一种载钆聚合物囊泡及其制备方法和应用的制作方法[0002]近年来，药物载体得到了广泛的研究。其中，关于两亲性嵌段聚合物在水溶液里进行自组装形成囊泡或胶束作为药物载体的研究备受广大研究人员的关注。两亲性嵌段聚合物在水中可以进行自组装形成囊泡双层膜，但目前广泛应用的脂质体类囊泡的稳定性较差，容易破裂并产生囊泡膜间融合。而聚合物囊泡能显著提高囊泡的机械性能，由聚碳酸酯类和多肽类聚合物组成的可生物降解聚合物囊泡更是研究的热点。[0003]为了提高药物载体的靶向性，载体表面往往接上一些靶向基团。叶酸(Folicacid, FA)本质是一种小分子维生素，又称喋酞谷氨酸，它既参与细胞DNA和RNA前提的嘧啶和嘌呤核苷酸的合成，又参与蛋氨酸的合成。叶酸受体的研究已经表明，人类许多上皮来源的肿瘤如卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、鼻咽癌、肝癌等肿瘤细胞表面的叶酸受体的活性和数量显著高于正常组织细胞，呈过度表达。而正常的动物细胞缺乏叶酸生物合成的关键酶，只能依赖细胞表面的叶酸特异结合蛋白(即叶酸受体，Folate receptors, FR)主动摄取外源性叶酸来维持正常的生命活动，因而表达量极低。因此，根据正常细胞与癌细胞表面叶酸受体的表达差异，可以制备出带有叶酸靶向基团的聚合物囊泡，以提高聚合物囊泡对癌细胞的识别能力。[0004]1973年磁共振 成像(MRI)技术首次应用于人体诊断，经过四十多年的发展，这一技术已在生物、医学等领域得到迅速发展和广泛应用。与X-CT、超声波成像相比，MRI技术具有诸多突出优点:无电离辐射；可实现多核多参数成像；可施行任意方位层面的扫描；较高的空间分辨率和对比度；无骨质伪影；能反映被检测组织水质子周围环境并获取有关生理生化信息；可提高对心脏、大血管形态和功能的诊断等。所以，MRI技术已成为当今临床诊断中最有力的检测手段之一。此技术已广泛应用于人体的头部、神经系统、腹部及血管的造影，对检测组织坏死、局部缺血和各种恶性病变有效，特别用于肿瘤的早期诊断，可使治疗成功率有很大程度的提高。临床上，为确保诊断的准确性，45%以上的MRI检查需要使用造影剂提高图像对比度，其中30%以上使用含钆造影剂。然而，经过多次临床研究发现，游离的金属钆离子具有很强的毒副作用，会导致肾脏严重纤维化，临床上目前使用的钆造影剂都是经过络合剂作用后制备而成的，例如DTPA-Gd、DOTA-Gd、钆双铵(Gadodiamide)、?L喷酸葡胺(Gadopcntetate dimeglumine)、礼贝葡胺(Gadobenate dimeglemine)、礼特醇(Gadoteridol)、礼特酸葡胺(Gadoterate meglumine)等,但是这些临床上使用的礼造影剂仍存在灵敏度不高、生物相容性差、不易降解、载药率低和成像效果差等问题。
[0005]本发明针对现有技术的不足，主要目的在于提供一种无毒副作用、载药率高、成像效果好、容易降解并且生物相容性好的载钆聚合物囊泡。[0006]本发明的另一个目的在于提供一种上述载钆聚合物囊泡的制备方法。[0007]本发明的第三个目的在于提供上述载钆聚合物囊泡的用途。[0008]为达到上述目的，本发明的解决方案是:
[0009]一种载钆聚合物囊泡，包括由两种聚合物共同自组装成具有不对称膜结构的聚合物囊泡以及受聚合物囊泡承载的金属钆，两种聚合物分别为FA-PGAx-b-P β ζ和e-PGAy-b_Pi3z，FA为叶酸基团，χ和y为PGA的聚合度且x>y，ε为用于络合金属钆的络合剂，Ρβζ为疏水链段，FA-PGAx-b-Pi3z中的PGAxB成聚合物囊泡的外部晕层，ε -PGAy-b-P β z中的PGAy形成聚合物囊泡的内部晕层，两种聚合物中的P β ζ形成聚合物囊泡的膜层。
[0010]上述疏水链段为聚己内酯、聚三甲基碳酸酯和聚乳酸中的一种；或者，络合剂为二乙基三胺五乙酸和1，4，7，10-四氮杂环十二烷_1，4，7，10-四羧酸中的一种；或者聚合物囊泡与金属礼的摩尔比为1: (0.1~2)。上述聚合物囊泡的粒径为60~350nm ;或者载礼聚合物囊泡的粒径为80~400nm。
[0011]一种制备上述载钆聚合物囊泡的方法，包括如下步骤:
