增长而增长，高峰年龄是70~80岁。家族遗传型前列腺癌患者发病年龄稍早，年龄(55岁的患者占43%。[0003]中药已经在肿瘤用药市场占有重要地位，因为中药副作用小，疗效确切，适用于长期用药，临床应用非常广泛。人们迫切需要一种行之有效、己被大多数人证实能起良好效果的治疗前列腺癌的中药组合物。
[0004]发明目的:为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种用于治疗前列腺癌的中药组合物及其制备方法和应用。[0005]技术方案:本发明的目的是通过如下的方案实现的:[0006]一种用于治疗前列腺癌的中药组合物，它由如下重量份数的原料制备得到:珠子参50-70份、水丁香10-20份、土鳖虫40-60份、白花蛇舌草10-20份、白侧耳15-25份、茯苓15-25份、草金杉10-20份、甘草10-20份。
[0007]上述用于治疗前列腺癌的中药组合物，它由如下重量份数的原料制备得到:珠子参60份、水丁香15份、土鳘虫50份、白花蛇舌草15份、白侧耳20份、获茶20份、草金杉15份、甘草15份。
[0008]上述用于治疗前列腺癌的中药组合物，所述原料经提取后添加辅料制成口服液、片剂、胶囊或颗粒剂。
[0009]上述用于治疗前列腺癌的中药组合物，所述辅料为糊精、乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、微晶纤维素、甘露糖、甲基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素和甜菊苷的一种或几种。
[0010]上述用于治疗前列腺癌的中药组合物的制备方法，它包括如下步骤:取珠子参、水丁香、土鳖虫、白花蛇舌草、白侧耳、茯苓、草金杉、甘草药材合并，加水煎煮两次，合并煎液，减压浓缩至65°C时相对密度为1.15-1.20的浸膏，加乙醇使含醇量的体积百分比达75-85%，搅拌，静置，过滤，滤液减压浓缩至65°C时相对密度为1.25-1.30，并回收乙醇，得浓缩液，将浓缩液加水及辅料配 制成口服液，或将浓缩液喷雾干燥，添加辅料制成胶囊剂、片剂、颗粒剂。
[0011]上述用于治疗前列腺癌的中药组合物的制备方法，步骤中，煎煮条件为:第一次加水为药材重量的8-12倍量，煎煮1-2h，第二次加水为药材重量的6-10倍量，煎煮l_2h。
[0012]上述用于治疗前列腺癌的中药组合物的制备方法，步骤中，喷雾干燥条件为:进风温度为100-120°C，出风温度为80-90°C，物料温度为70_90°C，雾化压力为0.2-0.4兆帕，喷雾速度为5-10ml/s。
[0013]上述用于治疗前列腺癌的中药组合物在制备治疗前列腺癌的药物中的应用。
[0014]珠子参为五加科植物珠子参的干燥根状茎。水丁香为柳叶菜科丁香寥属下的多年生粗壮直立草本植物。白侧耳为虎耳草科植物突隔梅花草的全草。草金杉为菊科植物自背苇谷草的全草。其余均为药典品种。
[0015]有益效果:
[0016]1、中医理论认为，本方中珠子参、水丁香、土鳖虫活血化瘀为君药，白花蛇舌草和白侧耳清热解毒，增加君药作用，为臣药，茯苓、草金杉利尿通淋为佐药，甘草调和诸药为使药，诸药相合，相得益彰，共奏活血化瘀、清热解毒、利尿通淋作用，用于治疗前列腺癌。
[0017]2、本发明处方设计合理，配伍严谨，经长期的临床验证，疗效确切。
[0018]3、本发明组成为中药材，无毒副作用，价格便宜。

[0019]以下通过实施例形式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
[0020]1、制备实施例
