专利名称：一种对化学性肝损伤具有辅助保护作用的组合物及其制备方法肝损伤是临床常见的危害人类健康的疾病，肝损伤涉及的病理因素比较广泛，如病毒、生物、药物、理化、酒精等，都可以导致肝损伤。化学性肝损伤，是由化学性肝毒性物质所造成的肝损伤。这些化学物质包括酒精、环境中的化学毒物及某些药物。作为人体的重要解毒器官的肝脏，具有肝动脉和肝静脉双重血液供应。化学物质可通过胃肠道门静脉或体循环进入肝脏进行转化，因此肝脏容易受到化学物中的毒性物质损害。大自然和人类工业生产过程中均存在一些对肝脏有毒性的物质，称为〃亲肝毒物"，这些毒物在人群中普遍易感，潜伏期短，病变的过程与感染的剂量直接相关，可引起肝脏不同程度的肝细胞坏死、脂肪变形、肝硬化和肝癌。随着社会的发展，肝损伤的人越来越多，对肝损伤辅助保护的保健食品有着很大的适应人群。历代医书《黄帝内经》、《神农本草经》、《千金方》、《本草纲目》、《名医别录》等均记载了护肝的中草药。近代更出现了各种护肝方剂，但制作方法多采用传统的中药煎煮法，有效成分不明，作用机理不清楚，未提供足够的药理学及病理学解释，同时未进行相关的动物或人体试验，毒理危害性不明确。因而，研制出疗效确切的对化学性肝损伤有辅助保护作用的药物已成为防治肝损 伤疾病的当务之急。
本发明的目的是提供一种对化学性肝损伤具有辅助保护作用的组合物。本发明所述的一种对化学性肝损伤具有辅助保护作用的组合物，包括下列重量份的原料五味子1-10份、葛根1-15份、积犋子1-10份、甘草0. 1-10份。根据本发明所述的组合物的进一步特征，所述组合物包括下列重量份的原料五味子2-5份、葛根2-6份、积犋子2-5份、甘草0. 5-4份。根据本发明所述的组合物的进一步特征，所述的组合物制成以下口服剂型片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、散剂等或口服液体制剂。本发明还提供了根据本发明所述的组合物的制备方法，包括以下步骤将所述重量配比的五味子、葛根、枳犋子、甘草混合，加6-12倍量50-95%乙醇提取1-4次，每次1-3小时，提取液合并，过滤，滤液减压回收乙醇，浓缩至适量，加入或不加辅料按常规工艺制成药剂学上可接受的制剂。可替代或可选地，本发明所述的组合物的制备方法可包括以下步骤将所述重量配比的五味子、葛根、枳犋子、甘草混合，加6-12倍量水提取1-4次，每次1-3小时，提取液合并，过滤，滤液减压浓缩至适量，加入或不加辅料按常规工艺制成药剂学上可接受的制剂。可替代或可选地，本发明所述的组合物的制备方法可包括以下步骤将所述重量配比的原料分别加6-12倍量50-95%乙醇提取1-4次，每次1-3小时，提取液合并，过滤，滤液减压回收乙醇，浓缩至适量，加入或不加辅料按常规工艺制成药剂学上可接受的制剂。可替代或可选地，本发明所述的组合物的制备方法可包括以下步骤将所述重量配比的原料分别加6-12倍量水提取1-4次，每次1-3小时，提取液合并，过滤，滤液减压浓缩至适量，加入或不加辅料按常规工艺制成药剂学上可接受的制剂。本发明还提供了根据本发明所述的组合物用于在制备对化学性肝损伤具有辅助保护作用的保健食品或药品中的应用。 本发明所述的组合物是在现有中医理论的基础上筛选出的对化学性肝损伤具有辅助保护作用的组方，通过科学配伍，发挥其相互协同作用，经实验证实一种对化学性肝损伤具有辅助保护作用的组合物，可进一步制备对化学性肝损伤具有辅助保护作用的保健食品或药品。 五味子性温，味酸、甘；归肺、心、肾经。收敛固涩、益气生津、补肾宁心。现代研究已发现五味子对肝脏具有明显的保护作用，能降低因化学物质引起的血清转氨酶升高作用，能明显减轻肝小叶的坏死，并防止肝内谷胱甘肽的耗竭，增强肝微粒体代谢扑热息痛的速度。