[0012](I)、P β z-NH-Boc 的合成步骤:
[0013]将由Boc保护的乙醇胺、β和催化剂以摩尔比为1: (20~100): (0.005~0.05)反应12~48小时，处理后得到P β z-NH-Boc ；
[0014](2)、P β ζ-ΝΗ2 的合成步骤:
[0015]将步骤(1)所得的Ρβ z-NH-Boc溶解在有机溶剂中，加入过量的三氟乙酸，室温下反应2~24小时，处理后得到P β Ζ-ΝΗ2 ；
[0016](3)、PBLGx-b-P β ζ 和 PBLGy_b_P β z 的合成步骤:
[0017]将步骤⑵所得的P β ζ-ΝΗ2和谷氨酸的NCA单体按照摩尔比为1: χ的比例溶解在无水DMF中，室温下反应12~48小时，处理后得到PBLGx-b-P β ζ ；
[0018]将步骤⑵所得的P β ζ-ΝΗ2和谷氨酸的NCA单体按照摩尔比为1: y的比例溶解在无水DMF中，室温下反应12~48小时，处理后得到PBLGy-b-P β ζ ；
[0019](4)、FA-PBLGx-b-P β z 和 ε -PBLGy_b_P β ζ 的合成步骤:
[0020]将步骤(3)所得PBLGx-b_P β z和FA溶解在无水DMSO中，加入二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，室温下搅拌5~48小时，处理后得到FA-PBLGx-b-P β ζ。
[0021]将步骤(3)所得PBLGy-b_P β ζ和ε溶解在无水DMSO中，加入二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，室温下搅拌5~48小时，处理后得到ε -PBLGy-b-P β ζ。
[0022](5)、FA-PGAx-b-P β ζ 和 ε -PGAy_b_P β ζ 的合成步骤:
[0023]将步骤⑷所得FA-PBLGx-b-P β ζ溶解在33 %的HBr/CH3C00H溶液中，反应2~12小时，处理后得到FA-PGAx-b-P β ζ ；
[0024]将步骤(4)所得ε -PBLGy-b-P β ζ溶解在33 %的HBr/CH3C00H溶液中，反应2~12小时，处理后得到ε -PGAy-b-P β ζ ；
[0025](6)、载钆聚合物囊泡的制备步骤:
[0026]按照I ~30mg/ml 的浓度将步骤(5)得到的 FA-PGAx_b_P β z 和 ε -PGAy_b_P β z 一起溶解在DMF中，避光搅拌并以5~50d/min的速度滴加两倍于DMF体积的钆离子水溶液，透析除去DMF，得到载钆聚合物囊泡溶液；[0027]β为己内酯、三甲基碳酸酯和乳酸中的一种，ζ为β的聚合度。
[0028]在上述步骤(1)中，ζ为30~60 ;优选地，当β为己内酯时，ζ为30或60 ;当β为三甲基碳酸酯，ζ为30 ;当β为乳酸时，ζ为50。步骤(1)中的催化剂为辛酸亚锡；或者步骤(2)中的有机溶剂为二氯甲烷。
[0029]在上述步骤(3)中，χ为50~100，y为10~50 ;优选地，当β为己内酯时，χ为70或100，y为20或30 ;当β为三甲基碳酸酯，χ为80，y为25 ;当β为乳酸时，χ为75，I 为 15。
[0030]上述载钆聚合物囊泡在制备用于治疗癌症的药物的载体或药物组合物中得以应用。
[0031]上述载钆聚合物囊泡在制备用于靶向识别癌细胞的核磁共振显影剂中得以应用。
[0032]由于采用上述方案，本发明的有益效果是:
[0033]第一，因为其中一种聚合物上带有叶酸靶向基团，当多个聚合物形成载钆聚合物囊泡时，叶酸祀向基团位于囊泡外部晕层上，而叶酸祀向基团对癌细胞表面叶酸受体具有较高的亲和力，所以载礼聚合物囊泡能够富集在富含癌细胞的肿瘤部位；当载礼聚合物囊泡内填充有治疗癌症的药物时，其作为药物载体具有良好的癌细胞靶向性，可以对癌细胞进行靶向给药，在叶酸靶向基团与癌细胞表面的叶酸受体进行特异性结合后，能够大大提闻药物进入癌细胞的速率，从而提闻了对癌细胞的抑制或杀灭效果。