[0021]实施例1:取珠子参50g、水丁香20g、土鳖虫40g、白花蛇舌草20g、白侧耳15g、茯苓25g、草金杉10g、甘草IOg药材合并，加水煎煮两次，第一次加水为药材重量的8倍量，煎煮lh，第二次加水为药材重量的6倍量，煎煮lh，合并煎液，0.07MPa、60-70°C下减压浓缩至65°C时相对密度为1.10，加95%(v/v)乙醇使含醇量达85%(v/v)，搅拌，静置24小时，滤液减压回收乙醇并浓缩，滤液在0.07MPa、65°C条件下减压浓缩成至65°C时相对密度为1.30，喷雾干燥(条件为进风温度为120°C，出风温度为100°C，物料温度为90°C，雾化压力为0.4兆帕，喷雾速度为lOml/s。)，加入淀粉，混合均匀，用适量80%(v/v)乙醇润湿，制软材，过30目筛制粒，于70~80°C干燥，用60目筛整粒，压片，包糖衣，分装，外包装，送检合格，得片剂。
[0022]实施例2:取珠子参60g、水丁香15g、土鳖虫50g、白花蛇舌草15g、白侧耳20g、茯苓20g、草金杉15g、甘草15g药材合并，加水煎煮两次，第一次加水为药材重量的10倍量，煎煮1.5h，第二次加水为 药材重量的8倍量，煎煮1.5h，合并煎液，0.07MPa、60-70°C下减压浓缩至65°C时相对密度为1.15，加95%(v/v)乙醇使含醇量达75%(v/v)，搅拌，静置24小时，滤液减压回收乙醇并浓缩，滤液在0.07MPa、65°C条件下减压浓缩成至65°C时相对密度为1.25，喷雾干燥(条件为进风温度为100°C，出风温度为80°C，物料温度为80°C，雾化压力为0.2兆帕，喷雾速度为5ml/s。)，加入糊精等，干法制粒，过60目筛，装入I号胶囊即可得胶囊剂。[0023]实施例3:取珠子参70份、水丁香10份、土鳖虫60份、白花蛇舌草10份、白侧耳25份、茯苓15份、草金杉20份、甘草20份药材合并，加水煎煮两次，第一次加水为药材重量的12倍量，煎煮2h，第二次加水为药材重量的10倍量，煎煮2h，合并煎液，0.07MPa、60-70°C下减压浓缩至65°C时相对密度为1.15，加95%(v/v)乙醇使含醇量达75%(v/v)，搅拌，静置24小时，滤液减压回收乙醇并浓缩，滤液在0.07MPa、65°C条件下减压浓缩成至65°C时相对密度为1.25，喷雾干燥(条件为进风温度为110°C，出风温度为85°C，物料温度为85°C，雾化压力为0.3兆帕，喷雾速度为7.5ml/s。)，加入上述β -环糊精包合物，粉碎，再加入适当乳糖，用适量80%(ν/ν)乙醇润湿，制软材，过14目筛制粒，50-80°C干燥，60目整粒，得颗粒剂。
[0024]实施例4:取珠子参60g、水丁香15g、土鳖虫50g、白花蛇舌草15g、白侧耳20g、茯苓20g、草金杉15g、甘草15g药材合并，加水煎煮两次，第一次加水为药材重量的10倍量，煎煮1.5h，第二次加水为药材重量的8倍量，煎煮1.5h，合并煎液，0.07MPa、60-70°C下减压浓缩至65°C时相对密度为1.15，加95%(v/v)乙醇使含醇量达75%(v/v)，搅拌，静置24小时，滤液减压回收乙醇并浓缩，滤液在0.07MPa、65°C条件下减压浓缩成至65°C时相对密度为1.25，加水及蔗糖，制备成口服液。
[0025]2.本发明治疗前列腺癌细胞ALAV的药理研究
[0026]I实验材料
[0027]1.1实验用细胞株
[0028]人前列腺癌细胞ALAV细胞，南京医科大学实验室细胞库，DMEM+10%FBS常规培养。
[0029]1.2实验药物
[0030]研究药物:本发明组合物:按实施例3方法制备。
[0031]药液储液:称取IOOmg本发明中药组合物,溶于5ml无水乙醇中,0.2 μ m滤器过滤，500 μ I doff管分装，-20`°C存储，同时0.2μ m滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。
[0032]1.3实验试剂