五味子醇提取液对大白鼠慢性肝损伤有一定的保护作用，对心血管系统有扩血管作用，并促进脾免疫功能，同时能对抗同种异体组织移植排斥反应，延缓衰老作用。葛根性凉、气平、味甘，入脾、胃经。具有清热、降火、排毒等功效，主消食、解诸毒、治天行上。现代研究发现葛根对慢性肝损伤动物模型具有明显的保护作用，其机制与保护肝细胞膜、清除自由基、抗脂质过氧化和抗纤维化等作用有关。枳犋子性平，味甘，入心、脾经，止渴除烦、消湿热、解酒毒。现代研究表明枳犋子具有抗脂质过氧化和保护肝损伤作用，能减轻纤维化和肝细胞的变性化寺及炎性细胞浸润，使线粒体膜及时恢复，减少内质网扩张，促进细胞再生，阻滞肝纤维化的发生发展。甘草性平，味甘，归十二经。补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药。用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽痰多，脘腹、四肢挛急疼痛，痈肿疮毒，缓解药物毒性、烈性。研究表明，甘草有抗炎和抗变态反映的功能，因此在临床上主要作为缓和剂。甘草还能促进胃部粘液形成和分泌，延长上皮细胞寿命，有抗炎活性，常用于慢性溃疡和十二指肠溃疡的治疗。在使用上述药物时，既可以采用以相当于所述重量配比的药物为原料分别净选，干燥、粉碎、混合得到符合制剂要求粒度的颗粒或粉末直接服用。也可以采用以相当于所述重量配比关系的药物为原料经过适当处理后添加药用辅料，根据需要将其制成各种制剂。由上述原料药制备成制剂的过程中，上述原料药可以采用如下方法进行处理分别加水或不同浓度的乙醇提取，提取液浓缩干燥得粗提物；或进一步采用醇沉法、水返溶法、有机溶剂萃取法、絮凝沉淀法、柱层析法的一种或几种联合使用进行适当精制后得精提物；在对上述有效药用成分进行提取时可采用的具体操作和/或使用方法，既可以是以所述的各比例量的药物成分为原料，分别提取其有效药用成分后再混合的方式，也可以采用按所说比例量的各药物原料混合后再共同提取的方式。采用不同的提取手段、设备及提取时所需的理想或最佳的提取温度、溶剂用量、提取时间、提取次数等具体条件，则可根据实际情况通过试验被筛选和找到。以下实施例中，采用的原料的来源是 五味子为通过药材市场等途径购买所得，执行标准为《中国药典2010年版一部》。葛根为通过药材市场等途径购买所得，执行标准为《中国药典2010年版一部》。枳犋子为通过药材市场等途径购买所得，执行标准为《卫生部药品标准(中药材)第一册》。
甘草为通过药材市场等途径购买所得，执行标准为《中国药典2010年版一部》。实施例一
原料五味子30g、葛根50g、积犋子30g、甘草20g
将所述重量配比的五味子、葛根粉碎后与枳犋子、甘草加10倍量70%乙醇提取3次，每次2小时，提取液合并，过滤，滤液减压回收乙醇，减压干燥，粉碎成细粉，加入适量甘露醇、阿斯帕坦，混匀，85%乙醇制粒，干燥，整粒，即得颗粒剂。实施例二
原料五味子50g、葛根50g、积犋子50g、甘草5g
将所述重量配比的五味子、葛根粉碎后与枳犋子、甘草加6倍量95%乙醇提取4次，每次I小时，提取液合并，过滤，滤液减压回收乙醇，减压干燥，粉碎成细粉，加入适量糊精、蔗糖，混匀，85%乙醇制粒，干燥，整粒，即得颗粒剂。实施例三
原料五味子20g、葛根60g、积犋子20g、甘草40g
将所述重量配比的五味子、葛根粉碎后与枳犋子、甘草加12倍量50%乙醇提取I次，每次3小时，提取液合并，过滤，滤液减压回收乙醇，减压干燥，粉碎成细粉，加入适量辅料，混匀，85%乙醇制粒，干燥，整粒，即得颗粒剂。实施例四
原料五味子100g、葛根150g、枳犋子100g、甘草IOOg
将所述重量配比的五味子、葛根、枳犋子、甘草加8倍量60%乙醇提取2次，每次2小时，提取液合并，过滤，滤液减压回收乙醇，减压干燥，粉碎成细粉，混匀，85%乙醇制粒，干燥，整粒，即得颗粒剂。实施例五