[0034]第二，因为当多个聚合物形成载钆聚合物囊泡时，该载钆聚合物囊泡内部晕层的末端有络合剂，该络合 剂与金属钆相络合，所以该载钆聚合物囊泡在临床上可以同时作为核磁共振的造影剂使用，并且比当前临床上使用的DTPA-Gd的灵敏度更高。
[0035]第三，当载钆聚合物囊泡包裹亲水抗癌药DOX.HCl时，载钆聚合物囊泡晕层亲水链段侧链羧基与DOX -HCl有静电作用，使其载药率可达40%~60%，而当前技术的聚合物囊泡对DOX.HCl的载药率仅有20%~30%，因此载药率约提高了一倍。
[0036]第四，载钆聚合物囊泡使用的聚合物为可降解多肽和聚碳酸酯类组成的两嵌段聚合物，在蛋白酶或者脂肪酶作用下易发生生物降解，同时由于囊泡的包载作用，大大降低了金属钆对人体的毒副作用，提高了用药和显影的安全性。
[0037]第五，载钆聚合物囊泡具有两种聚合物，这两种聚合物的链段比例不同，因此，聚合物的自组装过程使得载钆聚合物囊泡成为不对称膜的结构，方便对该载钆聚合物囊泡内外晕层进行功能化设计。



[0038]图1为本发明实施例一所得的载钆聚合物混合囊泡的DLS结果图。
[0039]图2为本发明实施例一所得的载钆聚合物混合囊泡的TEM结果图。
[0040]图3为本发明实施例一所得的载钆聚合物混合囊泡的弛豫率A的测试结果图。

[0041]以下结合附图所示实施例对本发明作进一步的说明。
[0042]实施例一
[0043]本实施例提供了一种载钆聚合物囊泡，由聚合物囊泡以及受该聚合物囊泡承载的金属钆组成。
[0044]聚合物囊泡由两种聚合物共同自组装而成，具有不对称的膜结构。这两种聚合物分别为FA-PGAx-b-P β z和ε _PGAy_b_P β z。其中，FA为叶酸基团，作为癌细胞表面叶酸受体的祀向基团而起作用。PGA表示聚谷氨酸(Polyglutamic Acid,PGA),其作为亲水链段而起作用；χ和y为PGA的聚合度并且χ > y, χ可以为50~100, y可以为10~50。ε为用于络合金属礼的络合剂，可以为二乙基三胺五乙酸(Diethylene Triamine PentacetateAcid，DTPA)和1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1，4，7，10-四羧酸(DOTA)中的任意一种。Ρβζ为疏水链段，ζ表示该疏水链段的聚合度，ζ可以为30~60。当多个聚合物形成聚合物囊泡时，聚合物FA-PGAx-b-P β z中的PGAx形成聚合物囊泡的外部晕层，聚合物ε -PGAy_b_P β ζ中的PGAy形成聚合物囊泡的内部晕层，两种聚合物中的Ρβ ζ形成聚合物囊泡的膜层。
[0045]金属钆络合在ε上。在载钆聚合物囊泡中，聚合物囊泡与金属钆的摩尔比为1: (0.1~2)，本实施例中为1:0.5。聚合物囊泡的粒径为60~350nm，载钆聚合物囊泡的粒径为80~400nm。
[0046]本实施例中β可以为己内酯(Caprolactone,CL) ,Ρβ ζ(即PCLz)的聚合度ζ优选为30。在聚合物FA-PGAx-b-P β z中，PGAx的聚合度χ优选为70 ;在聚合物ε -PGAy_b_P β ζ中，PGAy的聚合度y优选为20。络合剂ε优选为DTPA。此时，两种聚合物的结构式分别为:FA-PGA70-b-PCL30 和 DTPA-PGA2(l-b-PCL3。。
[0047]本实施例中的载钆聚合物囊泡的制备方法包括如下步骤:
[0048](I)Pcl30-NH-Boc 的合成步骤； [0049]将干燥后的叔丁基(Boc)保护的乙醇胺、己内酯单体(CL)和催化剂辛酸亚锡按照摩尔比为1: 30: 0.005的比例加入到圆底烧瓶中，于110°C下反应48小时，然后加入溶剂二氯甲烷溶解，在甲醇中沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色粉末状聚合物PCL3tl-NH-B0c。
[0050](2)大分子引发剂PCL3tl-NH2的合成步骤；
[0051]将步骤(1)所得聚合物PCL3tl-NH-B0c溶解在有机溶剂二氯甲烷当中，加入过量三氟乙酸(TFA)，于室温下搅拌反应12小时，旋蒸浓缩，甲醇中沉淀，抽滤，真空干燥，重复操作三次，得到白色粉末状大分子引发剂pcl3(1-nh2。
