专利名称：一种附着有细菌膜的海参幼苗附着基及其制作方法一种附着有细菌膜的海参幼苗附着基及其制作方法技术领域本发明属于海水养殖领域，特别是涉及一种附着有细菌膜的海参幼苗附着基及其制作方法。海参浮游状态的樽形幼体变为附着状态的五触手幼体的附着变态过程，是海参发育过程中最为重要的环节，同时也是海参育苗成功与否的关键所在。海参要实现附着变态， 附着基是不可缺少的重要条件。现在普遍使用的附着基主要是透明聚乙烯波纹板、聚乙烯网片等，同时有关海参幼体附着基的专利也有很多，例如专利号为ZL200720013117. 9的海参幼体附着基等。海参的苗种生产中，幼体的低附着变态率问题严重制约了海参养殖业的发展。对于海参来说，附着基作为其幼体附着变态的依托，是影响海参养殖业效率提高的重要因素。但是现在绝大部分养殖用户仍习惯于单独使用聚乙烯波纹板，而海参幼体在聚乙烯波纹板上的附着变态率较低，一般为20%左右，附着率较低，严重影响海参养殖的发展。 而对于表面附着有细菌等微生物膜的附着基使用较少，究其原因是大部分养殖用户忽略了细菌等附着基表面微生物膜的作用。现在尚未见一种高活性诱导细菌附着的能大幅度提高海参幼体附着变态率的聚乙烯波纹板附着基。发明内容本发明的目的是提供一种附着有细菌膜的海参幼苗附着基及其制作方法，它能利用细菌对海参幼体附着基进行优化，提高海参幼体的附着变态率，能满足现有技术的上述需求。一种附着有细菌膜的海参幼苗附着基，包括一聚乙烯波纹板，其特征在于该聚乙烯波纹板的两面分别涂有一环氧树脂胶层，在各环氧树脂胶层的外面分别粘附一蛎壳粉层，在各蛎壳粉层外分别附着一层由交替单胞菌形成的菌膜。上述附着有细菌膜的海参幼苗附着基的制作方法，其特征在于首先将购买到的蛎壳粉依次用45目和60目的网筛进行2-3次筛选，得到相应粒径的蛎壳粉；，将环氧树脂胶分别均勻地涂到聚乙烯波纹板的两面上；再将上述蛎壳粉分别粘附在各环氧树脂胶层的外面，分别形成蛎壳粉层，凝固后浸于氢氧化钠水溶液中，取出后用过滤海水冲洗掉氢氧化钠；最后将上述涂有环氧树脂胶层和蛎壳粉层的聚乙烯波纹板浸入zobell 2216E培养液中，按照菌液与培养液的体积比为(1-4) 20的比例加入交替单胞菌属细菌(Alteromonas sp.)的菌液，在水温18-26°C的条件下曝气培养，形成菌膜，即得到附着有细菌膜的海参幼苗附着基。上述的交替单胞菌属细菌(Alteromonas sp.)，选用筛选的单胞菌属细菌 Lch-I (Alteromonas sp.)，已于2011年12月22日保藏在位于北京朝阳区北辰西路1号院 3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO. 5639。本发明可以使海参幼体的附着变态率较只用聚乙烯波纹板提高60%左右。


附图是本发明的结构示意图。
其中，1、聚乙烯波纹板，2、环氧树脂胶层，3、蛎壳粉层，4、菌膜。

下面结合附图对本发明附着有细菌膜的海参幼苗附着基及其制作方法做进一步说明。
首先，将购买到的蛎壳粉依次用45目和60目的网筛进行2-3筛选，得到相应粒径的蛎壳粉。再使用毛刷将环氧树脂胶分别均勻地涂到洗刷干净的聚乙烯波纹板1的两面上，分别形成环氧树脂胶层2，并将上述蛎壳粉分别粘附在各环氧树脂胶层2的外面上，分别形成蛎壳粉层3，凝固后浸于质量百分数为1 % -10%的氢氧化钠水溶液中，浸泡1-2天， 取出后用过滤海水冲洗掉氢氧化钠。最后，将上述涂有环氧树脂胶层2和蛎壳粉层3的聚乙烯波纹板1浸入浓度为10%-40%的zobell 2216E培养液中，按照菌液与培养液的体积比为(1-4) 20的比例加入交替单胞菌细菌(Alteromonas sp.)的菌液，在水温18_26°C 的条件下曝气培养48-96小时，形成菌膜4，并保证菌膜4中的细菌密度超过107cellS/cm2， 即得到附着有细菌膜的海参幼苗附着基。
在海参幼体发育的附着变态时期，将附着有细菌膜的海参幼苗附着基取出进行投放。
上述交替单胞菌属细菌Alteromonas Lch-I来自山东文登海参育苗场采集的附着细菌经过纯化筛选获得。上述的hBell 2216E培养液其标准浓度如下蛋白胨5g/L;酵母提取物lg/L ；pH为7. 2。上述交替单胞菌细菌(Alteromonassp.)菌液为在标准浓度的 ZoBell 2216E培养液中25°C、黑暗条件下培养48h的细菌菌液。上述Alteromonas Lch-I 在hBell 2216E固体培养基上形成圆形菌落，表面光滑，扁平凸起，边缘整齐，菌落直径约为1 2mm，表面湿润，白色，不透明，革兰氏染色呈阴性。上述Alteromonas Lch-I具有很强的附着特性。实施例
下面以采用细菌Alteromonas Lch-Ι为例，具体说明制作过程
首先，将购买到的蛎壳粉依次用45目和60目的网筛筛选三次，得到相应粒径的蛎壳粉。再使用毛刷将环氧树脂胶分别均勻地涂到洗刷干净的聚乙烯波纹板1上，形成环氧树脂胶层2，并将上述蛎壳粉分别粘附在各环氧树脂胶层2的外面，分别形成蛎壳粉层 3，待自然凝固后浸于质量百分数为1 %的氢氧化钠水溶液中，浸泡两天，取出后用过滤海水冲洗掉氢氧化钠，并插入海参筐中，每筐20片。最后将海参筐浸入浓度为10%的^Bell 2216E培养液中，按照菌液与培养液的体积比为3 20的比例加入交替单胞菌Alteromonas Lch-I菌液，在水温22°C的条件下曝气培养48小时，形成菌膜4，并保证菌膜4中细菌密度达到107cellS/cm2，即得到附着有细菌膜的海参幼苗附着基。
在海参幼体发育的附着变态时期将装有附着基的海参筐从培养液中取出进行投放。
本实施例所用的交替单胞菌Alteromonas Lch-I也可以改用交替单胞菌属的其他细菌，取得的效果类似。


一种附着有细菌膜的海参幼苗附着基，包括一聚乙烯波纹板，其特征在于该聚乙烯波纹板的两面分别涂有一环氧树脂胶层，在各环氧树脂胶层的外面分别粘附一蛎壳粉层，在各蛎壳粉层外再分别附着一层由交替单胞菌(Alteromonas sp.)形成的菌膜。制作时，先将蛎壳粉用45目和60目的网筛筛选；将环氧树脂胶涂到聚乙烯波纹板上；再将上述筛选后的蛎壳粉粘附在环氧树脂胶层外面，形成蛎壳粉层，凝固后浸泡于氢氧化钠溶液中，取出后用海水冲净氢氧化钠，并投放到已添加交替单胞菌属(Alteromonas sp.)菌液的ZoBell 2216E培养液中，18-26℃条件下曝气培养，形成菌膜，即得到附着有细菌膜的海参幼苗附着基。本发明可以使海参幼体的附着变态率较聚乙烯波纹板提高60％左右。