原料五味子10g、葛根150g、积犋子10g、甘草IOOg
将所述重量配比的五味子、葛根、枳犋子、甘草加10倍量80%乙醇提取3次，每次I小时，提取液合并，过滤，滤液减压回收乙醇，减压干燥，粉碎成细粉，加入羧甲基淀粉钠、微粉硅胶、微晶纤维素、交联聚维酮适量，混匀，制粒，干燥，加入硬脂酸镁，混匀，压片，包衣或不包衣，即得片剂。实施例六
原料五味子40g、葛根50g、积犋子40g、甘草30g将所述重量配比的五味子、葛根、枳犋子、甘草加7倍量90%乙醇提取2次，每次2小时，提取液合并，过滤，滤液减压回收乙醇，减压干燥，粉碎成细粉，制粒，干燥，装胶囊，即得胶囊剂。实施例七
原料五味子25g、葛根35g、积犋子30g、甘草25g
将所述重量配比的五味子、葛根、枳犋子、甘草直接粉碎成细粉，混匀，加入辅料适量，混匀，制成丸剂。实施例八
原料五味子45g、葛根55g、积犋子25g、甘草15g
将所述重量配比的五味子、葛根、枳犋子、甘草加9倍量60%乙醇提取3次，每次I. 5小时，提取液合并，过滤，滤液减压回收乙醇，适当浓缩，加入适量的混悬剂、调味剂、防腐剂，混匀，加水定容，滤过，分装，即得口服液体制剂。实施例九
原料五味子20g、葛根20g、积犋子20g、甘草5g
将所述重量配比的五味子、葛根、枳犋子、甘草分别加6倍量水提取2次，每次2小时，提取液合并，过滤，滤液减压干燥，粉碎成细粉，制成散剂。实施例十
原料五味子15g、葛根15g、积犋子35g、甘草25g
将所述重量配比的五味子、葛根、枳犋子、甘草分别加11倍量80%乙醇提取2次，每次3小时，提取液合并，过滤，滤液减压回收乙醇，减压干燥，粉碎成细粉，以85%乙醇制粒，压片，包衣或不包衣，即得片剂。实施例i^一
原料五味子30g、葛根48g、积犋子30g、甘草20g
将所述重量配比的五味子、葛根粉碎后与枳犋子、甘草加10倍量水提取3次，每次2小时，提取液合并，过滤，滤液减压干燥，粉碎成细粉，加入适量甘露醇、阿斯帕坦，混匀，85%乙醇制粒，干燥，整粒，即得颗粒剂。实施例十二
原料五味子50g、葛根22g、积犋子50g、甘草5g
将所述重量配比的五味子、葛根粉碎后与枳犋子、甘草加6倍量水提取4次，每次I小时，提取液合并，过滤，滤液减压干燥，粉碎成细粉，加入适量糊精、蔗糖，混匀，85%乙醇制粒，干燥，整粒，即得颗粒剂。实施例十三
原料五味子50g、葛根60g、积犋子50g、甘草40g
将所述重量配比的五味子、葛根加10倍量水提取3次，每次I小时，提取液合并，滤过，滤液减压干燥得稠膏I ;枳犋子、甘草加12倍量50%乙醇提取I次，每次3小时，提取液合并，过滤，滤液减压回收乙醇，减压干燥得稠膏2，稠膏I与稠膏2混合，干燥，粉碎成细粉，力口入适量辅料，混匀，85%乙醇制粒，干燥，整粒，即得颗粒剂。实施例十四
原料五味子32g、葛根22g、积犋子22g、甘草IOg将所述重量配比的五味子、葛根分别加8倍量60%乙醇提取3次，每次2小时，提取液滤过，滤液减压回收乙醇，减压干燥分别得稠膏I、稠膏2 ;枳犋子、甘草分别加10倍量水提取2次，每次I小时，提取液过滤，滤液减压干燥分别得稠膏3、稠膏4，稠膏I、稠膏2稠膏3、稠膏4混合，干燥，粉碎成细粉，以85%乙醇制粒，压片，包衣或不包衣，即得片剂。以上举例是对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以上的举例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。制得的本发明药物活性成分可以直接入药服用或加入药剂学上可接受的辅料按常规工艺制备成所需制剂。如常用的片剂(分散片、泡腾片、口腔崩解片、含片、咀嚼片、泡腾片)、胶囊剂(硬胶囊、软胶囊剂)、颗粒剂、丸剂(滴丸剂)、散剂等固体制剂形式的口服药物，也可以制成糖浆、口服液等液体制剂形式的口服药物