[0052](3)两种两嵌段聚合物PBLG7Q-b-PCL3Q和PBLG2(|-b-PCL3(l的合成步骤；
[0053]将步骤(2)所得大分子引发剂PCL3tl-NH2和谷氨酸的NCA单体分别按照摩尔比为I: 70的比例溶解在无水DMF中，于室温下密封搅拌反应48小时，在乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色聚合物PBLG7(l-b-PCL3(l。b表示block，即链段。
[0054]将步骤⑵所得大分子引发剂PCL3tl-NH2和谷氨酸的NCA单体分别按照摩尔比为I: 20的比例溶解在无水DMF中，于室温下密封搅拌反应48小时，在乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色聚合物PBLG2Q-b-PCL3Q。
[0055](4) FA-PBLG70-b-PCL30 和 DTPA-PBLG2Q-b-PCL3(l 的合成步骤；
[0056]将步骤(3)所得聚合物PBLG7Q-b-PCL3Q和叶酸(FA)溶解在无水DMSO中，加入一定量的二环己基碳二亚胺(DCC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，室温下搅拌24小时，旋蒸浓缩，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到黄色聚合物FA-PBLG7(l-b-PCL3(l。
[0057]将步骤(3)所得聚合物PBLG2Q-b-PCL3Q与DTPA溶解在无水DMSO中，加入一定量的二环己基碳二亚胺(DCC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，室温下搅拌24小时，旋蒸，沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色聚合物DTPA-PBLG2Q-b-PCL3Q。
[0058](5)两亲性聚合物 FA-PGA7Q-b-PCL3Q 和 DTPA-PGA2Q-b-PCL3(l 的合成步骤；
[0059]将步骤(4)所得FA-PBLG7Q-b-PCL3Q溶解在33 % HBr/CH3C00H溶液中，搅拌反应5小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到粉末状聚合物FA-PGA7(l-b-PCL3(l。
[0060]将步骤(4)所得DTPA-PBLG2Q-b-PCL3Q溶解在33 % HBr/CH3C00H溶液中，搅拌反应5小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到粉末状聚合物DTPA-PGA2(l-b-PCL3(l。
[0061](6)载钆聚合物囊泡的制备步骤；
[0062]按照3mg/ml的浓度将步骤(5)得到的聚合物FA-PGA7(|-b-PCL3(l和DTPA-PGA2(l-b-PCL3(l —起溶解在DMF中，在避光剧烈搅拌的条件下，以10d/min的速度滴加两倍于DMF体积的钆离子的水溶液，避光透析除去有机溶剂DMF，得到浅蓝色溶液即为载钆聚合物囊泡溶液。 [0063]本实施例所得的载钆聚合物囊泡溶液的DLS结果如图1所示。该载钆聚合物囊泡溶液的TME结果如图2所示。该载钆聚合物囊泡溶液的弛豫率的测试结果如图3所示。
[0064]本实施例中的载钆聚合物囊泡溶液能够用来制备用于靶向识别癌细胞的核磁共振显影剂，还能用来制备用于治疗癌症的药物的载体或药物组合物。
[0065]本实施例中的载钆聚合物囊泡在蛋白酶或脂肪酶的作用下容易发生降解，因此生物相容性好，对人的机体不会产生 毒理作用。
[0066]实施例二
[0067]在实施例一中，载钆聚合物囊泡中的两种聚合物为FA-PGA7(|-b-PCL3(l和DTPA-PGA20-b-PCL30O实际上，载钆聚合物囊泡中的两亲性嵌段聚合物还可以为FA-PGA100-b-PCL60 和 DTPA-PGA3(l-b-PCL6(l。此时，FA-PGA1(l(l-b-PCL6(l 中 GA 的聚合度 χ 为 100，CL的聚合度ζ是60，DTPA-PGA30-b-PCL60中GA的聚合度χ为30，CL的聚合度ζ是60。