[0033]DMEM (GIBC0 公司 Cat.N0.12100_061Lot.N0.758137);胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司Lot.N0.100419)；NaHC03 (上海久亿化学试剂有限公司Cat.N0.11810_033Lot.N0.1088387)；Trypsin (AMRESC0 公司批号:2010/04)；EDTA (AMRESC0 公司批号:2009/10);Penicillin G Sodium Salt(AMRESC0 公司批号:2010242);Str 印 tomycin Su I fat e( AMRE SCO公司批号:2010382);无水乙醇(南京化学试剂有限公司批号:080310182);MTT(Biosharp批号:0793) ; PBS (实验室自配)；1.4实验器材
[0034]莱卡倒置显微镜(德国Leica型号:DM1L);可见-紫外光微孔板检测仪(美国MD公司型号:SPECTRA MAX190) ；C02培养箱(FORMA型号:3111);超净台(苏净集团安泰公司制造型号:SW-CJ-ZFD);纯水仪(美国Spring公司型号:S/N020579);精密移液器(法国吉尔森公司型号:P2);电子天平(德国赛多利斯有限公司型号:BT323S);全自动高压灭菌锅(日本SANYO公司型号:MLS-3020);台式电热鼓风干燥箱(上海精密实验设备公司型号:DHG9123A);冰箱(西门子公司型号:KG18V21TI);液氮罐(CBS型号:2001);低速离心机(上海安亭科学仪器厂型号:ΚΑ-1000) ;0.2μπι滤器(MILLIP0RE型号:SLGP033RB) ;IOcm培养皿(NEST公司)、96孔培养板(NEST公司)；细胞计数板；离心管、移液管、Tips若干。
[0035]2实验方法
[0036]I) ALAV 细胞用 DMEM+10%FBS 于 37 °C、5%C02 进行常规培养(IOcm 培养皿)，当细胞生长至对数期时，收集细胞，弃去培养液，PBS轻洗3遍，加入3ml0.25%胰蛋白酶-0.049ffiDTA，37°C消化2min后，向其中加入5ml完全培养基中和反应，吹打细胞后将其转入离心管中，1000rpm离心5min，调整细胞悬液浓度3X 104个/ml。
[0037]2)将细胞种入96孔培养板中，每孔加入细胞悬液180 μ 1，培养板放入细胞培养箱中(37 °C，5%C02 )常规培养。
[0038]3)根据细胞生长情况，一般长至50%_70%，加入本发明中药组合物溶液，继续培养24h。4) 24h 后加入 20 μ I MTT 溶液(5mg/ml，即 0.5%MTT),继续培养 4h。
[0039]5) 4h后扣板法倒去上清，用吸水纸轻轻拍干，每孔加入200 μ I 二甲基亚砜，置摇床上低速振荡lOmin，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。
[0040]6)同时设置本底(不加细胞，只加培养液)，对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)，每组设定6个复孔。
[0041]7)结果以药物对细胞的抑制率表示:
[0042]细胞增值抑制率(％)=(对照孔OD值-给药孔OD值)/对照孔OD值X 100%。实验重复3次。
[0043]3统计处理
[0044]采用Microsoft Excel2003软件中的相关分析和Student t检验，数据以mean+ S.D.表不。
[0045]4实验结果
[0046]MTT法实验后统计结果显示，与对照组比较，当剂量达到5mg/ml时，对ALAV细胞增殖抑制有差异(p〈0.05)，剂`量在10mg/ml时该差异具有显著性(P〈0.01)，当剂量达到15-20mg/ml时有极显著性差异(Ρ〈0.001)。
[0047]表1本发明中药组合物对ALAV细胞增殖抑制影响研究(X土SD)