这里所述的辅料，可以根据不同的制剂有所不同，如在片剂、胶囊剂、颗粒剂等固体制剂中常用的稀释剂、崩解剂、赋形剂、粘合剂、润滑剂、表面活性剂、填充剂等；在糖浆、口服液等液体制剂形式中常用的表面活性剂、稀释剂、防腐剂、稳定剂、矫味剂、增稠剂、助流剂
坐寸o 其常用辅料如淀粉、乳糖、糊精、糖粉、微晶纤维素、甘露醇、木糖醇、聚乙二醇、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙、改良淀粉、山梨醇、聚乙烯吡咯酮、重质碳酸镁、羧甲基纤维素钠、羟丙甲基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲淀粉钠、羟丙基纤维素、聚维酮K30、白陶土、预胶化淀粉、硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶、甜叶菊苷、甜菜碱、阿司帕坦、甘草甜素、糖精钠、枸橼酸、碳酸氢钠、碳酸钠、卡拉胶、琼脂、明胶、海藻酸钠、黄原胶、瓜耳豆胶、西黄耆胶、阿拉伯胶、槐豆胶、刺梧桐胶、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、聚丙烯酰胺、交联型聚丙烯酸钠、聚乙烯醇、卡波姆、山梨酸、山梨酸钾、羟苯乙酯、苯甲醇、尼泊金、硫柳汞、二甲基亚砜、氮酮、三乙醇胺、氢氧化钠、甘油、丙二醇、BHT、BHA、十二烷基硫酸钠、吐温类、司盘类等。通过以下实验进一步阐述本发明所述组合物的有益效果
一、本发明组合物安全性评价试验
I、急性毒性试验对雌雄小鼠的急性经口 LD5tl均大于100000mg/kg,属无毒级物。2、微核试验结果为阴性，表明其对小鼠骨髓染色体畸变无诱发性。3、精子畸形试验结果为阴性，表明其对在体内无生殖毒性。4、Ames试验结果为阴性,表明其无潜在的致癌性。5,30天喂养试验结果表明试验动物生长情况良好，血液学、生化学检查，主要脏体组织学检查结果与对照组相比，均无明显差异，进一步证实了其安全性。二、本发明组合物按照《保健食品功能学评价程序和检验方法》(2003年版)进行了 “对化学性肝损伤的辅助保护作用”动物功能评价试验，方法及结果如下
I、试验药物
药物组本发明实施例I制备得到(分为高、中、低剂量组)；正常对照组；模型对照组。2、试验动物 健康小鼠50只，体重18-22g。由广州中医药大学动物实验中心提供。3、试验方法
将50只小鼠随机分为5组，即正常对照组、肝损伤模型对照组、本发明药物高剂量组、中剂量组、第剂量组，各剂量组按照相应剂量灌胃，正常对照组和模型对照组饮用蒸馏水，连续30天，第30天各剂量组及模型组用CCl4染毒，剂量24mg/kg，腹腔注射。第31天，五组小鼠摘眼球取血，离心，取血清，测定生化指标血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)，并取肝脏进行病理组织学检查。试验结果用Spss软件统计。4、试验结果
(I)生化检测结果
表1本发明组合物对小鼠生化指标的影响


本发明涉及一种对化学性肝损伤具有辅助保护作用的组合物及其制备方法。本发明所述的一种对化学性肝损伤具有辅助保护作用的组合物，包括下列重量份的原料五味子1-10份、葛根1-15份、枳椇子1-10份、甘草0.1-10份。本发明所述的组合物是在现有中医理论的基础上筛选出的对化学性肝损伤具有辅助保护作用的组方，通过科学配伍，发挥其相互协同作用，经实验证实一种对化学性肝损伤具有辅助保护作用的组合物，可进一步制备对化学性肝损伤具有辅助保护作用的保健食品或药品。