[0068]本实施例中的载钆聚合物囊泡的制备方法包括如下步骤:
[0069](I)PCL60-NH-Boc 的合成步骤；
[0070]将干燥后的叔丁基保护的乙醇胺、己内酯单体(CL)和催化剂辛酸亚锡按照摩尔比为1: 60: 0.005的比例加入到圆底烧瓶中，于110°C下反应48小时，加入溶剂二氯甲烷溶解，甲醇中沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色粉末状聚合物PCL6tl-NH-B0c。
[0071 ] (2)大分子引发剂PCL6tl-NH2的合成步骤；
[0072]将步骤(1)所得聚合物PCL6tl-NH-B0c溶解在二氯甲烷当中，加入过量三氟乙酸，室温下搅拌反应8小时，旋蒸浓缩，甲醇中沉淀，抽滤，真空干燥，重复操作三次，得到白色粉末状大分子引发剂PCL6tl-NH2。
[0073](3)两种两嵌段聚合物PBLG1Q(|-b-PCL6Q和PBLG3(|-b-PCL6Q的合成步骤；
[0074]将步骤(2)所得大分子引发剂PCL6tl-NH2和谷氨酸的NCA单体分别按照摩尔比为I: 100的比例溶解在无水DMF中，室温下密封搅拌反应48小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色聚合物PBLG1Q(l-b-PCL6Q。
[0075]将步骤(2)所得大分子引发剂PCL6tl-NH2和谷氨酸的NCA单体分别按照摩尔比为1: 30的比例溶解在无水DMF中，室温下密封搅拌反应48小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色聚合物PBLG3Q-b-PCL6Q。
[0076](4) FA-PBLG100-b-PCL60 和 DTPA-PBLG3(l-b-PCL6。的合成步骤；[0077]将步骤(3)所得聚合物PBLGltltTb-PCL6tl和叶酸溶解在无水DMSO中，加入一定量的DCC和NHS，室温下搅拌24小时，旋蒸浓缩，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到黄色聚合物FA-PBLG1(l(l-b-PCL6(l。
[0078]将步骤(3)所得聚合物PBLG3Q-b-PCL6Q与DTPA溶解在无水DMSO中，加入一定量的二环己基碳二亚胺(DCC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，室温下搅拌24小时，旋蒸，沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色聚合物DTPA-PBLG3Q-b-PCL6Q。
[0079](5)两亲性聚合物 FA-PGA1Q(|-b-PCL6Q 和 DTPA-PGA3(|-b-PCL6(l 的合成步骤；
[0080]将步骤(4)所得聚合物FA-PBLG1Q(l-b-PCL6Q溶解在33 % HBr/CH3C00H溶液中，搅拌反应5小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到粉末状聚合物FA-PGAltltTb-PCL6tl。
[0081 ] 将步骤(4)所得聚合物DTPA-PBLG3Q-b-PCL6Q溶解在33 % HBr/CH3C00H溶液中，搅拌反应5小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到粉末状聚合物DTPA-PGA3(l-b-PCL6Q。
[0082](6)载钆聚合物囊泡的制备步骤；
[0083]按照3mg/ml的浓度将步骤(5)得到的聚合物FA-PGA1(l(|-b-PCL6(l和DTPA-PGA3(l-b-PCL6(l —起溶解在DMF中，在避光剧烈搅拌的条件下，以10d/min的速度滴加两倍于DMF体积的钆离子的水溶液，避光透析除去有机溶剂，得到浅蓝色溶液即为载钆聚合物囊泡溶液。
[0084]实施例二所得载钆聚合物囊泡和实施例一的在用途上无显著区别，只是聚合度不一样，得到的载钆聚 合物囊泡的粒径会有差异，可以在不同的情况下选择适用。
[0085]实施例三
[0086]与实施例一相比，在载钆聚合物囊泡的聚合物中，Ρβζ还可以为聚三甲基碳酸酯(PTMC)。当多个聚合物形成聚合物囊泡时，这些聚合物的PTMC形成聚合物囊泡的膜层。
[0087]本实施例中的载钆聚合物囊泡的制备方法包括如下步骤:
[0088](I)PTMC3O-NH-Boc 的合成步骤；
[0089]将干燥后的叔丁基保护的乙醇胺、TMC单体和催化剂辛酸亚锡按照摩尔比为1:30: 0.005的比例加入到圆底烧瓶中，110°C下反应40小时，加入溶剂二氯甲烷溶解，甲醇中沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色粉末状聚合物PTMC3tl-NH-B0c。
[0090](2)大分子引发剂PTMC3tl-NH2的合成步骤；
[0091]将步骤(1)所得聚合物PTMC3c1-NH-Boc溶解在二氯甲烷中，加入过量三氟乙酸，室温下搅拌反应8小时，旋蒸浓缩，甲醇中沉淀，抽滤，真空干燥，重复操作三次，得到白色粉末状大分子引发剂PTMC3tl-NH2。
[0092](3)两种两嵌段聚合物PBLG8Q-b-PTMC3Q和PBLG25-b_PTMC3(l的合成步骤；
[0093]将步骤(2)所得大分子引发剂PTMC3tl-NH2和谷氨酸的NCA单体分别按照摩尔比为1: 80的比例溶解在无水DMF中，室温下密封搅拌反应48小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色聚合物PBLG8Q-b-PTMC3Q。
[0094]将步骤⑵所得大分子引发剂PTMC3tl-NH2和谷氨酸的NCA单体分别按照摩尔比为I: 25的比例溶解在无水DMF中，于室温下密封搅拌反应48小时，在乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色聚合物PBLG25-b-PTMC3Q。
[0095](4) FA-PBLG80-b-PTMC30 和 DTPA-PBLG25-b_PTMC3(l 的合成步骤；
[0096]将步骤(3)所得聚合物PBLG8Q-b-PTMC3Q和叶酸溶解在无水DMSO中，加入一定量的DCC和NHS，室温下搅拌24小时，旋蒸浓缩，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到黄色聚合物FA-PBLG80-b-PTMC30o
[0097]将步骤(3)所得聚合物PBLG25-b_PTMC3(l与DTPA溶解在无水DMSO中，加入一定量的二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，室温下搅拌24小时，旋蒸，沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色聚合物DTPA-PBLG25-b-PTMC3Q。
[0098](5)两亲性聚合物 FA-PGA8Q-b-PTMC3Q 和 DTPA-PGA25-b_PTMC3(l 的合成步骤；
[0099]将步骤(4)所得聚合物FA-PBLG8Q-b-PTMC3Q溶解在33 % HBr/CH3C00H溶液中，搅拌反应5小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到粉末状聚合物FA-PGA8(l-b-PTMC3(l。
[0100]将步骤(4)所得聚合物DTPA-PBLG25-b-PTMC3Q溶解在33 % HBr/CH3C00H溶液中，搅拌反应5小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到粉末状聚合物DTPA-PGA25-b-PTMC3(l。
[0101](6)载钆聚合物囊泡的制备步骤；
[0102]按照3mg/ml的浓度将步骤(5)得到的聚合物FA-PGA8(l-b-PTMC3(l和DTPA-PGA25-b-PTMC30 一起溶解在DMF中，在避光剧烈搅拌的条件下，以10d/min的速度滴加两倍于DMF体积的钆离子的水溶液，避光透析除去DMF，得到浅蓝色溶液即为载钆聚合物囊泡溶液。
[0103]实施例四
[0104]与实施例一相比，在载钆聚合物囊泡的聚合物中，？@2还可以为聚乳酸(PLA)。当多个聚合物形成聚合物囊泡时，这些聚合物的PLA形成聚合物囊泡的膜层。
[0105]本实施例中的载钆聚合物囊泡的制备方法包括如下步骤: [0106](I)PLA50-NH-Boc 的合成步骤；
[0107]将干燥后的叔丁基保护的乙醇胺、乳酸单体(LA)和催化剂辛酸亚锡按照摩尔比为1: 50: 0.005的比例加入到圆底烧瓶中，125°C下反应48小时，加入溶剂二氯甲烷溶解，甲醇中沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色粉末状聚合物PLA5tl-NH-Boc。
[0108](2)大分子引发剂PLA5tl-NH2的合成步骤；
[0109]将步骤(1)所得聚合物PLA5q-NH-Boc溶解在二氯甲烷当中，加入过量三氟乙酸(TFA)，室温下搅拌反应8小时，旋蒸浓缩，甲醇中沉淀，抽滤，真空干燥，重复操作三次，得到白色粉末状大分子引发剂pla5(1-nh2。
[0110](3)两种两嵌段聚合物PBLG75-b-PLA5Q和PBLG15-b_PLA5(l的合成步骤；
[0111]将步骤(2)所得大分子引发剂PLA5tl-NH2和谷氨酸的NCA单体分别按照摩尔比为1: 75的比例溶解在无水DMF中，室温下密封搅拌反应48小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色聚合物PBLG75-b-PLA5Q。
[0112]将步骤(2)所得大分子引发剂PLA5tl-NH2和谷氨酸的NCA单体分别按照摩尔比为I: 15的比例溶解在无水DMF中，室温下密封搅拌反应48小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色聚合物PBLG15-b-PLA5Q。
[0113](4) FA-PBLG75-b-PLA50 和 DTPA-PBLG15-b_PLA5。的合成步骤；
[0114]将步骤(3)所得聚合物PBLG75-b_PLA5(l和叶酸(FA)溶解在无水DMSO中，加入一定量的DCC和NHS，室温下避光搅拌24小时，旋蒸浓缩，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到黄色聚合物 FA-PBLG75-b-PLA5。。
[0115]将步骤⑶所得聚合物PBLG15-b-PLA5(l与DTPA溶解在无水DMSO中，加入一定量的DCC和NHS，室温下搅拌24小时，旋蒸，沉淀，抽滤，真空干燥，得到白色聚合物DTPA-PBLG15-b-PLA50O
[0116](5)两亲性聚合物 FA-PGA75-b-PLA5Q 和 DTPA-PGA15-b_PLA5(l 的合成步骤；
[0117]将步骤(4)所得聚合物FA-PBLG75-b-PLA5Q溶解在33 % HBr/CH3C00H溶液中，搅拌反应5小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到粉末状聚合物FA-PGA75-b-PLA5(l。
[0118]将步骤(4)所得聚合物DTPA-PBLG15-b-PLA5(l分别溶解在33 % HBr/CH3C00H溶液中，搅拌反应5小时，乙醚中沉淀，抽滤，真空干燥，得到粉末状聚合物DTPA-PGA15-b-PLA5Q。
[0119](6)载钆聚合物囊泡的制备步骤；
[0120]按照3mg/ml的浓度将将步骤(5)得到的聚合物FA-PGA75-b_PLA5(l和DTPA-PGA15-b-PLA50 一起溶解在DMF中，在避光剧烈搅拌的条件下，以10d/min的速度滴加两倍于DMF体积的含一定量钆的水溶液，避光透析除去DMF，得到浅蓝色溶液即为即为载钆聚合物囊泡溶液。
[0121]上述的对实施例的描述是为便于该【技术领域】的普通技术人员能理解和使用本发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之 内。